Detección de Salmonella spp, Escherichia coli O157 : H7 y Listeria monocytogenes, en muestras de leche bovina del sistema de producción doble propósito colombiano

La leche cruda se considera uno de los vehículos más importantes de transmisión de microorganismos patógenos causantes de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA). En el presente estudio se determinó la presencia de estos microorganismos en leche bovina contaminada artificialmente, empleando técnicas de microbiología convencional y en forma simultánea por medio de una PCR múltiple. La técnica molecular se estandarizó utilizando como pre-enriquecimiento el caldo SEL (Salmonella, E. coli O157:H7 y Listeria), la sensibilidad fue de 10UFC/ml, para Salmonella y L. monocytogenes y de 1UFC/ml para E. coli O157:H7 y la especificidad fue evaluada con microorganismos de nueve géneros diferentes. Empleando las dos metodologías se evaluaron 600 muestras de leche cruda, provenientes de igual número de predios del sistema de producción doble propósito. El muestreo se realizó por conveniencia en tres microrregiones lecheras de: sabanas de Córdoba y Sucre, Valles del Cesar y Alto Magdalena-Magdalena Medio y la distribución de las muestras fue equitativa. La prevalencia para L monocytogenes fue 0,3% (2/600), para Salmonella spp. en el 0,8% (5/600) y E. coli O157:H7 en el 3,7% de las muestras analizadas (22/600). La PCR múltiple para la detección de E. coli O157:H7 fue más sensible que el método convencional y para Salmonella el tiempo de detección se redujo a ocho horas. La prevalencia de E. coli O157:H7 se encontró asociada a la región geográfica en forma estadísticamente significativa. La presencia de este microorganismo en la leche cruda puede considerarse un riesgo para la salud humana.Raw milk and dairy products contaminated with pathogens such as Salmonella spp., Escherichia coli O157: H7 and Listeria monocytogenes may be involved in outbreaks of foodborne diseases (FBD). In the present study we investigated the presence of these microorganisms in artificially contaminated bovine milk, using conventional microbiological techniques and simultaneously by a multiplex PCR. The molecular technique was standardized as pre-enrichment broth SEL (Salmonella, E. coli O157: H7 and Listeria), the sensibility was 10UFC/ml for Salmonella and L. monocytogenes and 1UFC/ml for E. coli O157: H7, and specificity was evaluated with microorganisms from nine different genera. Using both methods were evaluated 600 samples of raw milk, from an equal number of farms of dual-purpose cattle production. The sampling was performed for convenience in three dairy microregions: sabanas of Cordoba and Sucre, Valles of Cesar and Alto Magdalena-Magdalena Medio, the distribution of the samples was proportional, approximately 200 samples per region. For L monocytogenes prevalence was 0.3% (2/600) for Salmonella spp. in 0.8% (5/600) and E. coli O157: H7 in 3.7% of the samples analyzed (22/600). The multiplex PCR for detection of E. coli O157: H7 was more sensitive than conventional method, for Salmonella detection time was reduced to ten hours. The prevalence of E. coli O157: H7 was found associated with the geographic region was statistically significant. The presence of this organism in raw milk can be considered a human health riskMagíster en Ciencias BiológicasMaestrí

Detección de Yersinia pseudotuberculosis en heces de cuyes (Cavia porcellus) utilizando una metodología microbiológica y una molecular

The suitability of two methodologies, a conventional microbiological method and a molecular method, based on amplifications by Polimerase Chain Reaction (PCR) was evaluated for the detection of Yersinia pseudotuberculosis in feces of guinea pig. The analytical sensitivity and analytical specificity, as well as the economic cost, time and complexity for each method were evaluated. Molecular detection of Y. pseudotuberculosis was done by a nested PCR with specific primers for the inv chromosomal virulence gene. The microbiological confirmation was done by using a commercial identification kit. In order to reduce the side effect caused by PCR inhibitors that are normally present in feces, an amplification protocol for such type of samples was standardized. The highest sensitivity level was observed in the method that combined pre-enrichment, microbiological isolation and PCR. This method was able to detect bacterial concentrations between 1.5 x 104 and 1.5 x 103 colony-forming units per gram (CFU/g) of feces, whereas the highest diagnostic sensitivity level obtained by nested PCR was 1.5 x 105 CFU/g of feces. Both, the molecular and the microbiological methodologies, had advantages with experimentally inoculated sterile feces. Since the detection of the microorganism on samples of non-sterilized feces was difficult using either method, the use of a combination of microbiological and molecular techniques is suggested to get a better diagnostic performance for the detection of this pathogen. En este trabajo se evaluó el desempeño de dos metodologías, una microbiológica y una molecular basada en la amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para la detección de Yersinia pseudotuberculosis en heces de cuyes. La evaluación de cada una de las metodologías se realizó teniendo en cuenta su sensibilidad y especificidad analítica, así como su costo económico, tiempo y complejidad. La detección molecular de Y. pseudotuberculosis se realizó por PCR anidada usando iniciadores específicos para el gen de virulencia cromosomal inv, mientras que en los ensayos microbiológicos la identificación bacteriana se hizo mediante una batería comercial de perfiles bioquímicos. Se estandarizó un protocolo de amplificación en materia fecal, el cual redujo el efecto negativo que causan los inhibidores de la PCR presentes en muestras de esta naturaleza. La sensibilidad analítica más alta se observó con la metodología en la que se combinó preenriquecimiento, aislamiento microbiológico y PCR, con un rango de detección entre 1,5 x 104 y 1,5 x 103 unidades formadoras de colonias por gramo (ufc/g) de material fecal; mientras que la mayor sensibilidad obtenida en PCR anidada fue de 1,5 x 105 ufc/g de materia fecal. Tanto la metodología microbiológica como la molecular presentaron ventajas en los ensayos en los que se usó materia fecal estéril experimentalmente inoculada. Sin embargo, en muestras de materia fecal sin esterilizar la detección del microorganismo se dificultó al utilizar una única metodología, por lo que se sugiere combinar técnicas microbiológicas y moleculares para obtener un mejor desempeño diagnóstico.  

Comparación de tres tratamientos para la crioconservación de serovares de Leptospira en nitrógeno líquido

Traditional methods for preservation of bacteria belonging to the genus Leptospira, by frequent passages in culture media, are expensive, time consuming and may cause losses in genetic characteristics of the strains. In the present study a cryoprotective technique in liquid nitrogen was standardized for six serovars of Leptospira (Pomona, Hardjoprajitno, Canicola, Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa and Bratislava), by using as agent cryopreservative a 2% Dimethyl Sulfoxide (final concentration) solution in a 1°C/min rate of cooling, which was compared with 0.2% and 10% glycerol solutions (final concentrations). All three cryopreservative methods were evaluated by the determination of the bacterial viability pre and post freezing. In 0, 30, 90, 180, 270 and 360 days bacterial counting was done using a counting chamber. Analysis of variance (ANOVA) and the Bonferroni method were used for the analysis of the results. A final concentration of 10% Glycerol in the cryopreservative reduced the viability of the serovars. The liquid nitrogen cryopreservation technique either with 2% Dimethyl Sulfoxide or 0.2% (final concentrations) glycerol, allowed the successful preservation of all six serovars of Leptospira during a year. The cryopreservative method ensured the conservation of the bacterial viability and was less expensive and less time consuming. Additionally, this method is a better method of long term conservation when compared with the traditional maintenance by serial subcultivation.La preservación de bacterias pertenecientes al género Leptospira por métodos tradicionales -repiques frecuentes del cultivo- es costosa, dispendiosa y puede generar pérdidas de las características genéticas del cultivo. En el presente estudio se estandarizó una técnica de crioconservación en nitrógeno líquido para seis serovares de Leptospira -Pomona, Hardjoprajitno, Canicola, Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa y Bratislava-, usando como agente crioprotector el dimetil sulfóxido (DMSO) a una concentración final de 2% y una tasa de enfriamiento de 1°C/min y se comparó con el uso de glicerol a concentraciones finales de 0,2% y 10%. Los tres métodos se evaluaron mediante la determinación de la viabilidad bacteriana antes y después de la congelación (a 0, 30, 90, 180, 270 y 360 días) por recuento bacteriano en cámara. Los datos se sometieron a análisis de varianza y comparación por parejas usando la prueba de Bonferroni. La presencia de glicerol al 10% (concentración final) en el medio crioconservante disminuyó la viabilidad de los serovares. La técnica de criopreservación en nitrógeno líquido con DMSO al 2% y glicerol al 0,2% (concentraciones finales) permitió la exitosa conservación de los seis serovares de Leptospira. El método de criopreservación aseguró una alta viabilidad, lo que disminuyó costos y tiempo en su ejecución y demostró ser un mejor método de conservación a largo plazo en relación con el mantenimiento tradicional por subcultivos periódicos.  

Estudo de variabilidade genética em isolamentos de Leptospira spp., em sistemas bovinos de carne e duplo propósito

Leptospira spp. serovars were isolated from bovine kidney and urine in the Cundinamarca and Meta departments of Colombia. The isolates were classified by both, phylogenetic analysis and ribotyping, using 16SDNAr as a marker gene. The Phylogenetic analysis allowed the classification of the isolates into two of the three genomaspecies recognized: pathogenic and intermediate. The latter is of great importance because its immunological behavior in a host is unknown and this could generate variable answers. Ribotyping yielded “ribopatterns” of four Leptospira isolates and five reference strains with major identity; the analysis showed the presence of two predominant profiles in the four isolates. One profile was in line with the intermediate reference strain and the other profile was similar to the pathogenic reference strain, Copenhageni and Lai serovars. The isolate by phylogenetic analysis was placed within the intermediate type Leptospiras and its pathogenicity is still under study. The phylogenetic analysis of Leptospira species based on comparative sequences of 16SDNAr gene confirmed the possibility of identifying three groups according to their pathogenic status (pathogenic, intermediate and saprophytic), where the taxonomic purpose of the markers, showed consistent results in obtaining sequences of the 16SDNAr gene, grouped in a phylogenetic tree.A partir de riñón y orina de bovinos, se aislaron en campo serovares de Leptospira spp., en los departamentos de Cundinamarca y Meta, Colombia. Los aislamientos fueron clasificados mediante análisis filogenético y ribotipificación, utilizando como marcador el gen 16S ADNr. El análisis filogenético permitió clasificar los aislamientos en dos de las tres genomoespecies reconocidas: patógeno e intermedio, siendo este último de gran importancia, dado que no se conoce su patrón de comportamiento inmunológico ante un huésped, lo que podría generar respuestas variables. En la ribotificación se obtuvieron ribopatrones de cuatro aislamientos de leptospira y cinco cepas de referencia con mayor identidad y su análisis mostró la presencia de dos perfiles predominantes dentro de los cuatro aislamientos. Un perfil coincidió con la cepa de referencia intermedia y otro perfil fue similar a la cepa de referencia patógena serovares Copenhageni y Lai. El análisis filogenético del aislamiento, fue agrupado dentro de leptospiras tipo intermedio y su patogenicidad se encuentra todavía en estudio. Los análisis filogenéticos de especies de leptospiras basados en secuencias comparativas del gen 16S ADNr, permiten confirmar e identificar tres grupos según su estatus de patogenicidad (patógeno, saprofítico e intermedio), donde el propósito taxonómico de los marcadores genera resultados consistentes en obtener secuencias del gen 16S ADNr agrupados en un árbol filogenético.A partir de rim e urina de bovinos, se isolaram em campo serovares de Leptospira spp., nos departamentos de Cundinamarca e Meta, Colômbia. Os isolamentos foram classificados mediante análise filogenética e ribotipificação, utilizando como marcador o gene 16S ADNr. A análise filogenética permitiu clasificar os isolamentos em dois das três genomo-espécies reconhecidas: patógeno e intermédio, sendo este último de grande importância, dado que não se conhece o seu padrão de comportamento imunológico perante um hóspede, o que poderia gerar respostas variáveis. Na ribotificação obtiveram-se ribopatrões de quatro isolamentos de leptospira e cinco cepas de referência com maior identidade e a sua análise mostrou a presença de dois perfis predominantes dentro dos quatro isolamentos. Um perfil coincidiu com a cepa de referência intermédia e outro perfil foi similar à cepa de referência patógena serovares Copenhageni e Lai. A análise filogenética do isolamento, foi agrupada dentro de leptospiras tipo intermédio e a sua patogenicidade se encontra ainda em estudo. As análises filogenéticas de espécies de leptospiras baseados em sequências comparativas do gene 16S ADNr, permitem confirmar e identificar três grupos segundo o sue status de patogenicidade (patógeno, saprofítico e intermédio), onde o propósito taxonómico dos marcadores gera resultados consistentes em obter sequências do gene 16S ADNr agrupados em uma árvore filogenética.

Detección de Yersinia pseudotuberculosis en heces de cuyes (Cavia porcellus) utilizando una metodología microbiológica y una molecular

The suitability of two methodologies, a conventional microbiological method and a molecular method, based on amplifications by Polimerase Chain Reaction (PCR) was evaluated for the detection of Yersinia pseudotuberculosis in feces of guinea pig. The analytical sensitivity and analytical specificity, as well as the economic cost, time and complexity for each method were evaluated. Molecular detection of Y. pseudotuberculosis was done by a nested PCR with specific primers for the inv chromosomal virulence gene. The microbiological confirmation was done by using a commercial identification kit. In order to reduce the side effect caused by PCR inhibitors that are normally present in feces, an amplification protocol for such type of samples was standardized. The highest sensitivity level was observed in the method that combined pre-enrichment, microbiological isolation and PCR. This method was able to detect bacterial concentrations between 1.5 x 104 and 1.5 x 103 colony-forming units per gram (CFU/g) of feces, whereas the highest diagnostic sensitivity level obtained by nested PCR was 1.5 x 105 CFU/g of feces. Both, the molecular and the microbiological methodologies, had advantages with experimentally inoculated sterile feces. Since the detection of the microorganism on samples of non-sterilized feces was difficult using either method, the use of a combination of microbiological and molecular techniques is suggested to get a better diagnostic performance for the detection of this pathogen. En este trabajo se evaluó el desempeño de dos metodologías, una microbiológica y una molecular basada en la amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para la detección de Yersinia pseudotuberculosis en heces de cuyes. La evaluación de cada una de las metodologías se realizó teniendo en cuenta su sensibilidad y especificidad analítica, así como su costo económico, tiempo y complejidad. La detección molecular de Y. pseudotuberculosis se realizó por PCR anidada usando iniciadores específicos para el gen de virulencia cromosomal inv, mientras que en los ensayos microbiológicos la identificación bacteriana se hizo mediante una batería comercial de perfiles bioquímicos. Se estandarizó un protocolo de amplificación en materia fecal, el cual redujo el efecto negativo que causan los inhibidores de la PCR presentes en muestras de esta naturaleza. La sensibilidad analítica más alta se observó con la metodología en la que se combinó preenriquecimiento, aislamiento microbiológico y PCR, con un rango de detección entre 1,5 x 104 y 1,5 x 103 unidades formadoras de colonias por gramo (ufc/g) de material fecal; mientras que la mayor sensibilidad obtenida en PCR anidada fue de 1,5 x 105 ufc/g de materia fecal. Tanto la metodología microbiológica como la molecular presentaron ventajas en los ensayos en los que se usó materia fecal estéril experimentalmente inoculada. Sin embargo, en muestras de materia fecal sin esterilizar la detección del microorganismo se dificultó al utilizar una única metodología, por lo que se sugiere combinar técnicas microbiológicas y moleculares para obtener un mejor desempeño diagnóstico.  

Comparación de tres tratamientos para la crioconservación de serovares de Leptospira en nitrógeno líquido

Traditional methods for preservation of bacteria belonging to the genus Leptospira, by frequent passages in culture media, are expensive, time consuming and may cause losses in genetic characteristics of the strains. In the present study a cryoprotective technique in liquid nitrogen was standardized for six serovars of Leptospira (Pomona, Hardjoprajitno, Canicola, Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa and Bratislava), by using as agent cryopreservative a 2% Dimethyl Sulfoxide (final concentration) solution in a 1°C/min rate of cooling, which was compared with 0.2% and 10% glycerol solutions (final concentrations). All three cryopreservative methods were evaluated by the determination of the bacterial viability pre and post freezing. In 0, 30, 90, 180, 270 and 360 days bacterial counting was done using a counting chamber. Analysis of variance (ANOVA) and the Bonferroni method were used for the analysis of the results. A final concentration of 10% Glycerol in the cryopreservative reduced the viability of the serovars. The liquid nitrogen cryopreservation technique either with 2% Dimethyl Sulfoxide or 0.2% (final concentrations) glycerol, allowed the successful preservation of all six serovars of Leptospira during a year. The cryopreservative method ensured the conservation of the bacterial viability and was less expensive and less time consuming. Additionally, this method is a better method of long term conservation when compared with the traditional maintenance by serial subcultivation.La preservación de bacterias pertenecientes al género Leptospira por métodos tradicionales -repiques frecuentes del cultivo- es costosa, dispendiosa y puede generar pérdidas de las características genéticas del cultivo. En el presente estudio se estandarizó una técnica de crioconservación en nitrógeno líquido para seis serovares de Leptospira -Pomona, Hardjoprajitno, Canicola, Icterohaemorrhagiae, Grippotyphosa y Bratislava-, usando como agente crioprotector el dimetil sulfóxido (DMSO) a una concentración final de 2% y una tasa de enfriamiento de 1°C/min y se comparó con el uso de glicerol a concentraciones finales de 0,2% y 10%. Los tres métodos se evaluaron mediante la determinación de la viabilidad bacteriana antes y después de la congelación (a 0, 30, 90, 180, 270 y 360 días) por recuento bacteriano en cámara. Los datos se sometieron a análisis de varianza y comparación por parejas usando la prueba de Bonferroni. La presencia de glicerol al 10% (concentración final) en el medio crioconservante disminuyó la viabilidad de los serovares. La técnica de criopreservación en nitrógeno líquido con DMSO al 2% y glicerol al 0,2% (concentraciones finales) permitió la exitosa conservación de los seis serovares de Leptospira. El método de criopreservación aseguró una alta viabilidad, lo que disminuyó costos y tiempo en su ejecución y demostró ser un mejor método de conservación a largo plazo en relación con el mantenimiento tradicional por subcultivos periódicos.  

Estudio de variabilidad genética en aislamientos de Leptospira spp., en sistemas bovinos de carne y doble propósito

A partir de riñón y orina de bovinos, se aislaron en campo serovares de Leptospira spp., en los departamentos de Cundinamarca y Meta, Colombia. Los aislamientos fueron clasificados mediante análisis filogenético y ribotipificación, utilizando como marcador el gen 16S ADNr. El análisis filogenético permitió clasificar los aislamientos en dos de las tres genomoespecies reconocidas: patógeno e intermedio, siendo este último de gran importancia, dado que no se conoce su patrón de comportamiento inmunológico ante un huésped, lo que podría generar respuestas variables. En la ribotificación se obtuvieron ribopatrones de cuatro aislamientos de leptospira y cinco cepas de referencia con mayor identidad y su análisis mostró la presencia de dos perfiles predominantes dentro de los cuatro aislamientos.Un perfil coincidió con la cepa de referencia intermedia y otro perfil fue similar a la cepa de referencia patógena serovares Copenhageni y Lai. El análisis filogenético del aislamiento, fue agrupado dentro de leptospiras tipo intermedio y su patogenicidad se encuentra todavía en estudio. Los análisis filogenéticos de especies de leptospiras basados en secuencias comparativas del gen 16S ADNr, permiten confirmar e identificar tres grupos según su estatus de patogenicidad (patógeno, saprofítico e intermedio), donde el propósito taxonómico delos marcadores genera resultados consistentes en obtener secuencias del gen 16S ADNr agrupados en un árbol filogenético

Evaluación serológica a Leptospira spp. en equinos aparentemente sanos en municipios del Meta y Guaviare, Colombia

Introduction. Leptospirosis is the most disseminated zoonotic disease worldwide, and it causes serious economic loses in several animal species. There are few serological studies in Colombia applied to horses, so the reactivity of the main serovars is unknown. Objective. Determine the sanitary status of leptospira spp in apparently healthy horses and identify the main serovars. At the same time, we intend to relate seropositivity with the age, the age group and the sex of the animals. Materials and methods. A transversal study was performed in (n=94) horses from four towns located in the Guaviare and Meta provinces. As a diagnostic test, the microscopic agglutination (MAT) test was used before 10 serovars. Results. The seroprevalence in the subpopulations were L. Pomona, 41.5 %; L icterohaemorragiae, 40.4 %; L. grippothyposa, 24.5 %; L. javanica 23.4 %; L. canícola, 16 %; L. hardjoprajitno 10.6 %; L tarassovi, 7,4 %, L. hebdomadis, 7,4 %; L. wolffi, 2,1 % and L. Bratislava, 1,1 %. 23.4 % of the animals had no serological reactivity, and the response to one or more serovars was 76.6 %. Conclusion. The most prevalent serovars were Pomona and cterohaemorragaiae, and this can be a reflex of the specific epidemiological conditions of the towns the animals come from.Introdução. A leptospirose é a doença zoonótica a mais ampla difusão no mundo, que ocasiona sérias perdas econômicas em diferentes espécies animais. Em Colômbia, são escassos os estudos serológicos em equinos, pelo que se desconhece a reatividade dos principais serovares. Objetivo. Determinar o estado sanitário a Leptospira spp em equinos aparentemente sãos e identificar os principais serovares. Ao mesmo tempo, relacionar a soropositivida de com a idade, o grupo etário e o sexo. Materiais e métodos. Realizou-se um estudo transversal em (n=94) equinos que proviam de 4 municípios dos departamentos do Meta e Guaviare. Utilizou-se como prova diagnóstica o teste de aglutinação microscópica (MAT) frente a 10 serovares. Resultados. A seroprevalência na subpopulação foi L. pomona 41.5 %, L. icterohaemorragiae 40.4 %, L. grippothyposa 24.5 %, L. javanica 23.4 %, L. canícola 16 %, L. hardjoprajitno 10.6 %, L tarassovi 7,4 %, L. hebdomadis 7,4 %, L. wolffi 2,1 % e L. bratislava 1,1 %. O 23.4 % dos animais não mostrou reactividad serológica, enquanto a resposta a um ou mais serovares foi de 76.6 %. Conclusão. Os serovares mais prevalente foram pomona e icterohaemorragaiae, que podem ser o reflexo das condições epidemiológicas específicas para os municípios de onde procediam os animais.Introducción. La leptospirosis es la enfermedad zoonótica de más amplia difusión en el mundo, que ocasiona serias pérdidas económicas en diferentes especies animales. En Colombia, son escasos los estudios serológicos en equinos, por lo que se desconoce la reactividad de los principales serovares. Objetivo. Determinar el estado sanitario a Leptospira spp. en equinos aparentemente sanos e identificar los principales serovares. A la vez, relacionar la seropositividad con la edad, el grupo etario y el sexo. Materiales y métodos. Se realizó un estudio transversal en (n=94) equinos que provenían de 4 municipios de los departamentos del Meta y Guaviare. Se utilizó como prueba diagnóstica el test de aglutinación microscópica (MAT) frente a 10 serovares. Resultados. La seroprevalencia en la subpoblación fue L. pomona 41.5 %, L. icterohaemorragiae 40.4 %, L. grippothyposa 24.5 %, L. javanica 23.4 %, L. canícola 16 %, L. hardjoprajitno 10.6 %, L tarassovi 7,4 %, L. hebdomadis 7,4 %, L. wolffi 2,1 % y L. bratislava 1,1 %. El 23.4 % de los animales no mostró reactividad serológica, mientras que la respuesta a uno o más serovares fue de 76.6 %. Conclusión. Los serovares más prevalente fueron pomona y icterohaemorragaiae, que pueden ser el reflejo de las condiciones epidemiológicas específicas para los municipios de donde procedían los animales

Predatory Capacity in vitro of Native Nematophagous Fungi from Cundinamarca on Gastrointestinal Nematodes of Cattle

Dependence and indiscriminate use of chemical anthelmintics as the sole method for controlling gastrointestinal nematodes (GIN) of cattle causes problems in the environment, public health, and the productivity of cattle. It is important to develop non-chemical control strategies. Nematophagous fungi can be a viable and promising alternative for the control of these endoparasites. This study aimed to isolate, identify and evaluate in vitro the potential of nematophagous fungi from Cundinamarca on L3 larvae of gastrointestinal nematodes of cattle. 60 soil samples from cattle ranches were sown in Petri boxes containing agar-water for trapping fungi, and three strains of the fungus Arthrobotrys oligospora (L1, XVIII, and XXI) and one of Arthrobotrys musiformis (XXIV) were identified by morphometric keys. 1 x 106 conidia or chlamydospores of each fungi were used, which faced 100 nematode larvae. Isolate XXIV (A. musiformis) showed greater predatory capacity (96.8%) than isolates (A. oligospora) XVIII, L1, and XXI (69.68, 71.1, and 87.62%, respectively). There were no statistically significant differences (p > 0.05) among the strains with more predatory capacity. This is the first record of in vitro identification and evaluation of the predatory capacity of A. oligospora and A. musiformis, native fungi from Cundinamarca. The results suggest that these fungi could be used as biocontrol agents of nematodes in cattle

Capacidad predadora in vitro de hongos nematófagos nativos de Cundinamarca sobre nematodos gastrointestinales de bovinos

Dependence and indiscriminate use of chemical anthelmintics as the sole method for controlling gastrointestinal nematodes (GIN) of cattle causes problems in the environment, public health, and the productivity of cattle. It is important to develop non-chemical control strategies. Nematophagous fungi can be a viable and promising alternative for the control of these endoparasites. This study aimed to isolate, identify and evaluate in vitro the potential of nematophagous fungi from Cundinamarca on L3 larvae of gastrointestinal nematodes of cattle. 60 soil samples from cattle ranches were sown in Petri boxes containing agar-water for trapping fungi, and three strains of the fungus Arthrobotrys oligospora (L1, XVIII, and XXI) and one of Arthrobotrys musiformis (XXIV) were identified by morphometric keys. 1 x 106 conidia or chlamydospores of each fungi were used, which faced 100 nematode larvae. Isolate XXIV (A. musiformis) showed greater predatory capacity (96.8%) than isolates (A. oligospora) XVIII, L1, and XXI (69.68, 71.1, and 87.62%, respectively). There were no statistically significant differences (p > 0.05) among the strains with more predatory capacity. This is the first record of in vitro identification and evaluation of the predatory capacity of A. oligospora and A. musiformis, native fungi from Cundinamarca. The results suggest that these fungi could be used as biocontrol agents of nematodes in cattle.A dependência e o uso indiscriminado de anti-helmínticos químicos como único método de controle dos nematódeos gastrointestinais (NGI) de bovinos ocasionam problemas no meio ambiente, a saúde pública e a produtividade da pecuária bovina. É necessário desenvolver estratégias não químicas de controle. Os fungos nematófagos podem ser uma alternativa viável e promissória para o controle destes endoparasitas. O objetivo deste estudo foi isolar; identificar e avaliar in vitro o potencial nematófago de fungos de Cundinamarca sobre larvas L3 de NGI de bovinos. Foram semeadas 60 amostras de solo de fazendas de gado em placas de Petri com ágar-água para a armadilhagem dos fungos, e se identificaram através de chaves morfométricas três cepas do fungo Arthrobotrys oligospora (L1, XVIII e XXI) e uma de Arthrobotrys musiformis (XXIV). Utilizaram-se 1 × 106 conídios ou clamidósporos de cada fungo, os quais se enfrentaram a 100 larvas de nematódeos. O isolamento XXIV (A. musiformis) demonstrou maior capacidade predadora (96,8 %) que os isolamentos (A. oligospora) XVIII, L1 e XXI (69, 68, 71,1 e 87,62 %, respectivamente). No houve diferenças estatisticamente significativas (p > 0,05) entre as cepas de maior capacidade predadora. Este é o primeiro registro de identificação e avaliação in vitro da capacidade predadora dos fungos A. oligospora e A. musiformis nativos de Cundinamarca. Os resultados sugerem que estes fungos poderiam empregar-se como agentes bio controladores de nematódeos de bovinos.La dependencia y el uso indiscriminado de antihelmínticos químicos como único método de control de los nematodos gastrointestinales (NGI) de bovinos ocasiona problemas en el medio ambiente, la salud pública y la productividad de la ganadería bovina. Es necesario desarrollar estrategias no químicas de control. Los hongos nematófagos pueden ser una alternativa viable y promisoria para el control de estos endoparásitos. El objetivo de este estudio fue aislar, identificar y evaluar in vitro el potencial nematófago de hongos de Cundinamarca sobre larvas L3 de NGI de bovinos. Se sembraron 60 muestras de suelo de fincas ganaderas en cajas de Petri con medio agar-agua para el atrapamiento de los hongos, y se identificaron mediante claves morfométricas tres cepas del hongo Arthrobotrys oligospora (L1, XVIII y XXI) y una de Arthrobotrys musiformis (XXIV). Se utilizaron 1 × 106 conidios o clamidosporas de cada hongo, los cuales se enfrentaron a 100 larvas de nematodos. El aislamiento XXIV (A. musiformis) demostró mayor capacidad predadora (96,8 %) que los aislamientos (A. oligospora) XVIII, L1 y XXI (69, 68, 71,1 y 87,62 %, respectivamente). No hubo diferencias estadísticamente significativas (p > 0,05) entre las cepas de mayor capacidad predadora. Este es el primer registro de identificación y evaluación in vitro de la capacidad predadora de los hongos A. oligospora y A. musiformis nativos de Cundinamarca. Los resultados sugieren que estos hongos podrían emplearse como agentes biocontroladores de nematodos de bovinos