Molécules d'adhésion et chimiokines impliquées dans le recrutement des lymphocytes T et B à IgA dans les muqueuses des tractus aérien et digestif et de la mamelle chez le porc

Les muqueuses, premières barrières de défense contre les pathogènes de l'environnement, comprennent des sites inducteurs et effecteurs de la réponse immunitaire cellulaire et humorale. Dans le concept de système immunitaire commun aux muqueuses (CMIS), la réponse initiée dans une muqueuse peut se propager à une autre muqueuse différente du compartiment d'origine, réalisant ainsi un lien immun. Ce lien repose sur des mécanismes de reconnaissance spécifique, de type ligand/récepteur, entre des molécules d'adhésion à la surface des lymphocytes(récepteurs de domiciliation,RD) et des cellules endothéliales(adressines vasculaires,AV)d'une part et entre les chimiokines et leurs récepteurs d'autre part. L'immunité lactogène représente un exemple de lien immun entre le compartiment intestinal et la mamelle. Pour répondre à la question d'autres liens immuns au sein du CMIS, nous avons analysé chez le porc, les molécules d'adhésion et chimiokines propres aux sites d'initiation et de dissémination de la RI des tractus aéro-digestif supérieur et intestinal et de la glande mammaire.TOURS-BU Sciences Pharmacie (372612104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Development of a Macroarray To Specifically Analyze Immunological Gene Expression in Swine

DNA arrays are useful tools for simultaneously studying the expressions of a large number of genes. Herein, we describe the construction and the optimization of conditions for a low-density DNA macroarray specific for the porcine immune system. This specific DNA macroarray contains 63 gene products, including 20 cytokines, 11 chemokines, and 12 immunologically relevant receptors. It was constructed by designing gene-specific oligonucleotide primers from porcine sequences available in the EMBL or TIGR expressed sequence tag data bank and using primers from conserved regions of aligned sequences from other species for sequences unavailable for swine. Amplicons produced by reverse transcription-PCR were cloned, sequenced, and spotted onto nylon filters. A trial DNA array was first produced to optimize the intensity, specificity, and variability of signals from amplicons amplified with either gene-specific or universal primers. The DNA macroarray was then validated by comparing the gene expression profile of nonstimulated peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) to that of phorbol 12-myristate 13-acetate and ionomycin (PMA-Iono)-stimulated PBMCs from three different animals over a 48-h time period. As already described for more conventional techniques, we showed that certain genes, such as those for CD40, gamma interferon, interleukin 2 (IL-2), the IL-2 receptor, and tumor necrosis factor alpha, were upregulated in PMA-Iono-stimulated PBMCs. A detailed analysis also indicated a downregulation of several genes which are expressed mainly by macrophages (IL-1, IL-8, AMCF-1, natural-resistance-associated macrophage protein, neutrophil chemotactic protein, DAP-12, and monocyte chemoattractant protein) in samples stimulated for 24 h with PMA-Iono compared to their levels of expression in control samples. These results indicate that the DNA macroarray that we constructed can be a useful tool for simultaneously monitoring the mRNA expression of immunologically relevant genes in different porcine samples

Camelid‐derived T cell engagers harnessing human γδ T cells as promising antitumor immunotherapeutic agents

International audienceIn the last decade, there has been a surge in developing immunotherapies to enhance the immune system's ability to eliminate tumor cells. Bispecific antibodies known as T cell engagers (TCEs) present an attractive strategy in this pursuit. TCEs aim to guide cytotoxic T cells toward tumor cells, thereby inducing a strong activation and subsequent tumor cell lysis. In this study, we investigated the activity of different TCEs on both conventional alpha‐beta (αβ) T cells and unconventional gamma delta (γδ) T cells. TCEs were built using camelid single‐domain antibodies (VHHs) targeting the tumor‐associated antigen CEACAM5 (CEA), together with T cell receptor chains or a CD3 domain. We show that Vγ9Vδ2 T cells display stronger in vitro antitumor activity than αβ T cells when stimulated with a CD3xCEA TCE. Furthermore, restricting the activation of fresh human peripheral T cells to Vγ9Vδ2 T cells limited the production of protumor factors and proinflammatory cytokines, commonly associated with toxicity in patients. Taken together, our findings provide further insights that γδ T cell‐specific TCEs hold promise as specific, effective, and potentially safe molecules to improve antitumor immunotherapies

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Impacts environnementaux du PDU nantais 2000-2010 - synthèse des scénarios Eval-PDU

Exemple d'évaluation des impacts environnementaux du PDU 2000-2010 de Nantes Métropole à partir de simulations numériques de scénarios alternatifs sur la période 2002-2008. Le projet Eval-PDU a été consacré au développement et à l'application d'un ensemble de modèles adaptés à l'évaluation des impacts environnementaux (pollution, gaz à effet de serre, bruit) de différentes actions sur les transports et la mobilité urbaine. Un premier modèle sert à analyser les déplacements dans l'agglomération nantaise en fonction de la population et de sa répartition, des lieux d'emploi et d'activité, des voiries et moyens de transport existants. A partir de cette estimation du trafic automobile, un deuxième modèle sert à calculer les émissions de polluants par les Îhicules. Un troisième modèle permet de suivre la dispersion de ces polluants dans l'atmosphère et leur répartition dans l'agglomération. Un quatrième modèle s'intéresse au bruit généré par le trafic et à sa diffusion dans la ville. Pour appliquer la méthode Eval-PDU, plusieurs scénarios ont été élaborés. Tout d'abord deux scénarios historiques ont été choisis s'appuyant sur les situations réelles de l'agglomération nantaise en 2002 et 2008, tant du point de vue des données socio-économiques, de la voirie et des réseaux de transport publics, que des pratiques de déplacement des habitants. Ces deux scénarios ont permis de caler le modèle et de Îrifier que les évolutions constatées entre ces deux dates étaient correctement prises en compte. Des politiques alternatives ont été synthétisées dans trois scénarios et diverses variantes. Quelques résultats marquants de la simulation de ces scénarios par nos modèles sont présentés et discutés ci-dessous. A la lecture de ce document, on gardera à l'esprit les remarques qui précèdent: il s'agit d'éléments d'information pour alimenter le débat sur les politiques de transport et de mobilité en ville, certainement pas de chiffres absolus. Au-delà d'indications globales à l'échelle de l'agglomération, les informations plus locales (quartier ou voie) sont souvent les plus intéressantes

Cooperation between Monocyte-Derived Cells and Lymphoid Cells in the Acute Response to a Bacterial Lung Pathogen

<div><p><i>Legionella pneumophila</i> is the causative agent of Legionnaires’ disease, a potentially fatal lung infection. Alveolar macrophages support intracellular replication of <i>L</i>. <i>pneumophila</i>, however the contributions of other immune cell types to bacterial killing during infection are unclear. Here, we used recently described methods to characterise the major inflammatory cells in lung after acute respiratory infection of mice with <i>L</i>. <i>pneumophila</i>. We observed that the numbers of alveolar macrophages rapidly decreased after infection coincident with a rapid infiltration of the lung by monocyte-derived cells (MC), which, together with neutrophils, became the dominant inflammatory cells associated with the bacteria. Using mice in which the ability of MC to infiltrate tissues is impaired it was found that MC were required for bacterial clearance and were the major source of IL12. IL12 was needed to induce IFNγ production by lymphoid cells including NK cells, memory T cells, NKT cells and γδ T cells. Memory T cells that produced IFNγ appeared to be circulating effector/memory T cells that infiltrated the lung after infection. IFNγ production by memory T cells was stimulated in an antigen-independent fashion and could effectively clear bacteria from the lung indicating that memory T cells are an important contributor to innate bacterial defence. We also determined that a major function of IFNγ was to stimulate bactericidal activity of MC. On the other hand, neutrophils did not require IFNγ to kill bacteria and alveolar macrophages remained poorly bactericidal even in the presence of IFNγ. This work has revealed a cooperative innate immune circuit between lymphoid cells and MC that combats acute <i>L</i>. <i>pneumophila</i> infection and defines a specific role for IFNγ in anti-bacterial immunity.</p></div

Optimal bactericidal activity of MC, but not neutrophils, is dependent upon IFNγ.

<p>C57BL/6 (A, B) or IFNγ^-/- (B) mice were infected with <i>L</i>. <i>pneumophila</i> and at 2 days after infection the indicated cell types were isolated, lysed and the lysates cultured on selective bacterial culture plates to determine the number of <i>L</i>. <i>pneumophila</i> CFU per 10⁴ cells in each cell population. In B, lines connect data points from individual experiments using the same bacterial inoculum. Each point represents the results from one experiment where lungs from 4–5 mice were pooled. *. P < 0.05. In A all comparisons to AM group. In B, the fold change refers to the ratio of the averages of the two groups.</p