Functional nitric oxide conjugate systems state/restored heart thiols of rats in modeling isadrine-pituitrin’s myocardial infarction using metabolite-tropic cardioprotector “Angiolin”

Background: According to modern researches, endothelial dysfunction (ED) is one of the primary pathogenetic elements of cardiovascular diseases (myocardial infarction [MI], ischemic heart diseases, cerebral ischemic stroke, atherosclerosis, arterial hypertension, pulmonary hypertension, heart failure, and dilated cardiomyopathy) as well as obesity, hyperlipidemia, diabetes and hyperhomocysteinemia. The aim of this work was to study the influence of potential metabolitotropic cardioprotector “Angiolin” on the parameters of conjugate systems nitric oxide (NO)/restored thiols in heart under isadrine-pituitrin MI.Methods: This study was performed on Wistar white rats weighing 190-210 g. Biochemical, immune-enzyme analysis and histoimmunechemical study were performed.Results: In histological sections of hearts of the rats receiving Angiolin in parenteral dosing 50 mg/kg 30 mins before each pituitrin injection the density of endothelial NO-synthase (NOS)-positive cells increased by 29% and the density of inducible NOS-positive cells decreased by 23.3%. In cytosolic fraction of myocardium homogenate NOS activity increased by 27%, the concentration of NO stable metabolites increased by 70% and the content of nitrosative stress marker nitrotyrosine decreased by 42% when compared with control group. At the same time in similar samples of heart homogenate the increase of restored thiol groups’ level by 53.3%, methionine - by 35.1%, cysteine - by 170% and activity of glutathione reductase - by 186% was noted. The administration of reference drug mildronate to the animals with MI in dose 100 mg/kg did not result in significant changes of the studied parameters of thiol-disulfide system and NO system of the heart when compared with control group.Conclusions: Angiolin does not influence directly on NOS in MI, but at the same time protects NO from nitrosative stress increasing restored equivalents of thiol-disulfide system

Replication Fork Reversal after Replication–Transcription Collision

Replication fork arrest is a recognized source of genetic instability, and transcription is one of the most prominent causes of replication impediment. We analyze here the requirement for recombination proteins in Escherichia coli when replication–transcription head-on collisions are induced at a specific site by the inversion of a highly expressed ribosomal operon (rrn). RecBC is the only recombination protein required for cell viability under these conditions of increased replication-transcription collisions. In its absence, fork breakage occurs at the site of collision, and the resulting linear DNA is not repaired and is slowly degraded by the RecJ exonuclease. Lethal fork breakage is also observed in cells that lack RecA and RecD, i.e. when both homologous recombination and the potent exonuclease V activity of the RecBCD complex are inactivated, with a slow degradation of the resulting linear DNA by the combined action of the RecBC helicase and the RecJ exonuclease. The sizes of the major linear fragments indicate that DNA degradation is slowed down by the encounter with another rrn operon. The amount of linear DNA decreases nearly two-fold when the Holliday junction resolvase RuvABC is inactivated in recB, as well as in recA recD mutants, indicating that part of the linear DNA is formed by resolution of a Holliday junction. Our results suggest that replication fork reversal occurs after replication–transcription head-on collision, and we propose that it promotes the action of the accessory replicative helicases that dislodge the obstacle

Co-Orientation of Replication and Transcription Preserves Genome Integrity

In many bacteria, there is a genome-wide bias towards co-orientation of replication and transcription, with essential and/or highly-expressed genes further enriched co-directionally. We previously found that reversing this bias in the bacterium Bacillus subtilis slows replication elongation, and we proposed that this effect contributes to the evolutionary pressure selecting the transcription-replication co-orientation bias. This selection might have been based purely on selection for speedy replication; alternatively, the slowed replication might actually represent an average of individual replication-disruption events, each of which is counter-selected independently because genome integrity is selected. To differentiate these possibilities and define the precise forces driving this aspect of genome organization, we generated new strains with inversions either over ∼1/4 of the chromosome or at ribosomal RNA (rRNA) operons. Applying mathematical analysis to genomic microarray snapshots, we found that replication rates vary dramatically within the inverted genome. Replication is moderately impeded throughout the inverted region, which results in a small but significant competitive disadvantage in minimal medium. Importantly, replication is strongly obstructed at inverted rRNA loci in rich medium. This obstruction results in disruption of DNA replication, activation of DNA damage responses, loss of genome integrity, and cell death. Our results strongly suggest that preservation of genome integrity drives the evolution of co-orientation of replication and transcription, a conserved feature of genome organization

Освіта для Z покоління

У статті досліджується значення терміну "Z покоління". Представники Z покоління – це діти, народжені після 2001 року. У дослідженні зазначається, що сьогодні особливості системи освіти повинні бути переглянуті і змінені відповідно потреб лідей Z покоління.The article deals with the concept of Z generation. Representatives of Z generation are children born since 2001. it has been mentioned in the article that the main aspects of the educational system should be reconsidered and changed according to the goals and needs of Z generation

ПідбіР допоміжниХ речовиН З метоЮ створеннЯ таблетоК адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат МетодоМ вологоЇ грануляції. ЧАстинА 1

В даний час психічне здоров'я належить до числа найбільш серйозних проблем, що стоять перед усіма країнами, оскільки, в той чи інший період життя, такі проблеми виникають принаймні у кожної четвертої людини. Показники поширеності порушень психічного здоров'я в Європейському регіоні дуже високі. За даними ВООЗ, з 870 млн осіб, які проживають в Європейському регіоні, близько 100 млн відчувають стан тривоги і депресії; понад 21 млн страждають від розладів, пов'язаних з вживанням алкоголю; понад 7 млн – хворобою Альцгеймера та іншими видами деменції; близько 4 млн – на шизофренію; 4 млн – біполярними афективними розладами і 4 млн – панічними розладами.Численними дослідженнями про вплив лікарської форми на терапевтичну ефективність лікарських препаратів встановлено, що оптимальна активність лікарської речовини досягається лише за умови призначення її в раціональній лікарській формі. Крім того, в цьому випадку можна уникнути багатьох побічних ефектів лікарських препаратів на організм.Відомо, що більшість нейролептиків застосовуються у вигляді таблеток. Виходячи з вищесказаного, актуальним є розробка технології таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат.Метою дослідження є підбір раціональних допоміжних речовин для отримання таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат методом вологої грануляції з вмістом діючої речовини 70 мг.Методи. Досліджені чотири групи допоміжних речовин, які мають різні фізичні та технологічні властивості. Досліди були проведені з використанням сучасного обладнання для визначення однорідності маси таблеток, стиранності, часу розпадання та отримання таблеток.Досліджували 16 допоміжних речовин, більшість з яких з'явились на ринку в останні роки і немає відомостей про використання їх у фармацевтичній технології при створенні таблетованих лікарських форм.При вивченні чотирьох якісних факторів використовували один із планів дисперсійного аналізу – чотирьохфакторний експеримент на основі гіпер-греко-латинського квадрату.Результати. Виходячи з фармако-технологічних властивостей та морфометричних дослідів було запропоновано метод вологої грануляції для отримання таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат. Враховуючи літературні дані [3,6,10] спираючись на дослідження сучасниних видатних науковців, а саме проф.. Грошевого Т.А., Казарінова М.О. Борзунова Є.Е., Штейнгарта М.В. та досвід попередніх технологічних досліджень, нами було запропоновано теоретичний склад таблеток, а саме набір факторів, які частіше усього використовуються при створенні таблеток методом вологої грануляці

Excipients choice justification for the creation of Adamantane-1ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate tablets by the method of wet granulation (part 2)

Introduction. The compound adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate was first synthesized at the Department of Toxicology and Inorganic Chemistry (Zaporizhya State Medical University), and received the name “Adatryn”. According to pharmacological studies, it shows neuroleptic properties and can be used in pill form, as most neuroleptics. Thus it is important to develop pills technology of adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate. During pharmacological studies the optimum dose at one time was 70 mg. The aim of this work was to study the effect of different groups of excipients on pharmaco-technological properties of adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl) thio) acetate tablets. Materials and methods. In the process, we studied four groups of adjuvants, which have various physical and technological properties. In the study of four qualitative factors we used one of dispersion analysis plans – four-factor experiment based on hyper-Greco-Latin square. 16 Excipients were studied, most of which have appeared on the market in recent years and there is no information about their use in pharmaceutical technology in creation of tablet dosage forms. In the experiments we used modern equipment to determine the mass uniformity of drugs, abrasion (abrasion device to determine Pharmatest D-63512 Hainburg, Germany), the time of disintegration (ERWEKA D-63150, Germany), and drugpres (Belorussia). Results and discussion. Given pharmaco-technological properties and the results of morphometric studies proposed a method of wet granulation to obtain adamantan-1-ammonium 2-((5-(adamantan-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate tablets. Conclusions. The influence of four groups of auxiliary substances on the technological characteristics of the adamantan-1-ammonium 2-((5-(adamantan-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetadote tablets, has confirmed the possibility of their obtaining by method of direct pressing. Optimal excipients and the composition of the drugs have been chosen

Обґрунтування вибору допоміжних речовин з метою створення таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат методом вологої грануляції (частина 2)

Introduction. The compound adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate was first synthesized at the Department of Toxicology and Inorganic Chemistry (Zaporizhya State Medical University), and received the name “Adatryn”. According to pharmacological studies, it shows neuroleptic properties and can be used in pill form, as most neuroleptics. Thus it is important to develop pills technology of adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate. During pharmacological studies the optimum dose at one time was 70 mg.The aim of this work was to study the effect of different groups of excipients on pharmaco-technological properties of adamantane-1-ammonium 2-((5-(adamantane-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl) thio) acetate tablets.Materials and methods. In the process, we studied four groups of adjuvants, which have various physical and technological properties. In the study of four qualitative factors we used one of dispersion analysis plans – four-factor experiment based on hyper-Greco-Latin square. 16 Excipients were studied, most of which have appeared on the market in recent years and there is no information about their use in pharmaceutical technology in creation of tablet dosage forms. In the experiments we used modern equipment to determine the mass uniformity of drugs, abrasion (abrasion device to determine Pharmatest D-63512 Hainburg, Germany), the time of disintegration (ERWEKA D-63150, Germany), and drugpres (Belorussia).Results and discussion. Given pharmaco-technological properties and the results of morphometric studies proposed a method of wet granulation to obtain adamantan-1-ammonium 2-((5-(adamantan-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetate tablets.Conclusions. The influence of four groups of auxiliary substances on the technological characteristics of the adamantan-1-ammonium 2-((5-(adamantan-1-yl)-4-phenyl-4H-1,2,4-triazole-3-yl)thio)acetadote tablets, has confirmed the possibility of their obtaining by method of direct pressing. Optimal excipients and the composition of the drugs have been chosen.Соединение адамантан-1-аммоний 2-((5-(адамантан-1-ил)-4-фенил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетата впервые синтезировано на кафедре токсикологической и неорганической химии Запорожского государственного медицинского университета и получило условное название «Адатрин». Согласно фармакологическим исследованиям оно проявляет нейролептические свойства и планируется для использования в виде таблеток, как и большинство нейролептиков. Исходя из вышесказанного, актуальным является разработка технологии таблеток адамантан-1-аммоний 2-((5-(адамантан-1-ил)-4-фенил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацетата. В ходе фармакологических исследований подобрана оптимальная доза на один приём, которая составляет 70 мг.Цель работы – изучение влияния различных групп вспомогательных веществ на фармако-технологические свойства таблеток адамантан-1-аммоний 2-((5-(адамантан-1-ил)-4-фенил-4H-1,2,4-триазол-3ил)тио)ацетата.Материалы и методы. В процессе роботы исследованы четыре группы вспомогательных веществ, которым присущи различные физические и технологические свойства. При изучении четырёх качественных факторов использовали один из планов дисперсионного анализа – четырёхфакторный эксперимент на основании гипер-греко-латинского квадрата. Исследовали 16 вспомогательных веществ, большинство из которых появились на рынке в последние годы. Сведения об использовании их в фармацевтической технологии при создании таблетированных лекарственных форм отсутствуют. В опытах было использовано современное оборудование для определения однородности массы таблеток, истираемости (прибор для определения истираемости Pharmatest D-63512 Hainburg, ФРГ), времени распада (ERWEKA D-63150, ФРГ) и таблетопрес (Республика Беларусь).Результаты. Учитывая фармако-технологические свойства и результаты морфометрических исследований был предложен метод влажной грануляции для получения таблеток адамантан-1-аммоний 2-((5-(адамантан-1-ил)-4-фенил-4H-1,2,4 триазол-3-ил)тио)ацетата.Выводы. Исследовано влияние четырех групп вспомогательных веществ на технологические характеристики таблеток адамантан-1-аммоний 2-((5-(адамантан-1-ил)-4-фенил-4H-1,2,4-триазол-3-ил)тио)ацета, подтверждена возможность их получения методом прямого прессования. Подобраны оптимальные вспомогательные вещества и разработан состав таблеток.Сполука адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат уперше синтезована на кафедрі токсикологічної та неорганічної хімії Запорізького державного медичного університету, що отримала умовну назву «Адатрин». Згідно з фармакологічними дослідженнями вона проявляє нейролептичні властивості та планується для використання у вигляді таблеток, як і більшість нейролептиків. Отже, актуальною є розроблення технології таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат. Під час фармакологічних досліджень підібрали оптимальну дозу препарату на одне приймання, що становила 70 мг.Мета роботи – вивчення впливу різних груп допоміжних речовин на фармако-технологічні властивості таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетату.Матеріали та методи. У процесі роботи дослідили чотири групи допоміжних речовин, котрим притаманні різні фізичні, технологічні властивості. Вивчаючи чотири якісні фактори, використовували один із планів дисперсійного аналізу – чотирифакторний експеримент на основі гіпер-греко-латинського квадрата. Досліджували 16 допоміжних речовин, більшість із них з’явились на ринку в останні роки, та немає відомостей про їхнє використання у фармацевтичній технології під час створення таблетованих лікарських форм. У дослідах використали сучасне обладнання для визначення однорідності маси таблеток, стиранності (прилад для визначення стиранності Pharmatest D-63512 Hainburg, ФРН), часу розпадання (ERWEKA D-63150, ФРН) і таблетопрес (Республіка Білорусь).Результати. Враховуючи фармако-технологічні властивості та результати морфометричних дослідів, запропонований метод вологої грануляції для отримання таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетат.Висновки. Досліджений вплив чотирьох груп допоміжних речовин на технологічні характеристики таблеток адамантан-1-амонію 2-((5-(адамантан-1-іл)-4-феніл-4Н-1,2,4-триазол-3-іл)тіо)ацетату та підтверджено можливість їх отримання методом прямого пресування. Підібрані оптимальні допоміжні речовини та розроблений склад таблеток

Active site of the replication protein of the rolling circle plasmid pC194.

Mutation analysis of the rolling circle (RC) replication initiator protein RepA of plasmid pC194 was targeted to tyrosine and acidic amino acids (glutamate and aspartate) which are well conserved among numerous related plasmids. The effect of mutations was examined by an in vivo activity test. Mutations of one tyrosine and two glutamate residues were found to greatly impair or abolish activity, without affecting affinity for the origin, as deduced from in vitro gel mobility assays. We conclude that all three amino acids have a catalytic role. Tyrosine residues were found previously in active sites of different RC plasmid Rep proteins and topoisomerases, but not in association with acidic residues, which are a hallmark of the active sites of DNA hydrolyzing enzymes, such as the exo- and endonucleases. We propose that the active site of RepA contains two different catalytic centers, corresponding to a tyrosine and a glutamate. The former may be involved in the formation of the covalent DNA-protein intermediate at the initiation step of RC replication, and the latter may catalyze the release of the protein from the intermediate at the termination step

Protein-tyrosine phosphorylation interaction network in Bacillus subtilis reveals new substrates, kinase activators and kinase cross-talk

Signal transduction in eukaryotes is generally transmitted through phosphorylation cascades that involve a complex interplay of transmembrane receptors, protein kinases, phosphatases and their targets. Our previous work indicated that bacterial protein-tyrosine kinases and phosphatases may exhibit similar properties, since they act on many different substrates. To capture the complexity of this phosphorylation-based network, we performed a comprehensive interactome study focused on the protein-tyrosine kinases and phosphatases in the model bacterium Bacillus subtilis. The resulting network identified many potential new substrates of kinases and phosphatases, some of which were experimentally validated. Our study highlighted the role of tyrosine and serine/threonine kinases and phosphatases in DNA metabolism, transcriptional control and cell division. This interaction network reveals significant crosstalk among different classes of kinases. We found that tyrosine kinases can bind to several modulators, transmembrane or cytosolic, consistent with a branching of signaling pathways. Most particularly, we found that the division site regulator MinD can form a complex with the tyrosine kinase PtkA and modulate its activity in vitro. In vivo, it acts as a scaffold protein which anchors the kinase at the cell pole. This network highlighted a role of tyrosine phosphorylation in the spatial regulation of the Z-ring during cytokinesis