Differenciáldiagnosztikai és prognosztikai markerek alkalmazása korai arthritisekben, különös tekintettel a rheumatoid arthritisre = Application of differential diagnostic and prognostic markers in early arthritides especially in rheumatoid arthritis

Pályázatunkban differenciáldiagnosztikai és prognosztikai markerek alkalmazását tűztük ki célul korai arthritisekben, különös tekintettel a rheumatoid arthritisre (RA). Korszerű molekuláris biológiai módszerekel genetikai, virális és celluláris tényezőket vizsgáltunk. Eredményeinket számos nívós nemzetközi folyóiratban közültük, ezek közül az alábbiakat emeljük ki. Az RA specifikus szerológiai markere, az anti-ciklikus citrullinált peptid ellenanyag termelése összefüggést mutatott bizonyos HLA szubtípusokkal, főként a shared epitop tartalmú allélokkal.Elsőként vetettük fel az újonnan felfedezett TT vírus lehetséges patogenetikai szerepét systémás lupus erythematosusban (SLE) és súlyos polymyositisben. SLE B sejteken funkcionális abnormalitásokat találtunk az immunkomplexkötő receptorok működésében. Igazoltuk, hogy a spondylitis ankylopoeticában (SPA) és reaktív arthritisben a Toll-like receptorok szintjén észlelt funkcionális eltérések nem genetikailag determináltak. Paget-kórban új genetikai és klinikai összefüggéseket tártunk fel. Erdeményeink nemcsak a mozgásszervi betegségek patogenezisének megértéshez vihetnek közelebb, de klinikai konzekvenciái is lehetnek és új terápiás célpontok körvonalazadhatnak. | We aimed at studying differential diagnostic and prognostic markers in early arthritides, with special attention to rheumatoid arthritis (RA). Novel molecular biological methods were used to examine genetical, viral and cellular elements. Our main results were published in several international scientific journals. We showed that presence of the anti-cyclic citrullinated peptide antibodies, as the most specific serological markers of RA correlate with certain HLA DRB1 subtypes, mainly with the shared epitope. We first suggested the etiopathogenic role of the recently discovered TT virus in autoimmune rheumatic diseases such as systemic lupus erythematosus (SLE) and severe polymyositis. Moreover, SLE B cells were found to display functional abberations in the immune complex binding receptors. We verified that Toll-like receptor mediated functional alterations seen in ankylosing spondylitis and reactive arthritis are not determined genetically. Novel genetical and clinical correlations were found in Paget?s disease of bone. Our results may contribute to the better understanding of the etiopathogenesis of several rheumatic diseases but may also have clinical consequenses. Furthermore, novel pathways identified in our study might be targets for therapeutical interventions

A COVID–19-fertőzés és a védőoltások hatásosságának vizsgálata egészségügyi dolgozókon

Bevezetés: A COVID–19-pandémiát okozó SARS-CoV-2 koronavírusnak folyamatosan újabb variánsai jelennek meg, 2021. november óta a legtöbb fertőzést az omikron koronavírus-variáns okozta. Célkitűzés: A prospektív megfigyeléses kohorszvizsgálat célja a COVID–19-fertőzésre nagyobb rizikóval bíró, egész- ségügyben dolgozók körében két Pfizer–BioNTech-vakcina és az ezt követően önkéntesen felvett emlékeztető vakcina utáni COVID–19-fertőzések előfordulásának, a vakcina hatásosságának, biztonságosságának és immunogenitásá- nak vizsgálata volt. Módszer: A Betegápoló Irgalmasrend Budai Irgalmasrendi Kórháza egészségügyi és egészségügyben dolgozó munka- társainak két Pfizer–BioNTech (BNT162b2)-oltását 2021. január 7. és március 8. között kezdték meg. A harmadik, emlékeztető védőoltás típusának választása és időpontjának meghatározása önkéntes volt. 2021. január 7. és 2022. június 29. között követtük nyomon a dolgozókat. Felmértük a COVID–19-fertőzés előfordulását, az oltási reakció súlyosságát, a fertőzésre hajlamosító tényezőket és az oltások után a ’spike’ (S)-protein és a nukleokapszid (N)-protein elleni ellenanyag szintjének változási kinetikáját. Eredmények: 294 dolgozó – 96 orvos, 127 nővér és 71, egészségügyben dolgozó – adatait elemeztük, akiknek leg- alább három ellenanyagszint-mérésük történt a megfigyelési idő alatt. A harmadik, emlékeztető oltást 280 dolgozó kapta meg, a vakcinák megoszlása a következő volt: Pfizer–BioNTech (BNT162b2) (n = 210), Moderna COVID–19 (mRNA-1273) (n = 37), Sinopharm COVID–19 (n = 21), Janssen COVID–19 (n = 10) és AstraZeneca (ChAdOx1 nCoV-19) (n = 2). A megfigyelési időszakban 121 esetben történt fertőzés (41%). A COVID–19-fertőzések lefolyása többségében enyhe volt (97%), egy hét alatt gyógyult. A vizsgált időszakban 2 dolgozó halt meg: egy 56 éves nő két oltás után, COVID–19-fertőzéssel összefüggésbe nem hozható okból, és egy 58 éves férfi, aki a harmadik Pfizer-védőoltás után 6 hónappal zajló COVID–19-fertőzés után elhunyt. A fertőzés előfordulását nem befolyásolta az életkor, a nem, a kísérő betegségek, a dohányzás, a munkakör és a BMI. Az S-ellenanyag szintjének medián értéke az alapimmunizálás második oltása után 1 hónapig emelkedett (medián: 1173,0 U/ml), a 8. hónapig lassú csökkenő tendenciát mutatott (678,5–625,8–538,0 U/ml). A harmadik oltás után 1 hónappal lényegesen emelkedett az S-ellenanyag szintjének medián értéke (16 535,0 U/ml), az oltás utáni 3. hónaptól csökkenő tendenciát mutatott (9697,7 U/ml). Az S-antitest szintjének az oltások utáni kiugróan magas emelkedése összefüggést mutat az előzetes COVID–19-fertőzéssel. Az N-protein elleni ellenanyagszintet az oltás nem befolyásolta, emelkedése a fertőzéssel mutat összefüggést. Következtetés: Az emlékeztető vakcináció kevésbé hatott az omikron variáns okozta fertőzésre, de a betegség lefolyása enyhébb volt. Az alapimmunizáláshoz képest az emlékeztető oltás az S-antitest szintjének jelentősebb emelkedését okozta, ami összefüggést mutat a korábbi COVID–19-fertőzéssel

The EULAR Study Group for Registers and Observational Drug Studies: comparability of the patient case mix in the European biologic disease modifying anti-rheumatic drug registers

Objective. Under the auspices of the European League Against Rheumatism (EULAR), a study group of investigators representing European biologic DMARD (bDMARD) registers was convened. The purpose of this initial assessment was to collect and compare a cross section of patient characteristics and collate information on the availability of potential confounders within these registers. Methods. Baseline characteristics of patients starting their first bDMARD in an arbitrary year (2008) for the treatment of RA, including demographic and disease characteristics, bDMARD drug details and co-morbidities, were collected and compared across 14 European bDMARD registers. Results. A total of 5320 patients were included. Half the registers had restricted recruitment to certain bDMARDs during the study year. All registers's collected data on age, gender, disease duration, seropositivity for IgM-RF and 28-joint DAS (DAS28). The mean DAS28 ranged from 4.2 to 6.6 and the mean HAQ from 0.8 to 1.9. Current smoking ranged from 9% to 34%. Nine registers reported co-morbidities with varying prevalence. Conclusion. In addition to demonstrating European-wide collaboration across rheumatology bDMARD registers, this assessment identified differences in prescribing patterns, recruitment strategies and data items collected. These differences need to be considered when applying strategies for combined analysis. The lack of a common data model across Europe calls for further work to harmonize data collection across register

Bead arrays for antibody and complement profiling reveal joint contribution of antibody isotypes to C3 deposition

The development of antigen arrays has provided researchers with great tools to identify reactivities against self or foreign antigens from body fluids. Yet, these approaches mostly do not address antibody isotypes and their effector functions even though these are key points for a more detailed understanding of disease processes. Here, we present a bead array-based assay for a multiplexed determination of antigen-specific antibody levels in parallel with their properties for complement activation. We measured the deposition of C3 fragments from serum samples to reflect the degree of complement activation via all three complement activation pathways. We utilized the assay on a bead array containing native and citrullinated peptide antigens to investigate the levels of IgG, IgM and IgA autoantibodies along with their complement activating properties in serum samples of 41 rheumatoid arthritis patients and 40 controls. Our analysis revealed significantly higher IgG reactivity against the citrullinated fibrinogen β and filaggrin peptides as well as an IgA reactivity that was exclusive for citrullinated fibrinogen β peptide and C3 deposition in rheumatoid arthritis patients. In addition, we characterized the humoral immune response against the viral EBNA-1 antigen to demonstrate the applicability of this assay beyond autoimmune conditions. We observed that particular buffer compositions were demanded for separate measurement of antibody reactivity and complement activation, as detection of antigen-antibody complexes appeared to be masked due to C3 deposition. We also found that rheumatoid factors of IgM isotype altered C3 deposition and introduced false-positive reactivities against EBNA-1 antigen. In conclusion, the presented bead-based assay setup can be utilized to profile antibody reactivities and immune-complex induced complement activation in a high-throughput manner and could facilitate the understanding and diagnosis of several diseases where complement activation plays role in the pathomechanism

A BNT162b2 mRNS-Pfizer–BioNTech-védőoltás hatásosságának és immunogenitásának monitorozása egészségügyben dolgozókon

Bevezetés: A SARS-CoV-2 koronavírus okozta COVID–19 általános egészségügyi és gazdasági krízist idézett elő. Célkitűzés: A megfigyeléses vizsgálat célja a BNT162b2 mRNS-Pfizer–BioNTech-vakcina hatásosságának, biztonsá-gosságának és immunogenitásának igazolása a Budai Irgalmasrendi Kórház dolgozóin. Módszer: A vakcina adása után elemeztük a COVID–19-fertőzés előfordulását, az oltások utáni reakciókat, valamint a „spike” (S-) protein és a nukleokapszid (N)-protein elleni ellenanyag szintjének változását. Eredmények: A felmérésben részt vevő 295 dolgozó közül az oltást megelőzően 36 dolgozó esett át COVID–19-fer-tőzésen (COVID–19-pozitív csoport). A második oltás után a megfigyelési időszak három hónapjában COVID–19- fertőzés nem alakult ki a felmérésben részt vevő oltott dolgozók körében. Az oltási reakciók enyhék voltak. A COVID–19-pozitív csoportban az N-antitestek medián küszöbértékindexe az első vakcina után 4 héttel mérve szignifikánsan magasabb volt (28,37), mint a COVID–19-negatív (0,085) csoportban (p<0,0001). Az első vakcina után 4 héttel az S-antitestek medián értéke (8015 U/ml) a COVID–19-pozitív csoportban szignifikánsan magasabb volt (p<0,0001), mint a COVID–19-negatív csoportban (23,18 U/ml). A COVID–19-negatív csoport S-antitest-középértéke a második vakcina után szignifikáns (p<0,0001), mintegy 500×-os emelkedést mutatott (23,18 U/ml ről 1173 U/ml-re). Egy vakcina hatásosságát a fertőzések terjedésének megakadályozása igazolja. Következtetések: A második vakcina utáni megfigyelési időszakban új COVID–19-fertőzés nem volt az oltott dolgo-zók körében. A fertőzésen át nem esett COVID–19-negatív egyének esetén az S-antitest emelkedése mérsékelt az első oltás után, míg a második oltás után lényegesen emelkedik. A COVID–19-fertőzésen átesett egyének csoportjá-ban már az első vakcina is jelentős S-antitest-termelődést vált k

Subjective health expectations at biological therapy initiation: A survey of rheumatoid arthritis patients and rheumatologists

Subjective health expectations of patients with rheumatoid arthritis (RA) and rheumatologists remain understudied. We measured subjective expectations regarding treatment effects of biologicals as well as future length and quality of life. Moreover, we compared expectations regarding treatment effects to actual treatment effects. We recruited a sample of Hungarian RA patients initiating treatment with biologicals. Expectations regarding treatment effects and future health were obtained through a written questionnaire from patients and physicians, including functional impairment (HAQ-DI), health status (EQ-5D) and disease activity (DAS28). After three months, actual treatment effects were obtained. Ninety-two RA patients (females N = 81, 88%) with mean age of 51 (SD 12) and disease duration of 9 (SD 8) years with high average disease activity (DAS28: 6.1) were included. Patients expected significant and large health improvement within three months with mean changes on the HAQ-DI of -0.8 and on the EQ-5D of +0.4. Rheumatologists' estimates were similar, and they expected significant decrease of 2.3 on the DAS28. Actual scores after three months were obtained for 77 patients. The measured scores were significantly lower than expected scores for the HAQ-DI and EQ-5D. Rheumatologists' expectations for the DAS28 score were not significantly different from measured scores. Patients' average expectations regarding quality of life scores for ages 60, 70, 80 and 90 were 0.44, 0.24, 0.06 and -0.02, respectively. Our results suggest that both RA patients and rheumatologists expect quick and significant health improvements from biological drugs and tend to overestimate actual short term treatment effects. Nonetheless, RA patients expect a sharp deterioration of future health

The Role of IgG Fc Region N-Glycosylation in the Pathomechanism of Rheumatoid Arthritis

Anti-citrullinated protein antibodies (ACPAs) are involved in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. N-glycosylation pattern of ACPA-IgG and healthy IgG Fc differs. The aim of this study is to determine the relative sialylation and galactosylation level of ACPAs and control IgG to assess their capability of inducing TNFα production, and furthermore, to analyze the correlations between the composition of Fc glycans and inflammatory markers in RA. We isolated IgG from sera of healthy volunteers and RA patients, and purified ACPAs on a citrulline-peptide column. Immunocomplexes (IC) were formed by adding an F(ab)2 fragment of anti-human IgG. U937 cells were used to monitor the binding of IC to FcγR and to trigger TNFα release determined by ELISA. To analyze glycan profiles, control IgG and ACPA-IgG were digested with trypsin and the glycosylation patterns of glycopeptides were analyzed by determining site-specific N-glycosylation using nano-UHPLC-MS/MS. We found that both sialylation and galactosylation levels of ACPA-IgG negatively correlate with inflammation-related parameters such as CRP, ESR, and RF. Functional assays show that dimerized ACPA-IgG significantly enhances TNFα release in an FcγRI-dependent manner, whereas healthy IgG does not. TNFα production inversely correlates with the relative intensities of the G0 glycoform, which lacks galactose and terminal sialic acid moieties