Efficacy and safety of oncolytic vaccinia virus and Semliki Forest virus in the treatment of canine and feline malignant tumours

Cancer is one of the most common reasons for death in dogs, cats and humans. New therapeutic modalities are necessary to improve disease outcome. One promising approach is oncolytic virotherapy. Until now, the only oncolytic virus evaluated in a clinical trial in veterinary medicine has been canine oncolytic adenovirus, but a clinical trial has been started with oncolytic vaccinia virus (VV) in pet dogs. In cats, oncolytic viruses have not been evaluated in clinical settings. Tumour treatment in dogs and cats could also serve as a model for human cancer therapy. The purpose of the thesis was to evaluate preclinically whether genetically modified oncolytic VV and Semliki Forest virus (SFV) could offer a new treatment modality for dogs and cats. Oncolytic VV was rendered tumour selective by a dual ablation of vaccinia growth factor and thymidine kinase, making it more cancer-specific than previously used VVs in veterinary research. To further increase the efficacy of the VV, an immunostimulatory gene, CD40L, was added to the virus backbone. Avirulent SFV A7(74) has a natural trophism for cancer cells and was not genetically manipulated. Both viruses infected and killed tested cancer cell lines, and VV also infected most of the primary surgical tumour tissues tested. In the nude mouse xenograft model, double deleted VV (vvdd) significantly reduced tumour growth. Interestingly, when in intact monolayers, SCCF1 cells were not killed by VV, but secreted infectious, morphologically abnormal virions. One dog experienced a possible seizure after VV administration, but no other serious adverse events occurred. Vaccinia DNA declined quickly in the blood after virus administration, but was still detectable one week later by qPCR. Only samples taken directly after the VV infusion contained infectious virus, which was not found in any other blood, saliva, urine or faecal samples. Necropsies did not reveal any pathological changes associated with virus administrations. In conclusion, our results show that oncolytic VV and SFV can infect and kill tested canine cancer cell lines, and that VV has antitumoral activity in the mouse xenograft model and it can infect fresh tumour biopsies. In addition, intravenous administration of the viruses did not induce life-threatening adverse events in healthy dogs. These agents thus warrant further evaluation in veterinary medicine.Syöpä on yksi yleisimmistä koirien, kissojen ja ihmisten kuolinsyistä, minkä vuoksi uusia hoitomuotoja tarvitaan parantamaan hoitotuloksia. Onkolyyttiset virukset ovat yksi lupaava syövän hoitomuoto. Eläinlääketieteessä ainoastaan onkolyyttistä koirien adenovirusta on käytetty koirien syövän hoidossa, mutta kliininen hoitokoe on meneillään myös onkolyyttisellä vaccinia viruksella. Kissojen syöpien hoidossa ei ole vielä käytetty onkolyyttisiä viruksia. Koirien ja kissojen kasvaimet voivat toimia myös mallina ihmisten syöpien hoitoon. Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli arvioida prekliinisesti geneettisesti muunnellun onkolyyttisen vaccinia viruksen ja Semliki Forest viruksen (SFV) tehoa koirien ja kissojen syöpien hoidossa. Tutkimuksessa käytettävästä vaccinia viruksesta oli poistettu vaccinian kasvutekijä- ja tymidiinikinaasigeeni, jolloin virus on syöpäspesifisempi kuin aikaisemmat eläinlääketieteellisissä tutkimuksissa käytetyt vaccinia virukset. Lisäksi vaccinia virukseen on lisätty immuunipuolutusta parantava CD40L-geeni. Avirulentti SFV A7/(74) puolestaan hakeutuu luonnostaan kasvainkudokseen ja lisääntyy siellä. Sekä vaccinia virus että SFV kykenivät tappamaan syöpäsoluja. Vaccinia virus infektoi useimmat koirien kasvainkudokset sekä hidasti merkittävästi hiirille aiheutettujen syöpien kasvua. Vaccinia viruksen lisääntyminen kissan levyepiteelikarsinoomasoluissa oli poikkevaa, koska syntyneet virukset olivat rakenteeltaan epänormaaleja, mutta kuitenkin tartuntakykyisiä. Virusten antaminen ei aiheuttanut merkittäviä haittavaikutuksia koirille, mutta yhdellä koiralla epäiltiin vaccinia viruksen aiheuttamaan epileptistyyppistä kohtausta. Vaccinia viruksen DNA:n määrä laski nopeasti veressä infuusion jälkeen, mutta DNA:ta todettiin veressä vielä viikon päästä. Tartuntaykyistä vaccinia virusta todettiin ainoastaan verinäytteissä, jotka kerättiin välittömästi virusinfuusion jälkeen. Virtsa, sylki- ja ulostenäytteissä viruksia ei todettu. Tutkimustulostemme perusteella onkolyttinen vaccinia virus ja SFV infektoivat ja tappoivat testattuja koiran kasvainsolulinjoja ja lisäksi vaccinia virus hidasti syövän kasvua hiirimallissa ja infektoi potilaskoirista kerättyjä kasvaimia. Kumpikaan virus ei aiheuttanut henkeäuhkaavia haittavaikutuksia terveillä koirilla. Löydöstemme perusteella kumpaakin virusta kannattaa tutkia lisää koirien syöpien hoidossa

Puumateriaalin käyttö rakennusmateriaalina

Tehdyn opinnäytetyön tarkoituksena on parantaa Laukaan kunnan mahdollisuutta hyödyntää puumateriaalia kustannustehokkaasti tulevissa hankkeissa. Opinnäyteyössä käsitellään puumateriaalin ominaisuuksia, investointi- ja elinkaarikustannuksia, puumateriaalin vaikutuksia sisäilmaan, sekä selvennetään puumateriaalin käyttöä ekologisesta näkökulmasta. Tehdyssä työssä on pohdittu ja tuotu esille seikkoja puurakentamisesta, mitkä tukevat teoriaa puurakentamisen lisäämisestä lähivuosina. Rakennusfysiikan osuudessa käsitellään puumateriaalin ominaisuuksia, ja niiden vaikutuksia puurakentamiseen. Rakennusfysiikalla luodaan pohjaa ymmärtää puumateriaalin käyttäytymistä eri olosuhteissa ja rakenneratkaisuissa. Puumateriaalin kosteuskäyttäytyminen ja paloturvallisuus eivät nykyisin rajaa puumateriaalin hyödyntämismahdollisuuksia rakentamisessa. Puumateriaalin käytöllä voidaan parantaa sisäilman laatua, ja vaikuttaa rakennuksen käyttäjän kokemukseen. Puumateriaali tasaa huoneilman kosteutta pitäen sisäilman käyttäjälle miellyttävän tuntuisena. Lisäksi sisätiloissa käytetyn puumateriaalin on havaittu laskevan ihmisten stressitasoja. Kuten muutkin rakennusmateriaalit, myös puu voi aiheuttaa negatiivisia vaikutuksia sisäilmaan väärien rakenneratkaisujen ja materiaalivaurioiden vuoksi. Kustannuksissa puu on kilpailukykyinen betonirakentamisen kanssa. Pienkohteissa puu on käytetyin ja kustannustehokkain materiaali. Puuelementtirakentamisella voidaan saada laskettua työmaakustannuksia isommissakin rakennuskohteissa. Elinkaarikustannuksiltaan puurakenteiset talot eivät poikkea betonirakenteisista rakennuksista. Rakentajien ja suunnittelijoiden tietotaidon parantuessa puurakentamisen kustannuksia saadaan laskettua rakennuskohteissa. Puumateriaalin käytöllä rakentamisessa voidaan vähentää ympäristön rasitusta. Puu pystyy varastoimaan itseensä hiiltä, joka säilyy puumateriaalissa varastoituneena koko materiaalin elinkaaren ajan. Lisäämällä puurakentamisen käyttöä rakentamisessa voidaan vaikuttaa suuresti ympäristön kuormitukseen.  The aim of the thesis was to examine the investments and life cycle costs of wood materials, so that the municipality of Laukaa can use information to help improve the cost effectiveness of its future projects. By using wood materials, emissions of the environment can be reduced. The main content of the thesis consists of information about the features and costs of wood materials, the effects on indoor air, and how the use of wood material affects environment. This thesis also deals with the issues that support the theory of increasing the use of wood in construction sites. The part about building physics deals with the properties of wood materials and their effects on wood construction. Building physics provides a basis for understanding the behavior of wood materials in different conditions and structural solutions. Moisture behavior and fire safety of wood material currently do not limit the possibilities of utilizing wood material. As a material wood is a viable alternative to concrete. Most houses are built of wood and one reason for that is cost-effectiveness. Building costs can be lowered by using wood elements. The lifecycle costs of wooden houses do not differ from concrete houses. As the skills of builders and planners improve, the cost of wood construction can be reduced. The use of wood material can improve indoor air quality and influence the user experience of a building. The wood material balances the humidity of the room air, keeping the indoor air comfortable for the user. Test results proved that the use of wood materials in the indoor parts of a house reduces the uses’ stress levels. Like other building materials, wood can also have a negative impact on indoor air due to incorrect structural solutions and material damages. As the result of the thesis shows, wood is one of the most ecological building materials that are used on construction sites. By using wood as a building material, we can try to control the climate change. A wooden building has a small carbon footprint and it can absorb carbon dioxide from the atmosphere and store it

Mesoteliooma koiralla - kolme potilastapausta ja kirjallisuuskatsaus

Peer reviewe

Attenuated Semliki Forest virus for cancer treatment in dogs : safety assessment in two laboratory Beagles

Background: Dogs suffer from spontaneous tumors which may be amenable to therapies developed for human cancer patients, and dogs may serve as large-animal cancer models. A non-pathogenic Semliki Forest virus vector VA7-EGFP previously showed promise in targeting human tumor xenografts in mice, but the oncolytic capacity of the virus in canine cancer cells and the safety of the virus in higher mammals such as dogs, are not known. We therefore assessed the oncolytic potency of VA7-EGFP against canine cancer cells by infectivity and viability assays in two dog solid tumor cell lines. Furthermore we performed a 3-week safety study in two adult Beagles which received a single intravenous injection of similar to 2 x 10(5) plaque forming units of parental A7(74) strain. Results: VA7-EGFP was able to replicate in and kill both canine cancer cell lines tested. No adverse events were observed in either of the two virus-injected adult Beagles and no infective virus could be recovered from any of the biological samples collected over the course of the study. Neutralizing antibodies to Semliki Forest virus became detectable in the dogs at 5 days post infection and remained elevated until study termination. Conclusions: Based on these results, testing of the oncolytic potential of attenuated Semliki Forest virus in canine cancer patients appears feasible.Peer reviewe

Safety and biodistribution of a double-deleted oncolytic vaccinia virus encoding CD40 ligand in laboratory Beagles

Peer reviewe