Carboxylesterase Activities and Protein Expression in Rabbit and Pig Ocular Tissues

Hydrolytic reactions constitute an important pathway of drug metabolism and a significant route of prodrug activation. Many ophthalmic drugs and prodrugs contain ester groups that greatly enhance their permeation across several hydrophobic barriers in the eye before the drugs are either metabolized or released, respectively, via hydrolysis. Thus, the development of ophthalmic drug therapy requires the thorough profiling of substrate specificities, activities, and expression levels of ocular esterases. However, such information is scant in the literature, especially for preclinical species often used in ophthalmology such as rabbits and pigs. Therefore, our aim was to generate systematic information on the activity and expression of carboxylesterases (CESs) and arylacetamide deacetylase (AADAC) in seven ocular tissue homogenates from these two species. The hydrolytic activities were measured using a generic esterase substrate (4-nitrophenyl acetate) and, in the absence of validated substrates for rabbit and pig enzymes, with selective substrates established for human CES1, CES2, and AADAC (D-luciferin methyl ester, fluorescein diacetate, procaine, and phenacetin). Kinetics and inhibition studies were conducted using these substrates and, again due to a lack of validated rabbit and pig CES inhibitors, with known inhibitors for the human enzymes. Protein expression levels were measured using quantitative targeted proteomics. Rabbit ocular tissues showed significant variability in the expression of CES1 (higher in cornea, lower in conjunctiva) and CES2 (higher in conjunctiva, lower in cornea) and a poor correlation of CES expression with hydrolytic activities. In contrast, pig tissues appear to express only CES1, and CES3 and AADAC seem to be either low or absent, respectively, in both species. The current study revealed remarkable species and tissue differences in ocular hydrolytic enzymes that can be taken into account in the design of esterase-dependent prodrugs and drug conjugates, the evaluation of ocular effects of systemic drugs, and in translational and toxicity studies.Peer reviewe

Verkkopalvelun kehittäminen webanalytiikan avulla

The goal of this research was to define a process for using web analytics for improving a web service. An iterative process is presented for setting up web analytics tracking and visualizing the collected data in a business dashboard. The process includes identifying key stakeholders for the dashboard, defining business goals to track and improve, and setting up the analytics tracking and visualizing the results. As a case example the defined process was used for improving Audiodraft web service.Tämän tutkimuksen tavoitteena oli esittää prosessi verkkopalvelun kehittämiseksi webanalytiikan avulla. Tutkimus esittää iteratiivisen prosessin webanalytiikan keräämisen rakentamiseen ja kerätyn datan visualisoimiseen. Prosessi sisältää avainhenkilöiden tunnistamisen, parannettavien liiketoimintatavoitteiden määrittelemisen sekä webanalytiikan keräämisen asentamisen ja tulosten visualisoinnin. Määritettyä prosessia käytettiin esimerkkinä Audiodraft verkkopalvelun parantamiseksi

Pientalon suunnittelu ja E-luvun laskenta

Tiivistelmä Tässä opinnäytetyössä oli kaksi tavoitetta. Ensimmäinen tavoite oli suunnitella tilaajien toiveiden mukainen kaksikerroksinen omakotitalo. Toisena tavoitteena oli tutustua vuonna 2012 voimaan tuleviin rakennuksia koskeviin energiamääräyksiin ja laskea rakennukselle sen energian kulutusta kuvaava E-luku. Rakennuksen suunnittelun lähtötietoina pidettiin tilaajan hahmotelmia ja esittämiä toiveita rakennuksen tiloista ja koosta. Rakennus pyrittiin suunnittelemaan avaraksi ja pohjaratkaisultaan toimivaksi kokonaisuudeksi. Julkisivuiltaan toiveena oli saada rakennukseen vanhanajan henkeä ja pyrkiä sulauttamaan rakennus rakennuspaikkaansa saumattomasti. Rakennuksen suunnittelussa käytettiin luonnosteluvaiheesta lähtien Archicad-ohjelmaa. Rakennuksen E-lukua tutkittiin ja laskettiin itse tekemän Excel-taulukon avulla. Rakennusta suunniteltaessa ja energiamääräyksiin perehtyessä huomattiin asioiden sitoutuvan tiiviisti toisiinsa ja tästä syystä rakennussuunnittelu ja E-luvun laskenta etenivät yhtäaikaa. Työntuloksena saatiin tilaajalle suunniteltua tulevat energiamääräykset täyttävä talo ja rakennuslupaa varten tarvittavat piirustukset.Abstract The first aim of this thesis was to plan and make drawings for the building permit of a detached house. The second aim was to familiarize with the new legislation on the energy efficiency of houses and to calculate the E-factor for the house. The work was commissioned by Arto and Johanna Tolonen. As a starting point of the work were the needs of the client in order to design a functional building. The architectural planning and drawings for the building permit were drawn with the Arhicad modelling 3D building design software. The E-factor calculation was made by using a self-made Excel datasheet. The first results were the main drawings for a detached house which include all the given requirements. The second result of this thesis was the E-factor calculation for the designed house