Previous notes: evaluation of the antagonistic effect of Lactobacillus species on Listeria monocytogenes in vitro

Listeria monocytogenes, agente causador da listeriose, é de grande importância para a indústria alimentícia, pois esta bactéria é capaz de proliferar-se em ambientes refrigerados, condições em que normalmente são estocados os alimentos. Os indivíduos acometidos por listeriose podem contrair infecção intrauterina, meningite e septicemia. A incidência de listeriose é baixa, mas especial atenção lhe tem sido dada devido a sua alta taxa de mortalidade e às seqüelas deixadas nos indivíduos, uma vez que esta infecção afeta o sistema nervoso central. Tendo em vista os recentes avanços no emprego de microrganismos probióticos contra espécies patogênicas, o presente trabalho teve como objetivo verificar o efeito antagônico de espécies de Lactobacillus compreendendo L. casei subsp. pseudoplantarum (30b e 30c), L. plantarum (11fb, 22c e 41b), L. reuteri (18fa e 19fa) e L. delbrueckii subsp. delbrueckii (17fb) sobre o desenvolvimento de Listeria monocytogenes in vitro. O acompanhamento da ação das possíveis substâncias inibitórias presentes no sobrenadante dos cultivos de Lactobacillus sobre a espécie patogênica foi conduzido por meio da técnica do ágar spot test e turbidimetria. Os resultados revelaram que as cepas de Lactobacillus testadas isoladamente, bem como o pool constituído pelas oito cepas, demonstraram atividade bacteriostática sobre L. monocytogenesListeria monocytogenes, an agent responsible for listeriosis, is of great importance in the food industry because of its ability to proliferate in cooled environments at temperatures normally used for food storage. Listeriosis may appear as uterine infection, meningitis and septicemia. Although listeriosis is of rather low incidence, it has received special attention because the infection affects the central nervous system, having a high mortality rate or leaving serious neurological sequels in surviving victims. With the recent advances concerning the action of probiotic microorganisms against pathogenic species, the present work aimed at studying the antagonistic effect of L. casei subsp. pseudoplantarum (30b and 30c), L. plantarum (11fb, 22c and 41b), L. reuteri (18fa and 19fa), L. delbrueckii subsp. delbrueckii (17fb) on the development of Listeria monocytogenes in vitro, employing spot test and optical density techniques. The results showed a bacteriostatic effect exerted by the Lactobacillus strains on L. monocytogenes, tested either individually or as a pool of all the eight strain

Interação de síndrome geral de adaptação e miocardite causando ruptura ventricular em cisne negro (Cygnus atratus): relato de caso

Relato de caso de interação de miocardite crônica e Síndrome Geral de Adaptação (estresse) causando ruptura da parede ventricular esquerda em uma fêmea jovem da espécie Cygnus atratus (cisne-negro), que veio a óbito no Zoológico Municipal de Taboão da Serra, em São Paulo, durante período de quarentena, após longa viagem em condições desfavoráveis de temperatura e ventilação.Case report about the interaction of chronic myocarditis and General Adaptation Syndrome ("stress") causing rupture of left ventricular wall on a young, female specie of Cygnus atratus (black swan), that came to die at the Country Zoo of Taboão da Serra, in São Paulo, during quarantine, after being taken on a long distance travel, under disfavorable temperature and ventilation conditions

Caracterização molecular de adenovírus aviário em frangos comercializados no Equador

Fowl Adenovirus Group I (FAdV-I) is considered an important pathogen in the poultry industry in Ecuador and worldwide. Inclusion Body Hepatitis (IBH) and Hydropericardium Syndrome (HPS) are the main diseases associated with this virus, and despite being an etiological agent that is usually related to immunosuppressive diseases such as Chicken Anemia Virus or Gumboro disease, recent studies have demonstrated the pathological activity of FAdV-I as the primary responsible for certain diseases. Since the 1990s, several outbreaks of IBH and HPS have been reported in many Latin American countries, identifying the serotype 4 of FADV-I as the causal agent of these outbreaks. The aim of this study is to determine by molecular methods like the Polymerase Chain Reaction (PCR), the presence of the FAdV-I serotypes found in commercial poultry farms in Ecuador. Different organs of birds with enteric problems were collected in the northern area of ??Ecuador, and subsequently impregnated in FTA cards for transport and processing. 4/13 (30.8%) samples were positive for FAdV-I and by sequencing and bioinformatic analysis of DNA amplified by PCR, serotypes 6 and 11 of FAdV-I were characterized. These data show us the variety of serotypes present in poultry farms in Ecuador that could be influencing the health status of the country's poultry industry.El Adenovirus Aviar del grupo I (FAdV-I), es considerado como un patógeno de mucha importancia en la industria avícola en el Ecuador y a nivel mundial. La Hepatitis por Cuerpos de Inclusión (IBH) y el Síndrome del Hidropericardio (HPS), son las principales enfermedades asociadas a este virus, y a pesar de ser un agente etiológico que por lo general se encuentra relacionado a enfermedades inmunodepresoras como Anemia Infecciosa de las Aves o la enfermedad de Gumboro, recientes estudios han demostrado la actividad patológica del FAdV-I como responsable primario de estas enfermedades. Desde la década de 1990, se reportaron varios brotes importantes de IBH y HPS en muchos países de América Latina incluyendo el Ecuador, logrando identificar principalmente al serotipo 4 del FAdV-I como agente causal de estos brotes. El objetivo de este estudio fue determinar por métodos moleculares como la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), la presencia de los serotipos del FAdV-I que se encuentran circulando en granjas de aves comerciales en Ecuador. Fueron colectados diferentes órganos de aves con problemas entéricos en la zona norte del Ecuador, y posteriormente impregnados en tarjetas FTA para su transporte y procesamiento. 4/13 (30,8%) muestras fueron positivas a FAdV-I y mediante el secuenciamiento y análisis bioinformático del ADN amplificado por la PCR, se caracterizaron los serotipos 6 y 11 del FAdV-I. Estos datos nos demuestran la variedad de serotipos presentes en granjas avícolas del Ecuador y que podrían estar influenciando en el estado sanitario de la industria avícola del país.O grupo Adenovírus Aviário I (FAdV-I) é considerado um patógeno muito importante na indústria avícola no Equador e no mundo. A Hepatite por Corpúsculos de Inclusão (IBH) e a Síndrome Hidropericárdica (HPS) são as principais doenças associadas ao vírus. Apesar de ser um agente etiológico geralmente relacionado a doenças imunodepressoras, como a anemia infecciosa das aves ou a doença de Gumboro, estudos recentes mostraram que a atividade patológica do FAdV-I é a principal responsável por essas doenças. Desde a década de 1990, vários surtos importantes de IBH e HPS foram relatados em muitos países latino-americanos, incluindo o Equador, identificando principalmente o sorotipo 4 do FAdV-I como agente causador destes surtos. O objetivo deste estudo foi caracterizar por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e sequenciamento de primeira geração, sorotipos FAdV-I que circulam em granjas comerciais de aves no Equador. Para este fim, os órgãos de frangos de corte com problemas entéricos foram coletados de 13 fazendas diferentes ao longo da zona norte do Equador, e posteriormente foram impregnados em cartões de FTA para seu transporte e processamento. 4/13 (30,8%) das amostras foram positivas para FAdV-I e por sequenciamento e análise de bioinformática de DNA com PCR foram caracterizados os sorotipos 6 e 11 de FAdV-I. Os dados demonstram a variedade de sorotipos de FAdV-I atualmente presentes em granjas avícolas de Equador que podem estar influenciando o estado de sanitário da indústria avícola do país

Detecção do virus da anemia das galinhas em coinfecção com o vírus doença infecciosa bursal em frangos

Este estudo investigou a manifestação do vírus da Anemia Infecciosa das Aves (VAIA) em lotes de frangos que apresentavam retardo no crescimento e aumento da mortalidade observado a partir do quarto dia de idade. Clinicamente, as aves apresentavam depresão, palidez, despigmentação e retardo de crescimento. À necropsia, as aves apresentavam lesões compatíveis com a infecção pelo vírus da Anemia infecciosa das aves (VAIA). Amostras de fígado, baço e timo foram examinadas por PCR que amplifica um frangmento de 675 pb do gene VP-1 do VAIA. Todos os órgãos examinados foram positivos para o vírus da Anemia Infecciosa das Aves. Os demais patógenos, como adenovírus, reovírus, astrovírus, vírus da doença infecciosa bursal e coronavírus aviário não foram detectados pelas diferentes técnicas laboratoriais, como sorologia, PCR ou PAGE. Os resultados mostraram que o vírus da Anemia Infecciosa das Aves (VAIA) pode manifestar-se clinicamente nos primeiros dias de vida dos frangos - um fato ainda não reportado - associado ao vírus vacinal da doença infecciosa bursal (DIB) cepa forte pode induzir um persistente retardo de crescimento, por várias semanas, em frangos.This survey aimed to investigate chicken anemia virus (CAV) in broilers flocks experimenting retarded growth and increasing mortality since the fourth day of age. Clinically, chickens presented depression, paleness, depigmentation and retarded growth. At necropsy, chickens presented CAV-compatible lesions. Samples from liver, spleen and thymus were tested by PCR for a 675-bp fragment of the CAV VP-1 gene, and all tested samples were positive. Serological and molecular techniques did not detect other pathogens, such as adenovirus, reovirus, astrovirus, infectious bursal disease and avian infectious bronchitis virus. These results showed that chicken anemia virus (CAV) may occur since the first few days of life in broilers - a fact not as yet reported -, associated with high pathogenic Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) vaccine strain may induce a persistent growth retarded for several weeks in broilers

Contributo para o estudo das plantas vasculares endémicas da Ilha das Flores (Açores).

IV Expedição Científica do Departamento de Biologia – Flores 1989.Conforme mostra MALATO-BELIZ (1988), o número de taxa vasculares endémicos nas ilhas dos Açores varia entre um máximo de 62 taxa (ilha de S. Miguel) e um mínimo de 11 taxa endémicos na ilha Graciosa. A pequena ilha das Flores com 51 taxa endémicos ultrapassa claramente neste particular as ilhas Graciosa (11), S. Maria (35) e Corvo (37) e quase iguala em número de espécies endémicas ilhas bastante maiores como a Terceira (55) e o Faial (55). Não admira pois que em termos da relação "nº taxa endémicos/unidade de superfície (Km2)" a ilha das Flores com 0,357 end./Km2, apenas seja ultrapassada por S. Maria (0,360 end./ Km2) e pelo Corvo (2,126 end./Km2), 0 valor médio para o arquipélago situa-se apenas nos 0,184 end./Km2. A explicação para esta relativa riqueza em espécies endémicas da ilha das Flores fica sem dúvida a dever-se à grande diversidade de biótopos que ela possui e à existência de algumas manchas vegetais menos alteradas pelo homem

Caracterização molecular dos fatores de virulência de estirpes de Escherichia coli isoladas de papagaios com colibacilose aviária

A total of eight Escherichia. coli isolates from psittacine birds were serogrouping and investigated for the virulence factors: pili associated with pyelonephritis (pap), S fimbriae (sfa), afimbrial adhesin (afa), capsule K1 (neu), curli fibers (crl, csgA), temperature-sensitive hemagglutinin (tsh), heat labile (LT) and heat stable (STa and STb) enterotoxins, Shiga-like toxins (Stx1 and Stx2), Cytotoxic necrotizing factor (cnf1), haemolysin (hly), aerobactin production (iuc) and serum resistance (iss). The results showed that the isolates belonged to six serogroups: O23; O54; O64; O76; O128 and O152. The found virulence genes were: crl+ in all isolates, pap+, iuc+ and iss+ in three isolates; tsh+ in two isolates. All strains were negative for genes neu, csgA, sfa, afa, hly, cnf and LT, STa, STb, Stx1, Stx2 toxins. Our findings suggested that some E. coli isolated from psittacine birds present some virulence factors of avian pathogenic E. coli (APEC) pathotype.Oito amostras de Escherichia coli isoladas de papagaios com colibacilose aviária foram sorogrupadas e investigadas para a presença dos fatores de virulência: pili associado a pielonefrite (pap), fímbria S (sfa), adesina afimbrial (afa), cápsula K1 (neu), curli (crl, csgA), hemaglutinina termosensível (tsh), enterotoxinas termo-lábil (LT) e termo-estável (STa e STb), Shiga-like toxinas (Stx1 e Stx2), Fator citotóxico necrotizante (cnf1), hemolisina (hly), aerobactina (iuc) e resistência sérica (iss). Os resultados mostraram que os isolados pertenciam a seis sorogrupos: O23; O54; O64; O76; O128 e O152. Os genes de virulência detectados foram: crl+ em todos os isolados; pap+; iss+ e iuc+ em três isolados, tsh+ em dois isolados. Todas as amostras foram negativas para os genes neu, csgA, sfa, afa, hly, cnf e para as toxinas LT, STa, STb, Stx1 e Stx2. Estes resultados sugerem que amostras de E. coli isoladas de papagaios apresentam alguns fatores de virulência das amostras do patotipo de E. coli patogênica para aves (APEC)

Pathogenicity index, production of hemolysin and serogroup of samples of Escherichia coli isolated from commercial layng hens

Este estudo avaliou o índice de patogenicidade, a produção de hemolisina e a determinação de sorogrupos de cepas de Escherichia coli isoladas de fígado de aves de postura comercial com um dia de idade. Para este estudo, foram analisados 32 lotes, dos quais 15 foram positivos para o\ud isolamento de E. coli no fígado, totalizando vinte e quatro amostras. A patogenicidade dos isolados foi determinada por inoculação no saco aéreo de pintinhos e classificada como alta, intermediária, baixa ou não-patogênica. Os sorogrupos foram identificados utilizando um conjunto de antissoros anti-O (O1 a O180). A produção de hemolisina foi determinada por semeadura em ágar sangue de galinha (8%) e em placas de ágar sangue de carneiro (8%). Do total de amostras estudadas, 17 (70,83%) foram classificadas como não patogênica, 6 (25%) como de baixa patogenicidade e 1 (4,17%) de alta patogenicidade. Foram identificados 14 sorogrupos diferentes: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132, O141. Cinco cepas não tiveram o sorogrupo identificado. Com relação ao teste de produção de hemolisina, todas as cepas foram consideradas negativas, tanto para o teste realizado com ágar sangue de galinha quanto para o de carneiro. Os resultados obtidos neste estudo demonstram a importância de se identificar as cepas prevalentes de E. coli nas diferentes regiões produtoras, podendo ser utilizados em estudos epidemiológicos.This work evaluated the index of pathogenicity, the production of hemolysin and determination of serogroups in Escherichia coli strains isolated from liver of commercial laying hens with one day of age. Thirtytwo lots were analyzed, of which 15 were positive for the isolation of E. coli in the liver, for a total of 24 samples. The pathogenicity in one-day-old chicks was determined by inoculation in air sac and was classified as high, intermediate or low pathogenicity, or non-pathogenic. Serogroups were identified using a set of anti-O antisera (O1 to O180). The production of hemolysin was determined by plating on chicken blood agar (8%) and sheep blood agar (8%). Of the samples studied, 17 (70.83%) were classified as non-pathogenic, 6 (25%) as low pathogenicity and 1 (4.17%) as high pathogenicity. Fourteen different serogroups were identified: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132 and O141, while 5 samples were non-typable. Regarding the test for production of hemolysin, all strains were considered negative for both the test performed with chicken blood agar and that with sheep blood agar. The results of this study demonstrate the importance of identifying the prevalent strains of E. coli in different producing regions, as this information can be used in epidemiological studie

Sorogrupos e genes de virulência em Escherichia coli isoladas de psitacídeos

Escherichia coli isolates from 24 sick psittacine birds were serogrouped and investigated for the presence of genes encoding the following virulence factors: attaching and effacing (eae), enteropathogenic E. coli EAF plasmid (EAF), pili associated with pyelonephritis (pap), S fimbriae (sfa), afimbrial adhesin (afa), capsule K1 (neu), curli (crl, csgA), temperature-sensitive hemagglutinin (tsh), enteroaggregative heat-stable enterotoxin-1 (astA), heat-stable enterotoxin -1 heat labile (LT) and heat stable (STa and STb) enterotoxins, Shiga-like toxins (stx1 and stx2), cytotoxic necrotizing factor 1 (cnf1), haemolysin (hly), aerobactin production (iuc) and serum resistance (iss). The results showed that the isolates belonged to 12 serogroups: O7; O15; O21; O23; O54; O64; O76; O84; O88; O128; O152 and O166. The virulence genes found were: crl in all isolates, pap in 10 isolates, iss in seven isolates, csgA in five isolates, iuc and tsh in three isolates and eae in two isolates. The combination of virulence genes revealed 11 different genotypic patterns. All strains were negative for genes encoding for EAF, EAEC, K1, sfa, afa, hly, cnf, LT, STa, STb, stx1 and stx2. Our findings showed that some E. coli isolated from psittacine birds present the same virulence factors as avian pathogenic E. coli (APEC), uropathogenic E. coli (UPEC) and Enteropathogenic E. coli (EPEC) pathotypes.Amostras de Escherichia coli isoladas de 24 psitacídeos doentes foram sorogrupadas e investigadas para a presença de genes que codificam os seguintes fatores de virulência: attaching e effacing (eae), plasmídeo EAF (EAF), pili associado à pielonefrite (pap), fímbria S (sfa), adesina afimbrial (afa), cápsula K1 (neu), curli (crl, csgA), hemaglutinina termosensível (tsh), enterotoxina termo-estável 1 de E. coli enteroagregativa (astA), toxina termolábil (LT) e toxina termoestável (STa e STb), Shiga-like toxinas (stx1 e stx2), fator citotóxico necrotizante 1 (cnf1), hemolisina (hly), produção de aerobactina (iuc) e resistência sérica (iss). Os resultados mostraram que os isolados pertenciam a 12 sorogrupos: O7; O15; O21; O23; O54; O64; O76; O84; O88; O128; O152 e O166. Os genes de virulência encontrados foram: crl em todos os isolados, pap em 10 isolados, iss em sete isolados, csgA em cinco isolados, iuc e tsh em três isolados e eae em dois isolados. A combinação dos genes de virulência revelou 11 perfis genotípicos distintos. Todas as amostras foram negativas para os genes que codificam EAF, EAEC, K1, sfa, afa, hly, cnf, LT, STa, STb, stx1 e stx2. Estes resultados demonstraram que algumas amostras de E. coli isoladas de psitacídeos apresentam os mesmos fatores de virulência presentes nos patotipos de E. coli patogênicas para aves (APEC), uropatogênicas (UPEC) e E. coli enteropatogênicas (EPEC).Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Faculdades Metropolitanas Unidas Laboratório de Epidemiologia e Doenças InfecciosasUniabc Faculdade de Medicina VeterináriaUniversidade de São Paulo Faculdade de Medicina Veterinária e ZootecniaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de MedicinaUniversidade Estadual de Campinas Instituto de BiologiaUniversidade de Santiago de Compostela Facultad de Veterinaria Departamento de Microbiologia e ParasitologíaUNIFESP, EPMSciEL

A survey on gram-negative bacteria in saffron finches (Sicalis flaveola) from illegal wildlife trade in Brazil

Passerines such as canaries or finches are the most unlawfully captured species that are sent to wildlife centers in São Paulo, Brazil. Captured birds may have infection by opportunistic bacteria in stressful situations. This fact becomes relevant when seized passerine are reintroduced. The aim of this study was to evaluate the health state of finches from illegal wildlife trade using microbiological approaches. Microbiological samples were collected by cloacal and tracheal swabs of 100 birds, captured during 2012 and 2013. The results indicate high frequency of gram-negative bacteria in feces and oropharynx, especially from the Enterobacteriaceae family (97.5%). The most frequent genera were Escherichia coli (46.5%) and Klebsiella pneumoniae (10.4%). Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp. Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii were isolated with lower frequency from asymptomatic birds. The presence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shiga toxin-producing strain (STEC) confirm the zoonotic risks and public health concern.No Estado de São Paulo, Brasil, os pássaros como os canários-da-terra têm sido uma das espécies mais frequentemente resgatadas do tráfico illegal e enviadas aos centros de vida selvagem. Em situações de estresse estas aves podem ser acometidas por infecções causadas por bactérias oportunistas. Este fato é de grande importância quando é planejada da reintrodução das aves na natureza. O presente trabalho foi delineado para avaliar o estado de saúde de canários-da-terra resgatados do tráfico ilegal. Foram colhidas soabes da traqueia e da cloaca de 100 aves resgatadas durante os anos de 2012 e 2013. Os resultados obtidos revelaram alta frequência de bactérias gram-negativas nas fezes e no orofaringe dos animais, com maior frequência para os membros da família Enterobacteriaceae (97,5%). Os gêneros mais frequentes foram Escherichia coli (46,55) e Klebsiella pneumoniae (10,4%). Outros microorganismos incluindo Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp, Klebsiella oxytoca e Citrobacter freundii também foram isolados em menor frequencia de aves assintomáticas. A presença de estirpes de Escherichia coli enteropagênicas (EPEC) e as produtoras da toxina de Shiga confirmam o risco de zoonose e a importância para saúde pública deste tipo de ave.