Guidelines for Successful Quantitative Gene Expression in Real- Time qPCR Assays

This chapter was developed to provide some important guidelines for studies with quantitative PCR (qPCR) using either dyes or probes, citing several essential components necessary for a good PCR assay. The efficiency and specificity of quantitative PCR (qPCR) depend on several parameters related to mRNA quantification that must be controlled to avoid mistakes in data interpretation. Avoiding contamination with proteins, carbohydrate and phenolic compounds during RNA extraction and purification processes will improve RNA quality and provide reliable results. Specific primers and sensible probes are also crucial to intensify efficiency, specificity and fluorescence. Other parameters such as the optimization of primer concentrations and efficiency primer curves must be done. During gene-expression profile quantification, qPCR assays using reference genes are required to normalize the target gene expression data. These reference genes are checked for stability to identify the most stable genes among a group of candidate genes that will be used to normalize the qPCR data, using programs such as geNorm, BestKeeper and NormFinder. Additionally, the choice of appropriate reference genes for a specific experimental condition is fundamental. The main aim of this chapter is to provide guidelines and highlight precautions to obtain a successful qPCR assays

Uma proposta de formulação de dimensionamento dos mecanismos centrais da ação do sujeito e das propriedades intrínsecas centrais do objeto na tomada de consciência, quando da dualidade de objetos

A riqueza da relação sujeito – objeto, sensivelmente compreendida por Piaget, foi por ele analisada do ponto de vista de um único objeto. No entanto, nas situações em que aelaboração das explicações físicas se dão sobre mais de um objeto, torna-se interessante a possibilidade de dimensionar-se o quanto podem ser amplificadas as propriedades intrínsecas centrais desses objetos, vinculadas aos mecanismos centrais da ação do sujeito. O quepropomos é a possibilidade de, com base estritamente nos pontos de delimitação dos mecanismos de ação e das propriedades do objeto, propostos por Piaget, apresentar umaproposta de ampliação e dimensionamento para casos como na ciência da computação em geral, e na robótica em particular, em que a elaboração das explicações físicas se aplicam sobre a dualidade de objetos

MARKET ASSISTED LAND REFORM IN NE BRAZIL: A STOCHASTIC FRONTIER PRODUCTION EFFICIENCY EVALUATION

We evaluate the "Cédula da Terra" Pilot Project, a land reform project whose conception, mechanisms and operational structure is different from traditional agrarian reform based on expropriation. The land distributed by the project, is first acquired by the agricultural producers associations, and a given set of incentives is established to obtain a better efficiency use of resources. The main objective of this article is to characterize the sources of technical and allocative inefficiency from a cross section of 309 beneficiaries from five states in NE Brazil. We estimated a potential production frontier following the methodology of BATTESE and COELLI (1995), using the software FRONTIER 4.1. (Tim COELLI, 1996). The main conclusion is that technical assistance, human capital (years of schooling) and better access to credit reduce inefficiency, or thus increase technical and allocative efficiency of the beneficiaries.

PRODUTIVIDADE VOLUMÉTICA DE CLONES DE Eucalyptus spp . NO POLO GESSEIRO DO ARARIPE, PERNAMBUCO

A vegetação nativa da Região do Polo Gesseiro do Araripe se encontrabastante degradada devido à intensa utilização dos recursos florestais daCaatinga como fonte energética pelas indústrias do gesso. Como o crescimentoda vegetação da região transformado em oferta de lenha é inferior à demandadessas indústrias a continuidade da exploração dos recursos florestais podelevar a sérios problemas ambientais. Assim sendo, estudos com florestas derápido crescimento com destaque para plantios com clones de Eucalyptusspp. constituem uma alternativa para suprir a demanda energética da região.Objetivou-se neste trabalho, comparar a produtividade dos clones de Eucalyptusspp. utilizando a análise multivariada de medidas repetidas ao longo do tempo;determinar a idade de rotação técnica e indicar quais entre os clones são osmais promissores para suprir as necessidades energéticas da região. O estudofoi conduzido na Estação Experimental do Araripe, no Instituto Agronômicode Pernambuco (IPA), onde foram testados 15 clones, híbridos de eucaliptos,plantados no espaçamento foi de 3m x 2m, com quatro repetições. Forammensuradas as circunferências a altura do peito (CAP) e as alturas totais (Ht)dos clones, a partir de 12 meses, e assim, sucessivamente, até os 90 mesesquando o experimento foi cortado e as árvores cubadas. Pelo teste de Scott-Knott, o clone C39 E. urophylla (cruzamento natural) apresentou os melhoresrendimentos volumétricos. A idade de rotação técnica (IRT) com base nosdados de incrementos volumétricos foi de sete anos. A alta produtividadealiada ao menor tempo de rotação do Eucalyptus spp. em relação à vegetação nativa faz desse gênero um grande potencial para ser usado como oferta para fins energéticos, o que ajudaria a minimizar o processo de devastação da vegetação nativa na região, pois um hectare de eucaliptos corresponde a aproximadamente seis hectares da vegetação nativa em plano da manejo florestal sustentável (PMFS)

MODELAGEM DO CRESCIMENTO VOLUMÉTRICO DE CLONES DE EUCALIPTO (EUCALYPTUS UROPHYLLA) NO POLO GESSEIRO DO ARARIPE-PE

O objetivo desta pesquisa foi o de ajustar modelos de crescimento volumétrico de clones de Eucalyptus urophylla no Polo Gesseiro do Araripe, Pernambuco, onde a principal fonte energética da indústria do gesso é a lenha proveniente da Caatinga. Como a demanda por lenha é superior à oferta, a introdução de clones de eucaliptos na região é uma opção viável para atender essa demanda e atenuar a devastação da Caatinga. Desta forma, o conhecimento dos padrões de crescimento desses clones é de fundamental importância para execução de planos de manejo florestal sustentável. O experimento foi conduzido na Estação Experimental do Instituto Agronômico de Pernambuco (IPA), em Araripina. O delineamento experimental utilizado foi o multivariado de medidas repetidas, em que foram analisados 15 clones (híbridos de eucaliptos) no espaçamento 3m x 2m com quatro repetições. Para este trabalho foram selecionados os dois clones que obtiveram melhores resultados volumétricos na primeira rotação. Foram mensuradas as circunferências a altura do peito (CAP) e as alturas totais (Ht) dos clones, a partir de 12 meses até os 90 meses, totalizando 14 medidas ao longo do tempo. Os modelos utilizados foram: Mitscherlich, Brody, Bertalanffy, Chapman-Richards, Weibull, Clutter e Jones e Silva-Bailey. Para a escolha do melhor modelo foi utilizado o índice de ajuste corrigido IAc, o erro padrão da estimativa Syx e a distribuição gráfica dos resíduos. Os modelos em geral obtiveram bons ajustes para os dois clones, especialmente Chapman-Richards com exceção do Weibull que obteve o menor IAc e maior Syx

Effect of angiotensin II and losartan on the phagocytic activity of peritoneal macrophages from Balb/C mice

Angiotensin II (AII), a product of rennin-angiotensin system, exerts an important role on the function of immune system cells. In this study, the effect of AII on the phagocytic activity of mouse peritoneal macrophages was assessed. Mice peritoneal macrophages were cultured for 48 h and the influence of different concentrations of AII (10-14 to 10-7 M) and/or losartan, 10-16 to 10-6 M), an AT1 angiotensin receptor antagonist, on phagocytic activity and superoxide anion production was determined. Dimethylthiazoldiphenyltetrazolium bromide reduction and the nucleic acid content were used to assess the cytotoxicity of losartan. A stimulatory effect on phagocytic activity (P < 0.05) was observed with 10-13 M and 10-12 M AII concentrations. The addition of losartan (up to10-14 M) to the cell cultures blocked (P < 0.001) the phagocytosis indicating the involvement of AT1 receptors. In contrast, superoxide anion production was not affected by AII or losartan. The existence of AT1 and AT2 receptors in peritoneal macrophages was demonstrated by immunofluorescence microscopy. These results support the hypothesis that AII receptors can modulate murine macrophage activity and phagocytosis, and suggest that AII may have a therapeutic role as an immunomodulatory agent in modifying the host resistance to infection.16717

Effect Of Angiotensin Ii And Losartan On The Phagocytic Activity Of Peritoneal Macrophages From Balb/c Mice.

Angiotensin II (AII), a product of rennin-angiotensin system, exerts an important role on the function of immune system cells. In this study, the effect of AII on the phagocytic activity of mouse peritoneal macrophages was assessed. Mice peritoneal macrophages were cultured for 48 h and the influence of different concentrations of AII (10(-14) to 10(-7) M) and/or losartan, 10(-16) to 10(-6) M), an AT1 angiotensin receptor antagonist, on phagocytic activity and superoxide anion production was determined. Dimethylthiazoldiphenyltetrazolium bromide reduction and the nucleic acid content were used to assess the cvtotoxicity of losartan. A stimulatory effect on phagocytic activity (P < 0.05) was observed with 10(-13) M and 10(-12 M) AII concentrations. The addition of losartan (up to10(-14) M) to the cell cultures blocked (P < 0.001) the phagocytosis indicating the involvement of AT1 receptors. In contrast, superoxide anion production was not affected by AII or losartan. The existence of AT1 and AT2 receptors in peritoneal macrophages was demonstrated by immunofluorescence microscopy. These results support the hypothesis that AII receptors can modulate murine macrophage activity and phagocytosis, and suggest that AII may have a therapeutic role as an immunomodulatory agent in modifying the host resistance to infection.99167-7

PROSPECÇÃO TECNOLÓGICA RELACIONADA AO USO DE SELÊNIO EM ALIMENTOS E PRODUTOS ALIMENTARES

O selênio é um mineral importante, sendo que seu teor varia nos solos, podendo haver excessos e faltas causando intoxicação ou deficiência. Pode ser encontrado em alimentos animais como pescados e vegetais como Castanha do Brasil. O objetivo desse trabalho foi realizar uma prospecção tecnológica sobre selênio em alimentos e produtos alimentares, caracterizando um perfil das patentes depositadas em base internacional. A prospecção foi realizada em um banco de dados Europeu, por meio de palavras chaves, sendo a China o país com maior quantidade de depósitos. O código mais freqüente foi o A23L1/30, as maiores quantidades de patentes depositadas ocorreram de 2006 a 2012, havendo três empresas e três inventores com maiores documentos depositados