Prevalence and characterization of Aeromonas spp. in an ex situ program for threatened freshwater fish : consequences for conservation and public health

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, área científica Sanidade AnimalABSTRACT - Prevalence and characterization of Aeromonas spp. in an ex situ program for threatened freshwater fish : consequences for conservation and public health - Ex situ reproduction programs are essential conservation techniques for endangered species, though their success faces many limitations, namely the possibility of disease development and dissemination of virulent and antimicrobial resistant bacteria in captivity. In this study, an ex situ assay focusing on Portuguese arched-mouth nase (Iberochondrostoma lusitanicum) — a critically endangered leuciscid species occurring only in small drainages of Portugal — was performed to investigate the effect of simple biosafety measures (i.e., material disinfection protocols and animal handling with gloves) on the population structure, virulence factors’ expression and antimicrobial resistance profiles of a potential pathogenic and zoonotic genus, Aeromonas. Our findings show that technicians were colonized by Aeromonas spp. after handling the animals and suggest that the use of protective measures may have led to a decline in Aeromonas spp. prevalence. Furthermore, bacterial isolates displayed significantly lower virulence index values when virulence phenotypical expression was tested at 22ºC — with a noteworthy decrease of gelatinolytic activity, proteolytic activity, and slime production in isolates from the experimental model where protective measures were employed. Moreover, antimicrobial resistant profiles in Aeromonas spp. significantly increased in isolates collected in the first to the final week of the study, with all isolates collected at the end of the assay being classified as multidrug-resistant. These results sustain the growing concern for public health regarding zoonotic transmission of pathogens and antimicrobial resistance dissemination, namely in Aeromonas spp., in aquatic ex situ programs, and further research on prevention measures is needed. Despite this study not having fully validated a definitive link between the biosafety practices used and the noted shifts in bacterial dynamics and virulence expression, these measures are simple and low-cost tools that could easily be applied in ex situ breeding programs for aquatic animals worldwide.RESUMO - Prevalência e caracterização de Aeromonas spp. num programa ex situ para peixes de água doce : consequências para conservação e saúde pública - Programas de reprodução ex situ são técnicas essenciais na conservação de espécies ameaçadas, embora se coloquem vários obstáculos ao seu sucesso, nomeadamente a possibilidade de os animais desenvolverem doenças bacterianas e/ou estes microrganismos adquirirem determinantes de virulência e de resistência antimicrobiana em cativeiro. Neste estudo, efetuámos uma investigação ex situ com bogas portuguesas (Iberochondrostoma lusitanicum) — uma espécie de leuciscídeos criticamente em perigo que habita pequenos corpos de água doce — com o objetivo de investigar o impacto de medidas de biossegurança simples (i.e., protocolos de desinfeção de material e manipulação dos animais com luvas) na estrutura populacional, expressão de fatores de virulência e perfis de resistência de um género zoonótico potencialmente patogénico para estes animais, Aeromonas. Os resultados evidenciam a ocorrência de colonização bacteriana dos técnicos por Aeromonas spp. posterior à manipulação dos peixes e sugerem que a aplicação de medidas de biossegurança pode ter promovido o declínio da prevalência de Aeromonas spp. nos animais e amostras em estudo. Verificou-se ainda que os valores dos índices de virulência dos isolados bacterianos diminuíram significativamente quando a expressão fenotípica dos fatores de virulência foi avaliada a 22ºC — com um decréscimo relevante da atividade gelatinolítica, da atividade proteolítica e da produção de biofilme nos isolados obtidos de amostras do modelo experimental onde foram instituídas medidas de biossegurança. Além disso, os perfis de resistência a antimicrobianos aumentaram significativamente nos isolados Aeromonas spp. obtidos entre a primeira e a última semana do estudo, sendo que todos os isolados obtidos no final do ensaio foram classificados como multirresistentes. Estes resultados corroboram também a crescente preocupação para a saúde pública quanto à transmissão zoonótica de agentes patogénicos e disseminação de resistência a antimicrobianos através de programas de conservação ex situ e a necessidade de realizar mais estudos sobre métodos que as previnam. Embora não tenha sido possível comprovar a correlação definitiva entre as práticas de biossegurança implementadas e as alterações observadas na dinâmica bacteriana e na expressão fenotípica de fatores de virulência, estas são medidas simples e económicas que poderão facilmente ser instituídas em programas ex situ para animais aquáticos.N/

Sociabilidades da morte em Zacatecas. A cooperativa mútua “Obreros Libres” e o apoio às mortes de seus membros, 1902-1910

The objective of this work is to analyze the labor sociabilities that workers (artisans, mining workers and manufacturing workers) adopted and implemented, through mutual aid societies, established in Zacatecas at the end of the 19th century and the beginning of the 20th century. The mutual-cooperative “Obreros Libres” is addressed, established in the city of Zacatecas and directed by Antonio Chávez Ramírez, a Freemason lawyer who moved, through the mutual, between the benefit of workers and political participation. In this context, the sociabilities of death arise in “Obreros Libres”, that is, the sociocultural actions that refer to funeral processions, civic-funeral rites carried out in recognition of active members, sick and deceased protectors. Like other actions and cultural practices in the world of work, it was part of a broader and more heterogeneous universe, instituted by the popular classes.El objetivo de este trabajo es analizar las sociabilidades laborales que adoptaron e implementaron los trabajadores (artesanos, operarios mineros y operarios de las manufacturas), a través de las sociedades de socorros mutuos, establecidas en Zacatecas a finales del siglo XIX y principios del siglo XX. Se aborda la mutuo-cooperativista “Obreros Libres”, establecida en la ciudad de Zacatecas y que fue dirigida por Antonio Chávez Ramírez, un abogado masón que se movió, a través de la mutualista, entre la beneficencia de los trabajadores y la participación política. En este contexto surgen las sociabilidades de la muerte en “Obreros Libres”, es decir, las acciones socioculturales que hacen referencia a los cortejos fúnebres, los ritos cívico-funerarios efectuados en reconocimiento a los socios activos, protectores enfermos y fallecidos. Al igual que otras acciones y prácticas culturales del mundo laboral que formaba parte de un universo más amplio y heterogéneo, instituido por las clases populares. O objetivo deste trabalho é analisar as capacidades trabalhistas adotadas e implementadas pelos trabalhadores (artesãos, trabalhadores da mineração e trabalhadores da indústria), por meio das sociedades de ajuda mútua, estabelecidas em Zacatecas no final do século XIX e início do século XX. Trata-se da cooperativa mútua “Obreros Libres”, estabelecida na cidade de Zacatecas e dirigida por Antonio Chávez Ramírez, advogado maçom que moveu, através do mutualista, entre a beneficência dos trabalhadores e a participação política. Nesse contexto surgem as sociabilidades da morte em “Trabalhadores Livres”, ou seja, as ações socioculturais que remetem às procissões fúnebres, os ritos cívico-fúnebres realizados em reconhecimento aos parceiros ativos, protetores doentes e falecidos. Como outras ações culturais e práticas do mundo do trabalho que fazia parte de um universo mais amplo e heterogêneo, instituído pelas classes populares.&nbsp

Electrocatalytic Oxidation of Acetaminophen on a PVC/TTF-TCNQ Composite Electrode Modified by Gold Nanoparticles: Application as an Amperometric Sensor

This work shows the electrocatalytic activity towards the oxidation of acetaminophen of a composite electrode PVC/TTF-TCNQ modified with gold nanoparticles. Owing to a good linear relationship between acetaminophen concentration and current response at lower oxidation potential it is proposed as a new alternative for amperometric determination of acetaminophen. Besides the good catalytic activity (Eapp = 0.425 V), the proposed sensor shows high reproducibility, long-term stability, low cost and can be used both in batch and in FIA systems. In batch, it was obtained a linear range for acetaminophen over a range of 1 to 800 μM with a detection limit of 0.66 μM and a correlation coefficient of 0.997 with a slope (sensitivity) of 53 mA M-1. In FIA, a sensitivity of 9.9 ± 0.15 mA M-1 and a linear regression coefficient (r) of 0.999 were obtained for a linear range for acetaminophen between 1 to 800 μM. The detection limit (s/n = 3) was 8.9 μM

New Biosensor for Phenols Compounds Based on Gold Nanoparticle-Modified PVC/TTF-TCNQ Composite Electrode

A gold nanoparticle-modified PVC/TTF-TCNQ composite electrode with tyrosinase enzyme is proposed as electrochemical biosensor for detecting phenolic compounds in musts and wines samples using phenol and catechol as standards. The work potential was 0 V both in batch and in FIA system (linear range from 0.6 μM up to 10.0 μM), with a detection limit of 7.9 x 10-7 M for phenol and 6.43 x 10-7 M for catechol. The good correlation between the results obtained with the biosensor and those achieved with the Folin–Ciocalteu reference method enables that it can be used for rapid and almost automated estimation of the “total phenolics” and “high antioxidant” fraction of must and commercial wines

Electrodo compósito PVC/TTF-TCNQ modificado con nanopartículas de oro: aplicación para la determinación amperométrica de Paracetamol

II Encuentro sobre nanociencia y nanotecnología de investigadores y tecnólogos de la Universidad de Córdoba. NANOUC

O impacto dos sintomas depressivos no défice cognitivo em idosos institucionalizados

Os sintomas depressivos relacionam-se com o défice cognitivo em idosos, mostrando várias investigações que os doentes com sintomas depressivos perdem algumas competências cognitivas, como a sua concentração, atenção, dificuldades de memória, aprendizagem, fluência verbal e funções executivas (Ávila e Bottino, 2006; Chodosh, Reuben, Albert e Karlamangla, 2007; Crocco e Loewenstein, 2010; Gotlib e Joormann, 2010). Os sintomas depressivos e o défice cognitivo constituem risco para a demência (Mariani, Monastero e Mecocci, 2007), mas, pela análise da literatura não fica claro se os sintomas depressivos aumentam o risco para o défice cognitivo (Ganguli, Du, Dodge, Ratcliff e Chang, 2006; Gotlib e Joormann, 2010). Os objetivos do estudo são, assim, avaliar a prevalência dos sintomas depressivos em idosos institucionalizados com e sem défice cognitivo, verificar a relação entre sintomas depressivos e défice cognitivo e o impacto dos sintomas depressivos no défice cognitivo, controlando o potencial papel das variáveis sociodemográficas na análise preditiva

O impacto dos sintomas depressivos no défice cognitivo em idosos institucionalizados

Os sintomas depressivos relacionam-se com o défice cognitivo em idosos, mostrando várias investigações que os doentes com sintomas depressivos perdem algumas competências cognitivas, como a sua concentração, atenção, dificuldades de memória, aprendizagem, fluência verbal e funções executivas (Ávila e Bottino, 2006; Chodosh, Reuben, Albert e Karlamangla, 2007; Crocco e Loewenstein, 2010; Gotlib e Joormann, 2010). Os sintomas depressivos e o défice cognitivo constituem risco para a demência (Mariani, Monastero e Mecocci, 2007), mas, pela análise da literatura não fica claro se os sintomas depressivos aumentam o risco para o défice cognitivo (Ganguli, Du, Dodge, Ratcliff e Chang, 2006; Gotlib e Joormann, 2010). Os objetivos do estudo são, assim, avaliar a prevalência dos sintomas depressivos em idosos institucionalizados com e sem défice cognitivo, verificar a relação entre sintomas depressivos e défice cognitivo e o impacto dos sintomas depressivos no défice cognitivo, controlando o potencial papel das variáveis sociodemográficas na análise preditiva

Funções executivas e sintomas de ansiedade: estudo em idosos sob resposta social

A idade avançada caracteriza-se por várias mudanças psicológicas/biológicas, entre as quais se incluem mudanças do funcionamento cognitivo (Salthouse, 2009), em particular, alterações do funcionamento executivo, e ainda mudanças emocionais, incluindo a manifestação de sintomas ansiosos (Bryant, Jackson, e Ames, 2008; Segal, June, Payne, Coolidge, e Yochim, 2010). As funções executivas (FE) consistem num conjunto de processos que controlam/regulam atividades cognitivas mais simples e comportamentos dirigidos para objetivos dependentes da integridade dos lobos frontais (Lezak, Howieson, Loring, Hannay, e Fische, 2004) e, talvez por isso, o declínio das FE pode ser um marcador prodrómico importante demencial (Pereira, Yassuda, Oliveira, e Forlenza, 2008; Salthouse, Atkinson, e Berish, 2003). Por isso conhecer os correlatos das FE é importante para a implementação de programas de reabilitação. Tal como as FE, os transtornos/sintomas ansiosos parecem remeter essencialmente para o mal-funcionamento de estruturas pré-frontais (Ferrari, Busatto, McGuire, e Crippa, 2008). Segundo Sinoff e Werner (2003), a ansiedade é também indissociável da perda de memória e a sua presença é também um indicador precoce para declínio cognitivo futuro. De facto, vários estudos mostram que os sintomas ansiosos (SA) se relacionam com o declínio cognitivo (DC) (Beaudreau e O’Hara, 2008; Pietrzak et al., 2012). No entanto, se a relação entre ansiedade e défice executivo (DE), devido à partilha anatómica, é teoricamente aceite, empiricamente a investigação tem sido inconclusiva (Alansari, 2004). Assim, são objetivos do nosso estudo, averiguar a prevalência de DE e dos SA, verificar se há relação entre DE e SA, analisar outras associações potenciais com o DE e estudar o papel preditivo de variáveis relevantes no DE

Memória a curto-prazo em idosos em lar e em centro de dia

O processo de envelhecimento caracteriza-se por alterações, incluindo a degradação em diferentes funções cognitivas entre elas a memória. Aliás, a centralidade do prejuízo/declínio da memória com o envelhecimento é rapidamente verificada se considerarmos que entre os défices cognitivos referidos num dos critérios de diagnóstico de demência do Manual Diagnóstico e Estatístico das Perturbações Mentais (DSM-IV-TR; American Psychiatric Association [APA], 1994) é precisamente o défice/prejuízo da memória o primeiro a ser referenciado, “podendo ser acompanhado por pelo menos uma das seguintes perturbações cognitivas: afasia, apraxia, agnosia ou perturbação/prejuízo nas funções executivas” (DSM-IV-TR, p. 135)

Aeromonas spp. prevalence, virulence and antimicrobial resistance in an ex situ program for threatened freshwater fish – a pilot study with protective measures

This research was supported by CIISA - Centro de Investigação Interdisciplinar em Sanidade Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa, Project UIDB/00276/2020 (funded by FCT - Fundação para a Ciência e Tecnologia IP), by MARE (MARE-ISPA), MARE/UIDB/MAR/04292/2020 and strategic project MARE/UIDP/MAR/04292/2020 (also funded by FCT) and by the Zebra Foundation for Veterinary Zoological Education, Grant “A. hydrophila in Iberochondrostoma lusitanicum”. MLG thanks funding by the University of Lisbon (PhD fellowship C10571K). TAM and CM thank partial support by CEAUL (funded by FCT, Portugal, through the project UIDB/00006/2020).Ex situ breeding programs are important conservation tools for endangered freshwater fish. However, developing husbandry techniques that decrease the likelihood of disease, antimicrobial resistance, and virulence determinants acquisition during this process is challenging. In this pilot study, we conducted a captivity experiment with Portuguese nase (Iberochondrostoma lusitanicum), a critically endangered leuciscid species, to investigate the influence of simple protective measures (i.e., material disinfection protocols and animal handling with gloves) on the dynamics of a potential pathogenic genus, Aeromonas, as well as its virulence profiles and antimicrobial resistance signatures. Our findings show that antimicrobial resistance in Aeromonas spp. collected from I. lusitanicum significantly increased during the extent of the assay (5 weeks), with all isolates collected at the end of the study classified as multidrug-resistant. Additionally, humans handling fishes without protective measures were colonized by Aeromonas spp. The use of protective measures suggested a decreasing trend in Aeromonas spp. prevalence in I. lusitanicum, while bacterial isolates displayed significantly lower virulence index values when virulence phenotypical expression was tested at 22 °C. Despite this study representing an initial trial, which needs support from further research, protective measures tested are considered a simple tool to be applied in ex situ breeding programs for aquatic animals worldwide. Furthermore, current results raise concern regarding antimicrobial resistance amplification and zoonotic transmission of Aeromonas spp. in aquatic ex situ programs.Publisher PDFPeer reviewe