Evaluation of new 2-aminopurine derivatives as fluorescent probes for DNA studies

Dissertação de mestrado em Bioquímica Aplicada (área de especialização em Biotecnologia)Fluorescent nucleobases are critical for the understanding of the structural dynamics and functions of DNA and RNA. 2-aminopurine is a well-known fluorescent nucleobase, with many useful properties, like its high quantum yield, its ability to be introduced in DNA and be used as a guanine mimic, but with several restrictions, like its strong loss of fluorescence from quenching and disturbance it causes when introduced in DNA. Seven new 2-aminopurine derivatives with promising fluorescence properties were tested for toxicity and cellular integration in Escherichia coli and Schizosaccharomyces pombe (wild type and a mutant affected in chk1-), with liquid cell cultures growing in minimal media in the presence of said derivatives. Several derivatives caused a decrease of culture growth, one in E.coli and four in S.pombe, which is correlated with the size of the substituents, with the larger ones having more effect. Accumulation of two of the smaller derivatives in S.pombe cells was observed by detecting their own fluorescence inside the cells’ vacuoles, further showing the derivatives interactivity with the cells. The mechanisms of these derivatives integration and toxicity are not known, but due to their accumulation in the cells, coupled with their fluorescence, and the fact that they exhibit toxicity shows that there is sufficient potential in these compounds in applications in vacuole and lysosome studies.As nucleobases fluorescentes são críticas para a compreensão das dinâmicas da estrutura e funções do DNA e RNA. A 2-aminopurina é uma nucleobase fluorescente bem conhecida, com muitas propriedades úteis, como o seu alto rendimento quântico, a sua capacidade de ser introduzida no DNA e de ser usada como mimetizador de guanina, mas possuí várias restrições, como a sua forte perda de fluorescência por “quenching” e perturbações que causa quando introduzida em DNA. Sete novos derivados de 2-aminopurina com propriedades de fluorescência promissoras foram testados quanto à sua toxicidade e integração celular em Escherichia coli e Schizosaccharomyces pombe (estirpe selvagem e a mutante afetada em chk1-), com culturas de células líquidas crescendo em meio mínimo na presença dos derivados. Vários derivados causaram uma diminuição nas taxas de crescimento de culturas expostas a eles, um em E. coli e quatro em S.pombe, estando correlacionada com o tamanho dos radicais, com efeito maior com o seu tamanho. A acumulação de dois dos derivados menores nas células de S. pombe foi observado pela detecção da sua própria fluorescência dentro dos vacúolos das células, mostrando ainda que os derivados interagem com as células. Os mecanismos de integração e toxicidade desses derivados não são conhecidos, mas devido à sua acumulação nas células, à sua fluorescência, e o facto de apresentarem toxicidade mostra que há potencial suficiente nestes compostos em aplicações em estudos de vacúolos e lisossomas

LÉVINAS E A FENOMENOLOGIA: DAS INTENÇÕES AO DESEJO

ResumoO texto examina o pano de fundo fenomenológico a partir do qual se elabora o conceito levinasiano de Desejo. Mostra em que medida o referido conceito não só representa uma crítica ética ao predomínio do saber, mas que ele é o móbil fundamental da atividade teórico-crítica. Defende que o Desejo é uma intencionalidade não-teórica, mediante o qual se coloca em questão a primazia da atitude intelectual e da auto-reflexão do logos filosófico. Porém, esse questionamento, antes de ser a negação do teórico, é a sua própria condição. Portanto, o Desejo inverte o para-si em para-o-Outro, efetivando-se como abertura ética à alteridade.Palavras-chaveFenomenologia. Ontologia. Ética. Intencionalidade. Desejo. AbstractThis article aims at examining the phenomenogical background through it is elaborated the levinasian concept of Desire. It show in what extent this concept not only represents an ethical critique for the knowledge’s predominance, but it is the basic mobile of the activity-theoretical critique. Defends that the Desire is a not-theoretical intentionality, which discusses the primacy on intellectual attitude and self-reflexion on philosophical logos. However this question, before being theorist’ negation, it is its own condition. Therefore, Desire to reverse the himself/herself to the others, effective with ethics or overture of alterity. Keywords Phenomenology. Ontology. Ethics. Intencionality. Desire.

O ENSINO DE FILOSOFIA E AS HABILIDADES E COMPETÊNCIAS PRECONI-ZADAS PELOS PCNS:: UMA PERCEPÇÃO DOS PROFESSORES DE FILOSOFIA

O texto relata a percepção de professores de filosofia, que atuam em escolas públicas, em nível médio, sobre as competências e habilidades propostas pelos PCNs para o ensino de filosofia. Verifica até que ponto os professores desenvolvem as habilidades e competências para levar os estudantes a filosofar com o rigor e a globalidade. Analisa a compreensão que os docentes têm sobre a legitimidade e validade dessas habilidades e competências. O estudo foi desenvolvido a partir da abordagem qualitativa, com a realização de pesquisa bibliográfica e aplicação de entrevista com professores de filosofia do ensino médio e apresenta a seguinte estrutura: contextualiza a inserção da disciplina de Filosofia no ensino médio; comenta as leis que embasam o ensino de Filosofia e as habilidades e competências desenvolvidas em uma educação filosófica; examina os PCNs para identificar as competências e habilidades propostas para o ensino de Filosofia; analisa as respostas das entrevistas e discute esses dados com base nas concepções de autores que pesquisam sobre o ensino da filosofia. Portanto, constata que os docentes têm desenvolvido as propostas dos PCNs, porém encontram dificuldades: falta de hábito de leitura dos estudantes, as situações materiais precárias das instituições e a falta de atenção do governo ao ensino em geral

Experiência fática da vida e o fenômeno do histórico: contribuições do jovem Heidegger

O artigo estabelece um “encontro” com Heidegger a partir da primeira parte, da primeira preleção do semestre de inverno de 1920/1921 - Introdução à fenomenologia da religião.  Explicita o método fenomenológico desde os conceitos de experiência fática da vida e do fenômeno histórico. Elucida a peculiaridade dos conceitos filosóficos e a diferença de princípio que há entre filosofia e ciência. Mostra a vida fática (concreta e individual) de cada homem, como elemento central da fenomenologia heideggeriana. Acompanha a reelaboração do método fenomenológico, que possa fazer jus à vida fática e à historicidade (mundos vitais e significatividade) enquanto ponto de partida da filosofia. Apresenta o significado do fenômeno histórico e a crítica à maneira habitual de pensar o histórico como “algo que transcorre no tempo” ou como “uma propriedade geral aplicável a todo objeto temporal” e àqueles que tomam o homem por objeto. Conclui-se que as vias de afirmação da vida contra o histórico caem no modo teorético, e não expressam o histórico em seu caráter imediato. Defende que preservar o caráter intranquilizador da história significa respeitar a historicidade viva e a força vital e multidirecional do sentido fático da existência humana - ser-aí

DESAFIOS E POTENCIALIDADES:: O ENSINO DE FILOSOFIA NO CENÁRIO DA EDUCAÇÃO BÁSICA BRASILEIRA

O texto versa sobre alguns desafios encontrados no ensino da disciplina de Filosofia no cenário da educação básica brasileira. Aborda questões levantadas por pesquisadores nesta área que são corroboradas por experiência própria na docência em Filosofia. O objetivo aqui é refletir sobre as dificuldades encontradas no sentido de buscar conciliar a especificidade da Filosofia enquanto área do saber e a complexidade de seu ensino no nível médio. Trata-se de uma pesquisa bibliográfica, agregada com a experiência de acompanhamento dos estágios supervisionados do curso Licenciatura em Filosofia (UNIFRA) e da Coordenação do Programa Institucional de Bolsa de Iniciação à Docência (PIBID/CAPES/UNIFRA) na área de Filosofia.  &nbsp

As noções de conveniência e aparência como novidade ética em Maquiavel

Machiavelli's theoretical-practical positions and their opposition to traditional morality are examined in order to understand how his new ethical proposal is structured. The novelty is based on the political categories of convenience and appearance: it is admitted to resort to all means necessary to achieve the established ends, and to remain in power, obtain honor and glory, no matter what the Prince is, but what appears to be before subjects and allies. Hence the need for a Prince with a firm hand and who defends, without measuring efforts, the integrity and well-being of his people. The ruler's morals will be guided by the political situation and not by the ideal of a universal, abstract and perfect ruler. Political power has a mundane origin, born of the very malignity that is intrinsic to human nature, but it constitutes itself, albeit in a precarious and transitory way, as the only possibility to face the conflict. Finally, it is up to the Prince to use a set of expedients and techniques capable of ensuring maximum effectiveness in preserving the State and preserving its supreme purpose - order and harmony.Examina-se as posições teórico-práticas de Maquiavel e sua contraposição à moralidade tradicional, a fim de entender como se estrutura a sua nova proposta ética. A novidade está pautada nas categorias políticas da conveniência e da aparência: admite-se recorrer a todos os meios necessários para atingir os fins estabelecidos, e para manter-se no poder, obter a honra e a glória, não importa aquilo que o Príncipe é, mas o que aparenta ser perante os súditos e aliados. Disto decorre a necessidade de um Príncipe com o pulso firme e que defenda, sem medir esforços, a integridade e o bem-estar seu povo. A moral do governante será dirigida pela situação política e não pelo ideal de governante universal, abstrato e perfeito. O poder político tem uma origem mundana, nasce da própria malignidade que é intrínseca à natureza humana, mas se constitui, ainda que de modo precário e transitório, como a única possibilidade de enfrentar o conflito. Enfim, cabe ao Príncipe a utilização de um conjunto de expedientes e técnicas capazes de assegurar a máxima eficácia na preservação do Estado e na conservação de sua suprema finalidade - ordem e harmonia

Ética e cultura dialogal: transitividade crítico-reflexiva em educação

This paper shows that there is not ethically neutral education. In the process of forming an individual it becomes impossible to separate the issue of education from a set of ethical attributes. This paper examines the issue of (co) relation between ethics and education, in order to discuss the nature and function of the educational act, considering the implications and results in the formation of the individual. It argues that it is up to the educator to develop critical-reflexive dimension, exploring themes of motivation and proximity to the real conditions of existential and experiential learners, prompt the mentality of the research and the pursuit of knowledge autonomously, demonstrate the causes and reasons of oppression, motivate dialogue and hear what the students have to say and take their ethical responsibility to citizenship clarified.http://dx.doi.org/10.5902/198464446706 O artigo mostra que não há educação eticamente isenta e ideologicamente neutra. No processo de formação de um indivíduo torna-se impossível dissociar a questão educacional do um conjunto de atributos éticos. Examina a temática da (co)relação entre ética e educação, a fim de se discutir a natureza e a função do ato educativo, tendo em vista as implicações e os resultados na formação do indivíduo. Defende que cabe ao educador a função de desenvolver no educando a dimensão crítico-reflexiva, explorar temas de motivação e proximidade com as reais condições vivenciais e existenciais do educando, instigar a mentalidade da pesquisa e da busca autônoma do saber, demonstrar as causas e as razões da opressão, motivar o diálogo e ouvir o que o educando tem a dizer e assumir eticamente sua responsabilidade para com a cidadania esclarecida

LEVINAS E A EDUCAÇÃO:: DA PEDAGOGIA DO MESMO À PEDAGOGIA DA ALTERIDADE

Objetivamos, neste texto, estabelecer uma aproximação entre ética e educação, a partir do pensamento de Levinas. Apresentaremos uma (re) avaliação crítica da pedagogia da Totalidade, fundada no saber técnico-instrumental, ensinada pela maestria do Mesmo. Demonstraremos que Levinas não é só um crítico da filosofia e pedagogia tradicional, mas que sua reflexão abre vias para se pensar os desafios da educação contemporânea, recolocando a urgência do resgate de um outro-modo-de-ser pedagógico, fundamentalmente, Ético. Defenderemos que a grande contribuição de Levinas para a educação, consiste na (re)significação de um outro modo de Ensino, agora fecundamente baseado e fundado no ensinamento proveniente do Outro, enquanto condição ético-crítica de todo o saber. &nbsp

DA ÉTICA DO DIÁLOGO À RESPOSTA ÉTICA A ALTERIDADE – POR UMA EDUCAÇÃO INTER-HUMANA

Neste artigo, inicialmente, a partir de Gadamer e Freire, pretendemos examinar a importância do diálogo para a educação ética. O diálogo tem sido tomado como uma forma privilegiada de filosofar e educar, pois pressupõe uma discussão, uma conversa entre pessoas unidas por uma busca comum. O diálogo implica a tolerância ao pluralismo de valores e interesses na sociedade. O encontro dialógico torna-se a condição para a construção de uma educação ética na qual a verdade e a moralidade podem emergir. Concluímos o texto com uma leitura de Levinas acerca da concepção da relação inter-humana, fundada na resposta à alteridade e a importância desta para a educação. Pensar a educação como encontro inter-humano implica a incorporação sempre de novas experiências culturais e transformá-las em novas práticas, para além de uma mera descrição objetiva. Portanto, a ética, relação inter-humana, fundamenta a verdadeira educação, que não é uma simples relação com um interlocutor, mas com a alteridade que deve ser acolhida e respondida de forma incondicional. &nbsp

EDUCAÇÃO COMO ENCONTRO INTER-HUMANO:: DA ÉTICA DO DIÁLOGO À RESPOSTA ÉTICA PELA ALTERIDADE

Neste artigo, inicialmente, a partir de Gadamer e Freire, pretendemos compreender a importância do diálogo para a educação ética. O diálogo tem sido tomado como uma forma privilegiada de filosofar e educar, pois pressupõe uma discussão, uma conversa entre pessoas unidas por uma busca comum. O diálogo implica a tolerância ao pluralismo de valores e interesses na sociedade. O encontro dialógico torna-se a condição para a construção de uma educação ética na qual a verdade e a moralidade podem emergir. Concluímos o texto com uma leitura de Levinas acerca da concepção da relação inter-humana, fundada na resposta à alteridade e a importância desta para a educação. Pensar a educação como um encontro inter-humano implica a incorporação sempre de novas experiências culturais e transformá-las em novas práticas, para além de uma mera descrição objetiva. Portanto, a ética, relação inter-humana, fundamenta a verdadeira educação, que não é uma simples relação com um interlocutor, mas com a alteridade que deve ser acolhida e respondida de forma incondicional.&nbsp