Non-invasive monitoring of kiwifruit ripening

This thesis aims to explore the use of Visible and Near-Infrared Diffuse Reflectance Spectroscopy (VisNIR-DRS) in monitoring the ripening of two kiwifruit species, a yellow- (Actinidia chinensis Planch 'Jintao') and a green-fleshed (Actinidia deliciosa Liang et Ferguson 'Hayward'). The technique used in this study relies on correlating spectra with fruit internal quality attributes (IQA). However, low correlations in VisNIR-DRS causes problems in generalizing calibration models to new data. Therefore, the study was designed to test VisNIR-DRS in difficult real field conditions. Two orchards were monitored for each cultivar over two years, enabling internal (IV) and external validation (EV) on four independent datasets. The first part of the study focused on characterizing the time evolution of IQA during ripening. The second part involved developing calibration models for each IQA, based on the data from the first year. The results showed that it is possible to obtain highquality predictions for the IQA's daily averages from medium-quality models. The third part involved the two years' data. Variable selection and orthogonal signal correction were employed to improve the performance of the models, although only the IV performance improved, indicating that these widely recommended techniques are of little value in the context of stringent EV. Usual calibration transfer between the spectrometers used in each year was impossible in the absence of common samples. Therefore, a normalization approach based on daily average spectra was used, resulting in improved model performance. Lastly, the fourth part addressed the time variation of IQA in cold-stored kiwifruit, along with sensory data and their correlation with the spectra. According to the results of this study, VisNIR-DRS is a promising and important tool for kiwifruit industry since can be used to follow non-destructively the kiwifruit ripening, either on-tree or during storage, in a higher number of fruit samples and in less time.Esta tese debruça-se sobre a aplicação de Espetroscopia de Refletância Difusa no Visível e Infravermelho Próximo (ERD-VIP) na monitorização do amadurecimento de dois cultivares de kiwi, um de polpa amarela (Actinidia chinensis Planch ‘Jintao’) e outro de polpa verde' [Actinidia deliciosa (A. Chev.) C.F. Liang et A.R. Ferguson ‘Hayward’]. O estudo realizado enquadra-se, muito genericamente, no âmbito de um esforço global de promover a ERD-VIP como uma ferramenta prática e fiável para monitorizar a qualidade interna dos frutos. Com efeito, o controlo de qualidade dos frutos faz-se, em geral, através de processos destrutivos e demorados e que, pela própria limitação de desperdício na amostragem, conduz a caracterizações estatisticamente incorretas. Os métodos não invasivos, e a ERD-VIP em particular, permitem amostragens rápidas e uma caracterização estatística da população mais rigorosa. No entanto, a aplicação da ERD-VIP apresenta, ainda, alguns problemas, que têm impedido esta técnica de ser amplamente adaptada pelos produtores. A ERD-VIP baseia-se na correlação entre os espetros de refletância e os Parâmetros de Qualidade Interna (PQI) a determinar, como por exemplo, o Teor de Sólidos Solúveis (TSS). Com base nesta relação e em técnicas de análise multivariada, como por exemplo o Partial Least Squares (PLS), constroem-se modelos de calibração entre os espetros e os PQI. No entanto, na gama espetral do visível e infravermelho próximo, as bandas espetrais são muito largas e o efeito de interferentes é muito elevado, de onde resulta que os modelos de calibração para os PQI podem apresentar problemas de generalização a novos dados. Isto quer dizer que os modelos de calibração construídos com os frutos de um dado pomar podem realizar previsões de baixa qualidade quando aplicados a um pomar diferente; ou que os modelos construídos num dado ano, com certas características edafoclimáticas, podem falhar quando aplicados aos espetros do ano seguinte. A solução principal para este problema é recolher dados de proveniências o mais abrangentes possível, incluindo vários pomares, anos e condições de produção. No entanto, a abrangência das condições de calibração pode resultar numa perda de precisão relativamente a modelos mais localizados, no tempo e no espaço. Por exemplo, pode ser vantajoso desenvolver um modelo multi-anual para o mesmo pomar, garantindo maior especificidade. A análise da relação entre os dados de partida de um modelo e as suas características algébricas (vetor de regressão, loadings, scores, etc.), a que poderíamos chamar de meta-modelação, é uma área de investigação ainda com pouca expressão, mas que será crucial para resolver os problemas de generalização dos modelos de calibração. O objetivo mais lato desta tese é contribuir para este esforço de meta-modelação. A vasta maioria dos trabalhos realizados em ERD-VIP aplicada à determinação dos PQI processa-se na pós-colheita, o que significa que os frutos têm todos o mesmo estado de maturação e apresentam, por isso, bastante homogeneidade. Os resultados destes trabalhos são importantes para mostrar que a ERD-VIP pode ser utilizada, imediatamente antes da aquisição pelo consumidor, para classificar ou categorizar os frutos em escalões de qualidade. Existem muito menos trabalhos a aplicar a ERD-VIP durante a pré-colheita, em particular com o objetivo de poder prever a data ótima de colheita. Contudo, esta aplicação é tão ou mais importante que a anterior, pois permite monitorizar os pomares durante o amadurecimento da fruta e contribuir para a sua gestão adequada. A monitorização na pré-colheita tem, no entanto, algumas características que a tornam potencialmente mais complicada do que a que é feita apenas na pós-colheita. A principal diferença é que os frutos avaliados englobam um conjunto de estados de maturação muito heterogéneo, o que levanta problemas adicionais à modelação espetral. Com efeito, a estrutura e a constituição química dos frutos alteram-se durante o processo de maturação, o que tem consequências ao nível da propagação da luz e das relações espetrais entre os vários componentes. Assim, os estudos précolheita têm de se adaptar a uma estrutura física e química dos frutos que é mais dinâmica do que a encontrada na pós-colheita, o que dificulta o estabelecimento de padrões entre características espetrais e os PQI. Por outro lado, representa um campo de estudo mais desafiante e útil ao desenvolvimento da meta-modelação e permite ter uma perspetiva abrangente sobre os processos fisiológicos e a sua manifestação ao nível espetral. Procurando um enquadramento nos problemas descritos acima, optou-se, neste trabalho, por um desenho experimental que pudesse contribuir para as esclarecer as questões associadas à generalização dos modelos, num contexto de monitorização pré-colheita. Com este intuito, foram escolhidos dois pomares para cada cultivar (dois de kiwi polpa amarela e dois de kiwi de polpa verde) e as medidas de campo foram realizadas durante dois anos. Desta forma foi possível realizar validação externa dos modelos, dado que, para cada cultivar, obtiveram-se quatro conjuntos de dados independentes entre si: pomar 1/ano 1, pomar 2/ano 1, pomar 1/ano 2 e pomar 2/ano 2. Na validação externa usam-se três destes conjuntos independentes para fazer a calibração e o quarto para fazer a validação. A validação externa é, com efeito, um dos pilares essenciais para avaliar a capacidade de generalização dos modelos de calibração. No entanto, a maior parte dos estudos apresentados na literatura apresenta apenas uma calibração interna, em que os espetros de fontes diferentes (diferentes pomares, produtores ou anos) são distribuídos igualmente pelos conjuntos de calibração e validação. Deste modo não há verdadeira heterogeneidade entre calibração e validação, eliminando, em grande parte, o aparecimento de problemas relacionados com a generalização dos modelos a novos dados. Neste trabalho faz-se um paralelo entre os resultados obtidos em validação interna e externa, mostrando como os primeiros são sempre excessivamente otimistas. Na primeira parte do trabalho faz-se uma descrição da evolução dos PQI ao longo do processo de amadurecimento. Foram medidos dez PQI: os parâmetros de colorimetria L*, a*, b*, Hue e chroma, mais os parâmetros físico-químicos de firmeza, massa seca, TSS, pH e acidez titulável. O conhecimento da fisiologia dos kiwis e a interpretação da evolução dos PQI à luz dessa fisiologia são muito importantes para que se possa entender melhor as diferenças nos modelos de calibração obtidos em condições diferentes. Na segunda parte do trabalho faz-se um estudo inicial dos modelos de calibração com apenas um ano de medidas. Para cada cultivar havia apenas, nessa altura, dois conjuntos de dados independentes. A validação externa, que consiste em modelar com um desses conjuntos e prever o outro, conduziu a resultados muito pobres, pelo que se adotou uma abordagem híbrida, em que cada conjunto de dados era dividido em dois subconjuntos de árvores diferentes. Fez-se então o estudo com quatro conjuntos independentes de árvores. A qualidade das previsões depende muito do PQI. Os melhores resultados são obtidos para TSS, Hue e a* (Standard Deviation Ratio - SDR > 2). A firmeza e a percentagem de massa seca podem ser previstas de forma grosseira (SDR ~ 1.5), mas os restantes parâmetros não podem ser previstos de forma minimamente aceitável. Mostrou-se ainda que, mesmo partindo de modelos de calibração medianos, é possível obter previsões de grande qualidade da média diária dos PQI (SDR > 6), o que é, no fundo, o objeto de interesse para os produtores. Na terceira parte da tese faz-se um estudo detalhado da validação externa e interna em dois anos. Além disso, houve um problema adicional, relacionado com a perda do espetrómetro no início do segundo ano. Isto tornou o processo de validação ainda mais complicado, pois passou a incorporar uma componente de transferência de calibração entre os dois instrumentos. Tratou-se, portanto, de um problema de validação em dois pomares, dois anos e dois espetrómetros, o que corresponde ao caso real mais difícil de tratar. Perante este programa complexo, optou-se por concentrar os esforços na modelação do TSS, um dos PQI mais importante, tanto na determinação da data ótima de colheita, como na determinação do estado ótimo para consumo. Começou-se por comparar os resultados de validação interna com os de validação externa. Os resultados mostraram que a validação interna dá conta de todas as fontes de variabilidade (incluindo formas espetrais globalmente diferentes, fornecidas por cada um dos espetrómetros) e consegue fazer boas previsões (SDR = 2). Já os resultados de validação externa são bastante fracos, com um valor global de SDR = 1.4 (considerando em conjunto as previsões feitas para cada pomar), mas com valores individuais (SDR calculado apenas no conjunto de previsões de cada pomar) de 1 nos piores casos, ou seja, sem qualquer capacidade de previsão. Procurou-se então melhorar a performance do modelo utilizando duas técnicas muito usadas na literatura: a seleção de variáveis (SV) e correção de sinal ortogonal (Orthogonal Signal Correction - OSC). A ideia subjacente à aplicação destas técnicas é a mesma: eliminar a influência de componentes espectrais pouco informativas e que possam ser contraproducentes na validação. Em ambos os casos se verificou que a validação interna pode beneficiar da aplicação destes métodos, mas não a validação externa. Isto está de acordo com a ideia de que SV e OSC otimizam o espaço associado a três dos conjuntos de dados, mas que essa otimização não generaliza necessariamente ao quarto conjunto de dados. SV e OSC são duas das técnicas mais amplamente recomendadas para melhorar a robustez dos modelos. Neste trabalho mostra-se, portanto, que estas técnicas valem de pouco no contexto de uma validação externa difícil. Tentou-se uma transferência de calibração, mas na ausência de amostras comuns, as técnicas habituais não funcionam. Foi então tentada uma abordagem baseada na normalização aos espetros médios diários. Selecionou-se o conjunto com mais dias de medição como "master" e os restantes como "slaves". Em cada dia de medição, os espetros "slave" são multiplicados pela razão entre as médias “master” e “slave” desse dia. Isto permitiu compensar, em grande parte, as variações espetrais induzidas pelos espetrómetros e também variações de fundo espetral causadas por texturas diferentes. Foi assim possível aumentar bastante a performance do modelo em validação externa, passando o SDR de 1.4 para 1.8. Este valor permite realizar previsões médias diárias de TSS de elevada qualidade (SDR = 2.8). Demonstrou-se que mesmo numa conjuntura adversa de troca de espetrómetro, sem possibilidade de haver amostras comuns, é possível usar o modelo de calibração calculado num dado conjunto de frutos para prever o SSC de um conjunto de frutos independente (outro pomar e/ou ano). Na quarta parte da tese estuda-se a etapa de pós-colheita e armazenamento dos kiwis. Fez-se o estudo da variação dos PQI em função do tempo e realizou-se a análise dos dados sensoriais adquiridos a partir de painéis de provadores. A partir destes dados foi possível perceber quais são as características organoléticas mais valorizadas pelos consumidores. Por fim, procurou-se identificar algum tipo de padrão espetral que pudesse ser usado para correlacionar/antecipar a resposta sensorial, tendo se verificado uma boa correlação entre SSC e a refletância dos espectros dos kiwis nos comprimentos de onda entre 635 – 780 nm. De acordo com os resultados deste estudo, VisNIR-DRS é uma ferramenta promissora que pode ser usada para monitorizar o amadurecimento de kiwis na árvore, ou durante o armazenamento em pós-colheita. Isto é de grande importância para a indústria de kiwis, uma vez que permite que a monitorização do amadurecimento, seja feita de forma não destrutiva e num maior número de frutos, em menos tempo.The author acknowledges the Portuguese Foundation for Science and Technology – FCT for funding the PhD scholarship SFRH/BD/131462/ 2017

Sensory evaluation and spectra evolution of two kiwifruit cultivars during cold storage

Kiwifruit consumption has increased due to its rich nutritional properties. Although ‘Hayward’ continues to be the main cultivar, others, such as yellow fleshed ‘Jintao’, are of increasing interest. The objective of this research was to evaluate the acceptability and storage performance of these two cultivars. Sensory evaluation of green ‘Hayward’ and yellow ‘Jintao’ kiwifruit were performed along cold storage for three seasons/years to follow the organoleptic characteristics through ripening, as well as the acquisition of their spectra by Vis-NIR. For ‘Jintao’ were performed two sensory evaluations per year at 2.5- and 4.5-months’ storage and for ‘Hayward’ at 2.5-, 4.5- and 5.5-months’ storage. The nonparametric Mann–Whitney test and Kruskal–Wallis ANOVA were performed to test the significant differences between the mean ranks among the storage time. A non-metric multidimensional scaling plot method using the ALSCAL algorithm in a seven-point Likert scale was applied to determine the relationships in the data, and a new approach using the receiver operating characteristic (ROC) analysis was tested. The last revealed that, for both cultivars, sweetness, acidity and texture were the variables with better scores for General flavor. Aroma was also important on ‘Jintao’. A strong correlation between soluble solids content (SSC) and reflectance was found for both cultivars, with the 635–780 nm range being the most important. Regarding firmness, a good correlation with reflectance spectra was observed, particularly in ‘Hayward’ kiwifruit. Based on these results, Vis-NIR can be an objective alternative to explore for determination of the optimum eating-ripe stage.ALG-01-0247-FEDER-037303info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Non-destructive follow-up of ‘Jintao’ kiwifruit ripening through VIS-NIR spectroscopy – individual vs. average calibration model’s predictions

Visible/near infrared spectroscopy (Vis-NIRS) was used to monitor the yellow-fleshed kiwifruit (Actinidia chinensis Planch 'Jintao') ripening on two selected orchards along 13 weeks, from pre-harvest to the late harvest. Calibration models for several Internal Quality Attibutes (IQA) were built from the spectral data of 375 individual kiwifruit. The analyzed IQA were L*, a* and b* from the CIELAB color space, hue angle, chroma, firmness, dry matter (DM), soluble solids content (SSC), juice pH and titratable acidity (TA). Different pre-processing methods were tested for the construction of PLS calibration models. SSC and Hue were the best performing models with a correlation coefficient of 0.81 and 0.88, and root mean square error of prediction (RMSEP) of 1.27% and 1.95 degrees, respectively. The interpretation of the models in terms of the known absorption bands and the impact of signal to noise ratio (SNR) in them is discussed. The calibration models were used to perform average predictions of the IQA on orchard subareas, for each day of the experiment. These average predictions were compared with the IQA's average reference values on the same subareas and days. The model's metrics improved significantly through the averaging procedure, with RMSEP = 0.26-0.36% and R-2 = 0.99 for SSC; and RMSEP = 0.42 degrees - 0.56 degrees and R-2 = 1 for Hue. Since orchard management is done essentially through averages and not individual values, this result reinforces the applicability of the NIR technology for follow-up of fruit ripening in the tree.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Considerações iniciais sobre a interação professor-licenciando atuantes no PIBID/UFSCar do curso de Química

..

Chemical and organoleptic properties of bread enriched with Rosmarinus officinalis L.: the potential of natural extracts obtained through green extraction methodologies as food ingredients

The potential of R. officinalis L. (RO) extracts as a source of aromas was accessed by hydrodistillation (HD) and supercritical fluid extraction using carbon dioxide (SFE-CO2), followed by a series of analysis: quantification by GC-MS, sensory perception and description, and cytotoxicity against Vero cells. The extracts shown abundancy of α-pinene, eucalyptol, S-verbenone and camphor, contributing for the green, fresh, citric, and woody as main sensory notes. The odour threshold (ODT) value (less than 3.0 × 10 3 μg⋅mL 1) and the cytotoxic potential (ca. 220 μg∙mL 1) defined the concentration range for food application. The most promising extract was added to bread doughs and the final volatile profile was characterised by GC-MS through HS-SPME over time. Among the 34 compounds found, furfural showed an evident contribution in the bread crust aroma, which persisted over four hours of storage, contributing to a pleasant bread fragrance according to the evaluators. This study aims to represent a stepping stone for the use of natural aromas as ingredients for the development of innovative food products.This work was funded by the European Regional Development Fund (ERDF) through the Regional Operational Program North 2020, within the scope of Project Mobilizador Norte-01-0247-FEDER-024479: ValorNatural ®. This work was also supported by LA/P/0045/2020 (ALiCE), UIDB/50020/2020 and UIDP/50020/2020 (LSRE-LCM), and UIDB/ 00690/2020 (CIMO) funded by national funds through FCT/MCTES (PIDDAC). L. Barros and R. Calhelha also thank the national funding by FCT, P.I. through the institutional scientific employment and individual program-contract, and Júlia Cristiˆe Kessler acknowledges her Ph.D scholarship (ref. 2020.06656.BD) by FCT.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

S100B inhibition protects from chronic experimental autoimmune encephalomyelitis

© The Author(s) 2022. Published by Oxford University Press on behalf of the Guarantors of Brain. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), which permits unrestricted reuse, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.Studies have correlated excessive S100B, a small inflammatory molecule, with demyelination and associated inflammatory processes occurring in multiple sclerosis. The relevance of S100B in multiple sclerosis pathology brought an emerging curiosity highlighting its use as a potential therapeutic target to reduce damage during the multiple sclerosis course, namely during inflammatory relapses. We examined the relevance of S100B and further investigated the potential of S100B-neutralizing small-molecule pentamidine in chronic experimental autoimmune encephalomyelitis. S100B depletion had beneficial pathological outcomes and based on promising results of a variety of S100B blockade strategies in an ex vivo demyelinating model, we choose pentamidine to assay its role in the in vivo experimental autoimmune encephalomyelitis. We report that pentamidine prevents more aggressive clinical symptoms and improves recovery of chronic experimental autoimmune encephalomyelitis. Blockade of S100B by pentamidine protects against oligodendrogenesis impairment and neuroinflammation by reducing astrocyte reactivity and microglia pro-inflammatory phenotype. Pentamidine also increased regulatory T cell density in the spinal cord suggesting an additional immunomodulatory action. These results showed the relevance of S100B as a main driver of neuroinflammation in experimental autoimmune encephalomyelitis and identified an uncharacterized mode of action of pentamidine, strengthening the possibility to use this drug as an anti-inflammatory and remyelinating therapy for progressive multiple sclerosis.This work was funded by grants from Ordem dos Farmacêuticos (AF), Merck KGaA (AF) and Fundação de Ciênciase Tecnologia (UIDB/04138/2020; UIDP/04138/2020) (iMed.ULisboa).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Obtaining aromatic extracts from portuguese Thymus mastichina L. by hydrodistillation and supercritical fluid extraction with CO2 as potential flavouring additives for food applications

Humans often respond to sensory impulses provided by aromas, and current trends have generated interest in natural sources of fragrances rather than the commonly used synthetic additives. For the first time, the resulting aroma of a selected culture of Thymus mastichina L. was studied as a potential food ingredient. In this context, dried (DR) and fresh (FR) samples were submitted to carbon dioxide (CO2) supercritical extraction (SFE) and hydrodistillation (HD) methods. The extracts were characterised according to their volatile composition by GC-MS, cytotoxicity against a non-tumour cell culture, and sensory attributes (odour threshold and olfactive descriptors). The most abundant aromas were quantified, and the analysis performed by GC-MS revealed an abundance of terpenoids such as thymol chemotype, followed by the precursors -terpinene and p-cymene. DR and FR extracts (EX) obtained from SFE-CO2 show the highest content of thymol, achieving 52.7% and 72.5% of the isolated volatile fraction. The DR essential oil (EO) contained the highest amount of terpenoids, but it was also the most cytotoxic extract. In contrast, SFE-CO2 products showed the lowest cytotoxic potential. Regarding FR-OE, it had the lowest extraction yield and composition in aroma volatiles. Additionally, all samples were described as having green, fresh and floral sensory notes, with no significant statistical differences regarding the odour detection threshold (ODT) values. Finally, FR-EX of T. mastichina obtained by SFE-CO2 presented the most promising results regarding food application.This research was funded by the European Regional Development Fund (ERDF) through the Regional Operational Program North 2020, within the scope of Project Mobilizador Norte- 01-0247-FEDER-024479: ValorNatural. This work was financially supported by: LSRELCM Base- UIDB/50020/2020 and Programmatic- UIDP/50020/2020 and CIMO UIDB/00690/2020, funded by national funds through FCT/MCTES (PIDDAC). L. Barros also thanks the national funding by FCT, P.I. through the institutional scientific employment and individual program contract, and Júlia Cristiê Kessler and Filipa Mandim acknowledges their Ph.D. scholarships by Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT) (2020.06656.BD and SFRH/BD/146614/2019, respectively).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Severe COVID-19 recovery is associated with timely acquisition of a myeloid cell immune-regulatory phenotype

Copyright © 2021 Trombetta, Farias, Gomes, Godinho-Santos, Rosmaninho, Conceição, Laia, Santos, Almeida, Mota, Gomes, Serrano, Veldhoen, Sousa and Fernandes. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (CC BY). The use, distribution or reproduction in other forums is permitted, provided the original author(s) and the copyright owner(s) are credited and that the original publication in this journal is cited, in accordance with accepted academic practice. No use, distribution or reproduction is permitted which does not comply with these terms.After more than one year since the COVID-19 outbreak, patients with severe disease still constitute the bottleneck of the pandemic management. Aberrant inflammatory responses, ranging from cytokine storm to immune-suppression, were described in COVID-19 and no treatment was demonstrated to change the prognosis significantly. Therefore, there is an urgent need for understanding the underlying pathogenic mechanisms to guide therapeutic interventions. This study was designed to assess myeloid cell activation and phenotype leading to recovery in patients surviving severe COVID-19. We evaluated longitudinally patients with COVID-19 related respiratory insufficiency, stratified according to the need of intensive care unit admission (ICU, n = 11, and No-ICU, n = 9), and age and sex matched healthy controls (HCs, n = 11), by flow cytometry and a wide array of serum inflammatory/immune-regulatory mediators. All patients featured systemic immune-regulatory myeloid cell phenotype as assessed by both unsupervised and supervised analysis of circulating monocyte and dendritic cell subsets. Specifically, we observed a reduction of CD14lowCD16+ monocytes, and reduced expression of CD80, CD86, and Slan. Moreover, mDCs, pDCs, and basophils were significantly reduced, in comparison to healthy subjects. Contemporaneously, both monocytes and DCs showed increased expression of CD163, CD204, CD206, and PD-L1 immune-regulatory markers. The expansion of M2-like monocytes was significantly higher at admission in patients featuring detectable SARS-CoV-2 plasma viral load and it was positively correlated with the levels of specific antibodies. In No-ICU patients, we observed a peak of the alterations at admission and a progressive regression to a phenotype similar to HCs at discharge. Interestingly, in ICU patients, the expression of immuno-suppressive markers progressively increased until discharge. Notably, an increase of M2-like HLA-DRhighPD-L1+ cells in CD14++CD16- monocytes and in dendritic cell subsets was observed at ICU discharge. Furthermore, IFN-γ and IL-12p40 showed a decline over time in ICU patients, while high values of IL1RA and IL-10 were maintained. In conclusion, these results support that timely acquisition of a myeloid cell immune-regulatory phenotype might contribute to recovery in severe systemic SARS-CoV-2 infection and suggest that therapeutic agents favoring an innate immune system regulatory shift may represent the best strategy to be implemented at this stage.The Research was funded by Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT), “APOIO ESPECIAL RESEARCH 4COVID-19” projects 803, 125, 231_596873172, and 729. AMCG and GF received fellowships funded by FCT (DOCTORATES4COVID-19, 2020.10202.BD), and JANSSEN- CILAG FARMACÊUTICA, respectively. The funder was not involved in the study design, collection, analysis, interpretation of data, writing of the article or decision to submit it for publication. MV was supported by the European Union H2020 ERA project (No 667824 – EXCELLtoINNOV). This project has received funding from the European Union’s Horizon 2020 research and innovation programme under grant agreement No 667824.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Seroprevalence of anti-SARS-CoV-2 antibodies in COVID-19 patients and healthy volunteers up to 6 months post disease onset

SARS-CoV-2 has emerged as a human pathogen, causing clinical signs, from fever to pneumonia—COVID-19—but may remain mild or asymptomatic. To understand the continuing spread of the virus, to detect those who are and were infected, and to follow the immune response longitudinally, reliable and robust assays for SARS-CoV-2 detection and immunological monitoring are needed. We quantified IgM, IgG, and IgA antibodies recognizing the SARS-CoV-2 receptor-binding domain (RBD) or the Spike (S) protein over a period of 6 months following COVID-19 onset. We report the detailed setup to monitor the humoral immune response from over 300 COVID-19 hospital patients and healthcare workers, 2500 University staff, and 198 post-COVID-19 volunteers. Anti-SARS-CoV-2 antibody responses follow a classic pattern with a rapid increase within the first three weeks after symptoms. Although titres reduce subsequently, the ability to detect anti-SARS-CoV-2 IgG antibodies remained robust with confirmed neutralization activity for up to 6 months in a large proportion of previously virus-positive screened subjects. Our work provides detailed information for the assays used, facilitating further and longitudinal analysis of protective immunity to SARS-CoV-2. Importantly, it highlights a continued level of circulating neutralising antibodies in most people with confirmed SARS-CoV-2.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Useful ultrasonographic parameters to predict difficult laryngoscopy and difficult tracheal intubation-a systematic review and meta-analysis

The Supplementary Material for this article can be found online at: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmed.2021.671658/full#supplementary-materialUnexpected difficult airway management can cause significant morbidity and mortality in patients admitted for elective procedures. Ultrasonography is a promising tool for perioperative airway assessment, nevertheless it is still unclear which sonographic parameters are useful predictors of difficult laryngoscopy and tracheal intubation. To determine the ultrasonographic predictors of a difficult airway that could be applied for routine practice, a systematic review and meta-analysis was conducted. Literature search was performed on PubMED, Web of Science and Embase using the selected keywords. Human primary studies, published in English with the use of ultrasonography to prediction of difficult laryngoscopy or tracheal intubation were included. A total of 19 articles (4,570 patients) were analyzed for the systematic review and 12 articles (1,141 patients) for the meta-analysis. Standardized mean differences between easy and difficult laryngoscopy groups were calculated and the parameter effect size quantified. A PRISMA methodology was used and the critical appraisal tool from Joanna Briggs Institute was applied. Twenty-six sonographic parameters were studied. The overall effect of the distance from skin to hyoid bone (p = 0.02); skin to epiglottis (p = 0.02); skin to the anterior commissure of vocal cords (p = 0.02), pre-epiglottis space to distance between epiglottis and midpoint between vocal cords (p = 0.01), hyomental distance in neutral (p < 0.0001), and extended (p = 0.0002) positions and ratio of hyomental distance in neutral to extended (p = 0.001) was significant. This study shows that hyomental distance in the neutral position is the most reliable parameter for pre-operative airway ultrasound assessment. The main limitations of the study are the small sample size, heterogeneity of studies, and absence of a standardized ultrasonographic evaluation method [Registered at International prospective register of systematic reviews (PROSPERO): number 167931].This work has been funded by National funds, through the Foundation for Science and Technology (FCT)-project UIDB/50026/2020 and UIDP/50026/2020; and by the projects NORTE-01-0145-FEDER-000013 and NORTE-01-0145-FEDER-000023, supported by Norte Portugal Regional Operational Programme (NORTE 2020), under the PORTUGAL 2020 Partnership Agreement, through the European Regional Development Fund (ERDF)