Mecanismos patogénicos involucrados en el desarrollo de la esteatohepatitis no alcohólica en un modelo animal nutricional de ratón = Pathogenic mechanisms involved in the development of non alcoholic steatohepatitis in a nutritional mouse model

167 p.En la actualidad se define la hepatopatía grasa no alcohólica /esteatohepatitis no alcohólica (HGNA/EHNA), como un sUbtipo de hígado graso caracterizado por esteatosis, inflamación hepática, balonización hepatocelular y progesiva fibrosis hepática, que afecta a personas que no consumen alcohol. Así mismo, se le está considerando como la manifestación hepática del síndrome metabólico. Su espectro se caracteriza por un depósito inicial de triglicéridos en el hepatocito en una concentración mayor al 5%, seguida por lesiones degenerativas, infiltrado inflamatorio y fibrosis, que puede progresar a cirrosis. Aunque existen diversos modelos animales de HGNA/EHNA, uno de los que reproduce con mayor fidelidad el fenotipo de la enfermedad en humanos es el MCD, en el cual la hepatopatía se induce por la administración de una dieta deficiente en metionina y colina (dieta MCD), que son dos aminoácidos indispensables para el ensamble de las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL). De otra parte, el GW3965 es un agonista sintético de los receptores hepáticos LXR que fue sintetizado por Glaxo y Smith Klein en el año 2002. Los estudios realizados en modelos murinos y en células humanas como adipocitos y hepatocitos, han demostrado que este agonista mejora la homeostasis del colesterol y la tolerancia a la glucosa y puede tener efecto neuroprotector, antihipertensivo y antiinflamatorio. Sin embargo, su acción ¿in vivo¿ es contradictoria ya que aunque se han demostrado los efectos antiateróticos y antidiabéticos, también se ha encontrado que puede promover esteatosis y activar moléculas proinflamatorias y aterogénicas. OBJETIVO Esclarecer los mecanismos moleculares y celulares implicados en la HGNA/EHNA mediante la utilización de un modelo animal de dicha patología, con el fin de conocer la secuencia temporal de aparición de los distintos mecanismos patogénicos de la enfermedad y los posibles puntos de actuación terapéutica, e indagar sobre el posible papel terapéutico de la activación de los receptores hepáticos LXR en el tratamiento de la HGNA/EHNA, mediante la administración del agonista sintético GW3965 a dicho modelo animal. METODOLOGÍA Se utilizaron 160 ratones machos C57BL/6J, que se dividieron en los siguientes 4 grupos experimentales: ¿ Grupo control (n=40): se le suministró 0.5% de carboximetil celulosa por vía intragástrica y la dieta control suplementada con metionina y colina ¿ Grupo control más agonista (n=40): se le administró la dieta control y el agonista GW3965 en dosis de 20mg/kg/día por vía intragástrica ¿ Grupo EHNA (n=40): se le suministró 0.5% de carboximetil celulosa por vía intragástrica y la dieta MCD ¿ Grupo EHNA más agonista (n=40): se le administró la dieta MCD y el agonista GW3965 en dosis de 20mg/kg/día por vía intragástrica Este tratamiento se mantuvo por un periodo de 5 semanas. Al final de cada semana, previa anestesia y ayuno de 12 horas, se sacrificaron 5 animales por grupo. De cada individuo se extrajo el hígado y se recolectaron muestras de plasma para la cuantificación de las concentraciones basales de colesterol Total, C-HDL, C-LDL, C-VLDL, triglicéridos, AST, ALT, ALP, bilirrubina total, bilirrubina directa, albúmina y glucosa. Los cortes histológicos se tiñeron con las coloraciones de hematoxilina eosina y Tricrómico de Masson y se estudiaron bajo los criterios descritos por Brunt y cols. en 1999, que permiten determinar el índice de actividad de HGNA/EHNA. Adicionalmente, se cuantificaron las concentraciones hepáticas de colesterol total, triglicéridos glucógeno y glucosa y se determinó la expresión de los genes lipogénicos SREBP-1c y LXR¿ y de los de respuesta inflamatoria y estrés oxidativo CYP2E1, TNF¿, OPN, COX2 e INOS. RESULTADOS El modelo nutricional de HGNA/EHNA utilizado en el presente estudio, cursó con una alteración hepática progresiva en el tiempo, compatible con el desarrollo de esteatohepatitis. La administración del agonista GW3965 a los animales sanos preservó la arquitectura y funcionalidad hepáticas, no desarrolló esteatosis, disminuyó la síntesis de triglicéridos y sus lipoproteinas transportadoras las VLDL , potenció el transporte reverso del colesterol, incrementó la expresión de los genes lipogénicos SREBP-1c y LXR¿ y atenuó la expresión de los genes inflamatorios CYP2E1, TNF¿, COX2 e INOS. En el modelo MCD, la activación de los receptores LXR por el agonista GW3965 incrementó la lesión hepática preexistente, aceleró el desarrollo de esteatosis, favoreció la lipogénesis y la hipertrigliceridemia, potenció el transporte reverso del colesterol, redujo la expresión de los genes lipogénicos SREBP1c y LXR¿ e incrementó la expresión de los genes inflamatorios CYP2E1, TNF¿, COX2 e INOS. CONCLUSIONES Conclusión primera: Los ratones C57BL/6J alimentados con una dieta deficiente en metionina y colina (MCD), modelo nutricional de HGNA/EHNA utilizado en el presente estudio, reproducen las principales características de la enfermedad en humanos tales como, presencia de esteatosis e inflamación hepáticas, incremento en los marcadores de daño y destoxificación hepática, y mayor expresión del gen lipogénico SREBP-1c y de los de respuesta inflamatoria CYP2E1, TNF-a, OPN, COX-2 e iNOS . Conclusión segunda: La administración de GW3965, agonista sintético de los receptores hepáticos X, a ratones C57BL/6J sanos incrementa la síntesis de colesterol y de las lipoproteínas plasmáticas especializadas en su transporte HDL y LDL, a la vez que disminuye la de triglicéridos y sus lipoproteínas transportadoras, las VLDL. Así mismo, induce la expresión de genes lipo génicos y disminuye la de genes inflamatorios, sin favorecer el desarrollo de HGNA/EHNA, preservando a la vez la arquitectura y funcionalidad hepáticas. Conclusión tercera: La administración del agonista GW3965 a ratones C57BL/6J afectados de HGNA/EHNA, induce la expresión de genes inflamatorios y disminuye la de genes lipogénicos, lo que podría en parte estar relacionado con la aceleración del proceso de esteatosis, y el incremento en la inflamación y en el daño hepático preexistente en la HGNA/EHNA . Conclusión final: Los resultados obtenidos parecen indicar que los receptores hepáticos LXR median vías que podrían exacerbar la inflamación, la esteatosis y el daño hepático característicos de la HGNA/EHNA

Valor pronóstico de los marcadores bioquímicos en pacientes con COVID-19

El SARS-CoV-2 es un virus de la familia Coronaviridae, subfamilia coronavirus (CoV) y género β. Este se ha convertido en una amenaza inminente para toda la humanidad por ser el agente causal de la pandemia COVID-19, la cual llevó, por un lado, a la declaratoria de emergencia sanitaria a nivel mundial por parte de la Organización Mundial de la Salud (OMS) y, por otro, a instituir estrictas medidas de control para prevenir su contagio por parte de muchos gobiernos. En cuanto a la fisiopatología presentada en esta entidad, aunque las lesiones pulmonares han sido consideradas como las principales consecuencias de esta infección, a medida que avanza el conocimiento sobre el virus se han identificado también lesiones a nivel cardiaco, hepático y renal, que potencian la severidad de la infección y generan un mayor deterioro de los pacientes, su ingreso a las Unidades de Cuidados Intensivos y un mayor riesgo de mortalidad. Con base en esto, diversas investigaciones se han encaminado a determinar aquellos hallazgos clínicos y paraclínicos que puedan ser relevantes frente al pronóstico de los pacientes. Por lo anterior, la presente revisión aborda literatura disponible sobre los principales biomarcadores bioquímicos reportados por su asociación a daños cardiaco, hepático y renal, los cuales presentan mayor significancia para evaluar el curso, severidad, manejo y pronóstico de la infección, y cuya alteración conlleva finalmente a un mayor riesgo de mortalidad en pacientes hospitalizados que presentan COVID-19

Comparative study of risk factors related to cardiovascular disease in children from Bogotá, Colombia and Toluca, Mexico

Introduction: Currently, cardiovascular risk factors have not been studied so extensively in young people. Objective: To compare the cardiovascular risk factor between Colombian and Mexican children. Patients and methods: This was a transversal, descriptive, comparative and clinical study. 30 children of primary school aged 6-12 from Bogotá, Colombia were matched by age with a sample of 30 children from Toluca, Mexico. Cardiovascular risk factors measured were Body Mass Index (BMI), serum lipid profile, glucose and homocystein (Hcy). Besides we applied the validated surveys formats for food (dietary history), physical activity (International Physical Activity Questionnaire, IPAQ), alcohol consumption and smoking. Results: BMI was higher in Mexican children than in Colombian (20.43 ± 3.35 vs 16.92 ± 3.46) (p ≤ 0.001). Among Mexican children, 20% (6) of them had blood glucose concentration greater than 100 mg/dl, 6.6% (2) had triglycerides greater than 200 mg/dl, 36.6% (11) had cholesterol levels greater than 170 mg/dl, 16% (53.3) had HDL lower than the recommended limits, and 60% (18) had LDL above the normal limit. For the Colombian population these percentages were of 0, 3.3, 46.6, 13.33 and 53.3 respectively. Discussion: Mexican children had a stronger correlation between BMI and atherogenic indices and less physical activity than Colombian. Of the 30 Mexican children enrolled in the study only 13% had none of the cardiovascular risk factors, while in the Colombian this percentage was of 33. Conclusion: Latin American children are not metabolically homogeneous, Mexican children are at high risk of cardiovascular disease.UCMC, Laboratorios Annar Diagnóstica Colombia y Becton, Dickinson Colombia; CICMED; ASCILA; CGM

Identification of metabolic indicators for cardiovascular risk in schoolchildren

Objective. CardioVascular Disease (CVD) is one of the most important causes of death worldwide affecting people at younger ages every year. The purpose of this study was to identify the metabolic indicators for cardiovascular risk factors in primary school students from Mexico and Colombia. Methods. A clinical, prospective, cross-sectional and comparative study was conducted in Mexico and Colombia to contrast anthropometric measurements, biochemical and dietetic determinations and physical activity. Results. The Waist-Hip Ratio (WHR) and the Waist-to-Height Ratio (WtHR) showed significant differences (p≤0.001) between Mexico and Colombia (0.8 ± 0.1 versus 0.5 ± 0.1) and (0.4 ± 0.06 vs. 0.78 ± 0.04) respectively. The Automatic Linear Modeling showed that the main predictors for cholesterol levels were WtHR, MonoUnsaturated Fatty Acids (MUFA) and lipids ingestion. For glucose there were four main predictors: WHR, carbohydrates, MUFA and Saturated Fatty Acids (SFA). For triglycerides the pedictors were Products of Animal Origin (PAO), BMI, waist circumference, lipids and cholesterol ingestion and Mean Arterial Pressure (MAP). The Weight Estimation tests weighted per gender showed that for glucose levels the main determinants were carbohydrates, MUFA and oils; for cholesterol these were MUFA, PUFA and oils; and for LDL the significant variables were proteins, SFA, PAO and sugars; and last, for triglycerides the main variables were BMI, cholesterol and vegetables. Conclusions. Mexico has higher values in almost all items of cardiovascular risk in children, but both countries have significant percentages of obesity and the population free of cardiovascular risk is minimal.This work was funded by the Grant 1040/2014RIFC of the UAEMex

Serum Homocysteine Levels and its Methylenetetrahydrofolate Gene (MTHFR) C677t Polymorphism in Patients with Hemodialysis

Homocysteine plays an important role in cardiovascular disease as an independent risk factor, especially in patients with renal insufficiency. The present study aimed to determine whether Hcy levels, or those of its C677T polymorphism, were associated with higher mortality in patients submitted to chronic hemodialysis treatment. This was a descriptive, prospective study. Chronic renal patients undergoing hemodialysis in the "General Hospital, ISSSTE" Dr. Darío Fernández Fierro, Mexico City were included in the study. Serum homocysteine was analyzed by means of an ELISA test. The primers utilized for MTHFR C677T polymorphism identification were the following: F: 5'TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA3', R: 5'AGGACGGTGCGGTGAGTG3' and F2: 5’GCAGGGAGCTTTGAGGCTGAC3’. Differences among nominal conditions were evaluated by the Mann-Whitney U-test. Spearman test was used for correlation among variables. Regression, log-linear analysis and receiver operating characteristic (ROC) curves were conducted to evaluate the possible influence on prognosis of Hcy levels and the presence of the MTHFR C677T polymorphism. Cox regression and Kaplan-Meier tests were performed to evaluate the Hcy levels influence on survival. In all cases, p<0.05 was considered statistically significant. All tests were performed with the SPSS ver. 23 statistical software program. By means of regression analysis (p = 0.046) and ROC curve age was the sole significant prognostic variable for the "death". The loglinear analysis did not show any association between the presence of MTHFR C677T SNP with the mortality of patients. It was concluded that Hcy levels and the presence/absence of MTHFR C677T are not stronger predictors for mortality than the traditional cardiovascular risk factors."Dr. Darío Fernández Fierro" General Hospital. Ciprés Grupo Médico S.C. (CGM)

Evaluation of risk factors associated with cardiovascular disease in young university students of Santafe Locality from Bogota, Colombia

Objetivo. Identificar factores de riesgo cardiovascular en población joven de la Localidad Santafé de Bogotá, Colombia. Métodos. Estudio descriptivo, transversal desarrollado en estudiantes de tres universidades de la Localidad Santafé en Bogotá, con edades comprendidas entre los 16 a 29 años, a quienes se les realizaron exámenes clínicos y paraclínicos y se les aplicó una encuesta de factores de riesgo. Resultados. Se estudiaron 747 estudiantes, encontrando que la prevalencia más alta de factores de riesgo estuvo dada por el consumo de alcohol (96.1%), que mostró además relación con el aumento de tensión arterial con la prueba Chi cuadrada. Las prevalencias de sedentarismo (63.8%) y tabaquismo (48.1%) no presentaron diferencias marcadas en comparación con otros estudios, pero el segundo fue el único que se asoció con el aumento de la tensión arterial sistólica (P ≤ 0.001) y diastólica (P = 0.04). La prevalencia de obesidad fue similar a la hallada en investigaciones anteriores hechas en Colombia (2.3%); de igual manera se encontró asociación entre aquella, la presencia de hipertrigliceridemia (P = 0.001) y el incremento en los niveles de glucosa (P = 0.01). Los resultados de este estudio indican que los estudiantes universitarios de la Localidad Santafé en Bogotá, tienen como factores de riesgo preponderantes de enfermedad cardiovascular al consumo de alcohol, el tabaquismo y el sedentarismo

Papel de las pruebas rápidas (POCT) en el diagnóstico del SARS-COV-2, agente causal de COVID-19

The gold test to detect SARS-CoV-2, the etiologic agent that leads to the pandemic of atypical pneumonia (COVID 2019) that first appeared in Wuhan City, Hubei Province of China in December 2019 (1), is the RT-qPCR. The standard protocol involves reverse transcription of SARS-CoV-2 RNA into complementary DNA strands (cDNA), followed by the amplification of cDNA specific regions, a procedure that takes several hours to complete and which results in the final information from the infection status can take up to 24 hours. For this reason, and due to the need to reduce the risk of possible viral spread within the population caused by the fast transmission of SARS-CoV-2, in order to prevent nosocomial spread and subsequent community transmission through the quick identification of suspected cases, and to predict the further infectious waves of viral recurrence, rapid laboratory methods or Point of Care Testing (POCT) are being developedto reduce the diagnosis time and minimize the risk of contagion by the operators. These tests are discussed below.El estándar de oro actual para la detección de SARS-CoV-2, agente causal de la pandemia de neumonía atípica (COVID-19) que apareció por primera vez en la ciudad de Wuhan (provincia de Hubei, China) en diciembre de 2019 (1), es la RT-qPCR. El protocolo estándar implica la transcripción inversa de ARN de SARS-CoV-2 en cadenas de ADN complementarias (ADNc), seguida de la amplificación de regiones específicas del ADNc. Este procedimiento demanda varias horas para ser completado y deriva en que la informaciónfinal del estado de la infección pueda demorar hasta 24 horas. Ante la necesidad de disminuir el riesgo de una posible propagación viral dentro de la población originada por la rápida transmisión del SARS-CoV-2, se ha buscado prevenir el contagio, la propagación nosocomial y la transmisión comunitaria posterior, a través de la identificación rápida de casos sospechosos, y predecir las posteriores ondas infecciosas de recurrencia viral. Para esto, se vienen desarrollando métodos de laboratorio rápidos o point of care testing (POCT),que disminuyen el tiempo de diagnóstico y minimizan el riesgo de contagio por parte de los operadores

Comportamiento y valor pronóstico de la troponina I cardiaca en suero en pacientes con enfermedad renal final sometidos a hemodiálisis de largo plazo. Analisis de resultados quinquenales

Cardiac Troponin I (cTnI) levels are considered an important diagnostic tool in acute coronary events. However, there is controversy over their sensitivity, specificity and prognostic value in haemodialysis (HD) patients. The aim of this study was to explore the behaviour and prognostic value of cardiac troponin I in HD patients. Thirty-four asymptomatic patients undergoing long-term haemodialysis were studied. Samples of blood were collected at the start of the study (pre- and post-dialysis serum), after three years (pre-dialysis serum and plasma, with and without the addition of heterophilic antibody-blocking reagent (HBR) and after five years (pre-dialysis serum).Quantitative cardiac troponin I was measured with an AxSYM cTnI micro-particle enzyme immuno-assay and qualitative cTnI with a Hexagon Troponin immuno-chromatographic one-step test. It did not prove possible to detect any significant association between pre- and post-dialysis cTnI levels.Comparison of results for serum and heparin plasma revealed no statistically significant difference between the level of cTnI and the mean values for plasma and serum with and without the addition of HBR. The cTnI concentrations in the samples without added HBR were lower than in those with HBR, but no statistically significant difference between the mean for cTnI and the mean of samples with and without added HBR was observed. During the study, 35.2% of the population died. A positive association was observed between the cTnI values in the patients still living and those patients who died from ischaemic cardiomyopathy (p = 0.039).The crude risk of death by cardiovascular disease was increased eight-fold (the 95% confidence interval being 1.2 to 51.1) in patients with a cTnI concentration greater than 0.04 ng/mL. Levels of cTnI may reflect occult myocardial ischemia and identify haemodialysis patients who face a greater risk of death.Los niveles troponina I cardiaca (cTnI) se consideran una importante herramienta de diagnóstico en los eventos coronarios agudos. Sin embargo, hay controversia sobre su sensibilidad, especificidad y valor pronóstico en la hemodiálisis (HD) de los pacientes. El objetivo de este estudio fue explorar el comportamiento y el valor pronóstico de la troponina I cardiaca en pacientes en HD. Se estudiaron treintaicuatro pacientes asintomáticos sometidos a hemodiálisis a largo plazo. Las muestras de sangre fueron tomadas al inicio del estudio (pre-y post-diálisis en suero), después de tres años (pre-diálisis en suero y plasma, con y sin la adición de anticuerpos heterófilos reactivos de bloqueo (HBR) y después de cinco años (suero pre-diálisis). Se midió la troponina I cardiaca cuantitativa con micro-partículas AxSYM cTnI de la enzima inmuno-ensayo de cTnI y la cualitativa con una prueba de un solo paso de inmuno Troponina Hexagon-cromatografía.No fue posible detectar ninguna asociación significativa entre los niveles de cTnI pre-y post-diálisis. La comparación de los resultados de la heparina de suero y plasma no reveló ninguna diferencia estadísticamente significativa entre el nivel de cTnI y los valores promedio para el plasma y suero con y sin la adición de HBR.Las concentraciones cTnI en las muestras sin HBR añadido fueron más bajas que en aquellas con HBR, pero no se observó diferencia estadísticamente significativa entre la media de cTnI y la media de las muestras con y sin adición de HBR. Durante el estudio, el 35,2% de la población murió. Se observó una asociación positiva entre los valores de cTnI en los pacientes que aún viven y en los pacientes que murieron a causa de la miocardiopatía isquémica (p = 0,039). El crudo riesgo de muerte por enfermedad cardiovascular se ha multiplicado por ocho (el intervalo de 95% de confianza estando entre 1,2 y 51,1) en pacientes con una concentración de cTnI superior a 0,04 ng/ml. Los niveles de cTnI pueden reflejar la isquemia miocárdica oculta e identificar los pacientes en hemodiálisis que se enfrentan a un mayor riesgo de muerte

Valor pronóstico de los marcadores bioquímicos en pacientes con COVID-19

SARS-CoV-2 is a virus from the coronaviridae family, coronavirus (CoV) subfamily and genus β, it has become an imminent threat to all humanity as it is the causal agent of the COVID-19 pandemic, which led to On the one hand, the World Health Organization (WHO) declares a worldwide health emergency, and on the other, to institute strict control measures to prevent its spread by many governments. Regarding the pathophysiology presented in this entity, although lung lesions have been considered the main consequences of this infection, as knowledge about the virus progresses, cardiac, hepatic, and renal lesions have also been identified that enhance severity of the infection generating greater deterioration of the patients, their admission to the Intensive Care Units and a higher risk of mortality; Based on this, various investigations have aimed to determine those clinical and paraclinical findings that may be relevant to the prognosis of the patients. Therefore, this review addresses available literature on the main biochemical biomarkers reported for their association with cardiac, liver and kidney damage, which are more significant in evaluating the course, severity, management and prognosis of the infection and whose alteration ultimately leads to an increased risk of mortality in hospitalized patients presenting with COVID-19.El SARS-CoV-2 es un virus de la familia Coronaviridae, subfamilia coronavirus (CoV) y género β. Este se ha convertido en una amenaza inminente para toda la humanidad por ser el agente causal de la pandemia COVID-19, la cual llevó, por un lado, a la declaratoria de emergencia sanitaria a nivel mundial por parte de la Organización Mundial de la Salud (OMS) y, por otro, a instituir estrictas medidas de control para prevenir su contagio por parte de muchos gobiernos. En cuanto a la fisiopatología presentada en esta entidad, aunque las lesiones pulmonares han sido consideradas como las principales consecuencias de esta infección, a medida que avanza el conocimiento sobre el virus se han identificado también lesiones a nivel cardiaco, hepático y renal, que potencian la severidad de la infección y generan un mayor deterioro de los pacientes, su ingreso a las Unidades de Cuidados Intensivos y un mayor riesgo de mortalidad. Con base en esto, diversas investigaciones se han encaminado a determinar aquellos hallazgos clínicos y paraclínicos que puedan ser relevantes frente al pronóstico de los pacientes. Por lo anterior, la presente revisión aborda literatura disponible sobre los principales biomarcadores bioquímicos reportados por su asociación a daños cardiaco, hepático y renal, los cuales presentan mayor significancia para evaluar el curso, severidad, manejo y pronóstico de la infección, y cuya alteración conlleva finalmente a un mayor riesgo de mortalidad en pacientes hospitalizados que presentan COVID-19