Several Noether's theorem of Vacco systems with constraints

研究受约束Vacco系统的Noether对称性 .基于受约束Vacco系统在r 参数有限变换群Gr 的无限小广义准对称变换下的不变性 ,给出了受单面约束的Vacco系统的Noether定理及其逆定理 .受双面约束的Vacco系统的Neother定理为该定理的推论 .最后给出一个算例说明了结果的应用 .The Neother symmetry for Vacco systems with constraints is studied. Noether's theorem and its inverse theorem of Vacco systems with unilateral constraints are given,which are based upon the invariant properties by introducing the generalized quasi-symmetry of the infinitesimal transformation for the transformation group G r of r -parameter. And Noether's theorem dealing with the Vacco system of bilateral constraints is its corollary. An example to illustrate the application of the result is given.安徽省高校自然科学基金资助项目 (2 0 0 2kj2 3 0,2 0 0 4kj2 94

抗HEV中和抗体13D8的单链抗体的构建及表达

目的 :降低HEV中和性单抗 (mAb) 13D8的鼠源性 ,表达其单链抗体 (scFv)。方法 :从分泌 13D8鼠mAb的杂交瘤细胞中 ,通过RT PCR克隆mAb的VL、VH 基因 ,并进一步组装成VH linker VL 型的scFv片段。将scFv片段克隆到pTO T7载体中 ,在大肠杆菌中进行表达。用ELISA、Westernblot检测scFv的活性。结果 :SDS PAGE表明 ,13D8的scFv在E .coli中得到高效表达 ,表达量达菌体总蛋白的 2 6 .8%左右 ,表达产物主要以包涵体的形式存在。间接ELISA和Westernblot检测表明 ,表达的 13D8的scFv能与HEVOFR2区中一段重组蛋白(NE2 )特异结合。竞争ELISA表明 ,scFv与原鼠mAb识别的为同一表位。结论 :成功地表达出具有免疫学活性的 13D8的scFv

应用噬菌体随机肽库技术筛选戊型肝炎病毒中和表位模拟肽

以识别戊型肝炎病毒 (HEV)构象依赖性中和表位的单克隆抗体 8C11、8H3作为固相筛选分子 ,对噬菌体随机 7肽库进行 4轮筛选后 ,随机挑取单克隆噬菌体进行测序。合成优势 7肽序列基因 ,将其插入HBcAgAA78 83位置之中 ,进行原核表达 ,所获重组蛋白经蛋白印迹实验证实可与相应单抗结合 ,电镜下可见重组蛋白能形成与HBcAg相似的类病毒颗粒。化学合成单抗 8H3筛选出的优势 7肽 ,所获 7肽经生物传感器结合实验证实与单抗8H3结合。这些结果提示用噬菌体 7肽库可以筛选出部分模拟构象性表位的短肽 ,为亚单位疫苗的研制提供了新的思路

戊型肝炎病毒衣壳蛋白中和表位间的构象诱导

重组蛋白NE2包含了戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白(pORF2)的aa394～606片段。在NE2上已鉴定出了2个HEV中和表位,并获得了3个识别中和表位的单克隆抗体(MAb)8C11、13D8和8H3。这3个MAb间的交叉阻断ELISA实验发现,8C11和13D8可以彼此完全阻断,8H3对8C11和13D8均不能阻断,而8C11非但不能阻断8H3,反而显著增强了8H3与抗原的结合。用生物传感器进行的抗体与抗原结合的动力学分析也证实了这一现象。这些结果提示,在NE2上8H3表位区域受到抗原上某些结构的掩盖,而8C11与NE2的结合引起了抗原空间结构的改变,导致了掩盖8H3表位的结构的去除和8H3表位的充分暴露。免疫捕获RT PCR发现,8C11同样可以显著增强8H3对天然HEV病毒的捕获能力,提示这种结合诱导的衣壳蛋白空间构象改变在天然HEV病毒颗粒上同样存在

戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体的相互作用结构域

为了探讨戊型肝炎病毒衣壳蛋白同源二聚体形成的关键区域和相互作用结构域 ,以及二聚体形成与主要天然中和表位的形成之间的关系 ,通过末端缺失、定点突变技术研究戊型肝炎病毒 (HEV)ORF2的aa394_aa6 0 6片段NE2的聚合现象 ,发现其C端的aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区是该片段同源聚合的核心区域 ,提高该区域氨基酸的亲水性将妨碍聚合现象的发生 ;半胱氨酸化学交联实验表明NE2形成同源二聚体时 ,aa5 97在空间位置上相接近 ,处于可生成化学键的距离 ,提示所处区域为疏水聚合的作用结构域 ;通过Blast程序估算核心区域的天然突变率 ,发现其疏水性高度保守 ;N端缺失实验表明 ,至少 6 5个氨基酸既不影响同源聚合也不直接参与主要的天然中和表位的形成 ,但可协助中和表位构象的形成 ,而这种协助作用可被ORF2的末端肽段所代替。aa5 97_aa6 0 2 (AVAVLA)疏水区为戊肝病毒衣壳组装的第一步骤的核心区域 ,并与重要的天然中和表位的形成直接相关 ,从而为戊肝病毒疫苗的研究提供更详细的信息

戊型肝炎诊断中血清学及核酸检测意义的研究

目的 利用恒河猴感染模型评估血清学检测和核酸检测在戊型肝炎诊断中的临床意义。 方法对86只戊型肝炎病毒(HEV)实验感染猴的系列血清和粪便标本,用反转录聚合酶链反应方法进行病毒学检测,用4种酶联免疫吸附抗体检测试剂(E2-IgM,E2-IgG,GL-IgG和YES-IgG)进行血清学检测。 结果 感染猴均产生E2-IgG抗体,除1只感染猴未检出粪便排毒和E2—IgM外,其余感染猴均出现粪便排毒和E2-IgM阳转。GL-IgG和YES-IgG的阳转率较低,而且与感染剂量相关。急性肝炎主要开始于感染后3～7周内。病毒学指标在潜伏早期即已出现,较疾病的发生约早2周,并在急性期迅速下降。E2-IgM在发病时已有约2/3阳转,并在发病后10周内完全转阴。E2—IgG几乎与E2—IgM同时阳转,在所有感染猴中持续存在,直至86周后仍无阴转。GL-IgG和YES-IgG抗体较E2抗体晚约1周,在感染后20周内已有过半数转阴。结论 E2-IgM是一个良好的戊型肝炎急性感染诊断指标,E2-IgG是一个良好的戊型肝炎既往感染诊断指标,GL-IgG和YES-IgG抗体的阳转或双份血清滴度升高可以作为辅助诊断指标,病毒核酸检测仅在发病的极早期具有诊断价值

毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒

在毕赤酵母分泌表达嵌合有HEV受体相关表位12A10的HBcAg蛋白,经甲醇诱导后的培养液上清通过切向流浓缩、更换缓冲液后,进行疏水层析纯化.CsCl等密度梯度离心测得分泌的重组颗粒的密度为1.32 g/mL.透射电镜观察显示,纯化的重组颗粒为均一的直径30 nm左右的空心颗粒.小鼠免疫实验表明,纯化颗粒免疫8周后鼠血清中的特异性12A10抗体滴度可达到1.6×105,并且重组颗粒较好地呈递了HEV受体相关的非免疫优势表位.本文的结果为毕赤酵母胞外分泌表达其它大尺度的重组蛋白颗粒提供了参考,为研究携带表位多肽的疫苗载体提供了范例

戊型肝炎病毒中和性单克隆抗体的鉴定

阻断实验发现,用戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白重组抗原制备的8株抗HEV单克隆抗体(mAb),分别识别3个构象表位和2个线性表位。用抗体捕获反转录PCR方法证实,其中识别2个构象表位的3个mAb可以直接捕获HEV颗粒,表明这2个表位位于HEV颗粒的外表面。识别这两个表位的mAb8C11和8H3均可中和HEV对恒河猴的致病性和感染性。mAb8C11缩短排毒时间的效应较明显,而mAb8H3延迟机体抗HEV抗体阳转时间的效应较明显。二者的中和效应具有较明显的协同作用。中和单抗8C11、8H3对戊肝不同感染时期的血清均有显著阻断作用,Fab片段的阻断作用与完整抗体类似,表明这两个mAb对应的中和表位是HEV体液免疫应答的优势表位

Research and Implementation of Web Content Management in Portals

门户通过对信息的集成为用户提供了访问丰富信息资源的统一平台。随着门户的广泛使用，仅仅提供各种信息的访问入口已经不能满足使用需求，需要对门户中的信息进行有效的管理，以降低门户网站的维护费用，使门户信息可以及时准确地供用户访问。 作为一种基于B/S结构的系统，门户以Web的方式提供信息供用户访问。门户中的信息资源可统称为Web内容。Web内容具有层次性、自述性和动态可变性，不像关系数据库中的数据那样具有严格的模型描述。所以Web内容具有一定的结构，但非完全结构化的数据。半结构化是Web内容的最大特点。对Web内容的管理包括内容的创建，持久化存储，审核和发布，内容的呈现，以及安全访问控制等方面。 本文对门户中的Web内容管理技术进行研究，主要侧重于四个方面：在对Web内容特征进行分析的基础上，提出Web内容的“类型－内容－呈现”三层结构模型，将内容的结构、内容本身和内容的呈现进行分离；针对Web内容的半结构化特点，采取基于XML的方式对Web内容进行持久化存储；将内容的呈现风格独立出来作为模板，基于该模板，并充分利用门户中提供的Portlet和Portal页的呈现机制，对Web内容进行呈现；采用基于角色和组结构相结合的方法，对Web内容进行安全访问控制，权限以角色为单位授予组，便于权限的统一管理。以上的Web内容管理技术已经被应用于门户中间件OncePortal中，并在相关的功能模块中进行了实现。Through information integration, Portal provides a unified platform for users to access rich information resources. With the widespread use of Portal, simply providing the visit entrance can not meet the demand. Effective management is needed, so that the information in Portal can be timely and accurately accessed and the maintenance costs can be reduced. Portal is a system of B/S structure. The information provided by Portal is accessed through the web, which can be collectively referred to as Web Content. Web Content is layered, self-describing and dynamic variational. It’s not like the data in relational database, which have a rigid structure. So the Web Content is structured, but not fully structured. To be semi-structured is the most important feature of Web Content. The management of Web Content includes content creation, durable storage, auditing, publishing, content presentation, security access control and so on. In this paper, we research on the technology of Web Content Management in Portal, and mainly focus on four aspects. First, based on the analysis of Web Content, we present a “type-content-presentation” model for Web Content which makes the content type, content itself and content presentation separately. Second, as the Web Content is semi-structured, XML is used for durable storage. Third, the presentation manner is achieved by means of templates. Using the templates and the presentation mechanism provided by Portal, the Web Content is presented in Portlets and Portal Pages. Fourth, the security access control of Web Content is based on roles and groups. Permissions are granted to groups through roles, so that unified permission management can be achieved. The technologies all above have been applied to OncePortal, and implemented in the related components