Kratkotrajno očuvanje sperme potočne pastrmke (salmo trutta macrostigma): delovanje ekstendera na pokretljivost

Cilj eksperimenta je bila procena spermatoloških parametara kratkotrajno čuvane sperme potočne pastrmke (Salmo trutta macrostigma) korišćenjem različitih ekstendera. Mleč je uzorkovan od odraslih mužjaka istiskanjem rukom, bez anestezije. Po određivanju najvažnijih karakteristika sperme (volumen, pokretljivost, trajanje pokretljivosti, gustina, pH) uzorci sperme koji su pokazali >80 pokretljivosti su prikupljeni i razblaženi u odnosu 1:3 sa tri različita ekstendera. Razblažena sperma je čuvana 72 sata na 4°C. Tokom čuvanja na svaka 24 h je procenjivan motilitet spermatozoida (%). U zaključku, rezultati studije su pokazali da se ekstender I pokazao boljim od druga 2 za kratkotrajno očuvanje sperme potočne pastrmke

Dosage du plomb et du cadmium dans le sperme des sujets consultant pour infertilité masculine dans la ville de Cotonou

La diminution de la concentration des paramètres d’appréciation du sperme a soulevé le problème de la fertilité des hommes. La pollution de l’environnement est incriminée en grande partie dans cette infertilité. Dans la ville de Cotonou (BENIN), nous avons recherché au cours de la présente étude les effets du plomb et du cadmium sur la fertilité masculine. Ces métaux lourds toxiques n’ont aucune utilité pour l’organisme et perturbent le système de reproduction entrainant une infertilité du couple. Dans le cadre de cette étude, nous avons étudié en deux phases le sperme de 27 sujets qui souffrent d’une infertilité masculine dans la ville de Cotonou. La première phase a consisté à faire le bilan de l’infertilité masculine sur le sperme des 27 sujets qui ont fait l’objet de notre étude. Quant à la seconde phase, nous avons dosé par Spectrophotométrie d’Absorption Atomique le plomb et le cadmium dans 10 échantillons de sperme de volume supérieur à 2 g. Les résultats ont montré que 7 des 10 échantillons de sperme ont accumulé le cadmium à des concentrations différentes. Par contre, les teneurs en plomb des échantillons de sperme étaient inférieures à la limite de détection de l’appareil pour le plomb. Mais aucune relation significative n’a pu être démontrée entre les teneurs en cadmium et les anomalies observées. Toutefois, on peut soupçonner que la présence de cadmium dans le sperme, même à un taux infirme, serait responsable des Anomalies observées.Mots clés: Fertilité, Plomb, Cadmium, Spermatozoïde

Rôle des leucocytes infectés du sperme dans la transmission muqueuse du VIH : modèle expérimental de l’infection par le SIVmac251 de Macaca fascicularis

Human Immunodeficiency Virus (HIV) infection mostly spreads by the mucosal route: sexual transmission is the dominant mode of transmission, responsible for between 85% and 90% of cases of infection worldwide. These epidemiological data indicate that semen is one of the major sources of HIV-1 transmission. Semen, like other bodily secretions involved in HIV sexual transmission, contains the virus as two forms: cell-free viral particles and cell-associated virus, mostly in infected leukocytes. Although cell-to-cell HIV transmission has been extensively described as more efficient, rapid and resistant to host immune responses, very few studies have investigated the role in vivo of infected leukocytes in virus mucosal transmission. One such study has been recently conducted in our lab, and demonstrated that SIV-infected splenocytes are able to transmit infection to female macaques after vaginal exposure. However, all these studies used immune cells from peripheral blood or lymphoid tissues, such as spleen, and none have investigated the capacity of infected leukocytes in semen to transmit the infection in vivo. Indeed, nature, phenotype and infectivity of HIV associated with semen leukocytes may be different from that of HIV from other sources.Therefore, the objectives of this work are, first, to study of semen leukocytes and their dynamics during SIVmac251 infection in detail, then to investigate seminal factors that may influence semen infectiousness, and finally to test semen leukocyte infectivity in vitro and in vivo, using a model of mucosal exposure in cynomolgus macaques.Macaque semen contains all the target cells for HIV/SIV: CD4+ T cells, macrophages and dendritic cells in lower proportions. Semen CD4+ T cells and macrophages display an activation, differenciation and expression of migration markers profile which is typical of mucosal leucocytes. SIV infection induces significant changes in their phenotype and dynamics. Both cell types can be productively infected and are found in the semen at all stages of infection. These observations suggest that semen CD4+ T cells and macrophages may be able to transmit infection after mucosal exposure.If the role of semen infected leukocytes in HIV/SIV mucosal transmission is confirmed in vivo, this mechanism will be important to consider for further preventive strategies design, like microbicides.Aujourd’hui, plus de 80% des nouvelles infections par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH) se produisent au cours d’un rapport sexuel, avec une transmission du virus par voie muqueuse. Le sperme constitue donc une source majeure de virus à l’échelle mondiale. Le sperme d’hommes infectés par le VIH contient le virus sous deux formes : des particules virales libres et des cellules infectées, principalement des leucocytes.Plusieurs hypothèses ont été proposées afin d’expliquer le passage du virus à travers la barrière muqueuse, qu’il s’agisse d’une muqueuse génitale (cervico-vaginale, pénienne ou urétrale) ou intestinale (muqueuse anale ou rectale). Toutefois, une grande majorité des études qui ont été menées jusqu’à présent se sont concentrées sur le rôle des particules virales libres, et celui des cellules infectées demeure mal compris. Une étude menée dans notre laboratoire a montré que des leucocytes infectés par le virus de l’immunodéficience simienne (VIS) sont capables de transmettre l’infection après inoculation vaginale.Le projet de cette thèse est d’étudier le rôle des leucocytes infectés présents dans le sperme de macaque dans la transmission muqueuse du VIS/VIH. Ainsi, trois axes d’étude principaux ont été définis: 1) l’étude des leucocytes présents dans le sperme de macaque cynomolgus, et de l’influence que peut avoir l’infection par le VIS sur eux ; 2) l’identification des cellules immunitaires infectées présentes dans le sperme de macaque, et l’étude de leur dynamique au cours de l’infection par le VIS. ; 3) l’étude du pouvoir infectieux des deux principales cellules cibles pour le VIS/VIH : les lymphocytes CD4+ (LT CD4+) et les macrophages, in vitro et in vivo, après inoculation rectale et vaginale à des macaques cynomolgus.Le sperme de macaque contient toutes les cellules cibles du VIS/VIH : des lymphocytes T CD4+ (LTCD4+), des macrophages et des cellules dendritiques dans une moindre proportion). Les LTCD4+ et les macrophages du sperme présentent un phénotype d’activation, de différenciation et d’expression de marqueurs de migration typique des leucocytes résidant dans les tissus muqueux. L’infection par le VIS induit des changements significatifs dans leur phénotype et leur dynamique. Ces deux types cellulaires peuvent être infectés de façon productive et sont présents dans le sperme à tous les stades de l’infection. Ces données suggèrent que les LTCD4+ et les macrophages du sperme seraient capables de transmettre l’infection par voie muqueuse.Si le rôle des leucocytes infectés du sperme est confirmé in vivo, il sera important à l’avenir de prendre en compte ce mécanisme de transmission dans le développement de nouvelles stratégies préventives de l’infection par le VIH, notamment les microbicides

Influence d'une infection expérimentale à Trypanosoma congolense sur la fonction sexuelle des béliers Djallonké et Sahéliens en zone subhumide

Influence of an experimental Trypanosoma congolense infection on the reproductive function of Djallonké and Sahelian rams in subhumid zone. To measure the effect of African animal trypanosomosis (AAT) on male reproductive function, eight 18-24 month old Djallonké (ID; 31.2 ± 2.95 kg) and Sahelian (IS; 41.7 ± 4.64 kg) rams were infected with 104 Trypanosoma congolense. Eight other Djallonké (CD) and Sahelian (CS) rams with similar bodyweight and ages were used as uninfected controls. Four weeks after infection, ID and IS were treated with a trypanocidal drug, while maintained under observation. The evolution of clinical parameters shows a higher aptitude of Djallonké than Sahelian to control the effects of infection. This interbreed difference in susceptibility to AAT was confirmed by the higher weight losses in IS (-31.3 g) when compared to ID (-12.8 g) as to CD and CS rams. The effect of a T. congolense infection consisted in a decreased libido in IS (33 s) when compared to ID (22.1 s) (P > 0.05). The results indicate a significant effect of breed on ejaculate volume (CS: 1.23 ml vs CD: 0.88 ml; P < 0.05). Otherwise, breed did not significantly affect the other spermatic parameters. CD sperm cells concentration (3,293.4 x 106.ml-1), total abnormality rate (15.3%), dead sperm cells rate (13.9%), mobile sperm cells rate (75.5%), individual (3.76) and mass motilities (3.94) did not differ (P > 0.05) from those of CS (respectively 3,481.7 x 106.ml-1; 17.3%; 12.4%; 74.9%; 3.77; 3.36). However, the later produced 26% more total sperm cells than CD (P > 0.05). The infection reduced ejaculate volume by 15.8 and 14.5%, (P > 0.05), production of total sperm cells by 18.2 and 13.3% (P > 0.05) and the rate of mobile sperm cells by 14.2 and 27.9% (P < 0.05) respectively for Djallonké and Sahelian rams. The results show a dysfunctional state of testicles due to the harmful effects of AAT infection, hence the increase in dead sperm cells by 69.8 and 74.3% (P > 0.05) and in the rate of total abnormal sperm cells by 23.6 and 24.1% (P > 0.05) respectively for ID and IS rams when compared respectively to CD and CS animals. Harmful effects often more pronounced in Sahelian breeds during this experiment could indicate a higher susceptibility of this breed to AAT in comparison with Djallonké. One Sahelian ram died two weeks post-infection and azoospermia was observed in another one six weeks after chemotherapy and the disappearance of parasites from the bloodstream