Parâmetros hemato-imunológicos na vieira Nodipecten nodosus em diferentes etapas do ciclo reprodutivo e submetida a uma dieta rica em carotenóides

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Aqüicultura.O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo básico do sistema imune da vieira Nodipecten nodosus e avaliar a modulação de alguns parâmetros hemato-imunológicos ao longo de seu ciclo reprodutivo e em relação a uma dieta rica no carotenóide astaxantina, como um suplemento anti-estresse. As vieiras foram agrupadas em: juvenis (J), adultos (A), sexualmente maduros (M) e recém desovados (D). Os dois últimos grupos foram também tratados com uma dieta rica em astaxantina (Ma e Da). Vários parâmetros hemato-imunológicos foram selecionados para avaliação dos diferentes grupos: hemogramas, produção de espécies reativas de oxigênio, atividades aglutinante, antimicrobiana e da enzima fenoloxidase (PO) e concentração de proteínas totais. Além do mais, foram caracterizados os hemócitos circulantes das vieiras, encontrando-se hemócitos hialinos e granulares, sendo estes últimos ricos em peptídeos antimicrobianos (defensinas e mitilinas). A atividade aglutinante do plasma também foi caracterizada e esta, mostrou-se específica para galactose e sialo-conjugados e parcialmente dependente de cálcio. De modo geral, os vários parâmetros avaliados mostraram um comportamento semelhante ao longo do ciclo reprodutivo das vieiras, havendo um amadurecimento do sistema imune dos juvenis (J) para adultos (A), e uma acentuada depleção deste sistema por ocasião da maturação gonádica (M), que tendeu a se recuperar após a desova (D). A dieta rica em astaxantina influenciou as reações imuno-oxidativas, reduzindo parcialmente o estresse reprodutivo sofrido pelas vieiras (Ma e Da)

Suscetibilidade do camarão-branco do Pacífico à infecção com Vibrio alginolyticus em diferentes saturações de oxigênio

Abstract: The present study aimed to evaluate the cumulative mortality, reactive oxygen species production (ROS) and total hemocyte counts (THC) of the marine shrimp Litopenaeus vannamei infected with Vibrio alginolyticus at different oxygen saturations. A total of 240 shrimp (10 ± 1.5g) were distributed into 16 tanks (60L), divided into two groups, infected and uninfected, which were subjected to 30 or 100% of saturation (in quadruplicate). During 72 hours after infection, daily hemolymph samples were collected for THC and ROS evaluation, and dead animals were removed and computed to assess cumulative mortality rates. Mortality was observed only in infected group, and was higher under 30% of saturation (97.2%) than 100% (77.8%), however, no significant differences were observed between THC and ROS production of infected and uninfected animals, under both saturations. Therefore, the results of this study suggested that hypoxia increases the susceptibility of the shrimps to vibrio infection, which may be not related to the modulation of THC and ROS production.Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a mortalidade acumulativa, a contagem total de hemócitos (CTH) e a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) de camarões Litopenaeus vannamei infectados com Vibrio alginolyticus e submetidos a diferentes saturações de oxigênio dissolvido. Para tanto, 240 camarões (10 ± 1,5g) foram distribuídos em 16 caixas plásticas (60L), divididos em quatro grupos, infectados e não infectados, submetidos a 30% ou 100% de saturação (em quadruplicata). Foram coletadas amostras de hemolinfa para avaliação da CTH e das EROs antes (0h) e depois (24h, 48h e 72h) da infecção, e estimada a mortalidade nesse período. Foi observada mortalidade apenas nos tratamentos com infecção, sendo maior com 30% de saturação (97,2%) do que 100% (77,8%), porém não foram constatadas diferenças significativas na CTH e nas EROs dos animais infectados e não infectados em ambas as saturações. Dessa forma, pode-se concluir que a hipóxia aumenta a susceptibilidade dos camarões à infecção bacteriana, porém, aparentemente, sem relação com a modulação da quantidade de hemócitos circulantes e do burst respiratório.

Impact of thermal fluctuation on the response of Pacific White Shrimp to infection with the White spot syndrome Virus: Impacto da flutuação térmica sobre a resposta do Camarão-Branco-do-Pacífico frente à infecção com o vírus da Mancha Branca

This study evaluated the effect of thermal fluctuation on the susceptibility of Pacific White Shrimp to infection with the White Spot Syndrome Virus (WSSV). The shrimps were divided into two treatments: infected and subjected to thermal fluctuation from 28°C to 18°C for 48 h and back to 28°C (TF); and infected and kept at a constant temperature of 28°C (CT)

MODULAÇÃO DOS HORMÔNIOS LEPTINA E GRELINA E SEUS RECEPTORES EM TILÁPIAS-DO-NILO SOB DUAS CONDIÇÕES, JEJUM E RECÉM ALIMENTADAS APÓS CULTIVO EXPERIMENTAL UTILIZANDO DIETAS SUPLEMENTADAS COM PROBIÓTICOS

Com a expansão na produção de tilápias-do-nilo, o contexto aquícola busca por alternativas que auxiliem na prevenção e combate a enfermidades. A décadas, probióticos vem sendo utilizados com a premissa de uma ótima colonização do trato gastrintestinal, colaborando para menor proliferação de microrganismos patogênicos e maior aproveitamento de nutrientes e atividade digestiva. O uso de Lactobacillus plantarum na dieta de tilápias-do-nilo revela benefícios no ganho de peso, eficiência alimentar, resposta imune e resistência a enfermidades. Paralelamente, mecanismos fisiológicos afetados pelos probióticos são influenciados pela ação dos hormônios grelina e leptina, como crescimento, ingestão alimentar, regulação do apetite, metabolismo energético e resposta imune. Neste sentido, o objetivo do trabalho foi avaliar a variação nos marcadores dos hormônios leptina e grelina no tecido hepático e intestinal de tilápias-do-nilo alimentadas com dietas suplementadas de L. plantarum, bem como avaliar efeitos da suplementação sobre o desempenho zootécnico e parâmetros microbiológicos intestinais dos peixes. Ao longo do cultivo experimental de 45 dias, foram utilizados 90 alevinos de tilápia-do-nilo, distribuídos em 10 caixas de polietileno (60L), com filtros biológicos individuais, aeração constante e controle de temperatura. Para a alimentação, as dietas foram preparadas seguindo os protocolos estabelecidos no laboratório, onde as dietas experimentais receberam um inóculo contendo meio de cultura e cepas probióticas L. plantarum, na proporção de 10% do peso da ração (v:g), atingindo um valor final de 1x107 UFC g de ração-1. Na dieta controle, foi adicionado apenas o meio de cultura estéril na mesma proporção. A cada 15 dias foram realizadas pesagens dos animais para a correção da alimentação e os parâmetros de qualidade de água avaliados foram: temperatura e oxigênio dissolvido diariamente; pH e amônia semanalmente; nitrato e alcalinidade no início e final do experimento, para a comprovação do adequado funcionamento dos filtros biológicos. Ao final do cultivo foram avaliados os parâmetros zootécnicos e coleta de amostras teciduais de fígado e intestino para análises de imuno-histoquímica e microbiológicas (apenas o intestino). Na coleta, os animais foram anestesiados com Eugenol® e sacrificados através de concussão medular. As amostras foram armazenadas nas condições ideais para a preservação morfológica e um pool foi realizado para posterior cultivo microbiológico e contagem de bactérias totais. O processamento histológico de rotina e os cortes teciduais foram submetidos a técnica de imuno-histoquímica, com anticorpos monoclonais recém adquiridos pelo grupo de pesquisa. Os resultados do estudo não mostraram diferenças significativas no desempenho zootécnico, porém, os animais que receberam dietas suplementadas apresentaram um ganho de peso numericamente maior quando comparados ao grupo controle. Os parâmetros de qualidade de água não apresentaram oscilações significativas ao longo do experimento, permanecendo nos níveis adequados para espécie. A contagem de bactérias Vibrio ssp. intestinais fora inferior nos animais suplementados, e a contagem de bactérias ácido-láticas fora maior nestes animais. As análises de imunohistoquímica não apresentaram marcações específicas em tecidos com o inóculo do anticorpo monoclonal, fazendo surgir uma nova incógnita quanto ao funcionamento de anticorpos policlonais neste intuito. A realização de novas análises fora impossibilitada devido as recomendações que determinaram o fechamento do campus

A SUPLEMENTAÇÃO DE LACTOBACILLUS PLANTARUM INATIVADO NA DIETA PODE MELHORAR O DESEMPENHO E A MICROBIOLOGIA DO TRATO DIGESTIVO DE TILÁPIAS-DO-NILO (OREOCHROMIS NILOTICUS)?

No Brasil, 75% da produção de pescados é oriunda da piscicultura continental, com destaque para a tilápia-do-nilo. Em 2019, esta espécie representou 57% da produção da piscicultura nacional e 71,21% da produção de Santa Catarina. No entanto, a tilapicultura apresenta desafios quanto a ocorrência de enfermidades, e o uso de probióticos tem constituído uma forma efetiva de prevenção, pois estes colonizam o trato gastrintestinal, evitando a colonização de microrganismos patogênicos, bem como aumentam a absorção de nutriente, a atividade digestiva e os índices zootécnicos. Entretanto, a adição de probióticos vivos nas dietas comerciais antes da extrusão inativa ou reduz sua viabilidade, e a adição pós-extrusão nas fazendas é laboriosa e de baixa precisão na dosagem. Neste sentido, o uso de probióticos inativados pode trazer diversas vantagens, principalmente na facilidade de uso, armazenamento e administração aos animais, pois podem ser adicionados nas dietas antes da extrusão. Assim, o presente trabalho objetivou avaliar o efeito do probiótico Lactobacillus plantarum inativado sobre o desempenho zootécnico e microbiologia do trato digestivo de tilápias-do-nilo. A cepa de L. plantarum foi isolada do trato intestinal de tilápias-do-nilo saudáveis. Para o preparo da dieta experimental, foi utilizada uma ração base contendo 32% de proteína bruta, que recebeu um inóculo (10% do peso da ração v:g) de meio de cultura com bactérias probióticas inativadas (1x107 UFC g-1 ração). As dietas controles receberam apenas o meio de cultura estéril, na mesma proporção. Para inativação, após cultivo em agar MRS durante 48h a 34°C, as cepas probióticas foram congeladas a -20°C durante 24h, em seguida submetidas ao choque térmico em banho maria a 60ºC por 5 minutos e, por fim, expostas a luz UV por 30 minutos. No experimento, foram utilizados 90 alevinos de tilápia-do-nilo, distribuídos em 10 caixas de polietileno (60L) e divididos em dois tratamentos (peixes alimentados com e sem suplementação) em quintuplicata. Os aquários estavam equipados com sistema de aeração, filtro biológico e termostatos para manutenção da temperatura constante (± 28°C). Ao longo do cultivo experimental (45 dias), os peixes foram alimentados, duas vezes ao dia, com 3% da biomassa, sendo realizadas biometrias para correção da alimentação a cada duas semanas. Foram avaliados os parâmetros zootécnicos (sobrevivência, ganho de peso e conversão alimentar) e determinada a contagem de bactérias ácido-lácticas no trato intestinal. Além disso, foram realizadas as análises dos parâmetros de qualidade de água: oxigênio dissolvido e temperatura diariamente; pH e amônia uma vez por semana; e concentração de nitrato e alcalinidade no início e final do experimento. Não foi observada influência da suplementação com L. plantarum inativado sobre o desempenho zootécnico e a contagem de bactérias patogênicas no trato digestivo de tilápias-do-nilo. No entanto, foi observado um incremento na contagem de bactérias ácido-láticas no trato digestivo dos animais suplementados. Desta forma, novos estudos devem ser realizados para compreender os mecanismos de estímulo do crescimento de bactérias ácido-láticas utilizando probióticos inativados, bem como avaliando novos métodos de inativação, dosagem utilizada na dieta e os efeitos sobre os parâmetros zootécnicos

IDENTIFICAÇÃO DE IMUNOMARCADORES HEPÁTICOS EM TILÁPIAS-DO-NILO ALIMENTADAS COM PROBIÓTICO

Este trabalho teve por objetivo quantificar a intensidade de marcadores celulares no tecido hepático de tilápias-do-nilo alimentadas com e sem adição do probiótico Lactobacillus plantarum. Os alevinos foram cultivados em sistema de recirculação e alimentados duas vezes ao dia. Após 30 dias de alimentação, os tratamentos com adição de L. plantarum apresentaram maior ganho de peso, comparado ao grupo controle. A intensidade da imunomarcação para os hormônios IGF-1 e Leptina foram significativamente menores nos tratamentos com relação ao grupo controle. Os resultados mostram que o probiótico reduziu os níveis hormonais, porém não afetou os níveis dos receptores no tecido hepático