Inquérito epidemiológico da infecção por Criptosporidium spp. em ovinos da região metropolitana do Recife e zona da mata de Pernambuco / Epidemiological survey of infection with criptoosporidium spp. in sheep from the metropolitan region of Recife and Pernambuco forest área

O presente estudo teve como objetivo verificar a taxa de infecção por Cryptosporidium spp. e analisar a influência do manejo higiênico-sanitário em ovinos de propriedades localizadas na Região Metropolitana do Recife e Zona da Mata de Pernambuco. Foram analisadas 194 amostras de fezes de ovinos de 9 propriedades, utilizando-se as técnicas de sedimentação em formol-éter e coloração segundo Kinyoun. A taxa de infecção e os fatores de risco ligados à higiene e manejo foram analisados através do teste  Qui-quadrado de Pearson e do teste Exato de Fisher, com nível de significância de 5%. Foi observada positividade em 11,29% (21/186) das amostras. O sistema de criação extensivo teve associação significativa com a doença e os cuidados relativos ao manejo podem ser determinantes para a disseminação e presença de oocistos nas fezes de ovinos. 

Molecular diagnosis of American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) in dogs from an endemic area in Pernambuco State, Brazil

A survey was carried out to detect American cutaneous leishmaniasis (ACL) among dogs in an area where a human outbreak had occurred in the state of Pernambuco, in northeastern Brazil. Domiciled dogs living in the district of Três Ladeiras, Igarassu were used in the present study. The following procedures were performed: The Polymerase Chain Reaction (PCR) (n = 126); the Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) (n = 80); and a parasitological examination to detect amastigote forms of Leishmania sp. in skin lesions (n = 43). Associations between the infection in animals and the clinical and epidemiological factors were analyzed using Fisher's exact test or the Pearson’s chi-squared test. In total, 46.8% (59/126) of the samples tested were PCRpositive. Although a higher frequency of positivity was detected among males (46.3 %) and animals aged between 3 and 4 years (50.0 %), no significant associations were recorded for these variables (p> 0.05). Similarly, the clinical signs and aspects related to the environment in which the animal lives did not differ significantly, but differences were recorded for the variable locality. In the IFAT, only 6.2% (5/80) of the dogs were positive and no amastigote forms of Leishmania sp. were detected

HISTOMORPHOMETRIC ANALYSIS IN KIDNEY TISSUE OF MICE TREATED WITH INDIGOFERA SUFFRUTICOSA MILL

Objective: To investigate by histomorphometry the effect of aqueous extract of Indigofera suffruticosa leaves on proximal convoluted tubules and renal corpuscles of mice with sarcoma 180.Methods: Male swiss albino mice (Mus musculus) with 60 days of age were divided into 3 groups of 6 animals: Group 1-sarcoma 180 treated with aqueous extract (50 mg/kg, intraperitoneally (i. p.)), Group 2-sarcoma 180 treated with saline solution (15 ml/kg, i. p.) and Group 3–without sarcoma 180 treated with saline (15 ml/kg, i. p.). After 48 hours of tumor implantation, the treatment was initiated during 7 days. Histomorphometric analysis of kidney tissue was performed using IMAGEJ software.Results: Antitumoral treatment with aqueous extract of I. suffruticosa leaves at a dose of 50 mg/kg has not caused mice renal tissue histological changes.Conclusion: After treatment with aqueous extract of leaves of I. suffruticosa, renal architecture was preserved, suggesting its safety use as an antitumor agent.Â

AVALIAÇÃO DE FATORES EPIDEMIOLÓGICOS E SANITÁRIOS ASSOCIADOS À INFECÇÃO POR Cryptosporidium spp. EM CÃES DOMICILIADOS

O gênero Cryptosporidium é composto por protozoários com grande capacidade de reprodução e disseminação. Sua transmissão pode ocorrer indiretamente pela ingestão de água e alimentos contaminados com oocistos viáveis ou diretamente entre animais, entre humanos ou entre animais e humanos. Em diversas partes do mundo, animais de companhia tem sido citados como fontes potenciais de infecção por Cryptosporidium spp. O presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. em cães domiciliados na cidade do Recife, estado de Pernambuco, Brasil, bem como a associação da infecção com dados epidemiológicos e sanitários. Foram analisadas 97 amostras de fezes de caninos domiciliados, utilizando-se as técnicas de centrífugo-sedimentação em formol-éter com posterior coloração pelo método de Kinyoun. A análise estatística foi realizada por meio dos testes Qui-quadrado de Pearson e Exato de Fisher, com nível de significância de 5,0%.  Detectou-se positividade de 31,9% (31/97), tratando-se do primeiro registro de ocorrência da infecção por Cryptosporidium spp. na espécie canina no nordeste brasileiro, verificando-se associação significativa entre a taxa de infecção e a assistência médica veterinária, vacinação recebida e o tipo de ambiente de criação dos cães. Palavras-chave: caninos; criptosporidiose; epidemiologia; zoonose

Infecção por enteroprotozoários zoonóticos em população de comunidades, Pernambuco-Brasil / Zoonotic enteroprotozoan infection in communitypopulation, Pernambuco-Brazil

Infecções causadas por enteroprotozoários representam um importante problema em saúde pública. Enteroprotozoários são responsáveis por infecções que acometem o intestino de seu hospedeiro com possível transmissão por animais ao homem. A transmissão ocorre, principalmente, por meio da via fecal-oral com a ingestão de água e alimentos contaminados. As condições socioeconômicas desfavoráveis são fatores que favorecem a presença de protozoários entéricos no Nordeste brasileiro. O presente trabalho objetivou estimar a frequência dos enteroprotozoários e analisar a associação entre a infecção por enteroprotozoários e as condições higiênico-sanitárias e sociodemográficas de comunidades do Recife, Goiana, Igarassu e Camaragibe - estado de Pernambuco, Brasil. Os indivíduos participantes foram convidados a assinar um termo de Consentimento e Livre Esclarecido. As amostras fecais foram submetidas a exames parasitológicos, utilizando as técnicas de Willis (flutuação simples), Hoffman (sedimentação espontânea), Faust (centrífugo-flutuação), kato-katz, sistema Coproplus e centrífugo-sedimentação em formol éter confeccionando-se três lâminas para cada amostra em cada tipo de exame realizado. No total de amostras fecais analisadas a positividade foi de 15,5%, com frequência de infectados significativamente maior para pessoas com renda até um salário mínimo, detectando-se predominantemente Isospora belli além de Entamoeba spp. e Giardia spp. Conclui-se que a infecção por enteroprotozoários está presente nas comunidades analisadas, associada à renda familiar dos indivíduos e favorecida por condições socioeconômicas desfavoráveis e condições higiênico-sanitárias inadequadas.

MOLECULAR DIAGNOSTIC OF HAEMONCHUS CONTORTUS RESISTANCE TO THE BENZIMIDAZOLE GROUP IN SHEEP AND GOATS IN THE STATE OF PERNAMBUCO, BRAZIL

Ovinos e caprinos sofrem grande prejuízo clínico provocados pela alta prevalência de parasitos gastrintestinais, principalmente pelo nematoda Haemonchus contortus. Este parasito causa alta morbidade e mortalidade, entretanto, o uso indiscriminado de fármacos para seu controle tem provocado a seleção de populações resistentes. O diagnóstico molecular da resistência ao grupo dos benzimidazóis (BZs) é muito importante para indicar estratégias substitutivas de manejo e controle. O objetivodeste estudo foi determinar pela primeira vez, a presença da mutação na posição F200Y do isotipo 1 do gene da beta-tubulina, em sete populações de H. contortus de ovinos e caprinos no estado de Pernambuco, Brasil. Amostras de DNA foram extraídas de 20 machos adultos, obtidos de animais naturalmente parasitados, em propriedades de Recife, Sairé, Camocim de São Félix, Gameleira, Moreno, Bonito e Serra Talhada. Os iniciadores forward: 5’ AAT GCT ACC CTT TCC GTC CAT C 3’ e reverse: 5’ CAA AAC CGGCA TGA AGA AG 3’ foram utilizados para a pesquisa da principal mutação no gene da beta-tubulina, para determinar a resistência ao grupo dos BZs. Os iniciadores NC1/ITS-2, forward: 5’ ACG TCT GGT TCA GGG TTG TT 3’ e reverse: 5’ TTA GTT TCT TTT CCT CCG CT 3’ foram usados para a confirmação de H. contortus. Um questionário foi utilizado para obtenção de informações sobre práticas de manejo, incluindo a frequência de uso dos BZs. As sequencias NC1/ITS-2 confirmaram a presença de H. contortus em todas as populações. A mutação F200Y responsável pela resistência (TTC/TAC) de H. contortus ao BZ, foi encontrada na amostra proveniente de Sairé, sendo que a proporção do códon TTC variou entre 55.6 a 85.7%. Relativo ao questionário, todos os produtores revelaram ausência de quarentena para os animais recém-adquiridos; alta frequência de aplicação de anti-helmínticos (60 em 60 dias); tratamento de todo o rebanho; estimativa visual do peso dos animais para cálculo da dosagem do medicamento; e alta rotação de antihelmínticos. Foi relatado ainda, a carência de assistência técnica especializada, sem exame rotineiro de fezes nos animais. Muito embora, todos estes fatores possam ser fundamentais para aumentar a pressão de seleção parasitária, não foi possível determinar qual deles poderia representar um ou mais fatores de risco, devido ao grande número de variáveis e o baixo número de respondentes. Esta é sem dúvida uma grande dificuldade para correlacionar os dados fenotípicos de eficácia (ex. TRCOF), com os marcadores genotípicos (ex. PCR) de resistência em helmintos. Foram incluídos os fatores de risco relatados por criadores de Pernambuco e sua influência nos processos de seleção anti-helmíntica, assim como estratégias para mitigar esta situação. Os dados apresentados são o primeiro registro molecular da mutação F200Y que confere resistência ao grupo dos BZs em pequenos ruminantes no estado de Pernambuco, Brasil. Sheep and goats suffer heavy losses due to the high prevalence of gastrointestinal nematodes, mainly from the nematode Haemonchus contortus. The parasite causes high morbidity and mortality, even though, the indiscriminate use of chemicals to control H. contortus has favored the selection of multidrug resistance parasites. Molecular diagnosis of resistance to the benzimidazole (BZs) group is important to indicate substitute strategies of control. The aim of this study was to determine the presence of the mutation at position F200Y of the beta-tubulin gene in seven populations of H. contortus from sheep and goats’ farms from the state of Pernambuco, Brazil. Twenty adult H. contortus male worms were recovered for DNAextraction from naturally infected animals, from farms from Recife, Sairé, Camocim deSão Félix, Gameleira, Moreno, Bonito, and Serra Talhada. The primers forward: 5` AAT GCT TCC ACC CTT GTC CAT C 3’, and reverse: 5’ CAA CAA CGG GCA TGA AGA AG 3’ were used to search for the main codon (F200Y) of the beta-tubulin gene to determine BZ resistance. The NC1/ITS-2 forward: 5’ ACG TCT GGT TCA GGG GTT TT 3’ and reverse: 5’ TTA TCT GTT TTT CCT GCC CT 3’ primers were used for confirming H. contortus species. A questionnaire was applied to obtain information on management practices, including the frequency of BZs use. The sequences from the NC1/ITS-2 confirmed the presence of H. contortus from all samples. The F200Y mutation responsible for BZ resistance (TTC/TAC) in H. contortus was found only in the samples from Sairé, as the TTC codon varied from 55.6 to 85.7%. In relation to the questionnaire, producers revealed the absence of quarantine for newly arrived animals; high drug treatment frequency (60-days interval); treatment of the whole flock; the visual estimation of the weight of the animals for dose determination; and high drug rotation. It was also mentioned the lack of veterinary assistance with no use of fecal exams. Even though, all these factors may be essential to increase parasite selection pressure, it was not possible to determine which of those showed a higher risk due to the high number of variables and the small number of participants. This is without any doubt one of the great difficulties to correlate phenotypic drug efficacy data (ex. FECRT) and genotypic-related (ex. PCR) resistance markers in helminths. We have included some risk factors reported by the farmers from Pernambuco and their influences in the process of drug selection, as well as a few strategies to mitigate this situation. The present report constitutes the first record of a molecular diagnosis of the mutation F200Y that confers resistance to the BZ group in ruminants in the state of Pernambuco, Brazil

Cryptosporidium spp. em população de comuninades, PE- Brasil / Cryptosporidium spp. in a community population, PE- Brazil

Cryptosporidium spp. é um protozoário gastrointestinal que pode infectar as microvilosidades das células do intestino de mais de 150 espécies de vertebrados. Muitos fatores são determinantes para que os oocistos se disseminem e o risco da infecção depende da dose, virulência e infectividade dos mesmos, além do grau de susceptibilidade do hospedeiro. A transmissão ocorre pela ingestão de oocistos que são eliminados nas fezes em sua forma infectante. Água, alimentos contaminados e animais infectados são principal fonte de transmissão de Cryptosporidium spp. Esta enfermidade é considerada uma zoonose de grande importância em saúde pública devido à ocorrência de casos assintomáticos. Quando o sistema imunológico está comprometido os indivíduos podem vir a óbito. No presente estudo objetivou-se avaliar a freqüência de infecção por Cryptosporidium spp. e sua associação com as condições higiênico-sanitárias da população humana de comunidades dos municípios de Recife, Camaragibe, Goiana e Igarassu - PE, Brasil. As pessoas foram convidadas a assinar um termo de Consentimento Livre Esclarecido (TCLE), confirmando sua participação na pesquisa, selecionados por amostragem não probabilística. As amostras fecais foram processadas utilizando a técnica de centrífugo-flutuação em formol éter e cada lâmina foi corada segundo a Técnica de Ziehl-Neelsen modificado (Kinyoun). Foram realizadas três repetições para cada amostra. Da amostragem foi obtida uma positividade de 17,12% (62/362) para Cryptosporidium spp.nas onze comunidades das quatros cidades

Aspectos socioeconômicos e higiênico-sanitários da infecção por Schistosoma mansoni em comunidades, PE- Brasil / Socio-economic and hygiene-sanitary aspects of schistosoma mansoni infection in communities, PE- Brazil

A esquistossomose, causada pelo trematódeo Schistosoma mansoni no Brasil, assume caráter de doença infecciosa com quadros agudos e crônicos, estando a instalação da doença intimamente ligada à persistência dos focos de transmissão, às precárias condições socioambientais e à presença do vetor Biomphalaria glabrata. Em Pernambuco, embora a doença predomine em áreas rurais, casos em áreas litorâneas vêm sendo registrados, principalmente onde existem problemas de saneamento básico. Objetivou-se com este estudo, avaliar a frequência da infecção por S. mansoni e analisar aspectos socioeconômicos e higiênico-sanitários ligados ao parasitismo em comunidades da Região Metropolitana de Recife - PE. O estudo foi desenvolvido em 14 comunidades nos municípios de Camaragibe, Goiana, Recife e Igarassu, com anuência das Secretárias de Saúde de cada município.  Para o diagnóstico da doença, utilizaram-se as técnicas de Kato-katz, sistema Coprotest®, Hoffmann, Faust e Willis. Aplicou-se um questionário para a obtenção de dados epidemiológicos. Obteve-se positividade de 7,3%, sendo as variáveis de associação significativa a cidade e comunidade de residência dos indivíduos, a faixa etária, número de pessoas na residência, tipo de habitação, e, principalmente, aquelas ligadas à obtenção, uso e contato com a água

EVALUATION OF EPIDEMIOLOGICAL AND HEALTH FACTORS ASSOCIATED WITH INFECTION BY Cryptosporidium spp. IN DOMICILED DOGS

The genus Cryptosporidium consists of protozoa with large reproduction and dissemination capacity. Transmission can occur indirectly by ingestion of water contaminated with viable oocysts or directly between animals, between humans, or between animals and human. In various parts of the world, pets have been cited as potential sources of infection by Cryptosporidium spp. The present study aimed to evaluate the occurrence of natural Cryptosporidium spp. infection in domestic dogs in the city of Recife, Pernambuco State, Brazil, as well as the association of the infection with epidemiological and sanitary data. Stool samples from 97 dogs were analyzed using the techniques of centrifugal sedimentation in formalin-ether with subsequent staining by Kinyoun method. Statistical analysis was performed using the chi-square test of Pearson and Fisher Exact test, with significance level of 5.0%. Positivity was detected in 31.9% (31/97) of samples. It was the first record of infection by Cryptosporidium spp. in dogs from northeastern Brazil. We verified significant association between the rate of infection and veterinary medical care, vaccination, and type of environment in which the dogs were kept. Keywords: canine; cryptosporidiosis; epidemiology; zoonosis