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Allosteric activation unveils protein-mass modulation of ATP phosphoribosyltransferase product release
Funding: This work was supported by the Biotechnology and Biological Sciences Research Council (BBSRC) [Grant BB/M010996/1] via an EASTBIO Doctoral Training Partnership studentship to B.J.R.Heavy-isotope substitution into enzymes slows down bond vibrations and may alter transition-state barrier crossing probability if this is coupled to fast protein motions. ATP phosphoribosyltransferase from Acinetobacter baumannii is a multi-protein complex where the regulatory protein HisZ allosterically enhances catalysis by the catalytic protein HisGS. This is accompanied by a shift in rate-limiting step from chemistry to product release. Here we report that isotope-labelling of HisGS has no effect on the nonactivated reaction, which involves negative activation heat capacity, while HisZ-activated HisGS catalytic rate decreases in a strictly mass-dependent fashion across five different HisGS masses, at low temperatures. Surprisingly, the effect is not linked to the chemical step, but to fast motions governing product release in the activated enzyme. Disruption of a specific enzyme-product interaction abolishes the isotope effects. Results highlight how altered protein mass perturbs allosterically modulated thermal motions relevant to the catalytic cycle beyond the chemical step.Peer reviewe
Estudo do nÃvel de desenvolvimento da coordenação motora da população escolar (6 a 10 anos de idade) da região autónoma dos Açores
Os propósitos da presente investigação foram: (1) caracterizar o estado de desenvolvimento da coordenação motora ao longo dos quatro anos do 1º ciclo do ensino básico (1CEB); (2) mapear as diferenças entre as crianças dos dois sexos; e (3)
identificar a presença de insuficiência de desenvolvimento coordenativo. A amostra foi constituÃda por 3742 crianças de ambos os sexos dos 6 aos 10 anos de idade a frequentar o 1CEB na Região Autónoma dos Açores. A coordenação foi avaliada através
da bateria de testes de coordenação corporal
(Körperkoordinationstest für Kinder - KTK) que é composta por quatro testes: (1) equilÃbrio em marcha à retaguarda (ER);(2) saltos laterais (SL);(3)saltos monopedais (SM); e(4)transposição lateral (TL). A partir do resultado de cada teste, e
através da utilização das tabelas de valores normativos fornecidas pelo manual, obtém-se um quociente motor (QM). Fez-se a análise teste a teste e ao QM. Para além das medidas descritivas (média e desvio-padrão), recorreu-se à ANOVA factorial para identificar diferenças entre os sexos ao longo da idade, e utilizou-se a função discriminante para testar a presença de
perfis multivariados de coordenação motora. Verificou-se que, em ambos os sexos e em todas as provas da bateria, ocorre um
incremento significativo dos valores médios de cada teste ao longo da idade, tendo os meninos valores médios superiores aos das meninas em todos os intervalos etários em todos os itens da bateria, com a excepção dos SL. Os valores médios do desempenho nas quatro provas são inferiores aos valores
médios obtidos noutros estudos realizados, quer em Portugal, quer no estrangeiro. Contrariamente ao esperado, os valores
médios do QM decrescem com a idade. A generalidade das crianças, em ambos os sexos e nos diferentes intervalos etários,
situa-se no intervalo de insuficiência coordenativa e de perturbações de coordenação. Constata-se, em ambos os sexos, a tendência generalizada para as crianças de uma idade mostrarem perfis de coordenação motora inferiores àqueles que são esperados
para a sua idade. Tal circunstância revela uma forte insuficiência em aspectos do desenvolvimento coordenativo nas diferentes idades
A importância do estudo do tracking (estabilidade e previsão) em delineamentos longitudinais: um estudo aplicado à epidemiologia da actividade fÃsica e à performance desportivo-motora
Esta pesquisa pretende demonstrar a importância do estudo do tracking em investigação epidemiológica e da performance desportivo-motora. A partir de dois conjuntos de dados é apresentado o problema, a sua relevância e essência analÃtica. No primeiro estuda-se o tracking da participação em actividade fÃsica
(i.e., práticas desportivas generalizadas) a partir de informação proveniente de 588 sujeitos seguidos longitudinalmente dos
12.7 aos 17.7 anos. Foi utilizado um modelo quasi-simplex, que evidenciou a elevada estabilidade da prática desportiva,
bem como o valor moderado a elevado das trajectórias interindividuais. No segundo estudo recorremos a informação proveniente
de 12 saltadores em comprimento, a partir da sua melhor marca em seis anos consecutivos. Recorreu-se ao conceito de canalização a partir dos procedimentos propostos por
Cohen, e Foulkes e Davies. Os resultados salientaram um fraca estabilidade da performance no tempo, bem como o seu carácter
não-linear. Em conclusão há que salientar três aspectos fundamentais: o primeiro radica na necessidade do uso de novos procedimentos para pesquisar o fenómeno do tracking; o segundo sugere a forte estabilidade e tracking moderado a elevado na
prática desportiva ao longo da adolescência; o terceiro salienta a fraca canalização da performance dos saltadores, revelando a ausência de estabilidade
Articulação entre alfabetização cientÃfica, resolução de problemas e pesquisa orientada e mapas conceituais como recursos didáticos qualificadores ao ensino (de ciências)
O presente artigo trata de metodologias educacionais, cunhadas inicialmente como
recursos didáticos, na perspectiva de sua constituição como elementos integrantes de
estratégias facilitadoras aos processos relacionais e circunscritos de ensino-aprendizagem.
Tais elementos passam a ser defendidos no decorrer do texto como técnicas e/ou tecnologias
de ensino. Trata-se, portanto, de uma abordagem teórica embasada por diversas literaturas do
gênero, sob uma perspectiva de articulação daquelas como fins de composição de um plano de
ensino qualificado para o ensino (de ciências).This article deals with educational methodologies, initially minted as teaching
resources in view of its constitution as integral elements of facilitating strategies to relational
processes and teaching-learning circumscribed. These elements come to be defended
throughout the text as technical and/or teaching technologies. It is, therefore, a theoretical
approach grounded by various literatures of the genre, from the perspective of those as joint
composition purposes of a qualified teaching plan for education (of science).Fundos Nacionais através da FCT (Fundação para a Ciência e a Tecnologia) e cofinanciado pelo Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) através do COMPETE 2020 – Programa Operacional Competitividade e Internacionalização (POCI) no âmbito do CIEC (Centro de Investigação em Estudos da Criança, da Universidade do Minho) com a referência POCI-01-0145-FEDER-007562CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, IE, UMinho (UI 317 da FCT), Portugalinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio
Heterogeneidade nos nÃveis de actividade fÃsica de crianças dos 6 aos 12 anos de idade. Um estudo em gémeos.
Esta pesquisa pretende estabelecer a importância dos efeitos genéticos e do envolvimento na heterogeneidade dos valores de actividade fÃsica, em crianças com idades compreendidas entre os 6 e os 12 anos de idade. Com base numa amostra de 101 pares de gémeos monozigóticos e dizigóticos, foram estimadas as magnitudes das variâncias devidas a efeitos genéticos e do envolvimento nos nÃveis de actividade fÃsica, avaliados a partir do questionário de Godin e Shephard (11), depois de removidos
os efeitos das covariáveis idade e sexo. Recorreu-se aos procedimentos habituais em estudos gemelares, como sejam o cálculo da correlação intra-classe (t) e da heritabilidade (h2). Foi utilizado o software Systat 10. Os principais resultados e conclusões sugerem: (1) o valor baixo de h2 na actividade fÃsica ligeira (34%) e intensa (24%), implicando que cerca de 1/4 das diferenças inter-individuais nos nÃveis de actividade fÃsica sejam devidas a efeitos genéticos; (2) o valor elevado da influência do envolvimento comum (familiar, amigos, professores e outros significantes), i.e., de 66% a 82%, e que remete para os pais,
amigos e professores (de Educação FÃsica e outros) um fortÃssimo papel pedagógico na implementação de hábitos moderados a intensos de actividade fÃsica e estilos de vida mais saudáveis
Effects Of Stress On Electron Emission From Nanostructured Carbon Materials
The electron field emission from a graphite like amorphous carbon film was investigated. Threshold fields as low as 8 V/νm were observed at an assisting energy of 400eV. The field emission characteristics of the films were explained in terms of the high sp2 concentration, and the high intrinsic compressive stress modifying the electronic band structure of the film/graphitic nanostructures.21417101714McKenzie, D.R., Muller, D., Pailthope, B.A., (1991) Phys. Rev. Lett., 67, p. 773Schwan, J., Ulrich, S., Theel, T., Roth, H., Ehrhardt, H., Becker, P., Silva, S.R.P., (1997) J. Appl. Phys., 82, p. 6024Lifshitz, Y., Kasi, S.R., Rabalais, J.W., Eckstein, W., (1990) Phys. Rev. B, 41, p. 10468Robertson, J., (1993) Diamond Relat. Mater., 2, p. 984Lacerda, R.G., Hammer, P., Lepienski, C.M., Alvarez, F., Marques, F.C., (2001) J. Vac. Sci. Technol. A, 19, p. 971Bhattacharyya, S., Subramanyam, S.V., (1997) Appl. Phys. Lett., 71, p. 632Kilic, C., Mehrez, H., Ciraci, S., (1998) Phys. Rev. B, 58, p. 7872Uher, C., Hockey, R.L., Ben-Jacob, E., (1987) Phys. Rev. B, 35, p. 4483Satyanarayana, B.S., Hart, A., Milne, W.I., Robertson, J., (1997) Appl. Phys. Lett., 71, p. 1430Carey, J.D., Forrest, R.D., Silva, S.R.P., (2001) Appl. Phys. Lett., 78, p. 2339Illie, A., Ferrari, C., Yagi, T., Robertson, J., (2000) Appl. Phys. Lett., 76, p. 2627De Lima M.M., Jr., Lacerda, R.G., Vilcarromero, J., Marques, F.C., (1999) J. Appl. Phys., 86, p. 4936Hoffman, R.W., (1966) Physics of Thin Films, 3, pp. 211-273. , edited by G. Hass and R. E. Thun (Academic, New YorkCarey, J.D., Silva, S.R.P., (2001) Appl. Phys. Lett., 78, p. 347Hammer, P., Victoria, N.M., Alvarez, F., (2000) J. Vac. Sci. Technol. A, 18, p. 2277Lifshitz, Y., Lempert, G.D., Grossman, E., Avigal, L., Uzan-Saguy, C., Kalish, R., Khlik, J., Rabalais, J.W., (1995) Diamond Relat. Mater., 4, p. 318Fallon, P.J., Veerasamy, V.S., Davis, C.A., Robertson, J., Amaratunga, G.A.J., Milne, W.I., Koskinen, J., (1993) Phys. Rev. B, 48, p. 4777Ahuja, R., Auluck, S., Trygg, J., Wills, J.M., Eriksson, O., Johansson, B., (1995) Phys. Rev. B, 51, p. 4813Reynolds, W.N., Goggin, P.R., (1960) Philos. Mag., 5, p. 1049Lynch, R.W., Drickamer, H.G., (1966) J. Chem. Phys., 44, p. 181Chaumet, P.C., Dufour, J.P., (1998) J. Electrost., 43, p. 145Hryd, R., Charlier, A., McRae, E., (1997) Phys. Rev. B, 55, p. 682
Dynamics of Torsional Vibration Damper (TVD) pulley, implementation of a rubber elastomeric behavior, simulations and experiments
International audienceIn this work, the Torsional Vibration Damper (TVD) rubber ring viscoelastic-material properties are determined based on Dynamical Mechanical Analysis (DMA) measurements and master curves reconstructions using thermo-simplicity principle. The elastomeric constitutive behavior is then implemented in the torsional vibration damper's equation of motion and the frequency response is simulated so that enhanced physical representation of the TVD dynamics can be achieved. Major differences in the TVD frequency response are highlighted and analyzed whether or not the viscoelastic material properties (elasticity modulus and damping) are considered constant or frequency and temperature dependent
Human 2'-deoxynucleoside 5'-phosphate N-hydrolase 1 : the catalytic roles of Tyr24 and Asp80
The human enzyme 2′-deoxynucleoside 5′-phosphate N-hydrolase 1 (HsDNPH1) catalyses the hydrolysis of 5-hydroxymethyl-2′-deoxyuridine 5′-phosphate to generate 5-hydroxymethyluracil and 2-deoxyribose-5-phosphate via a covalent 5-phospho-2-deoxyribosylated enzyme intermediate. HsDNPH1 is a promising target for inhibitor development towards anticancer drugs. Here, site-directed mutagenesis of conserved active-site residues, followed by HPLC analysis of the reaction and steady-state kinetics are employed to reveal the importance of each of these residues in catalysis, and the reaction pH-dependence is perturbed by each mutation. Solvent deuterium isotope effects indicate no rate-limiting proton transfers. Crystal structures of D80N-HsDNPH1 in unliganded and substrate-bound states, and of unliganded D80A- and Y24F-HsDNPH1 offer atomic level insights into substrate binding and catalysis. The results reveal a network of hydrogen bonds involving the substrate and the E104-Y24-D80 catalytic triad and are consistent with a proposed mechanism whereby D80 is important for substrate positioning, for helping modulate E104 nucleophilicity, and as the general acid in the first half-reaction. Y24 positions E104 for catalysis and prevents a catalytically disruptive close contact between E104 and D80.Peer reviewe
Estabilidade e mudança nos nÃveis de actividade fÃsica. Uma revisão da literatura baseada na noção e valores do tracking
Esta revisão pretende efectuar uma abordagem aos conceitos de estabilidade e tracking, bem como
resumir os principais resultados de estudos longitudinais sobre estabilidade da actividade fÃsica. Faz-se a distinção
entre os diferentes tipos de estabilidade: estrutural, normativa ou da covariância, de nÃvel ou das médias, e
ipsativa. Aborda-se a problemática do tracking, da sua multiplicidade de significações e operacionalizações. Os
principais resultados sobre a estabilidade da actividade fÃsica salientam, que na generalidade, os seus valores
são baixos a moderados. Este quadro genérico coloca desafios à investigação de inúmeros pesquisadores,
desde epidemiologistas a professores de educação fÃsica.The main purposes of this paper is to review the concepts of stability and tracking, as well as the main
results from longitudinal studies focusing on physical activity. We explain the different meanings of stability:
structural, normative or covariance, level or means, and ipsative. We also look at tracking issues, its different
meanings and ways of computation. The main results from physical activity studies do show that, in general,
stability varies from low to moderate values. These results challenge researchers from different fields of study, from
epidemiologists to physical education teachers
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