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    Effets de l'apport en acides gras polyinsaturés Oméga 3 sous forme de phospholipides (étude chez le rat et sur modèle cellulaire)

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    De nombreuses études ont montré que l'augmentation de l'apport en acides gras polyinsaturés oméga 3 induit des effets bénéfiques sur de nombreuses pathologies cardiaques, neurologiques et inflammatoires. Nos travaux ont donc tenté de mieux appréhender les effets de la supplémentation en acides gras polyinsaturés oméga 3 et plus particulièrement en phospholipides riches en acide docosahexaénoïque (DHA, C22:6 3) sur le métabolisme des acides gras lors d'une étude in vivo chez le rat et sur la fonctionnalité cellulaire lors d'une étude in vitro sur un modèle cellulaire. L'apport de phospholipides riches en DHA à différentes doses à des rats induit une modification de la composition en acides gras des lipides sanguins et notamment une accrétion de la teneur en acide arachidonique (C20:4 6). Cette accrétion est corrélée négativement avec l'apport en acides gras polyinsaturés oméga 6 et positivement avec l'apport spécifique en DHA. L'effet de la supplémentation en DHA au niveau du métabolisme des acides gras semble être dose-dépendant avec une allure de courbe en cloche et peut être attribuable à la forme de vectorisation phospholipide. L'étude cellulaire montre que la variation de l'apport en acides gras polyinsaturés sous forme de phospholipides modifie les propriétés biophysiques des membranes en modulant la composition en acides gras des phospholipides et influe sur l'efficacité de certaines protéines membranaires. Cette étude montre également l'importance du rapport des acides gras 6/ 3 présents dans les phospholipides car ceux-ci peuvent devenir létaux quand l'apport en acides gras polyinsaturés oméga 3 est trop important. Ces études ont permis de montrer que l'effet observé lors d'une supplémentation en acides gras polyinsaturés oméga 3 peut être soit bénéfique soit néfaste en fonction de la dose d'acides gras polyinsaturés administrée, du vecteur utilisé et du rapport 6/ 3 présent dans les suppléments.Many studies have shown that the increase of omega 3 polyunsaturated fatty acids intake induces beneficial effects on various diseases such as cardiac, neurological and inflammatory diseases. Our work aims to better understand the effects of omega 3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) supplementation and in particular docosahexaenoic acid (C22:6 3) rich phospholipids supplementation on both fatty acid metabolism and cellular functionality. We showed by an in vivo study in rats that diet supplementation with DHA enriched phospholipids at various amounts results in a modification of the fatty acid composition of blood lipids with, in particular, an accretion of the arachidonic acid level (C20:4 6). This increase is correlated negatively with the omega 6 PUFA intake but positively with the DHA intake. The effect of the DHA supplementation on fatty acid metabolism seems to be dose dependent with a bell-shaped curve and probably liked to the PUFA vectorization form. The in vitro study on a cellular model showed that the addition of various amount of PUFA under the form of phospholipids modifies the biophysical properties of the membranes by modulating the fatty acid composition of the phospholipid and thereby influenced the efficiency of membrane proteins. In this study, we also showed that addition of a too high amount of omega 3 PUFA under the form of phospholipid become letal for the cells thus highlighting the critical importance of the 6/ 3 fatty acids ratio in phospholipids. In conclusion, these two studies allowed us to show that omega 3 PUFA supplementation has an effect which can be either beneficial or detrimental depending on the dose of omega 3 PUFA supplied, the vectorization form and the 6/ 3 ratio of the supplement.AIX-MARSEILLE2-BU Méd/Odontol. (130552103) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

    Supplémentation en acide docosahexaénoïque d'origine aviaire (études chez la personne âgée et le sportif)

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    AIX-MARSEILLE2-BU Méd/Odontol. (130552103) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

    Composition en acides gras des œufs : intérêt nutritionnel et valeur santé

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    The average composition in lipids and fatty acids of the hen’s egg is reported. The fact that the egg is a source of phospholipids is pointed out. The enrichment in essential fatty acids in response to different dietary lipids is reported with a focus on enrichment with omega 3 fatty acids. The results of the different approaches of enrichment through seeds oils, marine oils or both are described. The potential interest of using omega 3 enriched egg, specially DHA enriched egg, in human nutrition is documented through the specific properties of DHA-bearing egg phospholipids in terms of stability to oxidation, better bioavailability and specific physiological effects

    Les lipases des euphorbiaceae : purification et caractérisation des enzymes lipolytiques du latex d'euphorbia characias, mise en évidence de l'activité lipolytique de la ricine, relations entre les activités lipolytique, cytotoxique et lectine

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    Sept enzymes lipolytiques (LEC) ont été purifiées à partir du latex d 'Euphorbia characias, une plante méditerranéenne sauvage. Bien que les masses moléculaires soient très proches (80 kDa), des différences de points isoélectriques et d'association avec les lipides du latex sont associés à des différences d'activité enzymatique. Certaines protéines sont des phospholipases sans spécificité marquée, d'autres ont une activité de type A2 et deux d'entre elles sont spécifiques des acides gras insaturés à 18 atomes de carbone. D'autres sont des lipases sans spécificité marquée. Le séquençage de la LEC révèle une forte homologie de séquence avec la chaîne B de la ricine. Cette protéine est une toxine dimérique (chaînes A et B), utilisée dans la lutte contre le cancer et diverses pathologies. La chaîne A est responsable de la toxicité, elle inhibe la synthèse protéique. La chaîne B possède une activité lectine nécessaire au transport intracellulaire de la toxine, mais source de nombreux effets secondaires. L'étude de la séquence de la ricine révèle la présence de la séquence consensus des lipases dans la chaîne B. Nous avons donc purifié la ricine et recherché des activités lipolytiques possibles. Cette toxine se comporte comme une lipase non régiospécifique et possède des activités de type lysophospho lipase et phospholipase A1 et A2. Des études structurales montrent qu'un site actif potentiel de type lipase existe chez la ricine, situé à l'interface des deux sous-unités. Ce schéma est retrouvé chez plusieurs lectines homologues à la ricine. Les relations possibles entre les activités toxiques et lipolytiques pour ces toxines sont discutées, en relation avec l'activité lectine.AIX-MARSEILLE3-BU Sc.St Jérô (130552102) / SudocSudocFranceF

    Identification of the Ricin Lipase Site and Implication in Cytotoxicity

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    International audienceRicin is a heterodimeric plant toxin and the prototype of type II ribosome-inactivating proteins. Its B-chain is a lectin that enables cell binding. After endocytosis, the A-chain translocates through the membrane of intracellular compartments to reach the cytosol where its N-glycosidase activity inactivates ribosomes, thereby arresting protein synthesis. We here show that ricin possesses a functional lipase active site at the interface between the two subunits. It involves residues from both chains. Mutation to alanine of catalytic serine 221 on the A-chain abolished ricin lipase activity. Moreover, this mutation slowed down the A-chain translocation rate and inhibited toxicity by 35%. Lipase activity is therefore required for efficient ricin A-chain translocation and cytotoxicity. This conclusion was further supported by structural examination of type II ribosome-inactivating proteins that showed that this lipase site is present in toxic (ricin and abrin) but is altered in nontoxic (ebulin 1 and mistletoe lectin I) members of this family
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