Medida interferométrica do crescimento de bactérias

-O presente trabalho faz parte de um desenvolvimento de um novo método para monitorar o crescimento de bactérias. Para poder testar este método precisamos de uma estufa para manter estoques de bactérias. Como enfrentamos freqüentes faltas de energia elétrica na UFJF decidimos não utilizar uma estufa comercial. Optamos pela construção de uma estufa que é alimentada por uma eletrônica ligada a uma bateria automotiva que garante uma autonomia de várias horas. Montamos um circuito eletrônico que mede a temperatura, e fornece uma potência regulável, conseguindo assim manter a uma temperatura constante uma estufa que será usada para crescimento de bactérias, montamos esse circuito junto com uma fonte e uma bateria automotiva de modo que temos um sistema que continue funcionando por algumas horas mesmo que haja queda na energia, evitando assim uma perda de amostras. Para poder minimizar os gastos de energia e desta forma aumentar o tempo de autonomia do sistema, regulamos a potência do aquecedor com um esquema de Modulação de Largura de Pulso (PWM). O controle de temperatura é efetuado por um micro controlador

Screening antimycobacterial activity of Baccharis dracunculifolia, Centella asiatica, Lantana camara and Pterodonemarginatus

A investigação permanente de novas drogas antimicobacterianas é necessária no programa de erradicação da tuberculose e de outras doenças relacionadas com micobactérias. O objetivo deste estudo foi buscar novas fontes de drogas antimicobacterianas usando material vegetal. Neste estudo, 11 materiais de base vegetal (extratos, óleos essenciais e algumas frações) foram avaliados contra 5 espécies de micobactérias. Estes materiais foram obtidos a partir de 4 espécies de plantas medicinais tradicionalmente utilizadas como terapêutica geral para diferentes doenças e, especificamente, no tratamento de tuberculose (Baccharis dracunculifolia, Centella asiatica, Lantana camara, Pterodon emarginatus). Os ensaios foram realizados em microplacas com resazurina contra duas espécies do Complexo Mycobacterium tuberculosis e 3 espécies de micobactérias não tuberculosas. Os resultados mostraram o extrato hexânico e o óleo essencial de frutos de P. emarginatus como potenciais fontes para drogas antimicobacterianas contra quatro espécies de micobactérias testadas. A fração hexânica do extrato metanólico das folhas de C. asiatica também apresentou significativa inibição do crescimento de micobactérias apenas contra M. chelonae. Em conclusão, foi possível contribuir para as investigações de antimicobacterianos por apresentar três novas amostras de plantas com atividade antimicrobiana significativa contra quatro Mycobacterium spp e sugerir a realização de estudos futuros sobre as propriedades antimicobacterianas de frutos de P. emarginatus.The permanent investigation of new antimycobacterial drugs is necessary for the eradication programs of tuberculosis and other mycobacterium-related diseases. The aim of the present study is to search for new sources of antimycobacterial drugs using plant materials. In this study, 11 plant materials (extracts, essential oils and some fractions) obtained from 4 species of medicinal plants traditionally used as general therapeutics for different illnesses and specifically as treatment of tuberculosis, were evaluated using the microplate resazurin assay against 2 species of the Mycobacterium tuberculosis Complex and 3 nontuberculous mycobacteria. The results showed the hexane extract and the essential oil from fruits of Pterodon emarginatus (Vogel) as potential sources of antimycobacterial drugs against 4 species of tested mycobacteria. The hexane fraction of methanol extract from leaves of Centella asiatica also presented significant mycobacterial growth inhibition, but against M. chelonae only. In conclusion, it was possible to contribute to the antimycobacterial investigations by presenting three new samples of plants with significant antimicrobial activity against four Mycobacterium spp and suggest future studies about the antimycobacterial properties of fruits from P. emarginatus

Essential oil from leaves of Lantana camara : a potential source of medicine against leishmaniasis

Leishmaniasis is an infection of viscera or tegument caused by protozoa Leishmania sp. The extensive period required for the treatment, which involves the use of toxic medicines, leads patients to drop treatment increasing the development of resistant forms of Leishmania sp. Lantana camara L., Verbenaceae, is a tropical plant native from America. Folk uses have been described for treatment of tumors, tetanus, rheumatism and malaria. This study evaluates the leishmanicidal activity of the essential oil of leaves from L. camara on promastigote forms of Leishmania chagasi and L. amazonensis and its toxic effects on Artemia salina (brine shrimp test), macrophage cultures and BALB/c mice. The chemical composition was evaluated using the gas chromatography coupled with mass spectrometer (GC-MS). Thirty substances, mostly mono and sesquiterpenes were identifi ed. The most representative constituents were: germacrene D (24.90%), farnesene derivatives (22%) and (E)-cariophylene (14.31%). Bioassays revealed a signifi cant leishmanicidal activity of essential oil against L. amazonensis (IC50 0.25 μg/ mL) and a potential toxic effect on Brine shrimp (LC50 10 μg/mL) and macrophage assays (CC50 4 μg/mL), while there was no toxic manifestation on mice. The data show the relevant potential of L. camara as a source of medicine for leishmaniasis treatment

Screening antimycobacterial activity of Baccharis dracunculifolia, Centella asiatica, Lantana camara and Pterodonemarginatus

A investigação permanente de novas drogas antimicobacterianas é necessária no programa de erradicação da tuberculose e de outras doenças relacionadas com micobactérias. O objetivo deste estudo foi buscar novas fontes de drogas antimicobacterianas usando material vegetal. Neste estudo, 11 materiais de base vegetal (extratos, óleos essenciais e algumas frações) foram avaliados contra 5 espécies de micobactérias. Estes materiais foram obtidos a partir de 4 espécies de plantas medicinais tradicionalmente utilizadas como terapêutica geral para diferentes doenças e, especificamente, no tratamento de tuberculose (Baccharis dracunculifolia, Centella asiatica, Lantana camara, Pterodon emarginatus). Os ensaios foram realizados em microplacas com resazurina contra duas espécies do Complexo Mycobacterium tuberculosis e 3 espécies de micobactérias não tuberculosas. Os resultados mostraram o extrato hexânico e o óleo essencial de frutos de P. emarginatus como potenciais fontes para drogas antimicobacterianas contra quatro espécies de micobactérias testadas. A fração hexânica do extrato metanólico das folhas de C. asiatica também apresentou significativa inibição do crescimento de micobactérias apenas contra M. chelonae. Em conclusão, foi possível contribuir para as investigações de antimicobacterianos por apresentar três novas amostras de plantas com atividade antimicrobiana significativa contra quatro Mycobacterium spp e sugerir a realização de estudos futuros sobre as propriedades antimicobacterianas de frutos de P. emarginatus.The permanent investigation of new antimycobacterial drugs is necessary for the eradication programs of tuberculosis and other mycobacterium-related diseases. The aim of the present study is to search for new sources of antimycobacterial drugs using plant materials. In this study, 11 plant materials (extracts, essential oils and some fractions) obtained from 4 species of medicinal plants traditionally used as general therapeutics for different illnesses and specifically as treatment of tuberculosis, were evaluated using the microplate resazurin assay against 2 species of the Mycobacterium tuberculosis Complex and 3 nontuberculous mycobacteria. The results showed the hexane extract and the essential oil from fruits of Pterodon emarginatus (Vogel) as potential sources of antimycobacterial drugs against 4 species of tested mycobacteria. The hexane fraction of methanol extract from leaves of Centella asiatica also presented significant mycobacterial growth inhibition, but against M. chelonae only. In conclusion, it was possible to contribute to the antimycobacterial investigations by presenting three new samples of plants with significant antimicrobial activity against four Mycobacterium spp and suggest future studies about the antimycobacterial properties of fruits from P. emarginatus

Automação de medidas interferométricas

O presente trabalho relata o desenvolvimento de um equipamento que mede a atividade metabólica em até 96 amostras bacterianas interferometricamente. A finalidade deste equipamento se destina a pesquisas sobre bactérias de crescimento lento como o Mycobacterium tuberculosis. Medidas interferométricas podem informar sobre a atividade metabólica de forma precisa e em tempo real. Tipicamente estas medidas levam algumas semanas e eles acontecem de forma contínua. Por esta razão, o equipamento deve trabalhar de forma automática. Neste último ano avançamos na construção de um robô que transporta amostras entre um armário e um interferômetro. Este robô possui um braço que deve retirar uma fileira de 4 porta-amostras do armário, levá-la até a posição do interferômetro, introduzir a fileira dentro do interferômetro, posicionar os porta-amostras com precisão, retirar a fileira do interferômetro e levá-la de volta para sua origem. A maior parte da mecânica deste robô já foi construída, bem como grande parte da eletrônica que controla os movimentos . No momento, estamos desenvolvendo software e firmware, sendo possível controlar movimentos do braço robótico em duas dimensões, bem como a eletrônica com a correspondente firmware que coordena estes movimentos e se comunica com um computador que controla todo o processo de medida interferométrica

Metabolic Activity Interferometer: A Powerful Tool for Testing Antibiotics

It is demonstrated that the efficiency of antibiotics can be tested using an interferometric method. Two antibiotics were used as models to show that an interferometric method to monitor the metabolic activity of slowly growing bacteria can be a safer method to judge antimicrobial properties of substances than conventional methods. The susceptibility of Mycobacterium bovis to hexane extract of Pterodon emarginatus and to the well-known antibiotic rifampicin was tested with the interferometric method and with the conventional microplate method. The microplate method revealed a potential activity of hexane extract against M. bovis. However, the interferometric method showed that the action of this substance is rather limited. Also in the case of rifampicin, the interferometric method was able to detect resistant bacteria

The effect of essential oil of Syzygium cumini on the development of granulomatous inflammation in mice

The anti-inflammatory and apoptotic activity of the essential oil of Syzygium cumini (L.) Skeels, Myrtaceae, leaves was investigated in vivo. The anti-inflammatory action and chronic granulomatous inflammation in BALB/c mice, intravenously infected with Mycobacterium bovis, BCG, (Bacillo Calmet Guerim), was judged by measuring and classifying the granulomas formed in the hepatic parenchyma. The degree of apoptosis in the inflammatory cells was also measured. A reduction in the granulomatous area and a change in the pattern of the granulomas were found. Anti-mycobacterial activity of the essential oil against M. bovis was detected in vitro by an interferometric method in liquid culture medium. The chemical constituents of the essential oil were determined by GC/MS. Higher yields of the essential oil of S. cumini leaves were obtained by extraction in a Clevenger apparatus when the fresh leaves were previously frozen as a pre-processing step. The essential oil obtained from this plant demonstrated a statistically significant and dramatic effect in the chosen model system