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Microfluorìmetro Simplificado Para Estudo De Cálcio Intracelular
Compreendendo um sistema óptico, que é dividido em três subsistemas, sendo o primeiro identificado como subsistema de excitação; o segundo como subsistema de monitoração e o terceiro como subsistema óptico de detecção.BR9705280 (A)G01N21/17G01N33/48G01N21/17G01N33/48BR19979705280G01N21/17G01N33/48G01N21/17G01N33/4
Aplicação de tecnicas de engenharia no estudo de celulas cardiacas isoladas : medição de [Ca27] e limiar de estimulação
Orientador: Jose Wilson Magalhães BassaniTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Engenharia Eletrica e de ComputaçãoResumo: Vários eventos fisiológicos importantes são governados por variações na concentração intracelular de cálcio, ['CA POT. 2+¿]i. Na célula cardíaca, variações na ['CA POT. 2+¿]i são responsáveis pelo disparo e controle da força e curso temporal da contração. Neste trabalho estudamos a teoria que fundamenta o uso do Método da Razão, na quantificação de ['CA POT. 2+¿], a partir da medição de fluorescência emitida por indicadores como indo-1 e fura-2. Um sistema de microscopia de fluorescência completo, para ser utilizado com o indo-1, foi projetado e construído. O sistema foi utilizado no estudo dos transientes de cálcio em miócitos cardíacos isolados de ratos durante o desenvolvimento pós-natal (idades: 3 - 6; 13 - 16; 28 - 35 e 180 dias). Apesar dos parâmetros de calibração não se manterem constantes nos diversos grupos, as características dos transientes não mostraram diferenças estatisticamente significativas (['CA POT. 2+¿] diastólico 180nM; ['CA POT. 2+¿] pico 1¿mu¿M e fwhm 0.35ms). Estudando o limiar de estimulação elétrica pudemos comprovar experimentalmente que ele diminui com o desenvolvimento do animal, devido à modificação da geometria das células, como previsto pela teoriaAbstract: Important physiological events are governed by changes in intracellular 'CA POT. 2+¿ concentration (['CA POT. 2+¿]i). In cardiac cells, ['CA POT. 2+¿]I changes are resposible for triggering and controlling the strength and timecourse of contractions. In this work, we studied the fundamental theory for the ratio method, a method to quantitate ['CA POT. 2+¿] from the ratio of fluorescence emitted by a ratiometric 'CA POT. 2+¿ indicator, such as indo-1 and fura-2. Additionally, a complete microscopic system for measuring indo-1 fluorescence was designed and constructed. This system was applied for measuring 'CA POT. 2+¿ transients in cardiac myocytes isolated from rats during post-natal development (ages: 3-6; 13- 16; 28-35 and 180 days). Although the calibration parameters were not the same for all ages, diastolic and peak ['CA POT. 2+¿]i and duration of the 'CA POT. 2+¿ transients were not significantly different ( 180 nM , 1¿mu¿M and 0.35 s, respectively). To explain the field stimulation process of the cells at different ages we developed a simple model based on the eletromagnetic theory. Measured threshold for field eletrical stimulation was age-dependent and was found to be related to the cell geometry, as predicted by the modelDoutoradoAutomaçãoDoutor em Engenharia Elétric
Aplicação da criossorção no vácuo de aceleradores e linhas de luz sincrotron
Orientador: A. R. B. de CastroDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb WataghinResumo: Neste trabalho foi apresentado o projeto dos Sistema de Vácuo dos Aceleradores Linear e Circular do Laboratório Nacional de Luz Síncrotron (LNLS). Foram levantados vários problemas de operação destas máquinas devidos à contaminação com Hidrocarbonetos, normalmente provenientes de bombas mecânicas usadas no pré-vácuo. Foi proposta a obtenção de pressões menores que 1 x 10-4 mbar usando-se sistemas de bombas de criossorção. Estas bombas foram projetadas, construídas e caracterizadas mostrando-se apropriadas para a obtenção das pressões desejadas sem o menor risco de contaminação. Finalmente elas foram aplicadas em sistemas de Ultra Alto Vácuo como o Sistema de Testes do Canhão de Elétrons e o LINAC de 50 MeVAbstract: Not informed.MestradoFísicaMestre em Físic
Câmara Para Perfusão De Células Isoladas Em Regime De Fluxo Laminar
CÂMARA PARA PERFUSÂO DE CÉLULAS ISOLADAS EM REGIME DE FLUXO LAMINAR. Confeccionada em acrílico, e destinada à perfusão de células isoladas com soluções nutrientes, com cinco entradas independentes, permitindo a utilização de até cinco soluções diferentes num mesmo experimento. Apresenta seus diversos compartimentos e componentes na FIGURA 01, sendo que a FIGURA 02 ilustra uma visão frontal da câmara e, em corte longitudinal a câmara é apresentada na FIGURA 03. A FIGURA 04 detalha o conector Y, já mostrado na FIGURA 01, a vista frontal da câmara é apresentada na FIGURA 05, com as dimensões em milímetros. Uma vista lateral da câmara é apreciada, em corte longitudinal na FIGURA 06, e em corte transversal a câmara é vista na FIGURA 07.BR0302403 (A)G02B21/34G02B21/34BR20030302403G02B21/34G02B21/3
Analysis of cardiac parameters in animals with epilepsy: possible cause of sudden death?
Among the causes for sudden death in epilepsy, cardiac dysfunction has been an area of interest. Based on this, the aim of our study was to evaluate the heart rate (in vivo and in vitro) and ventricular pressure in vitro of rats with epilepsy induced by pilocarpine. Adult male Wistar rats (n=6) were given pilocarpine hydrochloride to induce status epilepticus. Control rats (n=6) received saline solution instead pilocarpine. Our results showed significant differences in the mean of heart rate in vivo between the groups. In contrast, we did not find differences during in vitro experiments. Our results suggest a central nervous system modulation on the heart, which could explain the sudden unexpected death in epilepsy.Dentre as causas de morte súbita nas epilepsias (SUDEPE), as disfunções cardíacas têm sido uma área de interesse. Sendo assim, o objetivo de nosso estudo foi avaliar a freqüência cardíaca (FC) (in vivo e in vitro) e a pressão ventricular (PV) in vitro de ratos com epilepsia induzida pela pilocarpina. Ratos machos, adultos, da raça Wistar (n=6) receberam pilocarpina para a indução do status epilepticus. Ratos controles (n=6) receberam solução salina ao invés de pilocarpina. Nossos resultados mostram diferenças significantes na freqüência cardíaca in vivo entre os grupos estudados. Em contraste, não encontramos diferenças entre os grupos nos experimentos in vitro. Nossos resultados sugerem que sob a influência do sistema nervoso central, o coração pode apresentar alterações funcionais que aumentam a probabilidade de ocorrência de morte súbita nas epilepsias
(-)-5-Demethoxygrandisin B a New Lignan from <i>Virola surinamensis (Rol.) Warb.</i> Leaves: Evaluation of the Leishmanicidal Activity by In Vitro and In Silico Approaches
Leishmaniasis is a complex disease caused by infection with different Leishmania parasites. The number of medications used for its treatment is still limited and the discovery of new drugs is a valuable approach. In this context, here we describe the in vitro leishmanicidal activity and the in silico interaction between trypanothione reductase (TryR) and (-)-5-demethoxygrandisin B from the leaves of Virola surinamensis (Rol.) Warb. The compound (-)-5-demethoxygrandisin B was isolated from V. surinamensis leaves, a plant found in the Brazilian Amazon, and it was characterized as (7R,8S,7′R,8′S)-3,4,5,3′,4′-pentamethoxy-7,7′-epoxylignan. In vitro antileishmanial activity was examined against Leishmania amazonensis, covering both promastigote and intracellular amastigote phases. Cytotoxicity and nitrite production were gauged using BALB/c peritoneal macrophages. Moreover, transmission electron microscopy was applied to probe ultrastructural alterations, and flow cytometry assessed the shifts in the mitochondrial membrane potential. In silico methods such as molecular docking and molecular dynamics assessed the interaction between the most stable configuration of (-)-5-demethoxygrandisin B and TryR from L. infantum (PDB ID 2JK6). As a result, the (-)-5-demethoxygrandisin B was active against promastigote (IC50 7.0 µM) and intracellular amastigote (IC50 26.04 µM) forms of L. amazonensis, with acceptable selectivity indexes. (-)-5-demethoxygrandisin B caused ultrastructural changes in promastigotes, including mitochondrial swelling, altered kDNA patterns, vacuoles, vesicular structures, autophagosomes, and enlarged flagellar pockets. It reduced the mitochondria membrane potential and formed bonds with important residues in the TryR enzyme. The molecular dynamics simulations showed stability and favorable interaction with TryR. The compound targets L. amazonensis mitochondria via TryR enzyme inhibition
Fish Oil Supplementation Improves the Repeated-Bout Effect and Redox Balance in 20–30-Year-Old Men Submitted to Strength Training
Herein, we investigated the effect of fish oil supplementation combined with a strength-training protocol, for 6 weeks, on muscle damage induced by a single bout of strength exercise in untrained young men. Sixteen men were divided into two groups, supplemented or not with fish oil, and they were evaluated at the pre-training period and post-training period. We investigated changes before and 0, 24, and 48 h after a single hypertrophic exercise session. Creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) activities, plasma interleukin-6 (IL-6) and C-reactive protein (CRP) levels, and the redox imbalance were increased in response to the single-bout session of hypertrophic exercises at baseline (pre-training period) and decreased during the post-training period in the control group due to the repeated-bout effect (RBE). The fish oil supplementation exacerbated this reduction and improved the redox state. In summary, our findings demonstrate that, in untrained young men submitted to a strength-training protocol, fish oil supplementation is ideal for alleviating the muscle injury, inflammation, and redox imbalance induced by a single session of intense strength exercises, highlighting this supplementation as a beneficial strategy for young men that intend to engage in strength-training programs