Manual completo de licoristas, destiladores, pasteleros, confíteros y perfumadores

Copia digital. España : Ministerio de Cultura y Deporte. Subdirección General de Coordinación Bibliotecaria, 201

Ανάλυση ανοσοκυττάρων περιφερικού αίματος ασθενών με καρκίνο ουροδόχου κύστης και νεφρού με κυτταρομετρία μάζας - CyTOF

ΕΙΣΑΓΩΓΗ: Η ανοσοθεραπεία με αναστολείς σημείων ελέγχου του ανοσοποιητικού είναι ένας ραγδαία εξελισσόμενος τομέας στο κομμάτι των αντικαρκινικών θεραπειών. Οι θεραπείες που στοχεύουν μόρια όπως τ ο PD-1/PD-L1 και το CTLA-4 έχουν εγκριθεί σαν θεραπείες εκλογής σε πολλές μορφές καρκίνου όπως οι καρκίνοι του ουροποιητικού συστήματος. Όπως όλες οι θεραπείες όμως δεν είναι αποτελεσματικές σε όλον τον πληθυσμό των ασθενών. Εκτός από την ανάλυση του μικροπεριβάλλοντος του όγκου που αποτελεί παρεμβατική διαδικασία, είναι επιτακτικής σημασίας η ανακάλυψη του ανοσολογικού προφίλ των ασθενών που ανταποκρίνονται στην θεραπεία για την ανεύρεση προγνωστικών βιοδεικτών ανταπόκρισης, με πιο εύκολες και γρήγορες μεθόδους όπως η ανάλυση ανοσοκυττάρων περιφερικού αίματος. ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑ: Χρησιμοποιήθηκε η τεχνολογία κυτταρομετρίας μάζας CyTOF για την ανάλυση του ανοσολογικού προφίλ 10 ασθενών με καρκίνο ουροποιητικού πριν λάβουν την θεραπεία με anti-PD1 ώστε να ανευρεθούν πιθανοί προγνωστικοί βιοδείκτες. Για την ανάλυση των δεδομένων χρησιμοποιήθηκε η διαδικτυακή πλατφόρμα Cytobank που επιτρέπει την πρόσβαση σε αλγορίθμους για dimensionality reduction (viSNE), clustering (FlowSOM) και differential analysis (CITRUS). ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Η ανάλυση περιφερικών ανοσοκυττάρων με CyTOF ανέδειξαν διαφορές στους πληθυσμούς των CD8+ Τ κυττάρων μνήμης , των δενδριτικών και των Τ βοηθητικών κυττάρων ανάμεσα στις δύο ομάδες responders και non-responders. Μέσω του αλγόριθμου viSNE φάνηκε η έκφραση του κάθε δείκτη/αντισώματος ξεχωριστά στην κάθε ομάδα αλλά και η κατανομή τους στον δισδιάστατο χώρο. Η ταυτότητα των κυτταρικών πληθυσμών που ανευρέθηκαν αναγνωρίστηκε από τις συστάδες που σχηματίστηκαν μέσω του αλγορίθμου FlowSOM και την μέση έκφραση του κάθε δείκτη σε αυτές. Τέλος, ο αλγόριθμος CITRUS χρησιμοποιήθηκε για να δημιουργηθεί ένα προβλεπτικό μοντέλο για τους πιθανούς προγνωστικούς βιοδείκτες για ανταπόκριση των ασθενών στην ανοσοθεραπεία. ΣΥΖΗΤΗΣΗ: Παρότι οι αναλύσεις έγιναν σε ένα μικρό δείγμα ατόμων, ανέδειξαν διαφορές ανάμεσα στους ασθενείς που ανταποκρίθηκαν στη θεραπεία και σε εκείνους που δεν ανταποκρίθηκαν. Αυτή η μελέτη είναι από τις πρώτες μελέτες περιφερικών ανοσοκυττάρων αίματος με CyTOF σε ασθενείς με νεοπλασία ουροποιητικού. Οι νέες τεχνολογίες για ανάλυση δεδομένων υψηλών διαστάσεων όπως η τεχνολογία κυτταρομετρίας μάζας που μπορεί να εφαρμοστεί για ανάλυση περιφερικών ανοσοκυττάρων αίματος, δίνουν τη δυνατότητα ανακάλυψης νέων βιοδεικτών ανταπόκρισης στην ανοσοθεραπεία ώστε ο κάθε ασθενής να έχει εξατομικευμένη αντιμετώπιση της νόσου εύκολα και σύντομα χωρίς παρεμβατικές διαδικασίες. Η ανάλυση αυτή μπορεί να αποτελέσει βάση για μία μελέτη σε ένα μεγαλύτερο πλήθος κλινικών δειγμάτων όπου θα υπάρχουν πιο ασφαλή και αξιόπιστα αποτελέσματα και θα μπορούσε να αξιολογηθεί λεπτομερώς η κλινική απόκριση των ασθενών στην θεραπεία αλλά και γενικά οι παράγοντες απόκρισης στη θεραπεία. Δεδομένα που ανευρίσκονται με το CyTOF θα μπορούσαν να μελετηθούν περαιτέρω με τεχνολογίες όπως το RNA sequencing ώστε να γίνει εις βάθος κατανοητός ο μηχανισμός της ανοσοαντίδρασης, που διαφοροποιεί την ανταπόκριση, σε επίπεδο μεταγραφώματος. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ : Η ανοσοθεραπεία βασίζεται στην ενίσχυση της φυσικής άμυνας του οργανισμού. Οι αναστολείς σημείων ελέγχου αποτελούν καινοτόμα ανακάλυψη στις θεραπείας ενάντια στον καρκίνο. Είναι χρήσιμο ωστόσο, όπως κάθε θεραπεία, να χρησιμοποιούνται στοχευμένα στους ασθενείς που ωφελούνται από αυτήν. Τεχνολογίες όπως η κυτταρομετρία μάζας μπορούν να βοηθήσουν στην ανακάλυψη προγνωστικών βιοδεικτών που θα βοηθήσουν στην επιλογή θεραπείας στην καθημερινή κλινική πράξη.Introduction: Ιmmune checkpoint inhibitors immunotherapy is a rapidly evolving field of anticancer therapies. Therapies targeting molecules such as PD-1/PD-L1 and CTLA-4 have been approved as first-line treatments in many cancers such as urinary tract or kidney cancers. Like all treatments, however, they are not effective in the entire patient population. Apart from the tumor microenvironment analysis, which is an interventional procedure, it is imperative to discover the immune profile of the patients who respond to the treatment in order to find biomarkers for predicting response, with easier and faster methods such as the analysis of peripheral blood immune cells. Methods: Mass cytometry technique (CyTOF) was used to analyze the immune profile of 10 patients with urinary system cancer, before receiving anti-PD or anti-PDL1 treatment to find potential prognostic biomarkers. The analysis tool used to analyze the CyTOF data was the cytobank website which allows access to algorithms for dimensionality reduction (viSNE), clustering (FlowSOM) and differential analysis (CITRUS). Results: PBMCs analysis with CyTOF showed differences in CD8+ T memory cells, dendritic cells and T helper cells among the two groups of responders and non-responders. Through the viSNE algorithm, the expression of each marker/antibody was shown separately in each group, as well as their distribution in the two-dimensional space. The identity of the cell populations found, was identified by the clusters formed through FlowSOM algorithm and the average expression of each marker among them. Finally, the CITRUS algorithm was used to create a predictive model for patient response to treatment. Discussion: Although this study was performed in a small sample of subjects, it revealed differences between responders and non-responders to treatment. It is one of the first studies of peripheral blood immune cells with CyTOF in patients with urinary system cancer. New technologies for high-dimensional data analysis, such as mass cytometry that can be applied to analyze peripheral blood immune cells, enable the discovery of new biomarkers that predict response to immunotherapy so that each patient can have an individualized treatment of this genetic disease easily and quickly without interventional procedures. This analysis can be the beginning of a larger study where there will be safer and more reliable results and the detailed clinical response of the patients to the treatment could be evaluated as well as the factors of response to the treatment in general. Data found with CyTOF could be further studied with technologies such as RNA sequencing to gain an in-depth understanding of the immunoreaction mechanism, which differentiates the response, at a transcriptome level. Conclusions: Immunotherapy is based on boosting immune system’s natural defenses. Checkpoint inhibitor treatment is a breakthrough in cancer therapy. It is crucial, however, like any treatment, to be used in a specific group of patients, who can only benefit from it. Technologies such as mass cytometry can help discover predictive biomarkers to aid therapy selection in the daily clinical practice

Μελέτη χημικής σύστασης αιθαιρίων ελαίων ορισμένων αρωματικών φυτών της ελληνικής χλωρίδας

Hydrodistillation (HD) and solid phase microextraction (SPME) were employed to isolate essential oil from dry leaves and stems of oregano (Origanum vulgare ssp. hirtum), mountain tea (Sideritis spp), spearmint (Mentha spp.) and peppermint (Mentha spp.). The main compounds present in the essential oil of the plants were isolated by both techniques. The two techniques were compared by gas chromatography-mass spectrometry. The two techniques proved statistically identical except for the essential oil composition of mountain tea and peppermint. In those cases, hydrodistillation was found to be statistically more sensitive than SPME. The seasonal variation of the essential oil composition of six aromatic wild plants, Pistacia lentiscus L. (Anacardiaceae) and Myrtus communis L. (Myrtaceae), Coridothymus capitatus Reinchenb. fil. (Lamiaceae), Satureja thymbra (Lamiaceae), Salvia fruticosa Miller (Lamiaceae), Rosmarinus officinalis L. (Lamiaceae), grown in Zakynthos, a Greek island, was investigated.Στην εργασία αυτή συγκρίθηκε η μέθοδος παραλαβής αιθέριων ελαίων με τη συσκευή Clevenger με μια μέθοδο απομόνωσης, την μικροεκχύλιση στερεός φάσης (SPME). Η μελέτη έγινε στα φυτά της ρίγανης (Origanum vulgare ssp. hirtum), του τσαγιού του βουνού (Sideritis spp.), της μέντας (Mentha spp.) και του δυόσμου (Mentha spp.). Στόχος ήταν η μελέτη της επίδρασης της μεθόδου διαχωρισμού στη σύσταση των αιθέριων ελαίων. Από την ανάλυση των αιθέριων ελαίων που έγινε με GC-MS βρέθηκε ότι η κύρια χημική ομάδα τερπενικών ουσιών που χαρακτηρίζει το κάθε φυτό προσδιορίζεται εξίσου καλά και με τις δύο μεθόδους. Η μέθοδος της υδροαπόσταξης ήταν στατιστικά σημαντικά πιο ευαίσθητη από την SPME στις περιπτώσεις (τσάι του βουνού και δυόσμος) που τα αποτελέσματα των δύο μεθόδων διέφεραν. Αντικείμενο μελέτης της παρούσας διατριβής αποτέλεσε η εποχική διακύμανση της χημικής σύστασης των αιθέριων ελαίων έξι αρωματικών φυτών: μυρτιά (Myrtus communis L.), σχίνος (Pistacia lentiscus L.), θυμάρι (Coridothymus capitatus Reinchenb. fil.), θρούμπη {Satureja thymbra L.), φασκόμηλο (Salvia fruticosa Miller), δενδρολίβανο {Rosmarinus officinalis L.)

Creating the computer player: an engaging and collaborative approach to introduce computational thinking by combining ‘unplugged’ activities with visual programming

Ongoing research is being conducted on appropriate course design, practices and teacher interventions for improving the efficiency of computer science and programming courses in K-12 education. The trend is towards a more constructivist problem-based learning approach. Computational thinking, which refers to formulating and solving problems in a form that can be efficiently processed by a computer, raises an important educational challenge. Our research aims to explore possible ways of enriching computer science teaching with a focus on development of computational thinking. We have prepared and evaluated a learning intervention for introducing computer programming to children between 10 and 14 years old; this involves students working in groups to program the behavior of the computer player of a well-known game. The programming process is split into two parts. First, students design a high-level version of their algorithm during an ‘unplugged’ pen & paper phase, and then they encode their solution as an executable program in a visual programming environment. Encouraging evaluation results have been achieved regarding the educational and motivational value of the proposed approach

Gas Chromatography–Mass Spectrometry-Based Metabolite Profiling for the Assessment of Freshness in Gilthead Sea Bream (Sparus aurata)

Gilthead sea bream (Sparus aurata) is one of the most important farmed Mediterranean fish species, and there is considerable interest for the development of suitable methods to assess its freshness. In the present work, gas chromatography–mass spectrometry-based metabolomics was employed to monitor the hydrophilic metabolites of sea bream during storage on ice for 19 days. Additionally, the quality changes were evaluated using two conventional methods: sensory evaluation according to European Union’s grading scheme and K-value, the most widely used chemical index of fish spoilage. With the application of chemometrics, the fish samples were successfully classified in the freshness categories, and a partial least squares regression model was built to predict K-value. A list of differential metabolites were found, which were distinguished according to their evolution profile as potential biomarkers of freshness and spoilage. Therefore, the results support the suitability of the proposed methodology to gain information on seafood quality