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Caracterização patogênica de Pestalotiopsis grandis-urophylla pela inoculação de disco de micélio
O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização patogênica de isolados de Pestalotiopsis grandis-urophylla obtidos a partir de lesões em folhas de eucalipto. A partir de 2 isolados foi realizado a caracterização patogênica, onde foram inoculados em folhas e submetidos a condições controladas de temperatura e luz em caixas acrílicas transparentes com manutenção da umidade apenas no papel. As avaliações foram realizadas medindo-se as lesões na face abaxial das folhas aos 4, 6, 8 e 10 dias após a inoculação (DAI), com auxílio de paquímetro digital, obtendo-se o tamanho das lesões em mm2. Na avaliação do potencial patogênico, os dados referentes às lesões causadas por P. grandis-urophylla foram submetidos ao teste de Tukey e à análise de regressão para obtenção de modelos significativos. Não houve diferença estatística entre os isolados quanto à área foliar lesionada (AFL), e quanto a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). A metodologia de inoculação avaliada proporcionou reprodução dos sintomas da doença
CRESCIMENTO IN VITRO DA ALGA Cephaleuros virescens EM DIFERENTES MEIOS DE CULTURA E SOB EFEITO DE HORMÔNIOS
A falha frequente na obtenção de um bom rendimento nos cultivos de algas parasitas de plantas em meio de cultura pode ser devido a um conhecimento limitado das necessidades nutricionais desse microrganismo. Objetivou-se neste trabalho avaliar o crescimento in vitro de Cephaleuros virescens em diferentes meios de cultura e sob o efeito de hormônios. Para tanto, discos de ágar contendo micélio do isolado H-27-01 de C. virescens mantidos em meio básico de Bold (MBB) foram repicados para os meios: MBB, meio extrato da folha do hospedeiro agarizado (EFH), Meio Bristol e meio Trebouxia, com e sem adição de hormônios (AIA) e (GA3). Em seguida as placas foram mantidas a 25ºC e fotoperíodo de 12 h, onde foram tomadas as medidas de diâmetro das colônias do 1º ao 4º dia para se fazer a AACCM. O meio de cultura que proporcionou maior crescimento micelial foi o meio Trebouxia, independente do uso de hormônio. O meio MBB apresentou pior desempenho nas avaliações. O meio EFH foi o único meio que apresentou aumento de AACCM quando da adição de hormônios
Epidemiological factors of Phytophthora palmivora affecting the severity of postharvest papaya fruit rot
A podridão de frutos causada por Phytophthora palmivora é uma das principais doenças pós-colheita que acomete o mamão e outras culturas de relevância econômica. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da temperatura (15, 20, 25, 30 e 35 ºC), do período de molhamento (0, 12, 24, 36, 48, 60, 72 h) e da concentração de inóculo (10¹ a 10(7) zoósporos mL-1) de quatro isolados de P. palmivora provenientes do sul da Bahia (PP04 e PP20) e do norte do Espírito Santo (PP15 e PP16) sobre a severidade da podridão-do-fruto em mamão cv. Sunrise Solo na pós-colheita. As mais altas concentrações de inóculo testadas 10(6) e 10(7) zoósporos mL-1 provocaram as maiores áreas de lesão nos frutos, aumentando a severidade da infecção dos quatro isolados de P. palmivora testados. A severidade da podridão-dos-frutos do mamoeiro foi significativamente influenciada pela temperatura de incubação e pelo período de molhamento dos frutos, com maiores áreas de lesão nos frutos expostos a 25 ºC e período de molhamento de 72 h . Sob estas condições o isolado PP04 foi o mais agressivo, pois causou maiores lesões nos frutos (7126,29 mm²) que os demais isolados. Houve variação quanto à agressividade entre os isolados da Bahia e do Espírito Santo, tendo os últimos requerido uma concentração de inóculo crítica (CIcri) para causar infecção (10(4) zoósporos mL-1) maior que os primeiros (10³ zoósporos mL-1).Fruit rot caused by Phytophthora palmivora is one of the most important postharvest diseases affecting papaya and other economically important crops. The aim of this study was to evaluate the influence of temperature (15, 20, 25, 30 and 35 ºC), wetness period (0, 12, 24, 36, 48, 60, 72 h) and inoculum concentration (10¹ to 10(7) zoospores mL-1) of four P. palmivora isolates, from the south of Bahia (PP04 and PP20) and from the north of Espírito Santo (PP15 and PP16), on fruit rot severity in papaya cv. Sunrise Solo. The highest inoculum concentrations tested, 10(6) and 10(7) zoospores mL-1, caused the largest lesion areas in the fruits, increasing the infection severity for all four strains of P. palmivora tested. The severity of papaya fruit rot was significantly influenced by incubation temperature and fruit wetness period; the largest lesion areas were found on fruits exposed to 25ºC and 72 h wetness period. Under these conditions, the isolate PP04 was the most virulent since it caused larger lesions in the fruits (7126.29 mm²), compared to the remaining isolates. There was variation in virulence between the isolates from Bahia and Espirito Santo; the latter required a critical inoculum concentration (ICcri) to cause infection (10(4) zoospores mL-1), greater than that for the former (10³ zoospores mL-1)
Physiological characterization of Colletotrichum gloeosporioides isolates from Mangifera indica
A antracnose tem sido relatada como a principal doença pré e pós-colheita da manga, atacando folhas e frutos. Este trabalho objetivou realizar a caracterização fisiológica e patogênica de cinco isolados de Colletotrichum gloeosporioides da mangueira cv. Amrapali. Para a caracterização fisiológica, os isolados foram cultivados sob diferentes regimes de luz (0h, 12h e 24h) a 25°C, em que medições diárias até o 6 DAI (Dias após inoculação) foram feitas para obtenção de medias de crescimento micelial, e aos 6 DAI quantificação de esporos. Em seguida foi avaliado o potencial patogênico dos isolados através de medições de lesões na face adaxial das folhas aos 2, 4, 6, 8 e 10 DAI. Ambas as avaliações foram conduzidas em delineamento inteiramente casualizado. Isolados de C. gloeosporioides cultivados sob o regime de 12 horas luz e sob a temperatura de 25°C obtiveram melhor desenvolvimento fisiológico e o maior desenvolvimento patogênico no regime de 0 horas de luz.Anthracnose comprises in the main pre- and post-harvest disease of mango, causing damage on the leaves and fruits. This work aimed to carry out a physiological and pathogenic characterization of five isolates of Colletotrichum gloeopsorioides from mango trees cv. Amrapali. For the physiological characterization, the isolates were cultivated under different light regimes (0h, 12h and 24h) at 25°C, wherein daily measurements were taken up to 6 DAI (Days after inoculation) to obtain mycelial growth averages, and at 6 DAI spore quantification. Then, the pathogenic potential of the isolates was evaluated, through measurements of lesions on the top surface of the leaves at 2, 4, 6, 8 and 10 DAI. Both evaluations were carried out in a completely randomized design. Isolates of C. gloeosporioides cultivated under 12 hours light at temperature of 25°C obtained the best physiological development and the highest pathogenic development was observed in the regime of 0 hours light
Descoloração do corante Azul Brilhante de Remazol R por leveduras isoladas de moluscos do Rio Subaé, no estado da Bahia, Brasil
Identificação de genes diferencialmente expressos em amendoim, submetido a estresse hídrico
O amendoim é um produto de grande importância mundial para a indústria de alimentos, sendo bastante representativo no Brasil que é um dos maiores produtores e consumidores dessa oleaginosa. Grande parte da produção está concentrada nas regiões Sudeste, Centro-Oeste e Nordeste. Nesta última região, o clima é um fator limitante ao seu cultivo, embora alguns tipos botânicos apresentem tolerância às condições de estiagem prolongada. O presente trabalho teve como objetivo identificar genes diferencialmente expressos em amendoim, submetido a estresse hídrico, que possam auxiliar nos programas de melhoramento genético da cultura na região Nordeste. Para este estudo a cultivar Senegal 55437, de reconhecida tolerância à seca, foi submetida a cinco dias de estresse hídrico em condições de casa de vegetação. O RNA total foi coletado a partir de tecidos foliares, quando as plantas atingiram 50% de fechamento estomático. Para a identificação de genes diferencialmente expressos, procedeu-se ensaios de RT-PCR utilizando-se primers ISSR. Os c-DNAs obtidos foram reamplificados, purificados, ligados em vetor pGEMT-Easy e clonados em Escherichia coli, célula INFα (Invitrogen). Foram obtidos vinte e nove fragmentos de cDNA dos quais dezessete na condição de subregulados,dois super-regulados e dez ativados, estes últimos encontrados apenas nas amostras estressadas, os quais foram seqüenciados. As seqüências obtidas foram comparadas em bancos de dados, evidenciando os bancos de Arabidobis thaliana e Arachis. Dentre as seqüências, quatro apresentaram homologia com genes conhecidos e envolvidos em rotas metabólicas de resposta a fatores abióticos e bióticos. Uma dessas seqüências com cerca de 700 pb apresentou homologia com a proteína Arabinogalactana 10 de A. thaliana. Essa proteína estrutural presente nas folhas, caules e raízes dos vegetais esta associada a processos regulatórios iniciados durante a perda de água pela célula, cujos genes envolvidos promovem aumento da proteção do citoplasma, organelas, membranas celulares, alterações do potencial celular osmótico e maior regulação da expressão de outros genes. O resultado aqui obtido sugere uma possível relação desse gene no envolvimento das rotas de resposta ao estresse hídrico.Peanut is a worldwide important product for food industries. In Brazil this crop is quite representative due its high consume. Most part of production is concentrated in the Southeast, Center-West and Northeast regions. In this last one, the wheather is a limiting factor for the crop; however, some botanical types present tolerance to prolonged dry conditions. The aim of this work was to identify genes differentially expressed in a peanut cultivar submitted to water stress which could aid on selective processes in the improvement programs carried out with this crop in the Northeast region. The cv. Senegal 55437 was chosen for this study due its recognizable tolerance to drought. It was submitted to five days of water stress under greenhouse conditions. The total RNA was collected from foliar tissues when plants reached 50% stomatic closure. RT-PCR assays were performed using ten ISSR primers and the c- DNAs obtained were re-amplified, purified and cloned into Escherichia coli, INFα cell (Invitrogen). A total of twenty-nine cDNA fragments were obtained, being seventeen at the down regulated condition, two at over regulated and ten activated. These later, only found in stressed samples, were sequenced. Sequences obtained were compared into databanks, focusing on Arabidobis thaliana and Arachis banks, andfour showed homology with genes which are involved in metabolic routes to abiotic and biotic factors. One of these sequences, with about 700pb, showed homology with Arabinogalactan protein 10 of A. thaliana. This structural protein present in the leaves, stems and roots is associated to regulatory processes initiated during the water loss by the cell, which genes increase protection to the cytoplasm, organelles,cell membranes, cellular osmotic potential alteration and improve better regulation in the expression of other genes. The result here obtained suggests a possible relation of this gene with the response routes to water stress.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNP
Crescimento in vitro da alga Cephaleuros virescens em diferentes meios de cultura e sob efeito de hormônios
The frequent failure to obtain a good mycelium yield in the growth of plant parasitic green algae when in culture medium is caused by an limited knowledge about the nutritional requirement of this microorganism. The aim of this study was to evaluate the in vitro growth of Cephaleuros virescensin different culture media and under the hormone effect. To this end, agar plates containing mycelium of the C. virescensisolate H-27-01 maintained in Bold basic medium (MBB) were mapped to the media: MBB, agarose host leaf extract medium (EFH), Bristol medium and Trebouxia, with and without hormones (AIA) and (GA3). After the plates were maintained at 25ºC and photoperiod of 12 h, where the measurements of colonies diameter from the 1st to the 4th day were taken to calculate the area below the mycelial growth curve (ABMGC). The culture medium that provided the greatest mycelial growth was the Trebouxia medium, independent of the use of hormone. MBB medium presented worse performance in the evaluations. The EFH medium was the only medium that presented increased AACCM when added hormones.A falha frequente na obtenção de um bom rendimento nos cultivos de algas parasitas de plantas em meio de cultura pode ser devido a um conhecimento limitado das necessidades nutricionais desse microrganismo. Objetivou-se neste trabalho avaliar o crescimento in vitrode Cephaleuros virescens em diferentes meios de cultura e sob o efeito de hormônios. Para tanto, discos de ágar contendo micélio do isolado H-27-01 de C. virescensmantidos em meio básico de Bold (MBB) foram repicados para os meios: MBB, meio extrato da folha do hospedeiro agarizado (EFH), Meio Bristol e meio Trebouxia, com e sem adição de hormônios (AIA) e (GA3). Em seguida as placas foram mantidas a 25ºC e fotoperíodo de 12 h, onde foram tomadas as medidas de diâmetro das colônias do 1º ao 4º dia para se fazer o cálculo da área abaixo da curva de crescimento micelial (AACCM). O meio de cultura que proporcionou maior crescimento micelial foi o meio Trebouxia, independente do uso de hormônio. O meio MBB apresentou pior desempenho nas avaliações. O meio EFH foi o único meio que apresentou aumento de AACCM quando da adição de hormônios
Physiological and Molecular Characterization of Cephaleuros virescens Occurring in Mango Trees
The objective of this work was to accomplish the isolation, molecular identification and characterizing the physiology of the causal agent of the algal spot in mango trees. For this purpose, the pathogen growth was assessed in different culture media, with subsequent observation and measurements of the filamentous cells. The molecular identification was made using mycelium obtained from leaf lesions and pure algae colonies grown in culture medium. Descriptions based on DNA sequencing indicated that the algae is Cephaleuros virescens. The algae must be isolated primarily in liquid medium for further pricking into agar medium. The highest mycelial growth average in Petri dishes occurred when the algae were grown in Trebouxia and BBM. Trebouxia enabled larger cells in the filamentous cells when compared to other culture media