Air-drying llama sperm affects DNA integrity

The objective of this study was to evaluate the effects of air-drying preservation on llama sperm DNA. Semen collections were carried out using electroejaculation under general anesthesia. A total of 16 ejaculates were processed from 4 males (n = 4, r = 4). Each sample was diluted 4:1 in a collagenase solution in TALP media, then incubated and centrifuged at 800 g for 8 min. The pellet was re-suspended to a concentration of 20 million sperm/ml in TALP. Then the samples were placed onto sterile slides forming lines and were left to dry under laminar flow for 15 min. After this, the slides were placed into Falcon centrifuge tubes and kept at 5°C. Sperm characteristics (motility, membrane function, viability and morphology) were evaluated in raw semen and in the air-dried samples kept at 5°C for 30 min. DNA evaluation (integrity and degree of chromatin condensation) was carried out in raw semen and in the air-dried samples after 30 min, 7, 14, 21, 30, and 60 days after preservation. To compare raw semen to the air-dried samples, a Wilcoxon test was used for all sperm characteristics except for DNA, where a paired Student t-test was applied. A split plot design was used to compare chromatin condensation between the different periods of preservation and a Kruskal Wallis test was used to compare DNA integrity. Motility, membrane function, viability and sperm with intact DNA decreased in the air-dried samples (p 0.05). No significant differences were observed in the percentage of sperm with condensed chromatin between the different periods of preservation (p > 0.05). On the other hand, a significant decrease in the percentage of sperm with intact DNA was observed as from day 7 of preservation (p < 0.05). In conclusion the air-drying process has a negative effect on llama sperm DNA, hence the media used will need to be improved to protect DNA and be able to implement this technique in this species.Fil: Carretero, Maria Ignacia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Arraztoa, Claudia Cecilia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fumuso, Fernanda Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gambarotta, Mariana Carla. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Neild, Deborah Margarita. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentin

Uterine and corpus luteum blood flow evaluation prior to uterine flushing in llama embryo donors

The aim of this study was to assess the uterine blood flow (UBF) and corpus luteum blood flow (CLBF) in llamas 8 days post-mating, using color-Doppler ultrasonography (CDU), to determine the possible relationship between vascularization and the presence of an embryo. Adult females (n = 25) were used to monitor ovarian dynamics by palpation and transrectal ultrasonography until detection of a ≥6 mm growing follicle. Females were randomly assigned to one of two groups: Group I (n = 19), were mated and ovulation was induced by a single dose of buserelin (GnRH analog) that same day (Day 0); and Group II (n = 6), only ovulation was induced (control). On Day 8, UBF and CLBF were evaluated transrectally in both groups. The color-flow images obtained were analyzed with Image J1.52a software to determine the vascularization area and the percentage of corpus luteum with blood flow emission (CLBF%) together with the percentage for each uterine horn (UBF%). Statistical analysis was performed using an ANOVA test. In Group I, uterine flushing was performed to obtain the embryos, thus dividing the females into Group I+ (n = 10), when an embryo was recovered and Group I- (n = 9), when no embryo was recovered. Embryo recovery rate was 52.63% (10/19). In Group I+, UBF% was significantly higher compared to Group I- and Group II (P 0.05). In conclusion, it is possible to detect a local increase of UBF in the presence of an embryo on day 8 post-mating in llamas. This could be useful to achieve an early pregnancy diagnosis or to decide whether to carry out the uterine flushing in a llama embryo transfer program.Fil: Zampini, Enzo German. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; ArgentinaFil: Gallelli, Maria Florencia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Neild, Deborah M.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Gambarotta, Mariana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo H.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Trasorras, Virginia Luz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; Argentin

Development of a GnRH-PGF2α based synchronization and superstimulation protocol for fixed-time mating in llama embryo donors

The aim of the present study was to evaluate the application of a GnRH-PGF2α based synchronization and superstimulation protocol for fixed-time natural mating in llama embryo donors. All females (n = 8) received 8 μg IM of GnRH analog (GnRHa; buserelin) on day 0, regardless of follicular status. After eight days, another GnRHa dose was administered followed by 250 μg IM PGF2α (cloprostenol). A dose of 1000 IU IM of equine chorionic gonadotrophin (eCG) was applied on day 12 and a new dose of PGF2α was administered on day 13. All embryo donors were mated with a male of proven fertility followed by a GnRHa dose on day 18. 24 h later, mating was repeated with a different male. Transcervical uterine flushing for embryo recovery was carried out on all females on day 26. Recipient females received one dose of GnRHa (day 0) two days after the first mating of embryo donor females. A 75% (6/8) of embryo donors responded to the superstimulation treatment with a range of 2 to 5 corpus luteums (CLs) on embryo recovery day. A total of 24 CLs were registered, with a mean of 4 ± 0.9 CLs per female. Embryo recovery rate was 66.7% (16/24), with a range of 0 to 4 embryos and a mean of 2.7 ± 1.5 embryos per female. Regarding quality of the recovered embryos, 56.2% were grade I, 6.2% were grade II and 37.5% were grade V (untransferable; arrested morulae). Grade I and II embryos (n = 10) were transcervically transferred into recipient females (n = 10) six days after inducing their ovulation. At 24 days after embryo transfer (ET), a 50% pregnancy rate was registered. In conclusion, a group of llama embryo donors can be synchronized and superstimulated using a fixed-time mating protocol based on GnRHa, PGF2α, and eCG without the necessity of using ultrasonography in the field.Fil: Zampini, Enzo German. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Veiga, Maria Fernanda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Fumuso, Fernanda Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cabido, Luciana. Gobierno de la Provincia de Jujuy. Dirección Provincial de Desarrollo Ganadero; ArgentinaFil: Neild, Deborah Margarita. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo Horacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Trasorras, Virginia Luz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Use of products of the wine industry in diets for goats: Effect on total apparent digestibility and ruminal degradability in situ

El objetivo del siguiente trabajo fue evaluar la incorporación de ensilado de orujo de uva en dietas para caprinos. La dietas suministradas fueron: heno de alfalfa 100% (D0) y heno de alfalfa + ensilado de orujo de uva (1kg/día/cabra) (D1). Las variables analizadas fueron CMST, CMSF, CTFDN, CTFDA, CTPB, CMSTD, TS, F/O, DTAIVMS, de la FDN, FDA y PB. Se evaluaron parámetros ruminales como pH ruminal y degradabilidad ruminal in situ. El CMST y CMSF, disminuyó linealmente (p 0,05). La DTAIV de la MS consumida como de la FDN, FDA, PB y el CMSTD fue menor (p 0,05) entre los tratamientos. El pH ruminal promedio de D1 registró una tendencia (p= 0,094) a ser mayor que D0. El área bajo la curva y las horas con valores de pH menores a 6, no verificaron efectos (p> 0,05) entre las dietas. La DEGRIMS del ensilado de orujo de uva, para las 24 horas de incubación, fue un 11,9 % menor (p 0.05). The DTAIV of the MS consumed as FDN, FDA, PB and CMSTD was lower (p 0.05) between treatments. The average ruminal pH of D1 showed a trend (p = 0.094) to be greater than D0. The area under the curve and hours with pH values below 6 not verified effects (p> 0.05). The DEGRIMS of grape pomace silage, for 24 hours of incubation was 11.9% lower (p <0.05) than the diet D0. For 48 hours incubation a trend (p = 0.095) to differ between treatments was observed. It can be concluded that although the nutritional value of grape pomace is limited, their interest could be related to maintenance diets, interesting in feeding the goats aspect considering the cost and the problem of their disposal as environmental waste.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Evaluación de la calidad bacteriológica de tilapia fresca (Oreochromis niloticus) proveniente de la Zona Norte de Costa Rica

El presente trabajo evaluó la flora normal y patógena asociada a la tilapia (Oreochromis niloticus), ya que no existen estudios previos, a nivel nacional, sobre la calidad microbiológica de este producto. Con este propósito, se determinó el Recuento Total Aerobio (RT), el número de coliformes totales (CT) y coliformes fecales (CF), Enterococcus sp., Aeromonas sp., bacterias lácticas y la presencia de Listeria sp y Salmonella spp. a partir de la superficie externa de la tilapia. Se recolectaron 50 muestras provenientes de las zonas de San Carlos y Cañas y se transportaron en frío hasta el Laboratorio de Microbiología de Alimentos y Aguas de la Facultad de Microbiología, Universidad de Costa Rica, donde se efectuaron los análisis señalados según la metodología presentada por la American Publilc Health Association, 1998. Los resultados obtenidos confirman, desde el punto de vista microbiológico, la frescura de las tilapias al momento de su análisis, sin embargo, los niveles de coliformes encontrados fueron inaceptables para el consumo humano. No se logró aislar Listeria sp., pero el aislamiento de Salmonella spp. confirmó la contaminación fecal de las aguas de crianza de la tilapia, aparte de su importancia a nivel de salud pública. También se encontró que la tilapia presenta un número elevado de Aeromonas sp. como parte de su flora normal, por lo que se recomienda incluir este género dentro de las normas de calidad para pescado fresco. Según los datos obtenidos, no existe diferencia significativa (95% de confianza) entre el RT, los niveles de CT y CF, Enterococcus sp y Aeromonas sp. a partir de la tilapia proveniente de los criaderos de las zonas de San Carlos y Cañas

Legume Seeds Treated by High Hydrostatic Pressure: Effect on Functional Properties of Flours

Pigeon pea (PP), cowpea (CU), dolichos bean (DB), and jack bean (JB) are legumes that constitute the daily diet in many countries. Legumes are a good source of proteins, carbohydrates, and minerals. Considering that legumes present potentials to be used as ingredients for food formulation, the study of functional and physicochemical properties of flours obtained from legume seeds treated by high hydrostatic pressure treatment (HHPT) (200, 400, 600 MPa) was conducted. Flours were evaluated for polypeptide composition (SDS-PAGE), fluorescence spectroscopy, color, protein solubility (PS), water-holding capacity (WHC), oil-holding capacity (OHC), emulsion activity (EA), emulsion stability (ES), foaming capacity (FC), foaming stability (FS), and least gelation concentration (LGC). PS of PP, CU, and DB diminished with the increase of pressure and only CU showed an increase of PS (7–40%) at the isoelectric point. WHC of PP, CU, and DB varied with the pressure applied; however, WHC of JB was not modified by HHPT as we observed in lambda max fluorescence-emission values and PS. Only PP showed an increment of OHC at 400 and 600 MPa. EA of PP was not affected by HPPT, while DB and JB showed a decrease. ES of CU, DB, and JB was not affected by HHPT. FC of PP, DB, and JB diminished with the increase of pressure. FS of DB and CU (400 MPa) was improved and continued for 120 min. LGC values and the equilibrium moisture content of flours were not influenced by HHPT, but the last decreased with the increase of temperature. Moisture sorption isotherms of flours fitted adequately to H-H equation covering the practical range of water activity (0.10–0.90) at the three temperatures tested. High pressure processed flours of PP, CU, DB, and JB showed functional properties that could be useful for food formulation.Fil: Fernández Sosa, Eliana Isabel. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Thompson, Cinthia María Belén. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Acevedo, Belén Andrea. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Avanza, María Victoria. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentin

Evaluación del desarrollo embrionario y fetal en la llama mediante ultrasonografía doppler color

Una de las grandes aplicaciones de la ultrasonografía es el diagnóstico de gestación en forma precoz. En algunas hembras, la evaluación de su estado reproductivo no finaliza al detectar la presencia o ausencia de preñez, sino que requiere de un mayor monitoreo de la salud del embrión y del feto. Estas son hembras que han experimentado pérdidas embrionarias o abortos y se consideran de alto riesgo. Además, no sólo es posible controlar el bienestar del embrión/feto, sino que también es posible determinar la edad gestacional con la consiguiente fecha probable de parto (en caso de desconocer la fecha de servicio) y también determinar el sexo del feto mediante la observación del flujo sanguíneo de las gónadas.El objetivo de este trabajo es describir la aplicación de la ultrasonografía Doppler color durante la evolución de la gestación en la llama, tecnología aún no descripta en esta especie.Fil: Trasorras, Virginia Luz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Veiga, Maria Fernanda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Baca Castex, Clara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentin

Production, preservation, and transfer of South American Camelid embryos

The current review summarizes progress in the field of in vitro and in vivo production of South American Camelid embryos. Both methods require ovarian superstimulation (with FSH and eCG) to obtain multiple ovulations (in vivo embryo production) or to induce follicle growth for oocyte collection (in vitro embryo production). Moreover, superstimulation entails prior administration of hormones that inhibit follicular growth (progesterone, progestagens, and estrogens). Cumulus-oocyte complexes obtained must mature in vivo (buserelin administration) or in vitro to then be subjected to in vitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection. All these techniques also require morphologically normal, motile spermatozoa to achieve fertilization. Methods used to decrease semen viscosity and to select the best spermatozoa (Percoll®; Androcoll-E™) are described. Additionally, nuclear transfer or cloning has been applied in llamas. Up to now, embryo deep-freezing and vitrification have progressed slowly but are at the height of development. Embryos that are obtained by any of these techniques, either in vivo or in vitro, need to be transferred to synchronized recipient females. The best results are achieved after transfer to the left uterine horn with an ipsilateral ovulation. No live offspring have been obtained after the transfer of cryopreserved embryos. Applying reproductive biotechnologies, such as those described, will permit the expansion of genetically selected animals in the population and also that of wild camelid species, vicunas, and guanacos, whose embryos could then be transferred to the uterus of domestic species.Fil: Trasorras, Virginia Luz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Carretero, Maria Ignacia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Neild, Deborah M.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Giuliano, Susana M.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentin

Reproducción en camélidos

Los Camélidos Sudamericanos (CSA) constituyen recursos ganaderos autóctonos por su producción de carne y fibra. La fibra es muy valorada internacionalmente por la industria textil y la carne posee muy bajo contenido en colesterol y es prácticamente la única fuente de proteínas de origen animal disponible para los habitantes de las zonas naturales que habitan los camélidos. La realidad social de las poblaciones relacionadas a la utilización de camélidos es de extrema pobreza, generalmente con necesidades básicas insatisfechas y ubicándose entre los grupos con condiciones de vida más desfavorables. A los magros ingresos que poseen, se suman las rigurosidades climáticas, un ambiente desértico y el aislamiento geográfico. Ante tanta adversidad, los camélidos constituyen una alternativa productiva esencial. Para mejorar sus ingresos, los pobladores necesitan producir más. El aumento indiscriminado del número de cabezas no resulta aconsejable pues estas zonas están expuestas al riesgo del sobrepastoreo y la desertificación. Por lo tanto, el aumento de la eficiencia productiva y especialmente reproductiva, de las tropas actuales representa la alternativa más viable para contribuir al mejoramiento de las condiciones de vida de los pobladores. Es necesario el uso de estrategias reproductivas tendientes a mejorar la producción de los rodeos y conservar el acervo genético de los futuros reproductores. Estas estrategias están representadas entre otras, por biotecnologías reproductivas como la inseminación artificial y la transferencia embrionaria. El éxito de estas estrategias se encuentra mediado por el conocimiento profundo de la anatomía y la fisiología reproductiva de estas especies. Este capítulo describe la anatomía, la fisiología y las biotecnologías reproductivas utilizadas en la hembra y el macho de CSA.Fil: Trasorras, Virginia Luz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fumuso, Fernanda Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Veiga, Maria Fernanda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Giuliano, Susana María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Miragaya, Marcelo Horacio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Carretero, Maria Ignacia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Porcine sperm vitrification II: Spheres method

Owing to current problems in boar sperm cryopreservation, this study proposes to evaluate vitrification in spheres as an alternative cryopreservation procedure, comparing the use or not of permeable cryoprotectants and two warming methods. Extended (n = 3; r = 4) and raw (n = 5; r = 2) porcine spermatozoa were diluted in media, in the absence or presence of either 4% dimethylformamide or 4% glycerol, to a final concentration of 5 × 106 spermatozoa/ml and vitrified using the spheres method. Two warming procedures were evaluated: a rapid method (30 s at 37°C) and an ultrarapid method (7 s at 75°C, followed by 30 s at 37°C). Percentages of total motility (phase contrast), membrane function (hypo-osmotic swelling test), acrosome integrity (phase contrast), sperm viability (6-carboxyfluorescein diacetate and propidium iodide stain), chromatin condensation (toluidine blue stain) and chromatin susceptibility to acid denaturation (acridine orange stain) were evaluated in the samples before and after vitrification. Results, analysed using Friedman's test, suggest that rapid warming of raw porcine spermatozoa vitrified without permeable cryoprotectants may preserve DNA condensation and integrity better than the other processing methods studied in this work. Hence, porcine sperm vitrification using spheres could be used to produce embryos with ICSI to further validate this method.Fil: Arraztoa, Claudia Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Miragaya, M. H.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Chaves, María Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Trasorras, Virginia Luz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Gambarotta, M.C.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Neild, Debora Margarita. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Teriogenología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigacion y Tecnología en Reproducción Animal; Argentin