Biotechnological potential of Phospholipase D for Loxosceles antivenom development

Loxoscelism is one of the most important forms of araneism in South America. The Health Authorities from countries with the highest incidence and longer history in registering loxoscelism cases indicate that specific antivenom should be administered during the first hours after the accident, especially in the presence or at risk of the most severe clinical outcome. Current antivenoms are based on immunoglobulins or their fragments, obtained from plasma of hyperimmunized horses. Antivenom has been produced using the same traditional techniques for more than 120 years. Although the whole composition of the spider venom remains unknown, the discovery and biotechnological production of the phospholipase D enzymes represented a milestone for the knowledge of the physiopathology of envenomation and for the introduction of new innovative tools in antivenom production. The fact that this protein is a principal toxin of the venom opens the possibility of replacing the use of whole venom as an immunogen, an attractive alternative considering the laborious techniques and low yields associated with venom extraction. This challenge warrants technological innovation to facilitate production and obtain more effective antidotes. In this review, we compile the reported studies, examining the advances in the expression and application of phospholipase D as a new immunogen and how the new biotechnological tools have introduced some degree of innovation in this field.Fil: Fingermann, Matias. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Doctor Carlos G. Malbrán". Instituto Nacional de Producción de Biológicos; ArgentinaFil: de Roodt, Adolfo Rafael. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Doctor Carlos G. Malbrán". Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Doctor Carlos G. Malbrán". Instituto Nacional de Producción de Biológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; ArgentinaFil: Miranda, Maria Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin

Sulfanilic acid-modified chitosan mini-spheres and their application for lysozyme purification from egg white

A cation exchange matrix with zwitterionic and multimodal properties was synthesized by a simple reaction sequence coupling sulfanilic acid to a chitosan based support. The novel chromatographic matrix was physico-chemically characterized by ss-NMR and ζ potential, and its chromatographic performance was evaluated for lysozyme purification from diluted egg white. The maximum adsorption capacity, calculated according to Langmuir adsorption isotherm, was 50.07 ± 1.47 mg g-1 while the dissociation constant was 0.074 ± 0.012 mg mL-1 . The process for lysozyme purification from egg white was optimized, with 81.9% yield and a purity degree of 86.5%, according to RP-HPLC analysis. This work shows novel possible applications of chitosan based materials. The simple synthesis reactions combined with the simple mode of use of the chitosan matrix represents a novel method to purify proteins from raw starting materials.Fil: Hirsch, Daniela Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Baieli, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Urtasun, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Lazaro Martinez, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas ; ArgentinaFil: Glisoni, Romina Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Miranda, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Wolman, Federico Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin

Technology and teaching in higher education: A simulation applied to the integration of concepts taught in postgraduate courses

Introducción: El objetivo de este trabajo fue implementar tecnologías de la información y la comunicación (TIC) a nivel de posgrado. En este caso particular se usó USINA, un simulador para la toma de decisiones diseñado por el Centro de Innovaciones en Tecnología y Pedagogía (CITEP), de la Universidad de Buenos Aires. Ésta permite trabajar con narraciones, estudio de casos y utilizar el “error” como método pedagógico. Métodos: 1) Diseñar una secuencia de pantallas para ser montadas en USINA utilizándola como herramienta de integración de conceptos en dos cursos de posgrado: Downstream Processing de proteínas (DSP) y Aplicaciones, Síntesis y Análisis de Péptidos Sintéticos (ASAP). 2) Aplicar una encuesta anónima para evaluar la eficiencia de USINA. 3) Realizar una clase presencial para intercambiar opiniones sobre la experiencia. Resultados y Discusión: En ambos cursos (DSP y ASAP) la experiencia resultó exitosa. El alumnado consideró que el uso de USINA permitió el andamiaje de conocimientos y la integración de conceptos al situarlo en el rol de experto. El uso de las TIC en los niveles educativos superiores sigue siendo una asignatura pendiente. A través de la experiencia aquí analizada, se abre la posibilidad de llevar esta herramienta a cursos de pregrado y con mayor número de estudiantesIntroduction: The aim of this work was to implement information and communication technologies (ICTs) at postgraduate level. In this particular case, USINA, a decision-making simulator designed by the Center for Innovation in Technology and Education (CITEP), of the University of Buenos Aires, was used. It allows working with stories, case studies and uses the "error" as a teaching method. Methods: 1) Design a sequence of screens to be mounted in the USINA platform to use it as a tool for the integration of concepts in two postgraduate courses: Protein Downstream Processing (DSP) and Applications, Synthesis and Analysis of Synthetic Peptides (ASAP). 2) Apply anonymous quiz to evaluate the efficiency of USINA. 3) Perform a class attendance to exchange opinions on the experience. Results: During both courses (DSP and ASAP) the experience was very successful. The students felt that the use of USINA enhanced learning and helped integrating concepts by situating them in the role of experts. Discussion: The use of ICTs in higher levels of education remains a pending issue. Through the experience here analyzed the possibility to bring this tool to undergraduate courses and more students is opene

Peptide Affinity Chromatography Applied to Therapeutic Antibodies Purification

The interest in therapeutic monoclonal antibodies (mAbs) has significantly grown in the pharmaceutical industry, exceeding 100 FDA mAbs approved. Although the upstream processing of their industrial production has been significantly improved in the last years, the downstream processing still depends on immobilized protein A affinity chromatography. The high cost, low capacity and short half-life of immobilized protein A chromatography matrices, encouraged the design of alternative short-peptide ligands for mAb purification. Most of these peptides have been obtained by screening combinatorial peptide libraries. These low-cost ligands can be easily produced by solid-phase peptide synthesis and can be immobilized on chromatographic supports, thus obtaining matrices with high capacity and selectivity. Furthermore, matrices with immobilized peptide ligands have longer half-life than those with protein A due to the higher stability of the peptides. In this review the design and synthesis of peptide ligands, their immobilization on chromatographic supports and the evaluation of the affinity supports for their application in mAb purification is described.Fil: Barredo, Gabriela Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Giudicessi, Silvana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Martínez Ceron, María Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Camperi, Silvia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin

Antivenenos ofídicos: comparación del desempeño de dos métodos de obtención

El envenenamiento por serpientes venenosas es frecuente en algunas zonas de Argentina, particularmente en las provincias del noreste y noroeste. Según datos del Programa Nacional de Ofidismo, el número de mordeduras es de alrededor de 1.200 anuales; son producidas casi totalmente por víboras del género Bothrops (yarará), en mucho menor número por Crotalus (cascabel) y en una cantidad todavía mucho más escasa por serpientes Micrurus (coral).Fil: Ávila, Lucía. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud;Fil: de Marco, María Belén. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud;Fil: Fingermann, Matias. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud; . Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Temprano, Guillermo Carlos. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud;Fil: Iácono, Rubén. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud; . Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Dokmetjian, José Christian. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud;Fil: Cascone, Osvaldo. Ministerio de Salud de la Nación. Dirección Nacional de Institutos de Investigación. Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud; . Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin

Friendly Strategy to Prepare Encoded One Bead−One Compound Cyclic Peptide Library

One bead−one peptide libraries allow the screening of suitable ligands for any target protein. Short cyclic peptides are ideal ligands for affinity chromatography because of their high affinity and selectivity for the target protein and stability against proteases. We designed a library synthesis strategy to facilitate the identification of cyclic peptides by MS consisting of (a) sequential incorporation of a mixture of Fmoc-Ala-OH and Fmoc-Asp[2-phenylisopropyl (OPp)]-OH (15:85) to Gly-oxymethylbenzamide-ChemMatrix (Gly-HMBA-CM) resin, (b) synthesis of the combinatorial library on the resin by the divide−couple−recombine method, (c) removal of OPp with 4% TFA, (d) peptide cyclization on solid phase through side-chain Asp and amino terminus, and (e) removal of side chain protecting groups with a 95% TFA cocktail. Peptides were cleaved from the beads with ammonia and the linear code was sequenced by MALDI-TOF MS/MS. The high capacity of ChemMatrix resin together with the sensitivity of MS allows code sequencing from a single bead.Fil: Giudicessi, Silvana Laura. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina;Fil: Gurevich Messina, Juan Manuel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; Argentina;Fil: Martínez Ceron, María Camila. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina;Fil: Erra Balsells, Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Centro de Investigaciones en Hidratos de Carbono; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina;Fil: Albericio, F.. Instituto de Investigación Biomédica; España; Universidad de Barcelona; España; Centro de Investigación Biomédica en Red en Bioingeniería, Biomateriales y Nanomedicina; España;Fil: Cascone, Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina;Fil: Camperi, Silvia Andrea. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; Argentina; Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

Fully automated screening of a combinatorial library to avoid false positives: application to tetanus toxoid ligand identification

Peptide ligands are widely used in protein purification by affinity chromatography. Here, we applied a fully automated two-stage library screening method that avoids false positive peptidyl-bead selection and applied it to tetanus toxoid purification. The first library screening was performed using only sulforhodamine (a fluorescent dye), and fluorescent beads were isolated automatically by flow cytometry and discarded. A second screening was then performed with the rest of the library, using the target protein (tetanus toxoid)-rhodamine conjugate. This time, fluorescent beads were isolated, and peptide sequences were identified by matrix-assisted laser desorption/ionization tandem mass spectrometry. Those appearing with greater frequency were synthesized and immobilized on agarose to evaluate a range of chromatographic purification conditions. The affinity matrix PTx1-agarose (Ac-Leu-Arg-Val-Tyr-His-Gly-Gly-Ala-Gly-Lys-agarose) showed the best performance when 20 mM sodium phosphate, 0.05% Tween 20, pH 5.9 as adsorption buffer and 100 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, pH 8.0 as elution buffer were used. A pure tetanus toxoid (Ttx) was loaded on a chromatographic column filled with the PTx1 matrix, and 96% adsorption was achieved, with a Kd of 9.18 ± 0.07 nmol/L and a qm of 1.31 ± 0.029 μmol Ttx/mL matrix. Next, a Clostridium tetani culture supernatant treated with formaldehyde (to obtain the toxoid) was applied as a sample. The sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis analysis showed a band, identified by electrospray ionization mass spectrometry as the Ttx, that appeared only in the elution fraction, where an S-layer protein was also detected.Fil: Martínez Ceron, María Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Avila, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Giudicessi, Silvana Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Minoia, Juan Mauricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Fingermann, Matias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Camperi, Silvia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Albericio, Fernando. Universidad de Barcelona; EspañaFil: Cascone, Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin

Variability of the protein composition of argentinian bothrops alternatus venom and its possible relationship with the biological activity

En esta revisión se pone de manifiesto la variabilidad en la composición proteica de los venenos de Bothrops alternatus entre distintas poblaciones de América, inclusive Argentina y entre ejemplares de la misma población, la cual refleja posibles diferencias funcionales. Los perfiles de proteínas de SDS-PAGE uni o bidimensionales del veneno de B.alternatus muestran una variabilidad significativa no sólo entre las diferentes poblaciones sino también entre venenos de individuos de una misma región. Las proteínas contenidas en las principales bandas de geles 1D SDS-PAGE o 2D SDS-PAGE fueron identificadas por espectrometría de masas. La variabilidad en la composición de los venenos se refleja también en diferencias en las actividades biológicas: dosis letal, actividad hemolítica indirecta, actividad coagulante, actividad hemorrágica y actividad proteolítica. Las proteínas identificadas involucran principalmente a fosfolipasas, Factor GPIb-BP, botrocetina, FactorIX/X de coagulación y metalo- y serin-proteinasas. Estos estudios pueden ser importantes para ser considerados en la producción de antivenenos más específicos.Studies on variability in the protein composition of Bothrops alternatus venoms from american regions – including Argentina – were reviewed. The main objective is to explore if such variability is responsible for functional differences. 1 or 2D SDS-PAGE indicate that variability exists not only between different regions but also between specimens of the same region. Proteins contained in the main gel bands of 1D SDS-PAGE or in some spots of 2D SDS-PAGE were identified by mass spectrometry. They involve mainly phospholipases, glycoprotein 1b binding factor, bothrocetin, coagulation factors IX/X, and metallo and serin proteinases. As expected, structural differences are reflected in biological activities such as lethal dosis, indirect haemolytic activity, coagulant activity and proteolytic activity. These studies are important for the production of more specific antivenoms.Fil: Ávila, Lucía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; ArgentinaFil: Pavan, Carlos Humberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Biscoglio, Mirtha Josefa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; ArgentinaFil: Dokmetjian, Jose Christian. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Fingermann, Matias. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud “Dr. C. G. Malbrán”; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Valorization of cheese whey: A challenge for the industrial-scale chromatography

El suero de queso o lactosuero es un subproducto de la fabricación del queso cuya producción mundial anual ronda los 200 millones de toneladas. Su contenido proteico es de 0,6 %, lo que significa 1,2 millones de toneladas de proteínas anuales. Este subproducto industrial contiene proteínas de alto valor comercial todavía no recuperadas eficientemente en nuestro país y en muchos lugares del mundo, siendo su mayor valorización la producción de suero en polvo, lactosa o concentrados proteicos totales. En este artículo se muestra la gran cantidad de proteínas y otras moléculas que pueden ser recuperadas a partir del lactosuero y se describen los métodos utilizados para su purificación. Dentro de las proteínas de alto valor se encuentran la lactoferrina, lactoperoxidasa y la osteopontina, además de las de valor intermedio como la β-lactoglobulina, α-lactalbúmina, caseinomacropéptido e inmunoglobulinas. La purificación de estas proteínas haría rentable la manufactura de un desecho industrial altamente contaminante de costo negativo.The lactoserum or cheese whey is a by-product of the manufacture of cheese whose annual world production around 200 million tons. Its protein content is 0.6%, which means 1.2 million tons of annual protein. This industrial by-product contains proteins of high commercial value not yet recovered efficiently in our country and in many parts of the world, being the production of whey powder, lactose, or total protein concentrates its higher valuation. This article shows the large number of proteins and other molecules that can be recovered from whey and describes the methods for its purification. Within high-value proteins are lactoferrin, lactoperoxidase and osteopontin, in addition to those of intermediate value such as the βlactoglobulin and α-lactalbumin, caseinomacropeptide and immunoglobulins. The purification of these proteins would make cost-effective the manufacture of this industrial waste.Fil: Urtasun, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Hirsch, Daniela Belén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Baieli, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Miranda, Maria Victoria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Wolman, Federico Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología Industrial y Biotecnología; Argentin

Lactoferrin purification and whey protein isolate recovery from cheese whey using chitosan mini-spheres

Direct protein purification from raw materials by chromatographic media represents an enormous challenge, especially when particulate solids and high charge solute are present. In this sense, protein purification from cheese whey is an excellent opportunity to test new chromatographic matrices that can be applied to direct protein isolation. The present work shows the utility of novel multimodal chitosan-based chromatographic matrices for obtaining lactoferrin (LF) and a whey protein isolate (WPI) directly from cheese whey without any pretreatment. A central composite experimental design was used to optimise an operative sequence. This sequence involved LF capture using sulfanilic acid-modified chitosan mini-spheres followed by the capture of the massive remnant proteins using glycidyl trimethylammonium-modified chitosan mini-spheres. Interestingly, a yield of 68% and 70% purity degree was obtained for LF, and 2.71 mg of WPI mL−1 whey was obtained in the WPI recovery process, revealing a potential industrial use of the developed matrices and processes.Fil: Hirsch, Daniela Belén. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Martinez Alvarez, Lucas Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Ministerio de Relaciones Exteriores, Comercio Interno y Culto. Dirección Nacional del Antártico. Instituto Antártico Argentino; ArgentinaFil: Urtasun, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular; ArgentinaFil: Baieli, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Lazaro Martinez, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Química Orgánica; ArgentinaFil: Glisoni, Romina Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Miranda, María V.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Cascone, Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Wolman, Federico Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentin