DESARROLLO DE UNA NUEVA PLATAFORMA VACUNAL BASADA EN EL USO DE BACULOVIRUS Y FLAGELINA

Si bien la vacunación ha sido la intervención médica más eficaz para disminuir la incidencia de enfermedades infecciosas, aun hoy existen muchas falencias vinculadas principalmente a la respuesta inmune inducidas por muchas vacunas y a la especificidad de las distintas poblaciones a inmunizar. Es por esto que en la actualidad es necesario el desarrollo de vacunas novedosas que logren sortear estas deficiencias y a la vez consigan reducir los efectos adversos de las mismas. En este contexto el rol de los adyuvantes como potenciadores y moduladores de la respuesta inmune inducida por la vacunación, ha tomado gran relevancia en los últimos años. Gracias a la mejor comprensión del papel de los receptores de la respuesta inmune innata en la articulación de la respuesta adaptativa, se han propuesto distintos agonistas de los receptores Toll (TLR) como posibles adyuvantes. Los baculovirus (BVs), son vectores vacunales de origen no humano fáciles de manipular, permiten la expresión de moléculas en distintas localizaciones de la partícula viral. Poseen un fenotipo brotante capaz de transducir un amplio espectro de células de mamíferos y con capacidad de activar la respuesta inmune innata en forma dependiente e independiente de TLR9. La flagelina (FliC) es un ligando de TLR5 que ha demostrado capacidad adyuvante mucosal, al ser coadministrado con antígenos o empleando antígenos quiméricos por fusión. Basado en esto y considerando que una variedad de estudios ha mostrado que ciertas combinaciones de TLR pueden inducir una fuerte respuesta inmune, en mi plan de trabajo postdoctoral nos planteamos utilizar esta estrategia para generar una plataforma vacunal basada en baculovirus y flagelina, que mejore las propiedades biológicas exhibidas individualmente. Se generarán BVs de AcMNPV que expresen FLliC y OVA como antígeno modelo. En esta etapa del trabajo estudiaremos tanto la bioseguridad, como la respuesta inmune celular y humoral inducida por la coadministración de ambos adyuvantes mediante el empleo del modelo murino de inmunización intranasal

Potential therapeutic targets for growth arrest of colorectal cancer cells exposed to PTHrP

Although PTHrP is implicated in several cancers, its role in chemoresistance is not fully elucidated. We found that in CRC cells, PTHrP exerts proliferative and protective effects and induces cell migration. The aim of this work was to further study the effects of PTHrP in CRC cells. Herein we evidenced, for the first time, that PTHrP induces resistance to CPT-11 in Caco-2 and HCT116 cells; although both cell lines responded to the drug through different molecular mechanisms, the chemoresistance by PTHrP in these models is mediated through ERK, which in turn is activated by PCK, Src and Akt. Moreover, continue administration of PTHrP in nude mice xenografts increased the protein levels of this MAPK and of other markers related to tumorigenic events. The understanding of the molecular mechanisms leading to ERK 1/2 activation and the study of ERK targets may facilitate the development of new therapeutic strategies for CRC treatment.Facultad de Ciencias Veterinaria

Evaluación de riesgo ecológica

La producción de bienes y servicios por parte del hombre pueden generar una variedad de estresores físicos, químicos y biológicos que producen o pueden producir impactos negativos sobre el ambiente y la integridad estructural y/o funcional de los ecosistemas. En consecuencia, resulta fundamental disponer de metodologías apropiadas que permitan identificar los principales peligros y efectos sobre los ecosistemas, evaluar los riesgos asociados y gestionar las medidas necesarias para su manejo. La Ecotoxicología tiene dentro de sus objetivos, proporcionar conocimiento básico para la identificación y valoración de la peligrosidad de diferentes sustancias químicas. Esta información puede incorporarse en un esquema conocido como Evaluación de Riesgos, siendo una valiosa herramienta disponible para evaluar el riesgo de una sustancia sobre la salud humana y el medio ambiente; y ha sido adoptada de manera amplia en distintas legislaciones nacionales e internacionales. Los tomadores de decisiones tienen el desafío de resolver problemas ambientales complejos asociados con las presiones crecientes generadas por las actividades humanas sobre los ecosistemas. Estos desafíos se hacen difíciles por la cantidad y diversidad de perturbaciones humanas y se amplifica más por la comprensión imperfecta de los sistemas ecológicos. El proceso de la Evaluación de Riesgos aborda la complejidad ecológica intentando incorporar la incertidumbre en la caracterización de los impactos provocados por el hombre sobre los ecosistemas. La Evaluación del Riesgo Ecológico es el proceso por el que se define la probabilidad de un determinado estrés para producir efectos ecológicamente adversos; en la bibliografía se utiliza la sigla ERA (Ecological Risk Assessment) para hacer referencia a este proceso. En el presente capítulo focalizaremos la ERA para la evaluación de estresores químicos individuales, aunque hay que mencionar que el esquema utilizado se ha generalizado tanto para múltiples estresores como para estresores de otra naturaleza (no solo de origen químico). Las ERAs se derivan de necesidades específicas para evaluar los impactos en el medio ambiente inducidos por el hombre. Además del contexto vinculado a la investigación académica, muchas ERAs realizadas son motivados por la legislación y llevadas adelante por organismo gubernamentales; como así también por la industria privada para determinar futuros riesgos y responsabilidades asociados con el desarrollo, uso y eliminación de productos nuevos o existentes (por ejemplo, plaguicidas y productos químicos industriales).Facultad de Ciencias Exacta

Potential therapeutic targets for growth arrest of colorectal cancer cells exposed to PTHrP

Although PTHrP is implicated in several cancers, its role in chemoresistance is not fully elucidated. We found that in CRC cells, PTHrP exerts proliferative and protective effects and induces cell migration. The aim of this work was to further study the effects of PTHrP in CRC cells. Herein we evidenced, for the first time, that PTHrP induces resistance to CPT-11 in Caco-2 and HCT116 cells; although both cell lines responded to the drug through different molecular mechanisms, the chemoresistance by PTHrP in these models is mediated through ERK, which in turn is activated by PCK, Src and Akt. Moreover, continue administration of PTHrP in nude mice xenografts increased the protein levels of this MAPK and of other markers related to tumorigenic events. The understanding of the molecular mechanisms leading to ERK 1/2 activation and the study of ERK targets may facilitate the development of new therapeutic strategies for CRC treatment.Facultad de Ciencias Veterinaria

Potential therapeutic targets for growth arrest of colorectal cancer cells exposed to PTHrP

Although PTHrP is implicated in several cancers, its role in chemoresistance is not fully elucidated. We found that in CRC cells, PTHrP exerts proliferative and protective effects and induces cell migration. The aim of this work was to further study the effects of PTHrP in CRC cells. Herein we evidenced, for the first time, that PTHrP induces resistance to CPT-11 in Caco-2 and HCT116 cells; although both cell lines responded to the drug through different molecular mechanisms, the chemoresistance by PTHrP in these models is mediated through ERK, which in turn is activated by PCK, Src and Akt. Moreover, continue administration of PTHrP in nude mice xenografts increased the protein levels of this MAPK and of other markers related to tumorigenic events. The understanding of the molecular mechanisms leading to ERK 1/2 activation and the study of ERK targets may facilitate the development of new therapeutic strategies for CRC treatment.Fil: Martín, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Gigola, Graciela. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Zwenger, Ariel. Hospital Provincial de Neuquén; ArgentinaFil: Carriquiriborde, Martin. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: Gentil, Florencia. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: Gentili, Claudia Rosana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentin

Housing systems evaluation for immunodeficient mice under experience

Las investigaciones que utilizan ratones inmunodeficientes requieren el uso de una infraestructura adecuada y estandarizada, que debe garantizar el mantenimiento correcto de estas cepas y asegurar la obtención de resultados confiables. El desarrollo y uso de equipamientos con tecnología destinada a controlar el macro y microambiente permite mantener pequeños grupos de animales en instalaciones en las que no se cuenta con barreras sanitarias absolutas. Uno es el aislador flexible (AF); y otro las estanterías con cajas individualmente ventiladas (CIV), ambos equipos independizan el microambiente del macroambiente. El objetivo de este trabajo fue evaluar las ventajas y desventajas de cada uno de estos sistemas de alojamiento para ratones inmunodeficientes. Durante un año se mantuvieron dos grupos de ratones de la cepa CBA/N-xid libres de patógenos específicos en un AF y en una ECIV respectivamente. Se realizaron controles microbiológicos del ambiente y de los animales. Se evaluó comparativamente el costo del equipamiento, montaje, mantenimiento, procedimientos de manejo, cuidados, capacidad, controles, durabilidad y espacio requerido. Los resultados demostraron que si bien existen diferencias entre los sistemas y en ambos se puede mantener adecuadamente roedores inmunodeficientes, las ECIV son más ventajosas a pesar de su costo elevado.Immunodeficient mice strains maintenance requires special and standarized equipments in order to assure their quality and to obtain reliable experimental results. The development of new technologies and equipments used to control the animal macro and microenvironment in facilities with no barrier systems allow to house small number of rodents along the experiment. Flexible isolators (FI) and individual ventilated cages (IVC) represents two equipments that are able to control environmental factors. The aim of this study was to evaluate FI and IVC efficiency when they are used to keep immunodeficient mice. Two SPF CBA/N-xid mice groups were housed one year in a FI and in an IVC respectively. Environmental and animals microbiological monitoring was performed. The cost, construction, durability, space requirements, maintenance processes, monitoring and technical procedures were evaluated and compared. The results show that although differences among these equipments, both are suitable for the maintenance of immunodeficient mice. However, the results also show that the IVC, though expensive, have advantages over flexible isolators.Facultad de Ciencias Veterinaria

Housing systems evaluation for immunodeficient mice under experience

Las investigaciones que utilizan ratones inmunodeficientes requieren el uso de una infraestructura adecuada y estandarizada, que debe garantizar el mantenimiento correcto de estas cepas y asegurar la obtención de resultados confiables. El desarrollo y uso de equipamientos con tecnología destinada a controlar el macro y microambiente permite mantener pequeños grupos de animales en instalaciones en las que no se cuenta con barreras sanitarias absolutas. Uno es el aislador flexible (AF); y otro las estanterías con cajas individualmente ventiladas (CIV), ambos equipos independizan el microambiente del macroambiente. El objetivo de este trabajo fue evaluar las ventajas y desventajas de cada uno de estos sistemas de alojamiento para ratones inmunodeficientes. Durante un año se mantuvieron dos grupos de ratones de la cepa CBA/N-xid libres de patógenos específicos en un AF y en una ECIV respectivamente. Se realizaron controles microbiológicos del ambiente y de los animales. Se evaluó comparativamente el costo del equipamiento, montaje, mantenimiento, procedimientos de manejo, cuidados, capacidad, controles, durabilidad y espacio requerido. Los resultados demostraron que si bien existen diferencias entre los sistemas y en ambos se puede mantener adecuadamente roedores inmunodeficientes, las ECIV son más ventajosas a pesar de su costo elevado.Immunodeficient mice strains maintenance requires special and standarized equipments in order to assure their quality and to obtain reliable experimental results. The development of new technologies and equipments used to control the animal macro and microenvironment in facilities with no barrier systems allow to house small number of rodents along the experiment. Flexible isolators (FI) and individual ventilated cages (IVC) represents two equipments that are able to control environmental factors. The aim of this study was to evaluate FI and IVC efficiency when they are used to keep immunodeficient mice. Two SPF CBA/N-xid mice groups were housed one year in a FI and in an IVC respectively. Environmental and animals microbiological monitoring was performed. The cost, construction, durability, space requirements, maintenance processes, monitoring and technical procedures were evaluated and compared. The results show that although differences among these equipments, both are suitable for the maintenance of immunodeficient mice. However, the results also show that the IVC, though expensive, have advantages over flexible isolators.Facultad de Ciencias Veterinaria

Prevalencia de anticuerpos contra el virus de la encefalomielitis murina de Theiler en colonias de ratones de Argentina

En el presente estudio se analizó la prevalencia de anticuerpos contra el virus de la encefalomielitis de Theiler en colonias de ratones de Argentina. En el primer ensayo se analizaron 352 sueros por ELISA indirecto (iELISA) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). La prevalencia establecida fue del 73 y 67 %, respectivamente, siendo los valores de sensibilidad, especificidad y kappa de 100%, 76,2% y 0,8 respectivamente. En un segundo análisis realizado unicamente por iELISA, en 558 sueros provenientes de 53 colonias, se obtuvo una seroprevalencia de 72.6%, entre valores de 0% hasta 100% .La prevalencia más elevada se observó en bioterios sin barreras sanitarias. Las infecciones del virus Theiler en colonias de ratones puede interferir con los resultados experimentales; esto se relaciona con una infraestructura deficiente, falta de entrenamiento del personal y un manejo inadecuado de la colonia.This study analyzes the prevalence to antibodies of Theiler’s murine encephalomyelitis virus (TMEV) in mice colonies of Argentina. A first study performed by indirect enzymelinked immunosorbent assay (iELISA) and indirect fluorescent antibody test (IFI) on 352 sera determined a prevalence of antibodies of 73% and 67% respectively with sensitivity of 100% and 76,2% respectively and 0,8 of kappa value. In a second assay performed only by iELISA on 558 sera from 53 colonies a seroprevalence of 72,6% varying between 0% to 100% was obtained. The higher values were found in those animal facilities without barrier systems. Theiler virus infections in mouse colonies could interfere with experimental results; this may be due to a lack of barriers, and poor staff training and colony management in the facility

El conejo como animal de experimentación

Se describen características del conejo como su origen, taxonomía, comportamiento, razas, cepas, genética, usos en el laboratorio, producción, reproducción, enfermedades, etc.Facultad de Ciencias Veterinaria

El cobayo como animal de experimentación

Se describen características del cobayo como su origen, taxonomía, comportamiento, razas, cepas, genética, usos en el laboratorio, producción, reproducción, enfermedades, etc.Facultad de Ciencias Veterinaria