O uso da histopatologia por microscopia de luz em estudos com peixes dulcícolas em condições ambientais controladas

Orientador : Prof. Dr. Antonio OstrenskyCo-orientadora : Profª. Drª. Gisele Geraldine Castilho WestphalTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 25/02/2016Inclui referênciasArea de concentraçãoResumo: A histopatologia por microscopia de luz é uma ferramenta bastante usada em estudos dos efeitos agudos e crônicos de xenobióticos em peixes e também na caracterização de enfermidades que os acometem. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da histopatologia por microscopia de luz como biomarcador da exposição de peixes a diferentes agentes estressores, utilizando para isso índices analíticos quantitativos de impactos teciduais. A tese foi dividida em quatro capítulos. O primeiro é um artigo de revisão bibliográfica que aborda o uso da histopatologia de luz como ferramenta de análise branquial, hepática e renal em peixes. Foram analisados 50 artigos, que registraram a ocorrência de 32 alterações branquiais, 46 hepáticas e 40 renais. A presença destas alterações, entretanto, não foi relacionada a um tipo específico de agente estressor. A análise evidenciou divergências com relação à metodologia analítica adotada por diferentes autores, dificuldades no uso da nomenclatura descritiva de determinadas lesões e relacionados ao uso de diferentes índices histopatológicos quantitativos. O segundo capítulo teve por objetivos descrever e quantificar as alterações teciduais observadas em exemplares de Rhamdia quelen (jundiá) e em Metynnis maculatus (pacu) durante o tratamento contra a ictiofitiríase. Para isso foram utilizados três índices: o Índice do Órgão (Iorg), o Índice de Impacto Branquial (IIBr) e o Índice de Alterações Histológicas (IAH) (os mesmos índices foram aplicados nos capítulos 3 e 4). Não foi possível estabelecer uma relação de nexo causal entre as alterações observadas e a parasitose analisada. Foram evidenciadas diferentes respostas teciduais apresentadas pelas brânquias das diferentes espécies, quando do uso desses diferentes índices. O terceiro capítulo objetivou testar a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus ao sal iodado e utilizar a histopatologia branquial e hepática como biomarcador da exposição dos animais ao sal. Foram registradas 10 alterações branquiais, além da presença do parasito I. multifiliis. Para exemplares de R. quelen, os animais expostos ao sal apresentaram maior prevalência de congestão, perda de adesão epitelial e edema que os animais do grupo controle. Os índices analisados de forma agrupada mostraram que os índices Iorg e IIBrT foram superiores para exemplares de M. maculatus enquanto que o IAH, foi superior para R. quelen. Para R. quelen, congestão hepática foi mais prevalente no tratamento do que no controle, sugerindo a ocorrência de um desequilíbrio hidroeletrolítico como fator desencadeador da congestão. No último capítulo foi testada a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus à amônia e avaliada as respostas histopatológicas branquiais e hepáticas derivadas da exposição dos animais a este composto. Nas brânquias foram registradas 13 lesões teciduais. Em exemplares de M. maculatus foi observado o aumento do IIBrT da alteração hiperplasia de epitélio de acordo com o aumento da concentração de amônia. Para R. quelen o mesmo foi observado para congestão. Nenhuma das alterações observadas no fígado foi relacionada à concentração de amônia. Os índices Iorg e IIBrT analisados de forma agrupada mostram valores superiores para exemplares de M. maculatus. Entretanto, quando usado o IAH, valor superior foi observado para R. quelenAbstract: The histopathology by light microscopy is a widely used tool in studies of acute and chronic effects of xenobiotics in fish and also the characterization of diseases that affect. The objective of this study was to evaluate the efficiency of histopathology by light microscopy as a biomarker of exposure of fish to different stressors, making use of quantitative analytical indices of tissue impacts. The thesis was divided into four chapters. The first is a literature review article that discusses the use of light histopathology as gill analysis tool, liver and kidney in fish. 50 articles that reported the occurrence of 32 gill changes, 46 liver and 40 kidney were analyzed. The presence of these changes, however, was not related to a specific type of stressor. The analysis showed differences regarding the analytical methodology used by different authors, difficulties in the use of descriptive nomenclature of certain injuries and related to the use of different quantitative histopathology indices. The second chapter aimed to describe and quantify tissue changes observed in specimens of R. quelen (silver catfish) and Metynnis maculatus (pacu) during treatment against ictiofitiríase. For this we used three indices: the Board Index (Iorg), the Branchial Impact Index (BII) and Histopathological Alteration Index (HAI) (the same indexes were later applied in Chapters 3 and 4). Could not establish a causal relationship between the alterations observed and analyzed parasitosis. They were shown different tissue responses submitted by the gills of different species, when the use of these different rates. The third chapter aimed to test the sensitivity of R. quelen and M. maculatus to iodized salt and use the gill and liver histopathology as a biomarker of exposure of animals to salt. It recorded 10 gill changes and the presence of the parasite I. multifiliis. For copies of R. quelen, animals exposed to salt had a higher prevalence of congestion, loss of epithelial adhesion and edema than the control group. The indexes analyzed in an aggregated manner showed that Iorg and BIIT indexes were higher for M. maculatus copies while the HAI, was superior to R. quelen. For copies of R. quelen, liver congestion was more prevalent in treatment than in the control, suggesting the occurrence of an electrolyte imbalance as triggering factor of congestion. In the last chapter we tested the sensitivity of R. quelen copies and M. maculatus to ammonia and evaluated the gill and liver histopathologic responses derived from animal exposure to this compound. In the gills were recorded 13 tissue lesions. In M. maculatus specimens was observed the increase in epithelial hyperplasia BIIT changes according to the concentration of ammonia. R. quelen the same was observed for congestion. In relation to the liver five tissue changes were identified. None of them, however, was related to the concentration of ammonia. The Iorg and BIIT indices analyzed in grouped form show higher values for M. maculatus copies. However, when used HAI, higher than was observed for R. quelen

Avaliação das taxas de filtração de Crassostrea Brasiliana (Bivalvia, Ostreidae) em diferentes condições de laboratório

Orientador: Prof. Dr. Antonio OstrenskyDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciencias Veterinárias. Defesa: Curitiba,24/02/2011Bibliografia: fls. 32-41Resumo: As taxas de clareamento de Crassostrea brasiliana - expressão do número de células de microalgas removidas da água pela ostra, em um determinado período de tempo - foram determinadas em diferentes condições experimentais de laboratório. As ostras foram testadas individualmente e tratadas como unidades experimentais independentes. Análises histológicas confirmaram que as ostras se alimentaram das microalgas durante os experimentos. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) nas taxas de clareamento quando as ostras foram expostas a diferentes regimes de aclimatação; diferentes espécies de microalgas; e quando um mesmo lote de ostras foi exposto a variações diárias de temperatura. Quando diferentes lotes de ostra foram expostas a distintas temperaturas foram observadas diferenças significativas nas taxas de clareamento entre tratamentos, porém sem qualquer correlação específica com as temperaturas testadas. As ostras que permaneceram por apenas duas horas expostas ao alimento apresentaram taxas de clareamento inferiores às demais (5,6 e 12 horas) (p0.05) in oyster’s clearance rates when they were exposed to different regimes of acclimatization; different microalgae species, and when the same batch of oysters was exposed to daily variations of temperature. When different batches of oysters were exposed to different temperatures differences in clearance rates between treatments were significant, but with no specific correlation on the temperatures. The oysters that remained for two hours exposed to the microalgae presented rates lower when compared to the others batches (5, 6 and 12 hours) (p<0.01). Salinity was the parameter that most affected the oyster’s clearance rate. In extreme salinities (5 or 30 psu) clearance rates were close to zero. The results suggest that low influence in the clearance rates of C. brasiliana, by the most of the tested variables, may be related to the large individual variability of the organisms used in the experiments

DETERMINAÇÃO DO PERÍODO REPRODUTIVO E DO TAMANHO DE MATURAÇÃO FUNCIONAL DOS OVÁRIOS DE UCIDES CORDATUS (LINNAEUS, 1763) (BRACHYURA, OCYPODIDAE) NA BAÍA DE VITÓRIA, ESPÍRITO SANTO.

O caranguejo Ucides cordatus (Linnaeus, 1763), conhecido vulgarmente como caranguejo-uçá, destaca-se como importante recurso pesqueiro na costa Brasileira, possuindo legislação específica para sua proteção. Este estudo teve como objetivo a análise do período reprodutivo e o tamanho de primeira maturação de fêmeas de U. cordatus, como subsídio à legislação de proteção à espécie no Estado do Espírito Santo. Os animais foram coletados mensalmente, em uma área do manguezal da Baía de Vitória (20º 14’ 20” S e 40º 18’ 30” W), no município da Serra, ES, durante o período de um ano (outubro de 1998 a setembro de 1999). As coletas foram realizadas manualmente com o auxílio de caranguejeiros. No laboratório, procedeu-se à biometria dos caranguejos. As 280 fêmeas coletadas foram mensuradas, pesadas e a presença de ovos nos pleópodos, registrada. A determinação do período reprodutivo foi feita através da análise da Relação Gonadossomática, do Fator de Condição Alométrico e da presença de fêmeas ovígeras. No ano analisado, o período reprodutivo estendeu-se de dezembro a abril. O tamanho mínimo de primeira maturação das fêmeas foi de 43,2 mm de largura e 32,7 mm de comprimento de carapaça

O uso da histopatologia por microscopia de luz em estudos com peixes dulcícolas em condições ambientais controladas

Orientador : Prof. Dr. Antonio OstrenskyCo-orientadora : Profª. Drª. Gisele Geraldine Castilho WestphalTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 25/02/2016Inclui referênciasArea de concentraçãoResumo: A histopatologia por microscopia de luz é uma ferramenta bastante usada em estudos dos efeitos agudos e crônicos de xenobióticos em peixes e também na caracterização de enfermidades que os acometem. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da histopatologia por microscopia de luz como biomarcador da exposição de peixes a diferentes agentes estressores, utilizando para isso índices analíticos quantitativos de impactos teciduais. A tese foi dividida em quatro capítulos. O primeiro é um artigo de revisão bibliográfica que aborda o uso da histopatologia de luz como ferramenta de análise branquial, hepática e renal em peixes. Foram analisados 50 artigos, que registraram a ocorrência de 32 alterações branquiais, 46 hepáticas e 40 renais. A presença destas alterações, entretanto, não foi relacionada a um tipo específico de agente estressor. A análise evidenciou divergências com relação à metodologia analítica adotada por diferentes autores, dificuldades no uso da nomenclatura descritiva de determinadas lesões e relacionados ao uso de diferentes índices histopatológicos quantitativos. O segundo capítulo teve por objetivos descrever e quantificar as alterações teciduais observadas em exemplares de Rhamdia quelen (jundiá) e em Metynnis maculatus (pacu) durante o tratamento contra a ictiofitiríase. Para isso foram utilizados três índices: o Índice do Órgão (Iorg), o Índice de Impacto Branquial (IIBr) e o Índice de Alterações Histológicas (IAH) (os mesmos índices foram aplicados nos capítulos 3 e 4). Não foi possível estabelecer uma relação de nexo causal entre as alterações observadas e a parasitose analisada. Foram evidenciadas diferentes respostas teciduais apresentadas pelas brânquias das diferentes espécies, quando do uso desses diferentes índices. O terceiro capítulo objetivou testar a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus ao sal iodado e utilizar a histopatologia branquial e hepática como biomarcador da exposição dos animais ao sal. Foram registradas 10 alterações branquiais, além da presença do parasito I. multifiliis. Para exemplares de R. quelen, os animais expostos ao sal apresentaram maior prevalência de congestão, perda de adesão epitelial e edema que os animais do grupo controle. Os índices analisados de forma agrupada mostraram que os índices Iorg e IIBrT foram superiores para exemplares de M. maculatus enquanto que o IAH, foi superior para R. quelen. Para R. quelen, congestão hepática foi mais prevalente no tratamento do que no controle, sugerindo a ocorrência de um desequilíbrio hidroeletrolítico como fator desencadeador da congestão. No último capítulo foi testada a sensibilidade de R. quelen e M. maculatus à amônia e avaliada as respostas histopatológicas branquiais e hepáticas derivadas da exposição dos animais a este composto. Nas brânquias foram registradas 13 lesões teciduais. Em exemplares de M. maculatus foi observado o aumento do IIBrT da alteração hiperplasia de epitélio de acordo com o aumento da concentração de amônia. Para R. quelen o mesmo foi observado para congestão. Nenhuma das alterações observadas no fígado foi relacionada à concentração de amônia. Os índices Iorg e IIBrT analisados de forma agrupada mostram valores superiores para exemplares de M. maculatus. Entretanto, quando usado o IAH, valor superior foi observado para R. quelenAbstract: The histopathology by light microscopy is a widely used tool in studies of acute and chronic effects of xenobiotics in fish and also the characterization of diseases that affect. The objective of this study was to evaluate the efficiency of histopathology by light microscopy as a biomarker of exposure of fish to different stressors, making use of quantitative analytical indices of tissue impacts. The thesis was divided into four chapters. The first is a literature review article that discusses the use of light histopathology as gill analysis tool, liver and kidney in fish. 50 articles that reported the occurrence of 32 gill changes, 46 liver and 40 kidney were analyzed. The presence of these changes, however, was not related to a specific type of stressor. The analysis showed differences regarding the analytical methodology used by different authors, difficulties in the use of descriptive nomenclature of certain injuries and related to the use of different quantitative histopathology indices. The second chapter aimed to describe and quantify tissue changes observed in specimens of R. quelen (silver catfish) and Metynnis maculatus (pacu) during treatment against ictiofitiríase. For this we used three indices: the Board Index (Iorg), the Branchial Impact Index (BII) and Histopathological Alteration Index (HAI) (the same indexes were later applied in Chapters 3 and 4). Could not establish a causal relationship between the alterations observed and analyzed parasitosis. They were shown different tissue responses submitted by the gills of different species, when the use of these different rates. The third chapter aimed to test the sensitivity of R. quelen and M. maculatus to iodized salt and use the gill and liver histopathology as a biomarker of exposure of animals to salt. It recorded 10 gill changes and the presence of the parasite I. multifiliis. For copies of R. quelen, animals exposed to salt had a higher prevalence of congestion, loss of epithelial adhesion and edema than the control group. The indexes analyzed in an aggregated manner showed that Iorg and BIIT indexes were higher for M. maculatus copies while the HAI, was superior to R. quelen. For copies of R. quelen, liver congestion was more prevalent in treatment than in the control, suggesting the occurrence of an electrolyte imbalance as triggering factor of congestion. In the last chapter we tested the sensitivity of R. quelen copies and M. maculatus to ammonia and evaluated the gill and liver histopathologic responses derived from animal exposure to this compound. In the gills were recorded 13 tissue lesions. In M. maculatus specimens was observed the increase in epithelial hyperplasia BIIT changes according to the concentration of ammonia. R. quelen the same was observed for congestion. In relation to the liver five tissue changes were identified. None of them, however, was related to the concentration of ammonia. The Iorg and BIIT indices analyzed in grouped form show higher values for M. maculatus copies. However, when used HAI, higher than was observed for R. quelen

DETERMINAÇÃO DO PERÍODO REPRODUTIVO E DO TAMANHO DE MATURAÇÃO FUNCIONAL DOS OVÁRIOS DE UCIDES CORDATUS (LINNAEUS, 1763) (BRACHYURA, OCYPODIDAE) NA BAÍA DE VITÓRIA, ESPÍRITO SANTO.

O caranguejo Ucides cordatus (Linnaeus, 1763), conhecido vulgarmente como caranguejo-uçá, destaca-se como importante recurso pesqueiro na costa Brasileira, possuindo legislação específica para sua proteção. Este estudo teve como objetivo a análise do período reprodutivo e o tamanho de primeira maturação de fêmeas de U. cordatus, como subsídio à legislação de proteção à espécie no Estado do Espírito Santo. Os animais foram coletados mensalmente, em uma área do manguezal da Baía de Vitória (20º 14’ 20” S e 40º 18’ 30” W), no município da Serra, ES, durante o período de um ano (outubro de 1998 a setembro de 1999). As coletas foram realizadas manualmente com o auxílio de caranguejeiros. No laboratório, procedeu-se à biometria dos caranguejos. As 280 fêmeas coletadas foram mensuradas, pesadas e a presença de ovos nos pleópodos, registrada. A determinação do período reprodutivo foi feita através da análise da Relação Gonadossomática, do Fator de Condição Alométrico e da presença de fêmeas ovígeras. No ano analisado, o período reprodutivo estendeu-se de dezembro a abril. O tamanho mínimo de primeira maturação das fêmeas foi de 43,2 mm de largura e 32,7 mm de comprimento de carapaça

Ecological analysis of the ichthyofaunal community ten years after a diesel oil spill at Serra do Mar, Paraná state, Brazil

In February 2001, an accidental spill dumped 52,000 litres of diesel oil in Serra do Mar, Paraná state, Brazil, contaminating streams. This study aimed to evaluate if fish communities currently inhabiting environments exposed to the oil spill still showing evidence of spill-related impacts. Ichthyofauna communities were monitored in five rivers located in the region of the spill. Two sites exposed to oil (Meio and Sagrado rivers) were considered treatment sites, and three unexposed sites with environmental characteristics similar to the treatment sites (Pinto, Passa Sete and Marumbi rivers) were considered control sites. Analysis of water quality parameters indicated that sites within rivers were more similar than sites among rivers. The diversity and species composition of fish communities differed between the treatment and control groups and among the rivers. The distribution and species composition of ichthyofaunal communities likely reflect the environmental characteristics of each river and not related to the environmental contamination resulting from the oil spill