Produção de plantas transgênicas de café resistentes ao herbicida glufosinato de amônio

Plantas transgênicas de Coffea canephora P. resistentes ao herbicida glufosinato de amônio foram regeneradas a partir de explantes foliares cocultivados com Agrobacterium tumefaciens EHA105 contendo o plasmídio pCAMBIA3301, que contém os genes bar e uidA ambos sob controle do promotor 35S ou pIBI3 (3300 contendo o gene da ACC oxidase, antisenso) ou ainda bombardeados com o plasmídio pCAMBIA3301. Embriogênese somática direta foi induzida no meio contendo ¼ dos macros e metade dos micronutrientes do meio MS, constituintes orgânicos do meio B5 e 30 g.L 1 de sacarose, suplementado com 5mM N 6 ? (2isopentenil) adenina (2iP) e 10 mM de glufosinato de amônio para seleção de embriões transgênicos putativos. A presença e a integração do gene bar foram confirmados pelas análises de PCR e Southern blot. As plantas transgênicas pulverizadas com 1600 mg.L 1 do herbicida Finale que contém glufosinato como ingrediente ativo, não apresentaram sintomas de toxidez, mantiveram a coloração e continuaram crescendo normalmente na aclimatação ex vitro

Análise da diversidade nucleotídica intra e interespecífica de Coffea spp.

Os bancos de dados de ESTs do gênero #Coffea# têm auxiliado os estudos de identificação de marcadores moleculares. Entre estes trabalhos, foi desenvolvido um #pipeline# para busca de polimorfismos que resultou na identificação de 23.062 SNPs e INDELS presentes em dois genótipos de #C. arabica# e quatro de #C canephora#. Devido a baixa representatividade genotípica dos dados de ESTs, esse trabalho buscou validar os polimorfismos detectados pelo #pipeline# e avaliar a frequência dos mesmos em um painel maior de genótipos, representativo da diversidade de #C. arabica# (12 genótipos) e #C. canephora# (oito genótipos). Também foram avaliados os polimorfismos entre estas duas espécies com #C. eugenioides#, #C. racemosa# e #Psilanthus bengalensis#. Para a análise foram selecionados oito genes envolvidos na biossíntese de diterpenos e açúcares, importantes compostos relacionados à qualidade da bebida, bem como um gene mitocondrial e um cloroplastídico, que permitem também a inferência sobre a história evolutiva dos genes analisados. Fragmentos dos respectivos genes foram amplificados por PCR e os produtos foram sequenciados. O alinhamento das sequências e a detecção manual dos polimorfismos foram realizados pelo programa #Codon Code Aligner#. Aproximadamente 7,6 kb foram explorados para identificação de 465 polimorfismos incluindo 416 SNPs, 18 INDELs e 31 SSR. Uma frequência de 6,1 SNP foi observada a cada 100 pb. Quando todos os polimorfismos foram considerados, verificou-se que 110 correspondem a diferenças entre #Psilanthus# e #Coffea# e 360 correspondem a diferenças entre as espécies de Coffea; destes 266 são intra ou inter específicos para #C. canephora# e #C. eugenioides#, espécies ancestrais de C. arabica. Em C. arabica foram encontrados 134 SNPs, sendo que aproximadamente 87% destes correspondem a polimorfismos entre os parentais da espécie e apenas 13% correspondem a diferenças intraespecíficas, sendo que maioria dos polimorfismos intraespecíficos verificados não é fixada na população. A partir dos resultados inferiu-se que a análise realizada pelo #pipeline# foi relevante para identificar alguns polimorfismos que diferenciam os genomas dos ancestrais de #C. arabica#, mas apresenta limitações na detecção de SNPs intraespecíficos importantes; por outro lado, o painel diverso de genótipos, permitiu a detecção de vários polimorfismos ainda não identificados, importantes para o mapeamento genético, análises de diversidade e de evolução molecular ao nível intraespecífico. Os dados obtidos poderão ser utilizados tanto nos programas de mapeamento genético de #C. arabica# e #C. canephora#, como para aplicações práticas de genotipagem ou no melhoramento através de seleção assistida por marcadores (SAM), além de serem úteis para estudos evolutivos e possibilitarem a escolha de genes candidatos para estudos de associação e de expressão diferencial de haplótipos relacionada à plasticidade fenotípica. Apoio Financeiro: Consórcio Pesquisa Café, CNPq. (Texte intégral

Thidiazuron como indutor de embriogênese somática em café (Coffea canephora Pierre).

Os efeitos de thidiazuron (TDZ) na indução de embriogênese somática em Coffea canephora foi investigado. Explantes foliares de C. canephora foram cultivados em um meio de cultura suplementado com diferentes concentrações de TDZ. Embriões somáticos foram observados nas concentrações de 0,25 até 2 mM, após dois meses em cultivo. Dentre os tratamentos testados, TDZ a 1 mM mostrou a mais alta freqüência de explantes com regeneração e maior número de embriões por explante. Entretanto, a indução de embriogênese somática ocorreu de forma não-sincronizada com todos os tratamentos investigados apresentando embriões em diferentes estádios de desenvolvimento

Principais doenças em cultivos de pequenas propriedades do entorno de Boa Vista

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Young stars in the periphery of the Large Magellanic Cloud

Despite their close proximity, the complex interplay between the two Magellanic Clouds, the Milky Way, and the resulting tidal features, is still poorly understood. Recent studies have shown that the Large Magellanic Cloud (LMC) has a very extended disk strikingly perturbed in its outskirts. We search for recent star formation in the far outskirts of the LMC, out to ~30 degrees from its center. We have collected intermediate-resolution spectra of thirty-one young star candidates in the periphery of the LMC and measured their radial velocity, stellar parameters, distance and age. Our measurements confirm membership to the LMC of six targets, for which the radial velocity and distance values match well those of the Cloud. These objects are all young (10-50 Myr), main-sequence stars projected between 7 and 13 degrees from the center of the parent galaxy. We compare the velocities of our stars with those of a disk model, and find that our stars have low to moderate velocity differences with the disk model predictions, indicating that they were formed in situ. Our study demonstrates that recent star formation occurred in the far periphery of the LMC, where thus far only old objects were known. The spatial configuration of these newly-formed stars appears ring-like with a radius of 12 kpc, and a displacement of 2.6 kpc from the LMC's center. This structure, if real, would be suggestive of a star-formation episode triggered by an off-center collision between the Small Magellanic Cloud and the LMC's disk.Comment: Accepted for publication in MNRA

Influence of realistic parameters on state-of-the-art LWFA experiments

We examine the influence of non-ideal plasma-density and non-Gaussian transverse laser-intensity profiles in the laser wakefield accelerator analytically and numerically. We find that the characteristic amplitude and scale length of longitudinal density fluctuations impacts on the final energies achieved by electron bunches. Conditions that minimize the role of the longitudinal plasma density fluctuations are found. The influence of higher order Laguerre-Gaussian laser pulses is also investigated. We find that higher order laser modes typically lead to lower energy gains. Certain combinations of higher order modes may, however, lead to higher electron energy gains.Comment: 16 pages, 6 figures; Accepted for publication in Plasma Physics and Controlled Fusio