Efeito protetor do probiótico Saccharomyces boulardii na infecção por Toxocara canis não se deve à ação direta sobre as larvas

SUMMARY In a previous study our group found that the probiotic Saccharomyces boulardii was capable of reducing the intensity of infection in mice with toxocariasis. In order to assess whether the mechanism involved would be a direct action of the probiotic on Toxocara canis larvae, this study was designed. Both probiotics were singly cultivated in plates containing RPMI 1640 medium and T. canis larvae. S. boulardii and B. cereus var. toyoi cultures presented 97.6% and 95.7% of larvae with positive motility, respectively, and absence of color by the dye trypan blue, not representing significant difference to the control group (p >; 0.05). We conclude that none of the probiotics showed in vitro effects on T. canis larvae and that the interaction with the intestinal mucosa is necessary for the development of the protective effect of S. boulardii.RESUMO Em estudo prévio nosso grupo verificou que o probiótico Saccharomyces boulardii foi capaz de reduzir a intensidade de infecção em camundongos com toxocaríase. Este estudo foi elaborado com o objetivo de avaliar se o mecanismo envolvido seria uma ação direta do probiótico sobre as larvas de Toxocara canis. Ambos probióticos foram cultivados, separadamente, em placas com meio RPMI1640 e larvas de T. canis. As culturas com S. boulardii e B. cereus var. toyoi apresentaram, respectivamente, 97,6% e 95,7% das larvas com motilidade positiva e ausência de coloração pelo azul de tripan, não representando diferença significativa do controle (p >; 0,05). Concluímos que nenhum dos probióticos apresentou efeito in vitro sobre as larvas de T. canis e que a interação com a mucosa intestinal é necessária para o desenvolvimento do efeito protetor de S. boulardii

Imunodiagnóstico da toxocaríase humana com antígeno TES30 recombinante

The toxocariasis is a widespread zoonosis worldwide, thus becoming an important public health problem. The diversity of clinical conditions associated with the different sites (liver, lungs, brain, eyes, lymph nodes, etc.) of the Toxocara canis larvae in the human body, hamper the diagnosis of this disease. In this context, immunological methods for detecting anti-T. canis serum antibodies were developed. Currently, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) associated with the excretorysecretory antigens of T. canis larvae (TES), and sera previously adsorved with somatic antigen of Ascaris spp. has been used as a standard method for testing of IgG anti-T. canis serum antibodies. The antigen TES is obtained from T. canis larvae cultivation and demand four months of expensive and laborious work. Given the above, recombinant antigens are being tested, aiming at improving the immunodiagnosis of human toxocariasis. The objective of this work was to produce recombinant excretion/secretion 30kDa T. canis larval antigen (TES30) in two heterologous protein expression systems, and evaluate them in the immunodiagnosis of human toxocariasis. The recombinants proteins rTES30E and rTES30P, respectively, produced in Escherichia coli and Pichia pastoris, were characterized by un indirect ELISA to detect anti-T. canis IgG in experimentally infected mice serum, which showed 100% effectiveness compared to native TES. For detecting anti-T. canis IgG antibodies in human sera, the rTES30E showed sensitivity and specificity (95% CI) of 95.8% and 82.6%, while rTES30P showed 95.4% and 92.8%, respectively, in comparison to native TES. Thus, we conclude that both recombinants proteins have antigenic potential, becoming an alternative to the use of native TES in immunodiagnosis of human toxocariasis.A toxocaríase humana é uma zoonose difundida em todo o mundo, constituindo-se em um importante problema de saúde coletiva, porém é negligenciada. A diversidade de quadros clínicos associada aos diferentes sítios (fígado, pulmões, cérebro, olhos, gânglios linfáticos, etc.) em que as larvas de Toxocara canis podem se alojar no organismo humano, dificulta o diagnóstico desta parasitose. Neste contexto, métodos imunológicos para a detecção de anticorpos anti-T. canis foram desenvolvidos. Atualmente, o ensaio imunoenzimático (ELISA) associado ao antígeno de excreção e secreção de T. canis (TES), com adsorção prévia de soros com antígeno somático de Ascaris spp., tem sido utilizado como método padrão para pesquisa de anticorpos IgG séricos anti-T. canis. O antígeno TES é obtido a partir do cultivo de larvas de T. canis e demanda, aproximadamente, quatro meses de trabalho dispendioso e fastidioso. Diante do exposto, antígenos recombinantes estão sendo testados, visando o aperfeiçoamento do imunodiagnóstico da toxocaríase humana. Assim, o objetivo deste trabalho foi produzir o antígeno de excreção/secreção de 30kDa de T. canis (TES30) em dois sistemas heterólogos de expressão protéica, e avaliá-los no imunodiagnóstico da toxocaríase humana. As proteínas recombinantes rTES30E e rTES30P produzidas em Escherichia coli e Pichia pastoris, respectivamente, foram caracterizadas através de ELISA-IgG com soros de camundongos infectados experimentalmente, demonstrando 100% de eficácia em comparação ao TES nativo. Na análise dos soros humanos, com ELISA-IgG a rTES30E apresentou sensibilidade e especificidade (IC 95%) de 95,8% e 82,6%, enquanto a rTES30P apresentou 95,4% e 92.8%, respectivamente, em comparação ao TES nativo. Assim, conclui-se que ambas as proteínas recombinantes apresentam potencial antigênico, constituindo-se em uma alternativa ao uso do TES nativo no imunodiagnóstico da toxocaríase humana

ELEVATED TRANS-MAMMARY TRANSMISSION OF Toxocara canis LARVAE IN BALB/c MICE

A toxocaríase é zoonose amplamente difundida e considerada importante problema de saúde pública. O objetivo deste estudo foi avaliar a frequência da transmissão transmamária de Toxocara canis em camundongos BALB/c neonatos amamentados por fêmeas experimentalmente infectadas com 1.200 ovos logo após o parto. Após 50 dias de idade, foi avaliada a presença de larvas em diferentes órgãos dos neonatos. A infecção por via transmamária foi confirmada em 73,9% dos camundongos amamentados por fêmeas infectadas. Estes dados demonstram elevada transmissão transmamária de T. canis e confirmam a importância desta via de transmissão em hospedeiros paratênicos.Toxocariasis is a widespread zoonosis and is considered an important worldwide public health problem. The aim of this study was to investigate the frequency of trans-mammary Toxocara canis infection in newborn BALB/c mice nursed by females experimentally infected with 1,200 eggs after delivery. After 50 days of age, the presence of larvae in different organs of the offspring was investigated. Trans-mammary infection was confirmed in 73.9% of the mice that had been nursed by infected females. These data show a high trans-mammary transmission of T. canis and confirm the significance of this transmission route in paratenic hosts

The importance of animal house in the experimental research

Submitted by Michele Fernanda ([email protected]) on 2012-09-22T18:38:40Z No. of bitstreams: 1 A importância de biotérios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5)Approved for entry into archive by Gabriela Silva da Rosa([email protected]) on 2012-09-26T19:35:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 A importância de biotérios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5)Made available in DSpace on 2012-09-26T19:35:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 A importância de biotérios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5) Previous issue date: 2008Biotérios são instalações capazes de produzir e manter espécies de animais para pesquisa em diferentes áreas da ciência. Independente da espécie ou linhagem utilizada, é importante que o manejo e a manutenção dos animais de laboratório sejam de acordo com os princípios éticos na experimentação animal. Os cuidados com o ambiente e microambiente, bem como as condições sanitárias do biotério, são indispensáveis para não haver interferência nos resultados das pesquisas. Faz-se necessário incentivar os pesquisadores a unificar esforços para a implantação de biotério setoriais na instituição, visando à otimização de espaços e de recursos humanos e financeiros destinados à manutenção dos animais. Assim, as instituições de pesquisa devem investir na construção e manutenção de biotérios de criação e de experimentação, com o intuito de promover o desenvolvimento da ciência e tecnologia, com reflexos diretos na saúde pública.Animal houses are facilities capable to produce and to keep animal species for research in different areas of science. Independent of species or lineages used, it is important that handling and maintenance of laboratory animals are in accordance with the ethical principles of animal experimentation. The care with environment and microenvironment, as well as the sanitary conditions of animal houses, are indispensable to have not interference in research results. It is necessary to stimulate the researchers to unify efforts for implantation of sector animal houses in their institutions, in order to optimize spaces and human and financial resources for animals’ maintenance. Thus, research institutions must invest in the construction and maintenance of breeding and experimentation animal houses, for promoting the development of science and technology with direct influence in the public health

A importância dos biotérios na pesquisa experimental

Biotérios são instalações capazes de produzir e manter espécies de animais para pesquisa em diferentes áreas da ciência. Independente da espécie ou linhagem utilizada, é importante que o manejo e a manutenção dos animais de laboratório sejam de acordo com os princípios éticos na experimentação animal. Os cuidados com o ambiente e microambiente,bem como as condições sanitárias do biotério, são indispensáveis para não haver interferência nos resultados das pesquisas. Faz-se necessário incentivar os pesquisadores a unificar esforços para a implantação de biotério setoriais na instituição, visando à otimização de espaços e de recursos humanos e financeiros destinados à manutenção dos animais.Assim, as instituições de pesquisa devem investir na construção e manutenção de biotérios de criação e de experimentação, com o intuito de promover o desenvolvimento da ciência e tecnologia, com reflexos diretos na saúde pública.Animal houses are facilities capable to produce and to keep animal species for research in different areas of science. Independent of species or lineages used, it is important that handling and maintenance of laboratory animals are in accordance with the ethical principles of animal experimentation. The care with environment and microenvironment, as well as the sanitary conditions of animal houses, are indispensable to have not interference in research results. It is necessary to stimulate the researchers to unify efforts for implantation of sector animal houses in their institutions, in order to optimize spaces and human and financial resources for animals’ maintenance. Thus, research institutions must invest in the construction and maintenance of breeding and experimentation animal houses, for promoting the development of science and technology with direct influence in the public health

The importance of animal house in the experimental research

Submitted by cristiane soares ([email protected]) on 2012-09-19T18:49:22Z No. of bitstreams: 1 A importância de bioterios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5)Approved for entry into archive by Gabriela Silva da Rosa([email protected]) on 2013-08-09T20:07:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 A importância de bioterios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5)Made available in DSpace on 2013-08-09T20:07:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 A importância de bioterios na pesquisa experimental.pdf: 99664 bytes, checksum: 20fefaf207325dfbdadbc31f031916bd (MD5) Previous issue date: 2008Biotérios são instalações capazes de produzir e manter espécies de animais para pesquisa em diferentes áreas da ciência. Independente da espécie ou linhagem utilizada, é importante que o manejo e a manutenção dos animais de laboratório sejam de acordo com os princípios éticos na experimentação animal. Os cuidados com o ambiente e microambiente,bem como as condições sanitárias do biotério, são indispensáveis para não haver interferência nos resultados das pesquisas. Faz-se necessário incentivar os pesquisadores a unificar esforços para a implantação de biotério setoriais na instituição, visando à otimização de espaços e de recursos humanos e financeiros destinados à manutenção dos animais.Assim, as instituições de pesquisa devem investir na construção e manutenção de biotérios de criação e de experimentação, com o intuito de promover o desenvolvimento da ciência e tecnologia, com reflexos diretos na saúde pública.Animal houses are facilities capable to produce and to keep animal species for research in different areas of science. Independent of species or lineages used, it is important that handling and maintenance of laboratory animals are in accordance with the ethical principles of animal experimentation. The care with environment and microenvironment, as well as the sanitary conditions of animal houses, are indispensable to have not interference in research results. It is necessary to stimulate the researchers to unify efforts for implantation of sector animal houses in their institutions, in order to optimize spaces and human and financial resources for animals’ maintenance. Thus, research institutions must invest in the construction and maintenance of breeding and experimentation animal houses, for promoting the development of science and technology with direct influence in the public health