Estudo químico e biológico de espécies do gênero Cnidoscolus presentes no ecossistema caatinga com potencial atividade terapêutica

Conhecidas por urtiga, as espécies pertencentes ao gênero Cnidoscolus despertam grande interesse científico. Possuem, entre outras, atividade antiinflamatória e antitumoral do sistema genito-urinário, antimicrobiana e anti-séptica. Os objetivos desta tese foram determinar o perfil fitoquímico e avaliar a atividade biológica dos extratos brutos e frações de quatro espécies medicinais de Cnidoscolus (C. infestus Pax & K. Hoffm., C. pubescens Pohl, C. quercifolius Pohl e C. urens (L.) Arthur) presentes em levantamentos etnobotânicos da Caatinga. As coletadas foram realizadas nos estados de Pernambuco (Altinho e Buíque) e Paraíba (Soledade) e o material testemunho foi depositado no Herbário UFP Geraldo Mariz do Centro de Ciências Biológicas/UFPE. O conteúdo de fenóis totais e taninos foram determinados pelo método Folin-Ciocalteu e o conteúdo de flavonóides pelo método de complexação com cloreto de alumínio. A atividade antioxidante foi analisada pelo ensaio do DPPH e ensaio quelante do íon ferroso (FIC). A caracterização fitoquímica foi realizada por cromatografia em camada delgada com eluentes e reveladores específicos. O método de difusão em ágar e Concentração Inibitória Mínima (CIM) foram utilizados para determinar a atividade antimicrobiana dos extratos brutos e frações. A toxicidade seletiva foi avaliada frente às larvas de Artemia salina Leach e a atividade citotóxica frente às linhagens HT-29, Hep-2 e NCI-H292 pelo método do MTT. Os níveis de fenóis totais variaram de 3,58 ± 0,16 mg equivalentes de ácido tânico (EAT)/g nas cascas de C. quercifolius a 23,00 ± 0,10 mg EAT/g nas folhas de C. pubescens. As partes aéreas de C. infestus e cascas de C. quercifolius não exibiram taninos enquanto que as folhas de C. pubescens possuem os mais elevados níveis (8,72 ± 0,16 mg EAT/g). As folhas de C. pubescens apresentaram o maior conteúdo de falvonóides (39,37 ± 0,57 mg equivalente de rutina por grama), entretanto, suas raízes não apresentaram esta classe. O extrato bruto das raízes de C. infestus apresentou o melhor resultado antioxidante pelo ensaio do DPPH, enquanto que o extrato bruto das raízes de C. pubescens foi mais eficiente no ensaio FIC. Comparativamente, a atividade antioxidante qualitativa correlacionou-se com a atividade antioxidante quantitativa. Os fitoquímicos presentes em todas as amostras foram cumarinas e terpenóides, enquanto que alcalóides e naftoquinonas não foram confirmados. A presença de uma mesma cumarina (Rf 0,35) nas amostras sugere um padrão que poderá ser usado como marcador químico para estas espécies. Os extratos foram ativos frente às bactérias Gram-positivas e inativos frente às Gram-negativas. O extrato bruto metanólico das cascas de C. quercifolius apresentou CIM entre 250-500 μg/mL frente às bactérias Staphylococcus aureus, S. coagulase negativa e Enterococcus faecalis e sua fração diclorometanólica apresentou CIM entre 62,5-250 μg/mL frente às cepas de Staphylococcus multirresistentes. Todos os extratos foram considerados tóxicos frente às larvas de A. salina (CL50 entre 165-675 μg/mL). Os extratos de C. infestus (atividade frente Hep-2 e NCI-H292), das cascas de C. quercifolius (atividade frente HT-29 e Hep-2) e das partes aéreas de C. urens (atividade frente Hep-2 e NCI-H292) mostraram inibição de crescimento celular e o extrato das raízes de C. urens apresentou concentração inibitória média (IC50) de 20,3 ± 6,33 μg/mL contra a linhagem Hep-2. Esta tese fornece valiosas informações sobre substâncias com potencial antioxidante, antimicrobiano e citotóxico do gênero Cnidoscolus e os resultados obtidos apontam para a descoberta de novos compostos ativo

Influência da sazonalidade climática e de parâmetros laboratoriais sobre o teor de flavonóides em Bauhinia cheilantha (BONG.) Steudel

Os flavonóides constituem uma classe amplamente distribuída no Reino vegetal e apresentam diversas funções biológicas e atividades farmacológicas. Este grupo tem sido bastante relatado no gênero Bauhinia, sendo o possível responsável por suas indicações populares. Bauhinia cheilantha (Bong.) Steudel é uma espécies nativa da Caatinga e possui diversos usos etnofarmacológicos. Fatores ambientais podem interferir na síntese destes metabólitos, alterando as respostas terapêuticas esperadas. No Brasil, diversos fitoterápicos possuem em sua constituição plantas do gênero Bauhinia, entretanto, por não estar de acordo com as normas vigentes, muitos não possuem registro. A Resolução RE nº 899, de 29 de maio de 2003 da na Agência Nacional de Vigilância Sanitária, determina que para validar a metodologia analítica faz-se necessário avaliar os parâmetros especificidade, linearidade, robustez, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. O presente estudo visa compreender as condições ambientais que a Caatinga desempenha sobre a produção de flavonóides e validar a metodologia analítica empregada. Amostras de B. cheilantha foram coletadas no fragmento de Caatinga pertencente à Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária (IPA), em Caruaru/PE durante os meses de abril a setembro/2006. O material testemunho foi depositado no Herbário Prof. Vasconcelos Sobrinho da Universidade Federal Rural de Pernambuco. Após secagem, as folhas foram pulverizadas e quantificadas por metodologia espectrofotométrica, sendo os resultados expressos como equivalentes do padrão rutina (em μg/mL). Os dados pluviométricos foram obtidos na Estação Climatológica do IPA. Os resultados foram analisados estatisticamente pelo programa BioEstat 4.0. Todos os parâmetros exigidos pela RE nº 899 foram avaliados e estão de acordo com as normas, o que confirma a validação do método. Não foi possível correlacionar à produção de flavonóides com a pluviosidade. Contudo, foi observado que o teor destes metabólitos é maior nos indivíduos da borda do fragmento. A realização deste estudo contribui para a compreensão da ecologia química de plantas da Caatinga, uma vez que há poucas pesquisas enfocam este tema e forneceu às indústrias o procedimento analítico validado para a realização mais eficiente do controle de qualidade de seus produtos comercializado

Antioxidant Capacity and Phenolic Content of Caesalpinia pyramidalis Tul. and Sapium glandulosum (L.) Morong from Northeastern Brazil

The aims of this study were to quantify the phenolic content and evaluate the antioxidant potential of extracts from the bark and leaves of C. pyramidalis and S. glandulosum. The total phenolic content (TPC) and total tannin content (TTC) were determined using the Folin-Ciocalteu method, and the total flavonoids content (TFC) was measured via complexation with aluminum chloride. The antioxidant activity was evaluated with DPPH (2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) and FIC (ferrous ion chelating) assays. The TPC ranged between 135.55 ± 9.85 and 459.79 ± 11.65 tannic acid equivalents (TAE) in mg/g material (mg TAE/g). The leaves of both species contained high levels of tannins and flavonoids. The crude ethanol extracts (CEE) from the bark of C. pyramidalis showed high antioxidant activity when compared to ascorbic acid and rutin, whereas the CEE from the leaves was more efficient in chelating ferrous ions. C. pyramidalis had very high phenolic content and anti-radical activity, which indicates a need for further studies aimed at the purification and identification of compounds responsible for the antioxidant activity

Validação de metodologia espectrofotométrica para quantificação dos flavonóides de Bauhinia cheilantha (Bongard) Steudel

Os laboratórios de fitoterápicos necessitam de metodologias que assegurem o controle de qualidade de seus produtos quando os mesmos não constam em farmacopéias ou monografias oficiais. Baseando-se neste fato, o presente estudo visou validar uma metodologia analítica para quantificação de flavonóides contidos nos extratos da pata-de-vaca (Bauhinia cheilantha [Bongard] Steudel), através de espectrofotometria no visível, como equivalentes de Rutina (µg/mL). Todos os parâmetros exigidos pela ANVISA foram avaliados. No teste de especificidade, observou-se a existência de pico máximo a 420 nm. O método foi considerado linear e com alta sensibilidade de quantificação (2,51 µg/mL). O método também mostrou-se robusto e com elevada recuperação (98,36%). Os resultados obtidos para repetibilidade (intra-corrida), precisão intermediária (inter-corridas) e reprodutibilidade certificaram a precisão do método com valores entre 0,31 e 3,58%, sendo também considerado exato (95,71-105,50%). Com este estudo, o método proposto foi considerado específico, preciso, reprodutível, exato, de baixo custo e fácil execução.Phytotherapeutic laboratories require access to methodologies that guarantee quality control for their products when these items are not already registered in pharmacopeias or official monographs. As such, the present study sought to validate analytical methodologies for quantifying natural flavonoids contained in extracts of "pata-de-vaca" (Bauhinia cheilantha [Bong.] Steudel) using visible light spectrophotometry and a rutin standard (µg/ml). All of the parameters required by ANVISA were evaluated. The specificity test revealed a maximum absorption peak at 420 nm. The methodology was considered linear and of high quantification sensitivity (2.51 µg/ml). The methodology also proved to be robust, and had high recovery levels (98.36%). The results obtained for repeatability, intermediate precision (intra- and inter-day), and reproducibility all certified the precision of the method, with values between 0.31 and 3.58%; the methodology was also considered exact (95.71-105.50%). This study demonstrated that the proposed methodology can be considered specific, precise, reproducible, exact, of low cost, and easy to perform

Antioxidant Capacity and Phenolic Content of Caesalpinia pyramidalis Tul. and Sapium glandulosum (L.) Morong from Northeastern Brazil

The aims of this study were to quantify the phenolic content and evaluate the antioxidant potential of extracts from the bark and leaves of C. pyramidalis and S. glandulosum. The total phenolic content (TPC) and total tannin content (TTC) were determined using the Folin-Ciocalteu method, and the total flavonoids content (TFC) was measured via complexation with aluminum chloride. The antioxidant activity was evaluated with DPPH (2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) and FIC (ferrous ion chelating) assays. The TPC ranged between 135.55 ± 9.85 and 459.79 ± 11.65 tannic acid equivalents (TAE) in mg/g material (mg TAE/g). The leaves of both species contained high levels of tannins and flavonoids. The crude ethanol extracts (CEE) from the bark of C. pyramidalis showed high antioxidant activity when compared to ascorbic acid and rutin, whereas the CEE from the leaves was more efficient in chelating ferrous ions. C. pyramidalis had very high phenolic content and anti-radical activity, which indicates a need for further studies aimed at the purification and identification of compounds responsible for the antioxidant activity

The Effect of Schinus terebinthifolius

Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae), popularly known as red aroeira, is used in traditional medicine to treat inflammatory, gastric, and respiratory disorders. The aim of this study was to evaluate the antihistaminic activity of S. terebinthifolius (St) bark extract by using in vivo and in vitro experimental models. The effects of St were investigated on contractions induced by histamine, carbachol, and potassium chloride in isolated guinea pig ileum. St was also studied in response to hind paw edema induced by histamine in rats. Experiments revealed that although St (250, 500, and 1,000 µg/mL) reduced the histamine-induced contractions by 9.1±1.8, 50.2±2.0, and 68.9±2.0%, respectively, it did not inhibit contractions induced by carbachol or KCl. The association of St (250 and 500 µg/mL) with hydroxyzine, an H1-antihistamine (0.125 and 0.250 µM), increased the inhibitory effect to 67.0±3.2 and 85.1±2.1%, respectively. Moreover, St (100, 200, and 400 mg/kg) decreased paw edema from its peak by 33.9, 48.4, and 54.8%, respectively, whereas hydroxyzine (70 mg/kg) inhibited the peak edema by 56.5%. Altogether, the results suggest that the bark extract of S. terebinthifolius has an antihistaminic effect (H1)

Otimização de metodologia analítica para o doseamento de flavonoides de Bauhinia cheilantha (Bongard) Steudel Optimization of analytic methodologies for quantifying flavonoids of Bauhinia cheilantha (Bongard) Steudel

<abstract language="eng">The present study examined the optimization of stabilization and extraction processes of the flavonoids of Bauhinia cheilantha (Bongard) Steudel. Four drying temperatures (room temperature, 40, 60 and 80 ºC) and seven extraction systems (distilled water, 100% methanol, 80% methanol, 100% ethanol, 80% ethanol, 80% acetone and 60% acetone) were examined. The results demonstrated a reduction in flavonoid levels with increasing drying temperatures; and 80% acetone, 80% ethanol, and methanol p.a extraction systems were found to be most efficient and its weren't differents statisticaly (p<0.05)

Conteúdo fenólico e atividade antioxidante de diferentes cultivares de ipomoea batatas (l.) lam. obtidas por melhoramento genético para produção industrial de etanol

A batata-doce (Ipomoea batatas (L.) Lam.) é um vegetal nativo da América Tropical, com destaque no cenário da agricultura mundial. A principal finalidade do cultivo desta planta concentra-se na obtenção de raízes para alimentação humana, de animais domésticos e produção de etanol. A preferência de consumo de I. batatas concentra-se nas raízes, consequentemente a parte aérea, na maioria das vezes, é descartada ou fornecida como alimento para animais. Este trabalho teve como objetivo determinar o conteúdo fenólico total, o perfil cromatográfico e o potencial antioxidante das folhas de 10 cultivares de I. batatas provenientes de melhoramento genético convencional direcionado para a produção industrial de etanol. Extratos etanólicos das folhas de plantas adultas foram avaliados quanto ao conteúdo fenólico pelo método Folin-Ciocalteu, que variou entre 54,72 ± 4,35 e 112,29 ± 3,65 mg EAT/g, flavonoides por complexação com cloreto de alumínio (29,15 ± 3,72 a 97,36 ± 2,13 mg ER/g), atividade antioxidante in vitro pelos métodos DPPH, FRAP e atividade quelante. Adicionalmente, foram investigados os componentes fenólicos por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), que revelaram matrizes complexas de compostos, constituídas por ácido elágico e vários flavonoides. Constatou-se um elevado potencial antioxidante correlacionado satisfatoriamente pelo coeficiente de Pearson com teor de fenóis e flavonoides totais. Os resultados demonstraram grande potencial de agregação de valor ao cultivo de I. batatas, pela integração das práticas agroenergéticas que utilizam suas raízes, com a obtenção de outros produtos de base orgânica presentes nas folhas desta planta