Antioxidant Activity and Flavonoids Identification by LC-MS/MS Analysis in Leaf Extract from Trattinnickia rhoifolia Willd

The objectives of this work were to evaluate the antioxidant and hepatoprotective activities in the oxidative stress model induced by paracetamol in male Swiss mice, to evaluate the hypoglycemic and hypolipidemic action and to identify flavonoids in the leaves ethanolic extract from Trattinnickia rhoifolia. By the LC-MS / MS method, eight flavonoids were identified in the hydromethanolic (HM) and ethyl acetate (EA) fractions, except for Amentoflavone, the flavonoids Apigenin, Canferol, Luteolin, Quercetin, Quercetin-3-β-d-glucoside, Rutin and Taxifoline were identified for the first time in this species. These fractions were evaluated for antioxidant capacity (DPPH test) and their protective effect in vivo through the analysis of superoxide dismutase, catalase, glutathione-s-transferase, non-protein thiols, ascorbic acid, TBARS and carbonylated proteins. The data showed that EA has antioxidant capacity and superior oxidative stress repair in chemical and biological analyzes, besides hypoglycemic and hypolipidemic action. Thus, the present work contributes significantly to the literature, since it is the first study that identifies the chemical constituents and pharmacological properties of leaves extract from T. rhoifolia.Os objetivos deste trabalho foram avaliar as atividades antioxidante e hepatoprotetora no modelo de estresse oxidativo induzido por paracetamol em camundongos Swiss machos,avaliar a ação hipoglicemiante e hipolipidêmica e identificar flavonoides no extrato etanólico de folhas da Trattinnickia rhoifolia. Pelo método de LC-MS/MS foram identificados oito flavonoides nas frações hidrometanólica (HM) e acetato de etila (EA), com exceção da Amentoflavona, os flavonoides Apigenina, Canferol, Luteolina, Quercetina, Quercetina-3-β-d-glicosídeo, Rutina e Taxifolina, foram identificados pela primeira vez na espécie. Estas frações foram avaliadas quanto à capacidade antioxidante (teste de DPPH) e seu efeito protetor in vivo através das análises de superóxido dismutase, catalase, glutationa-s-transferase, tiois não-proteicos, ácido ascórbico, TBARS e proteínas carboniladas. Os dados mostraram que EA possui capacidade antioxidante e reparo do estresse oxidativo superior nas análises químicas e biológicas, além de ação hipoglicemiante e hipolipidêmica. Assim, o presente trabalho contribui significativamente para a literatura, uma vez que é o primeiro estudo que identifica os constituintes químicos e propriedades farmacológicas do extrato de folhas de T. rhoifolia

Chemoprotective Effect of Leaf Extracts of Cecropia distachya Huber (Urticaceae) in Mice Submitted to Oxidative Stress Induced by Cyclophosphamide

The objective of this work was to evaluate the chemoprotective effects of the embaúba Cecropia distachya Huber (two methanolic fractions: F1 and F2) on oxidative stress induced by cyclophosphamide (75 mg kg-1) in mice, as well as phytochemical analyzes by LC-MS/MS. In the experimental model, the fractions increased the hepatic and cardiac catalase (CAT), reduced glutathione (GSH) of the kidney and the heart. F1 increased platelet levels (PLT), hemogram (RBC), hematocrit (HCT) and hemoglobin (Hb) and F1 reduced hepatic lipid peroxidation (TBARS) and aspartate aminotransferase (AST) activity increased. F1 was attributed to possible hypoglycemic activity and possible immunosuppressive effects and F2 presented antimutagenic activity. In some cases, the fractions were also hepatotoxic. These results demonstrated that the fractions stimulate the antioxidant defenses, being hypoglycemic (F1) and antimutagenic (F2), and, the harmful effects attributed to the fractions may be the association of compounds that were not elucidated in this work. &nbsp

EXTRATO DE MAMONA COMO MANIPULADOR DA FERMENTAÇÃO RUMINAL

Objetivou-se investigar os efeitos da adição do extrato de farelo de mamona (EFM) sobre o perfil da fermentação ruminal in vitro em dietas com alto e baixo teor de forragem. Utilizou-se ensaio de incubação ruminal in vitro com dois controles, um negativo (sem aditivo) e um positivo (monensina sódica) e EFM liofilizado (20, 40 e 60 mg/frasco). Em condições de alto teor de forragem na dieta, a adição do EFM aumentou o pH do meio e a concentração de acetato, reduziu a produção de gás, mas não afetou a produção de gás por unidade de matéria seca (MS) digerida em relação ao tratamento controle. Em comparação com monensina sódica, o EFM reduziu as concentrações de propionato e amônia e aumentou a produção de gás por unidade de MS digerida. Em condições de baixo teor de forragem, a adição do EFM reduziu o pH e potencial redox do meio em relação ao tratamento controle. Em comparação com a monensina sódica, o EFM reduziu o pH do meio e a produção total de gás, mas não afetou a produção de gás por unidade de MS digerida. O extrato de farelo de mamona destoxificado não apresenta potencial como manipulador da fermentação ruminal.Palavras-chave: amônia; digestibilidade; eficiência; metano. CASTOR BEAN EXTRACT AS A MANIPULATOR OF RUMINAL FERMENTATION ABSTRACT: Effects of the castorbean meal extract (CME) on ruminal in vitro were investigate in high and low forage diet conditions. For each dietary condition, one in vitro ruminal incubation experiment was conducted in a completely randomized design, with nine repetitions per treatment (three animal inoculum donators and three 48 hors-incubations). In high forage diet, CME increased ruminal pH acetate concentration, reduced gas production, but it did not affect the gas production per unit of digested dry matter (DM), in relation to control treatment. Compare to monensin sodium, CME reduced propionate and ammonia concentrations and increased gas production per unit of digested DM, indicating that CME reduces ruminal energetic efficiency. In low forage diet, CME reduced pH and redox potential compare to control. Compare to monensin sodium, CME reduced pH and gas production, but it did not affect gas production per unit of digested DM. Castorbean meal extract does not present potential as manipulator of the ruminal fermentation.Keywords: ammonia; digestibility; efficiency; methane

Antioxidant potential of Carica papaya Linn (Caricaceae) leaf extract in mice with cyclophosphamide induced oxidative stress

AIMS: This study aimed to investigate the effects of crude extract of Carica papaya leaves on oxidative stress in mice induced by cyclophosphamide, as well as phytochemical profile characterization of this extract.METHODS: The male Swiss mice received 15 days of treatment with the extract (500 mg kg-1, via gavage) and intraperitoneal injection of cyclophosphamide (75 mg kg-1) or saline (0.9%) on the 15th day. After 24 h the last treatment, the animals were anesthetized for blood withdrawal, sacrificed and removal of the organs for analyses (liver, kidney and heart). In the biochemical tests were determined: hematological parameters in blood, aminotransferases, alkaline phosphatase, glucose and total cholesterol dosages in plasma, enzymatic and non-enzymatic antioxidants and lipid damage marker were evaluated in different tissues, besides genotoxic and histopathological analyzes.RESULTS: In the extract of Carica papaya leaves, the flavonoids quercetin-3β-D-glucoside and rutin were identified, besides present positive results for alkaloids, saponins and tannins. This extract increased the activity of glutathione-S-transferase and catalase enzymes in the liver and reduced the levels of reduced glutathione in the kidneys and hematocrit levels, red cell count, and hemoglobin. It promoted the decrease of the reactive species of thiobarbituric acid (TBARS) in the kidneys and the activity of enzyme aspartate aminotransferase in the plasma and was antimutagenic in the micronucleus test.CONCLUSIONS: The study showed that extract of Carica papaya was beneficial against oxidative events and prevented DNA damage. The extract also showed hepatotoxicity, therefore prolonged infusion of papaya leaves is not advisable.OBJETIVOS: O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do extrato bruto de folhas de Carica papaya sobre o estresse oxidativo em camundongos induzidos pela ciclofosfamida, bem como a caracterização do perfil fitoquímico deste extrato.MÉTODOS: Os camundongos Swiss machos receberam 15 dias de tratamento com o extrato (500 mg kg-1, via gavagem) e injeção intraperitoneal de ciclofosfamida (75 mg kg-1) ou salina (0,9%) no 15º dia. Após 24 h do último tratamento, os animais foram anestesiados para retirada do sangue, sacrificados e retirada dos órgãos para análises (fígado, rim e coração). Nos testes bioquímicos foram determinados: parâmetros hematológicos em sangue, aminotransferases, fosfatase alcalina, dosagens de glicose e colesterol total no plasma, antioxidantes enzimáticos e não enzimáticos e marcador de dano lipídico foram avaliados em diferentes tecidos, além de análises genotóxicas e histopatológicas.RESULTADOS: No extrato de folhas de Carica papaya foram identificados os flavonoides quercetina-3β-D-glicosídeo e rutina, além de resultados positivos para alcaloides, saponinas e taninos. Este extrato aumentou a atividade das enzimas glutationa-S-transferase e catalase no fígado e diminuiu os níveis de glutationa reduzida nos rins, a concentração do hematócrito, a contagem dos glóbulos vermelhos e a hemoglobina. Promoveu a diminuição das espécies reativas de ácido tiobarbitúrico (TBARS) nos rins, a atividade da enzimaaspartato aminotransferase no plasma e foi antimutagênico no teste do micronúcleo.CONCLUSÕES: O estudo mostrou que o extrato de Carica papaya foi benéfico contra eventos oxidativos e preveniu danos no DNA. O extrato também mostrou hepatotoxicidade, portanto, a infusão prolongada de folhas de mamão não é aconselhável

First phytochemical study and biological activity of the leaves ethanolic extract from Cissus spinosa Cambess

AIMS: The objective of this study was to identify the phytochemical profile and to evaluate the biological effects of the crude ethanolic extract (EE) and the ethanolic fraction (EF) of leaves of the species Cissus spinosa Cambess, after oxidative stress induced by cyclophosphamide (CP) in mice.METHODS: Phytochemical profile was performed detecting functional groups and, analysis of total flavonoids and phenols concentration, as well as the antiradical activity in EE and EF. The phytochemical characterization was done for the identification of flavonoids present in the leaves of the plant. In the biochemical tests, hematological parameters, glucose and total cholesterol dosages in plasma, enzymatic and non-enzymatic antioxidants and lipid damage marker were evaluated in different tissues (liver, kidney and heart), besides genotoxic and immunological analyzes. The animals received 15 days of treatment, via gavage, with EE (50 mg kg-1) or EF (50 mg kg-1) and on the 15th day, an intraperitoneal injection of CP (100 mg kg-1) or saline (0.9%). After 24 h the last treatment, the animals were anesthetized for blood withdrawal, sacrificed and removal of the organs.RESULTS: In the phytochemical analyzes, the presence of alkaloids, flavonoids and phenols was identified, the latter presented a higher concentration for EF. Eight flavonoids were identified - Rutin, Quercetin-3-β-D-glucoside, Quercitrin, Taxifolin, Quercetin, Canferol, Luteolin and Apigenin. In the biochemical analyzes, in general, EE showed a better antioxidant action against oxidative damages, hypoglycemic and antitilipemic action when comparing with EF, probably due to the synergism caused by flavonoids. It was observed the reduction and an increase of micronucleated polychromatic erythrocytes, due to the action of antioxidant compounds and alkaloids present in the plant, also considering the question of the seasonal period that directly interferes in the production of these compounds. In the immunological analysis, the extracts did not stimulate the spontaneous production of oxygen peroxide (H2O2) and nitric oxide (NO•). CONCLUSIONS: Other studies, such as the variation of the chemical composition of the plant by local seasonality, hypoglycemic and antilipemic action, should be carried out to better delineate the biological action present in this plant.Objetivos: O objetivo deste estudo foi identificar o perfil fitoquímico e avaliar os efeitos biológicos do extrato etanólico bruto (EE) e da fração etanólica (EF) das folhas da espécie Cissus spinosa Cambess, após estresse oxidativo induzido pela ciclofosfamida. (CP) em camundongos.Métodos: O perfil fitoquímico foi realizado detectando grupos funcionais e, análise da concentração de flavo-noides e fenóis totais, bem como a atividade antirradical em EE e EF. A caracterização fitoquímica foi realizada para a identificação de flavonoides presentes nas fo-lhas da planta. Nos testes bioquímicos, os parâmetros hematológicos, as dosagens de glicose, colesterol total, creatinina, fosfatase alcalina e aminotransferases no plasma, os antioxidantes enzimáticos e não enzimá-ticos e o marcador de dano lipídico foram avaliados em diferentes tecidos (fígado, rim e coração), além de análises genotóxicas e imunológicas. Os animais receberam 15 dias de tratamento, via gavagem, com EE (50 mg kg-1) ou EF (50 mg kg-1) e no 15º dia, injeção intraperitoneal de CP (100 mg kg-1) ou soro fisiológico (0,9%) . Após 24 h do último tratamento, os animais fo-ram anestesiados para retirada do sangue, sacrificados e após a retirada dos órgãos.Resultados: Nas análises fitoquímicas, identificou-se a presença de alcaloides, flavonoides e fenóis, estes últimos apresentaram maior concentração para EF. Oito flavonoides foram identificados - rutina, quercetina-3-β--D-glicosídeo, quercitrina, taxifolina, quercetina, can-ferol, luteolina e apigenina. Nas análises bioquímicas, em geral, o EE apresentou melhor ação antioxidante contra os danos oxidativos, ação hipoglicemiante e antitilipêmica quando comparada à EF, provavelmente devido ao sinergismo causado pelos flavonoides. Observou-se a redução e um aumento de eritrócitos policromáticos micronucleados, devido à ação de compostos antioxidantes e alcaloides presentes na planta, considerando também a questão do período sazonal que interfere diretamente na produção desses compostos. Na análise imunológica, os extratos não estimularam a produção espontânea de peróxido de oxigênio (H2O2) e óxido nítrico (NO•).Conclusões: Outros estudos, como a variação da composição química da planta por sazonalidade local, ação hipoglicemiante e antilipêmica, devem ser rea-lizados para melhor delineamento da ação biológica presente nesta planta

Natural killer activity of the spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice treated with Copaifera multijuga extract = Atividade natural killer das células esplênicas de camundongos portadores do tumor de Ehrlich tratados com extrato de Copaifera multijuga

OBJETIVOS: O óleo-resina de Copaifera multijuga Hayne é popularmente utilizado na medicina tradicional por suas propriedades antiinflamatória, antisséptica, antitumoral e antibacteriana. Entretanto, há poucos estudos sobre o efeito dos compostos obtidos da casca da planta. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato etanólico da casca da C. multijuga na atividade natural killer das células esplênicas não aderentes de animais portadores do tumor de Ehrlich. MÉTODOS: Camundongos Swiss machos foram inoculados subcutaneamente com 1×106 células do tumor de Ehrlich (grupo Ehrlich e Ehrlich/C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e C. multijuga) e tratados diariamente (gavagem) com extrato de C. multijuga (200 mg kg-1, 0,1mL cada um, para os grupos Ehrlich/C. multijuga e C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e grupo Ehrlich). Os quatro grupos experimentais consistiram de oito animais cada e foram organizados em dois conjuntos, um tratado por sete dias e outro tratado por 14 dias, totalizando 64 animais durante todo o experimento. Após 24 horas do término do tratamento, os animais foram eutanasiados para obtenção da suspensão de células esplênicas não aderentes e avaliação da atividade natural killer. Os resultados são apresentados como porcentagem da lise celular das células alvo Yac. 1 pelas células esplênicas não aderentes RESULTADOS: A análise dos resultados demonstrou que aos sete dias de tratamento a C. multijuga aumentou a atividade natural killer no grupo Ehrlich/C. multijuga (21,20±8,89, p0,05). CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que o tratamento com o extrato etanólico da casca de C. multijuga favoreceu a atividade natural killer das células esplênicas não aderentes dos animais portadores do tumor de Ehrlich apenas aos sete dias de tratament

Natural killer activity of the spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice treated with Copaifera multijuga extract

AIMS: Copaifera multijuga Hayne oleoresin is commonly used in traditional medicine owing to its anti-inflammatory, antiseptic, antitumor, and antibacterial properties. However, little is known about the effect of the compounds from the bark of this plant. In this study, the immunomodulatory effect of the ethanolic extract of C. multijuga bark via natural killer activity of non-adherent spleen cells of Ehrlich tumor-bearing mice was evaluated.METHODS: Male Swiss mice were inoculated subcutaneously with 1×106 Ehrlich tumor cells (Ehrlich and Ehrlich/C. multijuga group) or phosphate buffered saline solution (control group and C. multijuga group) and treated orally daily with C. multijuga extract (200 mg kg-1, 0.1 mL per mouse, for the Ehrlich/C. multijuga and C. multijuga groups) or phosphate buffered saline solution (control group and Ehrlich group). The four experimental groups consisted in eight mice each and were organized in two sets, one treated for seven days and another treated for 14 days, totalizing 64 mice throughout the experiment. Twenty-four hours after the last oral administration, the mice were euthanized and the spleen tissue was isolated to prepare a non-adherent spleen cell suspension and to evaluate natural killer activity. Data are presented as the cell lysis percentage of Yac.1 target cells by non-adherent spleen cells.RESULTS: Treatment for seven days increased natural killer activity in the Ehrlich/C. multijuga group (21.20±8.89, p0.05).CONCLUSIONS: Treatment for seven days with an ethanolic extract of C. multijuga bark enhanced the natural killer activity of non-adherent spleen cells from Ehrlich tumor-bearing mice.***Atividade natural killer das células esplênicas de camundongos portadores do tumor de Ehrlich tratados com extrato de Copaifera multijuga***OBJETIVOS: O óleo-resina de Copaifera multijuga Hayne é popularmente utilizado na medicina tradicional por suas propriedades anti-inflamatória, antisséptica, antitumoral e antibacteriana. Entretanto, há poucos estudos sobre o efeito dos compostos obtidos da casca da planta. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador do extrato etanólico da casca da C. multijuga na atividade natural killer das células esplênicas não aderentes de animais portadores do tumor de Ehrlich.MÉTODOS: Camundongos Swiss machos foram inoculados subcutaneamente com 1 x 106 células do tumor de Ehrlich (grupo Ehrlich e Ehrlich/C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e C. multijuga) e tratados diariamente (gavagem) com extrato de C. multijuga (200 mg kg-1, 0,1mL cada um, para os grupos Ehrlich/C. multijuga e C. multijuga) ou com solução salina tamponada (grupo controle e grupo Ehrlich). Os quatro grupos experimentais consistiram de oito animais cada e foram organizados em dois conjuntos, um tratado por sete dias e outro tratado por 14 dias, totalizando 64 animais durante todo o experimento. Após 24 horas do término do tratamento, os animais foram eutanasiados para obtenção da suspensão de células esplênicas não aderentes e avaliação da atividade natural killer. Os resultados são apresentados como porcentagem da lise celular das células alvo Yac.1 pelas células esplênicas não aderentes.RESULTADOS: A análise dos resultados demonstrou que aos sete dias de tratamento a C. multijuga aumentou a atividade natural killer no grupo Ehrlich/C. multijuga (21,20±8,89, p0,05).CONCLUSÕES: Os resultados demonstraram que o tratamento com o extrato etanólico da casca de C. multijuga favoreceu a atividade natural killer das células esplênicas não aderentes dos animais portadores do tumor de Ehrlich apenas aos sete dias de tratamento

Metabolic and Behavior Changes in Surubim Acutely Exposed to a Glyphosate-Based Herbicide

This study examined the effect of glyphosate-based herbicide (Roundup Original), the major herbicide used in soybean crops in Mato Grosso state, at concentrations of 0, 2.25, 4.5, 7.5, and 15 mg L-1 on metabolic and behavior parameters of the hybrid fish surubim in an acute exposure lasting 96 h. Glycogen content, glucose, lactate, and protein levels were measured in different tissues. Plasma levels of cholesterol, alanine aminotransferase (ALT), and aspartate aminotransferase (AST) were also determined. Ventilatory frequency (VF) and swimming activity (SA) were considered behavior parameters. Results showed that herbicide exposure decreased plasma glucose levels and increased it in surubim liver. Lactate increased in both plasma and liver but decreased in muscle. Protein levels decreased in plasma and muscle but increased in liver. After herbicide exposure, liver and muscle glycogen was decreased. Cholesterol levels decreased in plasma at all concentrations tested. Plasma ALT increased, and no alterations were recorded for AST levels. VF increased after glyphosate exposure (5 min) and decreased after 96 h. SA showed differences among all groups (5 min). At the end of 96 h, SA was altered by the 7.5 mg L-1 concentration. Fish used anaerobic glycolysis as indicated by generally decreased glycogen levels and decreased lactate levels in muscle but increased ones in plasma and liver. We suggest that the studied parameters could be used as indicators of herbicide toxicity in surubim and may provide extremely important information for understanding the biology of the animal and its responsiveness to external stimuli (stressors)