Método De Teste Para Surdez De Origem Genética

Compreendendo um método de diagnóstico genético para detecção de portadores da mutação 35delG no gene da conexina 26, caracterizado pelo fato de compreender a utilização, para coleta do material biológico a ser analisado, de um papel de celulose ou similar que tenha as mesmas propriedades de ligação ao ácido nucleico; a reação de amplificação é feita a partir de uma gota de sangue periférico, podendo-se restringir a 1 a 3mm, ou outro material biológico, colhidos em papel, ou diretamente em tubo de reação.BR0005340 (A); BR0005340 (B1)C12Q1/68C12Q1/68BR20000005340C12Q1/68C12Q1/6

Lipopolysaccharide potentiates platelet responses via toll-like receptor 4-stimulated Akt-Erk-PLA2 signalling

Lipopolysaccharide (LPS) from the cell envelope of Gram-negative bacteria is a principal cause of the symptoms of sepsis. LPS has been reported to modulate the function of platelets although the underlying mechanisms of LPS action in these cells remain unclear. Platelets express the Toll-like receptor 4 (TLR4) which serves as a receptor for LPS, although the potential role of TLR4 and associated cell signalling in controlling platelet responses to LPS has not been extensively explored. In this study, we therefore investigated the actions of LPS prepared from different strains of Escherichia coli on platelet function, the underlying signalling mechanisms, and the potential role of TLR4 in orchestrating these. We report that LPS increased the aggregation of washed platelets stimulated by thromboxane (U46619) or GPVI collagen receptor agonists, effects that were prevented by a TLR4 antagonist. Associated with this, LPS enhanced fibrinogen binding, P-selectin exposure and reactive oxygen species (ROS) release. Increase of ROS was found to be important for the actions of LPS on platelets, since these were inhibited in the presence of superoxide dismutase or catalase. The effects of LPS were associated with phosphorylation of Akt, ERK1/2 and PLA2 in stimulated platelets, and inhibitors of PI3-kinase, Akt and ERK1/2 reduced significantly LPS enhanced platelet function and associated ROS production. Furthermore, inhibition of platelet cyclooxygenase or the thromboxane receptor, revealed an important role for thromboxane A2. We therefore conclude that LPS increases human platelet activation through a TLR4-PI3K-Akt-ERK1/2-PLA2 -dependent pathway that is dependent on ROS and TXA2 formation

Interaction between audiology and genetics in the study of a family: the complexity of molecular diagnosis and genetic counseling

Hearing loss is a multifaceted condition with many etiologies, among which genetic mutation is. Therefore, it is important to connect audiological investigation to etiological diagnosis. AIM: this study aims to establish the audiological and genetic profiles of three non-syndromic children with sensorineural hearing loss. MATERIALS AND METHOD: three brothers aged 3, 5 and 16 were enrolled in this study. They were submitted to behavioral and electrophysiological hearing tests and molecular studies. RESULTS: the hearing tests showed moderate to moderately severe bilateral symmetric sensorineural hearing loss and an accentuated descending slope. Transient and Distortion Product Otoacoustic emissions were absent in the two younger children. ABR showed a bilateral moderately severe to severe sensorineural hearing loss. P300 showed bilateral normal latencies in the older brother. Molecular tests showed that the two younger children were heterozygote for mutation 35delG on gene GJB2. CONCLUSION: The combination of speech and hearing tests and genetic analysis allows for the etiologic diagnosis of seemingly similar hearing loss cases, which however display different genetic backgrounds. Molecular studies must be comprehensive enough to avoid precipitated diagnosis which may impair genetic counseling.A deficiência auditiva como déficit sensorial mais comum tem dentre suas diferentes etiologias as alterações genéticas. Assim, é importante que a investigação audiológica se associe à busca do diagnóstico etiológico. OBJETIVO: Relatar o perfil audiológico e genético de três irmãos portadores de deficiência auditiva neurossensorial não-sindrômica. MATERIAL E MÉTODO: Estudo de caso de três irmãos, do sexo masculino, com 3, 5 e 16 anos, respectivamente, submetidos à avaliação audiológica comportamental e eletrofisiológica, e estudo molecular. RESULTADOS: Os achados audiológicos mostraram: audiometria do tipo neurossensorial, bilateral, simétrica, de grau moderado a moderadamente severo e configuração descendente acentuada. EOAT e EOAPD ausentes nos dois irmãos mais novos. PEATE compatível com perda auditiva moderadamente severa a severa. Presença do P300 com latências dentro da normalidade bilateralmente no irmão mais velho. Os achados do exame molecular mostraram que as duas crianças mais novas eram heterozigotos para a mutação 35delG no gene GJB2 e o mais velho não apresentava essa mutação. CONCLUSÃO: A associação das avaliações fonoaudiológicas e genéticas permite o diagnóstico etiológico de perdas auditivas que à primeira vista são semelhantes, mas que não obedecem à mesma estrutura genética. Os estudos moleculares devem ser abrangentes, evitando diagnósticos precipitados que prejudiquem o aconselhamento genético.Instituto de Estudos Avançados da AudiçãoUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Instituto de Estudos da AudiçãoUniversidade Estadual de CampinasUniversidade Estadual de Campinas Departamento de Genética MédicaUSP Faculdade de Medicina Departamento de Fisioterapia, Fonoaudiologia e Terapia OcupacionalFAPESPUNIFESPSciEL

Single nucleotide polymorphisms of the GJB2 and GJB6 genes are associated with autosomal recessive nonsyndromic hearing loss

Single nucleotide polymorphisms (SNPs) are important markers in many studies that link DNA sequence variations to phenotypic changes; such studies are expected to advance the understanding of human physiology and elucidate the molecular basis of diseases. The DFNB1 locus, which contains the GJB2 and GJB6 genes, plays a key role in nonsyndromic hearing loss. Previous studies have identified important mutations in this locus, but the contribution of SNPs in the genes has not yet been much investigated. The aim of this study was to investigate the association of nine polymorphisms located within the DFNB1 locus with the occurrence of autosomal recessive nonsyndromic hearing loss (ARNSHL). The SNPs rs3751385 (C/T), rs7994748 (C/T), rs7329857 (C/T), rs7987302 (G/A), rs7322538 (G/A), rs9315400 (C/T), rs877098 (C/T), rs945369 (A/C), and rs7333214 (T/G) were genotyped in 122 deaf patients and 132 healthy controls using allele-specific PCR. There were statistically significant differences between patients and controls, in terms of allelic frequencies in the SNPs rs3751385, rs7994748, rs7329857, rs7987302, rs945369, and rs7333214 (P < 0.05). No significant differences between the two groups were observed for rs7322538, rs9315400, and rs877098. Our results suggest that SNPs present in the GJB2 and GJB6 genes may have an influence on ARNSHL in humans2015CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQFundacao Herminio Ometto/FH

Hifocus Helix™ Electrode Insertion: Surgical Approach.

Cochlear implants have been used for almost 30 years as a device for the rehabilitation of individuals with severe-to-profound hearing loss. One of the important aspects of cochlear implantation is the type of electrode selected and proper insertion of the electrode array in scala tympani to minimize cochlear damage. The HiFocus Helix™ electrode is a precurved design aimed at placing the electrode contacts close to the spiral ganglion cells in the modiolus. The prescribed insertion techniques are intended to minimize the likelihood of damage to the basilar membrane or lateral wall of the cochlea. To describe the first insertion of a HiFocus Helix™ electrode in Brazil exposing surgical particularities and device details in a patient with profound hearing loss, due to Mondini's dysplasia. No problems were encountered during the surgical procedure. The patient experienced improvement in hearing thresholds and speech perception. The HiFocus Helix™ electrode proved easy to insert and provided expected hearing benefits for the patient. This manuscript indicates that the HiResolution™ Bionic Ear System with HiFocus Helix™ electrode comprise a cochlear implant system that is practical and beneficial for the treatment of severe-to-profound hearing loss.830

Interaction between audiology and genetics in the study of a family: the complexity of molecular diagnosis and genetic counseling

Hearing loss is a multifaceted condition with many etiologies, among which genetic mutation is. Therefore, it is important to connect audiological investigation to etiological diagnosis. AIM: this study aims to establish the audiological and genetic profiles of three non-syndromic children with sensorineural hearing loss. MATERIALS AND METHOD: three brothers aged 3, 5 and 16 were enrolled in this study. They were submitted to behavioral and electrophysiological hearing tests and molecular studies. RESULTS: the hearing tests showed moderate to moderately severe bilateral symmetric sensorineural hearing loss and an accentuated descending slope. Transient and Distortion Product Otoacoustic emissions were absent in the two younger children. ABR showed a bilateral moderately severe to severe sensorineural hearing loss. P300 showed bilateral normal latencies in the older brother. Molecular tests showed that the two younger children were heterozygote for mutation 35delG on gene GJB2. CONCLUSION: The combination of speech and hearing tests and genetic analysis allows for the etiologic diagnosis of seemingly similar hearing loss cases, which however display different genetic backgrounds. Molecular studies must be comprehensive enough to avoid precipitated diagnosis which may impair genetic counseling.A deficiência auditiva como déficit sensorial mais comum tem dentre suas diferentes etiologias as alterações genéticas. Assim, é importante que a investigação audiológica se associe à busca do diagnóstico etiológico. OBJETIVO: Relatar o perfil audiológico e genético de três irmãos portadores de deficiência auditiva neurossensorial não-sindrômica. MATERIAL E MÉTODO: Estudo de caso de três irmãos, do sexo masculino, com 3, 5 e 16 anos, respectivamente, submetidos à avaliação audiológica comportamental e eletrofisiológica, e estudo molecular. RESULTADOS: Os achados audiológicos mostraram: audiometria do tipo neurossensorial, bilateral, simétrica, de grau moderado a moderadamente severo e configuração descendente acentuada. EOAT e EOAPD ausentes nos dois irmãos mais novos. PEATE compatível com perda auditiva moderadamente severa a severa. Presença do P300 com latências dentro da normalidade bilateralmente no irmão mais velho. Os achados do exame molecular mostraram que as duas crianças mais novas eram heterozigotos para a mutação 35delG no gene GJB2 e o mais velho não apresentava essa mutação. CONCLUSÃO: A associação das avaliações fonoaudiológicas e genéticas permite o diagnóstico etiológico de perdas auditivas que à primeira vista são semelhantes, mas que não obedecem à mesma estrutura genética. Os estudos moleculares devem ser abrangentes, evitando diagnósticos precipitados que prejudiquem o aconselhamento genético.69870

Processo E Dispositivo Para Teste De Surdez De Origem Genética

PROCESSO E DISPOSITIVO PARA TESTE DE SURDEZ DE ORIGEM GENÉTICA". Novo processo e dispositivo para teste de surdez de origem genética, o qual trata-se de um processo que detecta a mutação 35deIG no gene da conexina 26, utilizando amostras de sangue total ou DNA extraído a partir de qualquer outro material biológico do paciente, impregnadas em um papel de celulose, ou similar que tenha as mesmas propriedades de ligação ao ácido nucléico, que através de duas reações liofilizadas de amplificação, uma com primer normal (NOR) e outra com primers mutante (MUT), predeterminados, acondicionadas cada uma em um dispositivo específico, e detecção da mutação por Eletroforese em gel de agarose, sendo o resultado e visualizado em um transluminador de luz ultravioleta, determinando, ou não, a existência do gene mutante. Onde a amplificação da região do gene onde está localizada a mutação é feita utilizando seqüências de primers localizadas próximas à mutação e contendo a mutação, os quais resultam em amplificações diferenciais entre os alelos normais e os alelos mutantes, assim como amplificações internas controles. Os primers utilizados correspondem ás regiões 8 e 786bp da seqüência genética. O tamanho das bandas de amplificação pode variar de acordo com a região da seqüência escolhida como primers para amplificação dentro do gene conexina 26. A amplificação se dá entre 20-40 ciclos. A temperatura de anelamento utilizada varia de acordo com a seqüência dos primers utilizados, de 40 a 70°C. A mistura de reação requer um tampão apropriado para a enzima de amplificação, podendo ser qualquer DNA polimerase disponível no mercado. A concentração de MgCl2 varia de acordo com a seqüência dos primes utilizados, podendo ser de 0 a 2mM. O resultado é analisado pela técnica de eletroforese, utilizando gel de agarose em concentrações que podem variar de 0,8 a 3%, ou géis similares, como por exemplo poliacrilamida ou géis pré-fabricados. O gel, por sua vez, pode ser corado pela adição de brometo de etídio ou outro tipo de coloração, como coloração com prata.BR0304012 (A)C12Q1/68C12Q1/68BR20030304012C12Q1/68C12Q1/6