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    Sorotipos, "mating type" e ploidia de amostras de C. neoformans isoladas de pacientes no Brasil

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    Serotype, mating type and ploidy of 84 strains of Cryptococcus neoformans isolated from 61 AIDS and 23 non-AIDS patients admitted in a tertiary teaching hospital in São Paulo, Brazil were examined. Among 61 strains isolated from AIDS patients, 60 strains were var. grubii (serotype A). Only one strain was var. gattii (serotype B). No var. neoformans (serotype D) was found. Among 23 strains isolated from non-AIDS patients, 15 were var. grubii (serotype A) and the remaining 8 were var. gattii, all of which were serotype B. Seventy-three of the 75 serotype A strains were the heterothallic alpha type (MATalpha) and the remaining 2 were untypable (asexual). Most of the MATalpha strains (69/73) were haploid and the remaining 4 strains were diploid. Similarly, both of the 2 asexual strains among the 75 serotype A strains were haploid. There were no alpha-mating type (MATalpha) strains among the 84 isolates. All of the 8 var. gattii strains were serotype B and haploid. Among a total of 84 strains tested, neither serotype AD nor serotype D were found. Neither triploid nor tetraploid were found. These results suggest that the serological, sexual and ploidy characteristics in C. neoformans strains isolated from AIDS patients in São Paulo were rather simple, whereas strains isolated from non-AIDS patients presented serotype A and B with predominance of serotype A.Foram estudados os sorotipos, "mating type" e ploidia de 84 amostras de C. neoformans isoladas de 61 pacientes com AIDS e 23 não-AIDS em São Paulo. Das amostras isoladas de pacientes com AIDS, 60 foram identificadas como var. grubii (sorotipo A) e 1 como var. gattii (sorotipo B). Não houve isolamento do sorotipo D. Entre as amostras isoladas, de pacientes não-AIDS, 15 foram de var. grubii (sorotipo A) e as 8 restantes de var. gattii, todos do sorotipo B. Setenta e três dos 75 sorotipos A foram identificadas como cepas heterotálicas do fenótipo alfa (MATalfa) e as 2 remanescentes não-tipáveis (assexuada), eram haplóides. A maioria das cepas MATalfa (69/73) era haplóide sendo 4 diplóide. Não houve o isolamento de fenótipo a (MATa) entre as 84 cepas analisadas. Todas as 11 amostras de var. gattii eram do sorotipo B e haplóides. Não foram observados os sorotipos AD e C, nem células triplóides ou tetraplóides entre as 84 amostras estudadas. Os resultados sugerem, que as características sorológicas, sexuais e de ploidia de C. neoformans, isoladas de pacientes com AIDS em São Paulo, são particularmente simples, a maioria do sorotipo A, enquanto que nos pacientes não-AIDS foram observados tanto os sorotipos A quanto o B

    Molecular techniques for rifampin resistance detection in Mycobacterium tuberculosis isolates

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    Introdução: A tuberculose e doenca infecciosa responsavel por 1,6 milhoes de obitos por ano no mundo. O surgimento de formas multi-resistentes a antimicrobianos tem sido um dos diversos fatores que dificultam o controle da doenca. Objetivo: Conhecer a prevalencia de resistencia a rifampicina (RMP) em pacientes com tuberculose e internados no complexo do Hospital São Paulo no periodo de janeiro/2001 a dezembro/2002; comparar metodos fenotipicos (Mycobacteria Growth Indicator TubeMGIT e razao de resistencia-RR) e genotipicos (rifoligotyping e sequenciamento do gene rpo8) para deteccao de resistencia a rifampicina em Mycobacterium tuberculosas e descrever as mutacoes no gene rpo8 relacionadas a resistencia. Metodos: foram analisados prontuarios de 107 pacientes, cujas 116 amostras de M tuberculosas foram testadas quanto a susceptibilidade a rifampicina pelo MGIT. Trinta e quatro amostras resistentes a RMP por RR (31 cedidas pelo Instituto Adolfo Lutz-SP e 3 provenientes do HSP), foram submetidas a teste de sensibilidade em MGIT e sequenciamento de fragmento de 261 pares de bases do gene rpoB. Trinta e duas destas amostras foram testadas em rifoligotyping, metodo baseado em hibridizacao. Resultados: 107 pacientes do HSP foram analisados, com prevalencia de resistencia a rifampicina de 1,8 por cento. Das 34 amostras resistentes a RMP de acordo com resultado de RR, 28 mostraram-se resistentes pelo MGIT. Todas as 28 amostras resistentes pelo MGIT apresentavam mutacao no fragmento sequenciado do gene rpo8, sendo as mutacoes na Ser531 e His526 responsaveis por 85,7 por cento das mutacoes encontradas. Nas amostras discordantes (RR resistentes e MGIT sensiveis) nao foram encontradas mutacoes no fragmento sequenciado. Avaliacao de 28 amostras resistentes e 4 sensiveis testadas em 2 membranas de rifoligotyping de diferentes origens, mostraram especificidade e sensibilidade deste metodo de 100 por cento e 82,1 por cento. Conclusoes: a taxa de resistencia a RMP nos pacientes do HSP foi semelhante as taxas globais descritas no pais. As, mutacoes detectadas foram ja descritas como mais prevalentes no Brasil e em paises da America Latina, Europa e Asia. O estudo sugere que o MGIT seja um teste acurado e embora o rifoligotyping tenha mostrado sensibilidade de 82,1 por cento, apresenta como vantagens a rapidez para execucao e possibilitar a deteccao da mutacao responsavel pela resistencia. Ja a RR e um teste trabalhoso e demorado. Alem disso, a obtencao de resultados falsos resistentes sugere a necessidade de utilizacao de outros metodos complementaresBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe
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