Determination of amphotericin B in PLA-PEG blend nanoparticles by HPLC-PDA

Neste trabalho desenvolveu-se e validou-se um efetivo método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa com detecção por fotodiodos para a análise quantitativa de anfotericina B (AmB) em nanopartículas compostas por blendas de poli(ácido lático)-polietilenoglicol (PLA-PEG). Corridas cromatográficas foram realizadas sob coluna C18 de fase reversa com fase móvel consistindo de ácido acético 9% e acetonitrila (40:60, v/v), em eluição isocrática com fluxo de 1 mL/min. A AmB foi detectada no comprimento de onda de 408 nm. O processo de validação foi realizado considerando a seletividade, linearidade, precisão, exatidão, robustez, limite de detecção (LD) e limite de quantificação (LQ) do método. Uma faixa de concentração entre 1-20 µg/mL foi usada para obter a curva-padrão linear. Os valores de LD e LQ foram 55 e 18 ng/mL, respectivamente. A recuperação média da AmB a partir das amostras foi de 99,92% (desvio padrão relativo = 0,34%, n=9) e o método foi robusto, considerando alterações no fluxo da fase móvel (desvio padrão relativo máximo=4,82%). Os coeficientes de variação intra e inter dia foram inferiores a 0,59%. O método foi utilizado com sucesso para a determinação da eficiência de encapsulação da AmB em nanopartículas de PLA-PEG.In this work, we developed and validated an effective reversed-phase HPLC method with photodiode array (PDA) detection for the quantitative analysis of amphotericin B (AmB) in poly(lactide)-poly(ethylene glycol) (PLA-PEG) blend nanoparticles. Chromatographic runs were performed on a reverse phase C18 column using a mobile phase comprising a 9% acetic acid and acetonitrile mixture (40:60, v/v) under isocratic elution with a flow rate of 1 mL/min. AmB was detected at a wavelength of 408 nm. The validation process was performed considering the selectivity, linearity, precision, accuracy, robustness, limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ) of the method. A concentration range of 1-20 µg/mL was used to construct a linear calibration curve. The LOQ and LOD were 55 and 18 ng/mL, respectively. The mean recovery of AmB from the samples was 99.92% (relative standard deviation (RSD) = 0.34%, n=9), and the method was robust for changes in the flow rate of the mobile phase (maximum RSD=4.82%). The intra- and inter-assay coefficients of variation were less than 0.59%. The method was successfully used to determine the entrapment efficiency of AmB in PLA-PEG blend nanoparticles

Thermoanalytical study of praziquantel-loaded PLGA nanoparticles

Nanopartículas poliméricas têm recebido grande atenção como potenciais sistemas de liberação controlada de fármacos. Polímeros biodegradáveis são extensivamente usados no desenvolvimento destes sistemas e os poliésteres como ácido poli-láctico e o glicólico, e seus copolímeros, como o ácido poli(láctico-co-glicólico) são os mais usados considerando sua biocompatibilidade e biodegradação. Técnicas de análise térmicas são usadas para substâncias farmacêuticas há mais de 30 anos e são métodos rotineiros para investigação de interações fármaco-excipiente. O objetivo deste trabalho é usar análise térmica para caracterizar nanopartículas de PLGA contendo um fármaco hidrofóbico, o praziquantel. Os resultados mostram que o fármaco apresenta-se em estado amorfo ou em fase cristalina desordenada de dispersão molecular na matriz polimérica e que o processo de microencapsulação não interfere na estrutura química do polímero e manteve a integridade estrutural do fármaco.Polymeric nanoparticles have received great attention as potential controlled drug delivery systems. Biodegradable polymers has been extensively used in the development of these drug carriers, and the polyesters such as polylactic acid, polyglycolic acid and their copolymers as poly-lactide-co-glycolide are the most used, considering its biocompatibility and biodegradability. Thermal analysis techniques have been used for pharmaceutical substances for more than 30 years and are routine methods for screening drug-excipient interactions. The aim of this work is to use thermal analysis to characterize PLGA nanoparticles containing a hydrophobic drug, praziquantel. The results show that the drug is in an amorphous state or in disordered crystalline phase of molecular dispersion in the PLGA polymeric matrix and that the microencapsulation process did not interfere with the chemical structure of the polymer, mantaining the structural drug integrity

A stability-indicating HPLC-PDA method for the determination of ferulic acid in chitosan-coated poly(lactide-co-glycolide) nanoparticles

The development and validation of a simple and efficient method for the quantification of ferulic acid in poly (D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA) nanoparticles coated with chitosan (CS) by reverse phase high performance liquid chromatography coupled to photodiode array detection was described. For the chromatographic analysis, a reverse phase C-18 column was used, mobile phase consisting of acetonitrile and 0.5% acetic acid (37:63, v/v), isocratically eluted at a flow rate of 1 mL/min. Drug determination was performed at 320 nm. The method was validated in terms of the selectivity, linearity, precision, accuracy, robustness, limits of detection and quantification. The method was linear in the range of 10 to 100 μg/mL (r=0.999) and presented limit of detection and quantification of 102 ng/mL and 310 ng/mL, respectively. The method was precise (intra and inter-day) based on relative standard deviation values (less than 3.20%). The recovery was between 101.06 and 102.10%. Robustness was demonstrated considering change in mobile phase proportion. Specificity assay showed no interference from the components of nanoparticles or from the degradation products derived from acidic and oxidative conditions. The proposed method was suitable to be applied in determining the encapsulation efficiency of ferulic acid in PLGA-CS nanoparticles and can be employed as stability indicating one

Nanočestice zeina s galnom kiselinom, stabilizirane pomoću polietilen-glikola

Research background. Gallic acid is a polyphenol with antioxidant and antitumor activities; however, its use as a nutraceutical or drug is hindered by its low bioavailability. Zein is a natural protein found in corn and has been applied as nanoparticle drug carrier. In this study, zein nanoparticles were obtained and stabilized with polyethylene glycol (PEG) as gallic acid carriers. Experimental approach. Nanoparticles were obtained by the liquid-liquid method and characterized in terms of mean size, polydispersity index, zeta potential, morphology, solid-state interactions and encapsulation efficiency/drug loading. The stability of nanoparticles was evaluated in simulated gastrointestinal fluids and food simulants, and the antioxidant activity was determined by the scavenging of the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical. Results and conclusions. Zein nanoparticles containing gallic acid were obtained and stabilized only in the presence of PEG. Under optimal conditions, nanoparticles with mean size <200 nm, low polydispersity index (<0.25) and negative zeta potential (−20 mV) were obtained. The gallic acid encapsulation efficiency was about 40%, loading about 5%, and it was encapsulated in an amorphous state. Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) did not identify chemical interactions after gallic acid nanoencapsulation. Zein nanoparticles were more prone to release the gallic acid in gastric than intestinal simulated medium; however, more than 50% of drug content was protected from premature release. In food simulants, the gallic acid release from nanoparticles was prolonged and sustained. Moreover, the nanoencapsulation did not reduce the antioxidant activity of gallic acid. Novelty and scientific contribution. The results show the importance of PEG in the formation and its effect on the properties of zein nanoparticles obtained by the liquid-liquid dispersion method. This study indicates that PEG-stabilized zein nanoparticles are potential carriers for oral intake of gallic acid, preserving its antioxidant properties and enabling its use in the pharmaceutical and food industries.Pozadina istraživanja. Galna kiselina je polifenol s antioksidacijskim i antitumorskim učinkom, no njezina je primjena u lijekovima i nutraceuticima ograničena zbog male bioraspoloživosti. Zein je prirodni protein iz kukuruza koji se u obliku nanočestica primjenjuje kao nosač lijekova. U ovom su radu proizvedene nanočestice zeina, stabilizirane pomoću polietilen-glikola, te korištene kao nosač galne kiseline. Eksperimentalni pristup. Nanočestice zeina dobivene su dispergiranjem tekućine u tekućini, te su određeni sljedeći parametri: srednja veličina čestica, indeks polidisperzije, zeta-potencijal, morfološka struktura, interakcije među česticama i učinkovitost inkapsulacije odnosno maseni udjel galne kiseline u nanočesticama. Stabilnost je nanočestica ispitana u simuliranom probavnom traktu i modelnim otopinama koje simuliraju hranu, a antioksidacijska je aktivnost određena mjerenjem sposobnosti uklanjanja DPPH radikala. Rezultati i zaključci. Nanočestice zeina koje sadržavaju galnu kiselinu proizvedene su i stabilizirane pomoću polietilen-glikola. Pri optimalnim su uvjetima nanočestice bile srednje veličine <200 nm, te su imale niski indeks polidisperzije (<0,25) i negativni zeta-potencijal (20 mV). Učinkovitost inkapsulacije galne kiseline bila je oko 40 %, maseni udjel galne kiseline u nanočesticama oko 5 %, a galna je kiselina inkapsulirana u amorfnom stanju. FTIR spektroskopijom nisu opažene kemijske interakcije nakon inkapsulacije galne kiseline. Nanočestice zeina lakše su oslobađale galnu kiselinu u simuliranim uvjetima probave u želucu nego u simuliranim uvjetima probave u crijevima, no više od 50 % galne kiseline je inkapsulacijom bilo zaštićeno od preranog oslobađanja. U modelnim otopinama se galna kiselina polagano i neprekidno oslobađala iz nanočestica. Osim toga, postupkom nanoinkapsulacije nije se smanjio antioksidacijski učinak galne kiseline. Novina i znanstveni doprinos. Rezultati pokazuju da polietilen-glikol bitno utječe na oblikovanje i svojstva nanočestica zeina dobivenih dispergiranjem tekućine u tekućini. U radu je prikazano da nanočestice zeina stabilizirane pomoću polietilen-glikola mogu poslužiti kao nosači galne kiseline za oralnu primjenu. Na taj bi način njezina antioksidacijska svojstva bila iskorištena i primijenjena u farmaceutskoj i prehrambenoj industriji

CONTROLE DE QUALIDADE DE CÁPSULAS DE CHÁ VERDE MANIPULADOS

As farmácias de manipulação têm representado uma alternativa ao cumprimento de esquemas terapêuticos, pois proporcionam à população o acesso a fórmulas oficinais e personalizadas, manipulando fármacos de diversas categorias terapêuticas por preços mais acessíveis. Entretanto, é comum ocorrer falta de credibilidade aos produtos manipulados em função de um controle de qualidade não muito rigoroso. O objetivo desse trabalho foi realizar o controle de qualidade do peso médio de cápsulas de chá verde (300 mg) manipuladas por uma farmácia de manipulação da região Centro-Sul do Paraná, Brasil. Os resultados indicam que as cápsulas manipuladas contendo chá verde estão dentro dos padrões exigidos pela legislação vigente

A quantitative validated method using liquid chromatography and chemometric analysis for evaluation of raw material oF Maytenus ilicifolia (Schrad.) Planch., Celastraceae

The hydroalcoholic extracts prepared from standard leaves of Maytenus ilicifolia and commercial samples of espinheira-santa were evaluated qualitatively (fingerprinting) and quantitatively. In this paper, fingerprinting chromatogram coupled with Principal Component Analysis (PCA) is described for the metabolomic analysis of standard and commercial espinheira-santa samples. The epicatechin standard was used as an external standard for the development and validation of a quantitative method for the analysis in herbal medicines using a photo diode array detector. This method has been applied for quantification of epicatechin in commercialized herbal medicines sold as espinheira-santa in Brazil and in the standard sample of M. ilicifolia

PHBV/PCL Microparticles for Controlled Release of Resveratrol: Physicochemical Characterization, Antioxidant Potential, and Effect on Hemolysis of Human Erythrocytes

Microparticles of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) containing resveratrol were successfully prepared by simple emulsion/solvent evaporation. All formulations showed suitable encapsulation efficiency values higher than 80%. PHBV microparticles revealed spherical shape with rough surface and presence of pores. PCL microparticles were spherically shaped with smooth surface. Fourier-transformed infrared spectra demonstrated no chemical bond between resveratrol and polymers. X-ray powder diffraction patterns and differential scanning calorimetry analyses indicated that microencapsulation led to drug amorphization. These PHBV/PCL microparticles delayed the dissolution profile of resveratrol. Release profiles were better fitted to biexponential equation. The hypochlorous-acid-scavenging activity and 2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical cation discoloration assay confirmed that the antioxidant activity of PHBV/PCL microparticles was kept, but was dependent on the microparticle morphology and dissolution profile. Resveratrol-loaded PHBV/PCL microparticles showed no cytotoxic effect on red blood cells

Nanopartículas de poli-?-caprolactona contendo TBHQ: desenvolvimento, caracterização e aplicação / Poli nanoparticles-?-caprolacton contents TBHQ: development, characterization and application

Devido à composição química, o biodiesel é muito suscetível à oxidação, tornando necessária a adição de antioxidantes que inibem ou retardam esse processo. Entretanto os antioxidantes ficam expostos à condições que podem degradá-los, reduzindo sua eficiência. Dessa forma, o uso de nanoesferas (NE) surge como alternativa para proporcionar a proteção dos mesmos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi desenvolver NE de poli-?-caprolactona contendo o antioxidante terc-butil-hidroquinona e aplicá-las no biodiesel. O método utilizado na produção das NE foi emulsificação-evaporação do solvente e a estabilidade foi avaliada durante 31 dias na estufa à 30°C, sendo analisados o tamanho, polidispersão, potencial zeta, atividade antioxidante e pH durante o período estudado, além da avaliação do tempo de indução do biodiesel contendo as NE. Após o período analisado, as NE sofreram variações estatisticamente significativas no pH (6,20 para 7,63), potencial zeta (-12,50 mV para -13,83 mV) e a atividade antioxidante (84,4 para 51%). Quanto ao TI, a adição das NE ao biodiesel não resultou em variações significativas

Análise quantitativa e qualitativa da neuroinflamação pela toxina beta amilóide 1-42 após tratamento com nanopartículas de resveratrol

Introdução: Este estudo avaliou os efeitos das nanopartículas de zeína com resveratrol na neuroinflamação causada pela doença de Alzheimer. Método: A amostra consistiu em 30 animais divididos em grupos de controle (C), controle positivo (CP), nanopartículas brancas (NB), nanopartículas de resveratrol (NR) e resveratrol (R). Os animaisreceberam 10 mg/kg de resveratrol ou nanopartículas de acordo com o grupo, diariamente, por 15 dias, por via oral. Em seguida, foram submetidos a análises imuno-histoquímicas (IHC). Resultados: A IHC mostrou que não houve alteração na composição morfológica do cérebro nos grupos NR e C. Por outro lado, nos grupos CP, NB e R, foram observadas alterações na deposição de Anti Tau. O grupo NR mostrou uma projeção normal de taurinano axônio, que não se apresentou da mesma forma nos outros grupos. O marcador CD68 não mostrou ativação microglial nos grupos R e C. As análises quantitativas do antibeta-amiloide no grupo NR mostraram uma diferença estatística quando comparadas aos grupos CP, NB e R, enquanto a análise do antitau mostrou uma diferença significativa entre os grupos CP e NR. O marcador CD68 mostrou uma diferença significativa entre os grupos C e NR. A análise das citocinas mostrou uma diferença significativa no TNF-α entre os grupos C e CP, C e NB, CP e NR, e NB e NR. IL-6 e InF-δ não apresentaram diferença significativa entre todos os grupos. A IL-10 apresentou diferenças significativas entre os grupos C e NR, C e R, e CP e NR. Conclusão: A NR impediu a evolução da neuroinflamação.Background: This study evaluated the effects of zein nanoparticles with resveratrol on neuroinflammation caused by Alzheimer’s disease. Method: The sample consisted of 30 animals divided into control (C), positive control (CP), white nanoparticles (NB), resveratrol nanoparticles (NR) and resveratrol (R) groups. The animals received 10 mg/kg of resveratrol or nanoparticles according to the group, daily, for 15 days, oral administration. Afterward, they weresubmitted to immunohistochemical (IHC) analyses. Results: the IHC showed that there was no change in the morphological brain composition in the NR and C groups. Conversely, in the CP, NB, and R groups, changes in the deposition of Anti Tau were observed. The NR group showed a normal projection of taurine in the axon, which was not presented in the same way in the other groups. The CD68 marker showed no microglial activation in the R and C groups. Quantitative analyses of Anti Beta-Amyloid in the NR group showed a statistical difference comparedto the CP, NB, and R groups, whereas the Anti Tau analysis showed a significant difference between the CP and NR groups. The CD68 marker showed a significant difference between the C and NR groups. The analysis of cytokines showed a significant difference in TNF-α between the C and CP groups, C and NB groups, CP and NR groups, and NB and NR groups. IL-6 and InF-δ showed no significant difference between all groups. IL-10 showed significant differences between the C and NR groups, C and R groups, and CP and NR groups. Conclusion: NR prevented the evolution of neuroinflammation