Emergencia viral y conciencia ecológica

RESUMEN: En el año 2002, con motivo de la celebración de los 40 años de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Antioquia (otrora Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia), fui invitado a dar una conferencia sobre mi trabajo. En aquel entonces me encontraba finalizando mis estudios doctorales en Arenavirus (virus transmitidos por roedores) y uno de mis intereses rondaba los agentes virales emergentes

Vacunas antivirales de última generación

RESUMEN: Prefacio Antes de iniciar este tema vale la pena mencionar que hasta el momento las técnicas tradicionales para producir vacunas, y por estas entiéndase vacunas a virus - vivo modificado - o también llamadas llamadas vacunas inactivas, han sido las más exitosas. Incluso sin conocer exactamente como actuaban o el agente causante de la infección y de la enfermedad, fueron las primeras e irónicamente siguen siendo, a pesar de todos los adelantos de la biología molecular y la manipulación genética, las que nos han brindado mayor bienestar e incluso la posibilidad de erradicación, a pesar de todos los inconvenientes que se les puedan encontrar o los mejoramientos que se les puedan sugerir

Reforma al Sistema General de Regalías (SGR) : ¿nuevas oportunidades en investigación o sofisma político?

RESUMEN: En 1994, como producto indirecto de la constitución colombiana de 1991,, se creó el Fondo Nacional de Regalías, as, el cual modificó la distribución de los entes territoriales de los recaudos por explotación de los recursos naturales no renovables. Lo anterior representó un intento de descentrali zar la administración de la economía, devolviendo a departamentos, municipios productores un más porcentaje de los réditos de minería y petróleo

Virus de Influenza A H5N1 y H1N1 : características y potencial zoonótico

ABSTRACT: Influenza A viruses which belong to the Orthomyxoviridae family, are enveloped, pleomorphic, and contain genomes of 8 single-stranded negative-sense segments of RNA. Influenza viruses have three key structural proteins: hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA) and Matrix 2 (M2). Both HA and NA are surface glycoproteins diverse enough that their serological recognition gives rise to the traditional classification into different subtypes. At present, 16 subtypes of HA (H1-H16) and 9 subtypes of NA (N1- N9) have been identified. Among all the influenza A viruses with zoonotic capacity that have been described, subtypes H5N1 and H1N1, have shown to be the most pathogenic for humans. Direct transmission of influenza A viruses from birds to humans used to be considered a very unlikely event but its possibility to spread from human to human was considered even more exceptional. However, this paradigm changed in 1997 after the outbreaks of zoonotic influenza affecting people from Asia and Europe with strains previously seen only in birds. Considering the susceptibility of pigs to human and avian influenza viruses, and the virus ability to evolve and generate new subtypes, that could more easily spread from pigs to humans, the possibility of human epidemics is a constant menace. A recent example was the outbreak of H1N1 influenza in 2009 that crossed species and geographical borders affecting up to 20 to 40% of the people in some parts of the world. Vaccines and control measures are continuously being developed to address a threat that every year claims human and animal lives, and makes us fear for a new and more lethal strain of the virus.RESUMEN: Los virus de influenza tipo A pertenecen a la familia Orthomyxoviridae, son envueltos, pleomórficos, y contienen 8 segmentos de ARN de cadena negativa. Dichos agentes poseen tres proteínas estructurales claves: Hemaglutinina (HA), Neuraminidasa (NA) y proteína de Matriz 2 (M2). La HA y la NA son glicoproteínas de superficie, que debido a su gran diversidad fueron usadas para crear la clasificación y nomenclatura de subtipos de virus de influenza, basada en la reactividad serológica contra ellas. De acuerdo con lo anterior, hasta la fecha se han identificado 16 subtipos de HA (H1-H16) y 9 subtipos de NA (N1-N9). De los virus tipo A, los denominados H5N1 y H1N1 han demostrado ser los más patógenos. El contagio directo de los virus de influenza A de las aves a los humanos se consideraba un evento raro y su dispersión se creía que era aún más limitada, percepción que ha cambiado desde 1997 y particularmente con los últimos brotes zoonóticos de influenza en Asia y Europa. Adicionalmente, si se considera que el porcino es una especie susceptible a virus de influenza provenientes de humanos y aves, y que estos agentes infecciosos tienen la capacidad de realizar un cambio antigénico al reasociarse generando así nuevos subtipos, la potencialidad de nuevas amenazas a la población humana es cada vez más tangible. Ejemplo de lo anterior es la reciente pandemia de influenza A H1N1 en el año 2009, que atravesó fronteras sin discriminación geográfica o de especie, afectando entre el 20 y el 40% de las personas en algunas partes del mundo. Vacunas y medidas de control se desarrollan en la actualidad para afrontar esta amenaza que cada año cobra vidas humanas y animales, y nos hace temer por una nueva y más mortífera epidemia en el futuro

Contribución de los modelos murino y primate al estudio de las enfermedades por arenavirus y fiebres hemorrágicas

ABSTRACT: This manuscript is an inedited part of my PhD dissertation, based on historical and recent findings on animal models, that was presented as part of the requirements to fulfill the conditions to become a philosophical doctor on Veterinary Sciences at the University of Wisconsin on October of 2003.The current mini-review written on a free-version style, underlines some of the cornerstones of immunology as a science, understood thanks to the use of the Lymphocytic Choriomeningitis virus (LCMV) experimentally and naturally infected mouse model. It should suffice to say that there have been two Nobel prices of Medicine for discoveries made through the employment of this animal model, in order to recognize the right importance to it. In addition, several laboratories, Dr. Salvato´s among them, have also employed the LCMV-infected Rhesus monkey model as a tool to unravel the mysteries of arenaviral hemorrhagic fever, and particularly the physiopathology of Lassa disease in humans. Here I show some of the knowledge generated through the study of both animal infections.RESUMEN: El siguiente manuscrito, es un capítulo inédito de mi tesis doctoral, basado en hallazgos históricos y recientes sobre modelos animales, que fue presentado como parte de los requisitos para obtener el título de Ph.D. en Ciencias veterinarias en la Universidad de Wisconsin, en Octubre de 2003.La actual minirevisión escrita en estilo de versión libre, subraya algunas de las piedras angulares de la inmunología como ciencia, entendidas gracias al uso del modelo murino infectado natural y experimentalmente con el virus de Coriomeningitis Linfocítica (LCMV). Sería suficiente mencionar que han existido dos premios Nóbel de Medicina por descubrimientos realizados a través del empleo de este modelo animal, para reconocer la real importancia del mismo. Adicionalmente, varios laboratorios, el de la Dra. Salvato entre ellos, también han empleado el modelo del mono Rhesus como un instrumento para desvelar los misterios de las fiebres hemorrágicas por arenavirus, y particularmente la fisiopatología de la enfermedad de Lassa en humanos. Aquí yo muestro algo del conocimiento generado a través del estudio de ambas infecciones animales

Transmissible spongiform encephalopathies : biology of the Prion and current state of the epidemiologic surveillance in Colombia

ABSTRACT: Transmissible Spongiform Encephalopaties, also called prion diseases, are a group of neurodegenerative diseases affecting a variety of mammals. The responsible agent consists of an abnormal isoform of a cellular protein that suffers a conformational change (prion), acquiring the ability of being transmissible. It has been demonstrated prions capacity to cross the species barrier between the cattle and humans; affecting public health in countries with reported cases of bovine spongiform encephalopathy. The transmissible spongiform encephalitis have been reported in a number of countries and Colombia is not the exception with some human sporadic cases, not related with the intake of contaminated material from sick animals. With this manuscript we pretend to give a view of the history and the current state of prion diseases in Colombia, which represent a serious threat for the public health and the cattle industry of the country.RESUMEN: Las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles, también llamadas enfermedades priónicas, son un grupo de enfermedades neurodegenerativas, que afectan una gran variedad de mamíferos. El agente responsable de estas patologías se ha identificado como una isoforma anormal de una proteína celular, la cual luego de sufrir un cambio conformacional (prion), adquiere la capacidad de comportarse como un agente infeccioso. Se ha demostrado la capacidad de los priones para cruzar la barrera de especies entre el ganado y los seres humanos; lo cual se ha reflejado en un problema de salud pública que ha afectado gravemente a los países donde se han presentado brotes de estas enfermedades. Las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles se han reportado en una gran cantidad de países y Colombia no ha sido ajena a la presencia de casos esporádicos humanos, no relacionados con el consumo de material contaminado procedente de animales enfermos. Con el presente artículo se pretende dar una visión de la historia y el estado actual de Colombia frente a estas enfermedades, las cuales representan una grave amenaza para la salud pública y la agrocadena ganadera del país

Bovine paratuberculosis : ¿Do we know the real situation of this disease in Colombian cattle?

ABSTRACT: Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map) is the etiologic agent of a severe granulomatous gastroenteritis in ruminants, known as bovine paratuberculosis or Johne's disease and characterized by persistent diarrhea and progressive emaciation that finally cause death. Calves under 6 months of age are the most susceptible to this bacterial infection by transplacental route, milk consumption or grassland contaminated feeding and although, they do not show clinical signs until they are 2 to 5 years old (incubation period), they commonly spread Map through their feces. A remarkable difficulty concerning Johne´s disease is its lack of appropriate treatment; therefore any control scheme must be focused in identification of infected animals by reliable diagnostic tests before the appearance of clinical manifestations, in order to avoid dissemination of the infection to animals of the same or different herd, particularly when marketing possible asymptomatic animals. The infection has a worldwide distribution and it is responsible of important economic losses in cattle industry. Bear to us, the disease has been reported in dairy herds of the municipality of San Pedro de los Milagros (Antioquia), but it is thought that there are many other infected regions, which makes more prominent the need of efficient methods for Map detection for rapid diagnosis and efficient control of the dissemination of the infection. In this review, we highlight some important features of bovine paratuberculosis and provide some insight regarding probable research perspectives of this disease.RESUMEN: El Mycobacterium avium subespecies paratuberculosis (Map) es el agente etiológico causante de una gastroenteritis granulomatosa severa en rumiantes, conocida como paratuberculosis bovina o enfermedad de Johne, caracterizada por la presentación de diarrea persistente y emaciación progresiva, que causan finalmente la muerte. Los animales menores de 6 meses de edad son los más susceptibles a contraer la infección por medio de la ingestión del bacilo a través de la leche o el pasto contaminado, o por vía transplacentaria y a pesar de que excretan el agente en las heces, no presentan signos clínicos antes de 2 a 5 años, tiempo que dura el periodo de incubación. Debido a la falta de tratamiento, cualquier medida de control debe estar enfocada en la identificación de los animales infectados mediante pruebas diagnosticas confiables, que permitan detectar el agente antes del inicio de los signos clínicos para evitar la diseminación de la infección a los animales del mismo hato o a otros, en caso de la venta de animales asintomáticos. La infección es de distribución mundial y es responsable de importantes pérdidas económicas en la industria de la producción bovina. En nuestro medio, se ha documentado la enfermedad en hatos lecheros del municipio de San Pedro de los Milagros (Antioquia), pero se cree que hay muchas otras zonas infectadas, por lo que se requiere el desarrollo de métodos eficientes de detección, diagnóstico y control de la enfermedad. En la presente revisión, se tratarán los aspectos concernientes a la paratuberculosis bovina y finalmente se destacan algunas perspectivas de investigación en esta enfermedad

Identificación de mycobacterium avium subspecies paratuberculosis mediante pruebas de PCR y definición de programa de control de la paratuberculosis bovina en hatos lecheros

ABSTRACT: The aim of this study was to establish the protocol of conventional and real time PCR for amplification of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) genome from bovine fecal samples, as a way to define strategies for establishing a prevention and control program in a dairy herd at the Universidad de Antioquia (Medellín, Colombia). Fecal samples were individually taken of clinical healthy cows or cows with diarrhea bred in a herd enzootic for Johne’s disease, were processed them for culture in liquid Middlebrook 7H9 media supplemented with mycobactin under two different protocols: with or without inhibitors. Fecal samples from clinically healthy cows were used as negative control. Conventional and real time PCR were performed with MAP DNA obtained of fecal or cultured samples. The MAP- specific IS900 segment was amplified by using the respective forward and reverse primers. DNA isolated from a reference MAP strain was used as positive control of PCR. Data were analyzed by descriptive statistics and simple regression analysis between PCR and culture results were performed. All samples cultured in media with or without mycobactin gave a positive result compatible with MAP growth. However, only 13,3% of samples were positive by real time PCR. There was no relationship neither between PCR and culture results, nor between clinical condition of the cow and MAP positivity. These results support the need combine culture of feces with PCR diagnosis for identification of MAP-excreting cows in a dairy herd. Finally, a strategy of prevention and control of bovine paratuberculosis is proposed for this enzootic herd and for dairy herds in Colombia.RESUMEN: El objetivo de este trabajo fue establecer un sistema de detección y amplificación del Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) a partir de muestras de materia fecal bovina, mediante el uso de la técnica de PCR en tiempo real, como estrategia de apoyo para el establecimiento de un programa de prevención detección y control de la paratuberculosis bovina en el hato lechero de la Universidad de Antioquia. Muestras de materia fecal fueron tomadas de bovinos provenientes de un hato enzoótico para la enfermedad de Johne, fueron cultivadas en medio de cultivo líquido Middlebrook 7H9 suplementado con micobactina, bajo dos protocolos de aislamiento: con o sin inhibidores. Como control negativo fue utilizada muestras de materia fecal de bovinos clínicamente sanos. Adicionalmente, con el DNA de las muestras aisladas en cultivo y de las muestras de materia fecal, fueron hechas pruebas de PCR convencional y en tiempo real, para la amplificación del elemento de inserción IS900 del MAP, mediante el uso de cebadores específicos para este elemento. Como control positivo se utilizó DNA de MAP de una cepa de referencia. Los resultados fueron evaluados mediante estadística descriptiva y la comparación entre el resultado del cultivo y de la prueba de PCR fue evaluado mediante regresión simple. Los resultados del cultivo bacteriológico, mostraron un total de 15 muestras con crecimiento compatible con MAP, el cual fue verificado por prueba de PCR en el 13.3% de los casos. No hubo correlación entre el resultado de cultivo y la prueba de PCR ni entre el estado clínico y la positividad al MAP. Los resultados confirman la necesidad de combinar el diagnóstico molecular con el cultivo bacteriológico para identificar las vacas positivas en un hato. Finalmente, una estrategia de prevención y control de la enfermedad aplicable a este hato enzoótico y a los hatos lecheros en Colombia es discutida

Anticuerpos contra el virus del Oeste del Nilo en equinos de Antioquia y Meta, Colombia, 2005-2008

ABSTRACT: West Nile Virus (WNV) is an arthropod-borne agent classified in the Flavivirus genus. Infection has been demonstrated in many vertebrate species including birds, mammals and reptiles. WNV can affect the nervous system of humans, horses and birds causing mild to severe illness and sometimes death. In 1999 WNV was introduced into the Americas causing a small outbreak in New York City. In the following years, the virus spread across North America and later into Central America, the Caribbean and parts of South America. Serological evidence of WNV in Colombia was first documented in 2005 in equines from the Atlantic coast; however clinical cases in humans or animals have not been reported. We extended these studies searching for WNV antibodies in sera of equines of two other provinces in Colombia: Antioquia and El Meta. IgG and IgM antibodies were first determined and reactive sera were processed by plaque reduction neutralization test (PRNT) to confirm the specificity of results. Four horses from Antioquia but none from El Meta tested positive for WNV antibodies. These results suggest that WNV has spread across the Atlantic coast and is now invading the Andean region in Colombia.RESUMEN: El virus del Oeste del Nilo (WNV) es un agente del género Flavivirus transmitido por artrópodos. La infección con WNV ha sido demostrada en muchas especies de aves, mamíferos y reptiles. El WNV puede afectar el sistema nervioso de humanos, caballos y aves causando enfermedad de leve a severa, ocasionando la muerte en algunos casos. En 1999, el virus fue introducido en Norteamérica causando un brote en la ciudad de New York. En los siguientes años, el virus se extendió por Norteamérica, y posteriormente fue encontrado en el Caribe, Centro y Suramérica. El primer reporte de anticuerpos para WNV en Colombia se hizo en 2005, en equinos de la costa Atlántica. En el presente estudio se extendió la búsqueda de anticuerpos a otros dos Departamentos de Colombia: Antioquia y El Meta. Primero se determinó la presencia de anticuerpos IgM e IgG, y los sueros reactivos fueron procesados para anticuerpos neutralizantes por la técnica de reduccion de placas para confirmar los resultados. Cuatro equinos de Antioquia y ninguno de El Meta fueron positivos para anticuerpos anti-WNV. Los resultados sugieren que el WNV está ampliamente distribuido en la costa Atlántica de Colombia y ha iniciado su dispersión por la zona andina

Biological characterization of two isolates of Leptospira spp. from Colombian patients with Weil´s syndrome

ABSTRACT: The dynamics of experimental infection in a hamster model are described for two Leptospira spp. isolates, recovered from patients with Weil’s syndrome from towns in Antioquia. Experimental infection was performed by intraperitoneal inoculation of juvenile hamsters. The evaluation of markers of liver and kidney function as well as an acute phase reactant was performed at two time points post-infection. At 18 days post-inoculation the end point was set, blood was collected and an autopsy was performed, taking tissue from liver, kidney and lung for cultivation in EMJH and buffered formalin for histopathological studies. The results of tests for renal function, liver and C-reactive protein were variable, and even though they showed slight increases they were not correlated with the presence of clinical signs; however, at the histopathology level one might expect significant changes, since growth was obtained from the cultivation of kidney and liver in some animals. The results of the evaluation of virulence by determining the lethal dose 50 suggests that the two isolates were of low virulence or that virulence had been lost perhaps due to the successive passes in vitro before inoculation of the animals.RESUMEN: Se describe la dinámica de la infección experimental en el modelo hámster de dos aislados de Leptospira spp. recuperados de pacientes con síndrome de Weil, procedentes de poblaciones Antioqueñas. La infección experimental se realizó mediante inoculación intraperitoneal de los aislados en hámsteres juveniles. La evaluación de marcadores de función hepática y renal, además de un reactante de fase aguda de inflamación, se realizó en dos momentos postinfección. A los 18 días postinoculación se establece el punto final, colectando sangre y realizando la necropsia, tomando tejido de hígado, riñón y pulmón, para cultivo en EMJH y en formol tamponado para estudio histopatológico. Los resultados de las pruebas de función renal, hepática y la proteína C reactiva fueron variables, y aunque mostraron ligeros aumentos no se correlacionó con la presencia de signos clínicos; sin embargo, en la histopatología se tiene la expectativa de evidenciar algún cambio importante, ya que se obtuvo crecimiento bacteriano a partir del cultivo de riñón e hígado en algunos de los animales. Los resultados de la evaluación de la virulencia a través de la determinación de la dosis letal 50 sugiere que los dos aislados eran poco virulentos o habían perdido virulencia quizás debido a los pases sucesivos in vitro a que se sometieron antes de inocularlos en los animales