DIAGNÓSTICO COMPARATIVO ENTRE CITOLOGIA ASPIRATIVA POR AGULHA FINA E AVALIAÇÃO HISTOLÓGICA DA GLÂNDULA MAMÁRIA DE CADELAS

O presente trabalho objetivou confirmar a eficiência da Citologia Aspirativa por Agulha Fina (CAAF) no diagnóstico de lesões da glândula mamária de cadelas. Durante o período de um ano, foram estudadas 148 cadelas, variando de 3 a 17 anos de idade, caracterizando-se 21 mastites, 21 neoplasias benignas e 21 malignas. A avaliação histológica foi realizada em todos os casos. Uma correlação positiva foi caracterizada em 80% dos casos entre os resultados da avaliação histológica e citológica. As limitações da CAAF são os casos falso-positivos. Na ausência de um diagnóstico citológico definitivo, uma biópsia e a avaliação histológica devem ser realizadas para confirmar uma possível lesão maligna clinicamente suspeita, mas não confirmada citologicamente. No contexto clínico, a CAAF tem um futuro promissor por evitar procedimentos invasivos desnecessários e propiciar ao cirurgião uma avaliação e abordagem mais racionais e precisas de lesões mamárias

Correlação entre a citologia aspirativa por agulha fina e a histologia no diagnóstico de tumores mamários de cadelas

Cytologic and histologic examination of 35 canine mammary masses was performed over a year period, from dogs that underwent mastectomy for mammary neoplasms at the UNESP Veterinary Medical Teaching Hospital -- Jaboticabal (SP) Brazil. The mastectomy specimens were evaluated according to structural parameters found to be prognostically significant in human mammary tumors, such as grade of atypia, nuclear criteria (shape, size, form, abnormal mitotic figures), chromatin and nucleolar patterns, high cellularity and poor intercellular cohesions. These criteria were used for differentiation of benign from malignant mammary tumors with 63% of a concordant diagnosis and sensibility of 73% and specificity of 83%. The "fine needle aspiration" technique is discussed as a tool to perform early diagnosis. Our data were found to have a positive correlation to the prognosis indicating that we can recognize structural variables of malignancy by citopathology. Application of the described parameters should facilitate comparative studies of histopathologic diagnosis with biologic behavior of canine mammary tumors using this technique to obtain early diagnosis and a secure prognosis.Foram estudados tumores de mama em cadelas, comparando o seu padrão citológico, obtido através da Citologia Aspirativa por Agulha Fina (CAAF), com os resultados da histopatologia. Num período de um ano, as cadelas trazidas ao Hospital Veterinário -- UNESP -- Câmpus de Jaboticabal foram submetidas a exérese cirúrgica dos tumores mamários. As amostras foram avaliadas de acordo com parâmetros estruturais utilizados nos tumores mamários humanos, como grau de atipia, critérios nucleares, padrão de cromatina e nucléolos, alta celularidade e pouca coesão intercelular. Utilizaram-se estes critérios para diferenciar tumores mamários benignos de malignos com 63% de diagnósticos concordantes, sensibilidade de 73% e especificidade de 83%. Nossos dados mostraram ter uma correlação positiva com o prognóstico, demonstrando que é possível reconhecer variáveis estruturais de malignidade na citopatologia para obter um diagnóstico precoce e um prognóstico seguro

A detecção de substâncias cancerígenas em estudos experimentais

Atualmente, o método mais importante para a identificação de agentes químicos cancerígenos é o teste de longa duração in vivo, com roedores. No Brasil não há condições para a sua execução, devido à inexistência de especialistas e de infra-estrutura adequada. Em conseqüência, o país é dependente dos conhecimentos gerados no exterior sobre o risco que determinados compostos químicos impõem às populações e ao meio ambiente. Por outro lado, as desvantagens inerentes ao protocolo deste teste, como a complexidade na execução, o tempo prolongado para obtenção das conclusões e custo elevado, entre outras, levam à procura de alternativas mais convenientes. No presente trabalho são apresentados dois testes in vivo para detecção de cancerígenos químicos em ratos, que têm como vantagens o tempo de execução e o custo, menores que os do teste convencional. Os sistemas propostos têm só-o-fígado ou vários-órgãos-simultãneos como órgãos-alvo do eventual cancerígeno. Ambos os testes foram avaliados respectivamente com centenas e dezenas de substâncias químicas e reproduziram os resultados já obtidos em testes de longa duração, mostrando forte consistência biológica. Os autores destacam as vantagens de sua adoção em países como o Brasil e propõem sua inclusão na seqüência de testes necessários para caracterizar um agente químico como cancerígeno

Comparação entre pericárdio bovino preservado em glicerina e malha de poliéster no reparo de falhas da parede abdominal em ratos Comparison of glycerin preserved bovine pericardium and a polyester mesh for the repair of abdominal wall defects in rats

OBJETIVO: Comparar uma malha comercial de poliéster com o pericárdio bovino preservado em glicerina na reconstituição de defeitos da parede abdominal. MÉTODOS: Foram utilizados 30 ratos, divididos em dois grupos eqüitativos. Efetuou-se uma excisão retangular de 2,5 x 2 cm, incluindo toda a musculatura abdominal e peritônio. No grupo I a parede abdominal foi reparada com malha de poliéster e no grupo II com pericárdio bovino conservado em glicerina. Os animais foram sacrificados aos 15, 60 e 90 dias de pós-operatório, sendo o local cirúrgico avaliado macroscópica e histologicamente. RESULTADOS: Os animais do grupo I apresentaram aderências mais severas e em maior número quando comparados aos do grupo II; porém, sem comprometimento funcional. A análise histológica revelou incorporação dos tecidos aos implantes, com maior resposta fibroblástica nos animais do grupo I. CONCLUSÃO: A malha de poliéster oferece maior resistência estrutural e resposta fibroblástica mais intensa; contudo, promove grande quantidade de aderências às vísceras abdominais, quando comparada ao pericárdio bovino.<br>PURPOSE: The aim of the study was to compare polyester mesh and glycerin preserved bovine pericardium for the repair of abdominal wall defects. METHODS: Thirty rats divided into two equal experimental groups were used. A 2.5 x 2 cm rectangular defect including all abdominal muscles and peritoneum was performed. The defect was reconstructed using polyester mesh in group I and glycerin preserved bovine pericardium in group II. The animals were submitted to euthanasia at 15, 60 and 90 days postoperatively, and the surgical area was evaluated by macroscopic and microscopic examination. RESULTS: The animals of the Group I had more abdominal adhesions and those were more severe than the animals of the Group II. The microscopic examination showed incorporation of the tissues in the implants with accentuated fibroblastic reaction in the animals of the group I. CONCLUSION: The polyester mesh offers more structural resistance and more fibroblastic response; however, leads to greater amount of abdominal viscera adhesions when compared to preserved bovine pericardium

Correlação entre a citologia aspirativa por agulha fina e a histologia no diagnóstico de tumores mamários de cadelas

Foram estudados tumores de mama em cadelas, comparando o seu padrão citológico, obtido através da Citologia Aspirativa por Agulha Fina (CAAF), com os resultados da histopatologia. Num período de um ano, as cadelas trazidas ao Hospital Veterinário -- UNESP -- Câmpus de Jaboticabal foram submetidas a exérese cirúrgica dos tumores mamários. As amostras foram avaliadas de acordo com parâmetros estruturais utilizados nos tumores mamários humanos, como grau de atipia, critérios nucleares, padrão de cromatina e nucléolos, alta celularidade e pouca coesão intercelular. Utilizaram-se estes critérios para diferenciar tumores mamários benignos de malignos com 63% de diagnósticos concordantes, sensibilidade de 73% e especificidade de 83%. Nossos dados mostraram ter uma correlação positiva com o prognóstico, demonstrando que é possível reconhecer variáveis estruturais de malignidade na citopatologia para obter um diagnóstico precoce e um prognóstico seguro.Cytologic and histologic examination of 35 canine mammary masses was performed over a year period, from dogs that underwent mastectomy for mammary neoplasms at the UNESP Veterinary Medical Teaching Hospital -- Jaboticabal (SP) Brazil. The mastectomy specimens were evaluated according to structural parameters found to be prognostically significant in human mammary tumors, such as grade of atypia, nuclear criteria (shape, size, form, abnormal mitotic figures), chromatin and nucleolar patterns, high cellularity and poor intercellular cohesions. These criteria were used for differentiation of benign from malignant mammary tumors with 63% of a concordant diagnosis and sensibility of 73% and specificity of 83%. The fine needle aspiration technique is discussed as a tool to perform early diagnosis. Our data were found to have a positive correlation to the prognosis indicating that we can recognize structural variables of malignancy by citopathology. Application of the described parameters should facilitate comparative studies of histopathologic diagnosis with biologic behavior of canine mammary tumors using this technique to obtain early diagnosis and a secure prognosis

The use of real-time PCR (qPCR) for the diagnosis of bovine herpes virus 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain samples identified as bovine unspecific encephalitis

Background: Bovine herpes virus 5 (BoHV-5) is a neurovirulent alpha herpes virus that causes fatal meningoencephalitis and huge economic losses in the livestock and associated industries worldwide; its diagnosis in the laboratory is essential for disease control, immunologic surveillance and effective monitoring programs in endemic areas. Materials and Methods: In this study, brain samples from 21 Colombian cattle that died of neurological disease, were negative for rabies and were diagnosed with nonspecific encephalitis were processed by real-time PCR (qPCR) in the laboratory of virology at the Institute of Biosciences, Sao Paulo State University, Brazil, to detect BoHV-5 genetic material in tissue preserved in paraffin blocks. Tissues were considered positive for BoHV-5 if amplification occurred at or before 30 PCR cycles, inconclusive if amplification occurred between 30 and 40 cycles and negative otherwise. Results and Conclusion: Two cases were positive, demonstrating that qPCR may be useful for confirming herpes encephalitis in acid formalin-fixed tissues with an inconclusive diagnosis

Agarose cell block technique as a complementary method in the diagnosis of fungal osteomyelitis in a dog

A 7-year-old Labrador Retriever female dog presenting left forelimb lameness for one day was admitted to the Veterinary Hospital (UNESP-Botucatu) for clinical evaluation. Several tests, including blood and image analysis, microbiological culture and cytology of lytic areas of affected bone were made in order to establish a diagnosis. Serum biochemical profile revealed increased levels of liver enzymes, plasma globulin, creatine kinase (CK) and calcium. Hemogram revealed anemia and leukocytosis; left humerus image analysis revealed an osteolytic lesion and cytology revealed a suppurative periostitis. Differential diagnosis was a nonspecific infectious inflammatory process or osteosarcoma. Since it was not possible to achieve a definitive diagnosis and there was a highly suspicious for an infectious agent, an agarose cell block of the bone marrow fine-needle aspiration was made. The cytological examination of cell block presented similar findings as described previously. However, additional stains including periodic acid-Schiff (PAS) were positive for fungal hyphae, which rendered a diagnosis of fungal osteomyelitis due to Aspergillus spp. This case report illustrates an uncommon cause of osteomyelitis for breed that was diagnosed by an underused method in veterinary medicine

Lesão vascular mediada pelo receptor AT1 esses efeitos em miocárdio, rins e fígado de ratos

The systemic aspect of vascular damage induced by angiotensin II (ANG II) has been poorly explored in the literature. Considering the presence of ANG II and its specific receptor AT1, in several organs, all tissues might be potentially affected by its effects. The aims of this study were: To evaluate the early histological changes in the heart, liver and kidneys, produced by ANG II infusion, to evaluate the protective effect of losartan. Wistar rats were distributed into three groups: control (no treatment), treated with ANG II, and treated with ANG II + losartan. ANG II was continuously infused over 72 hours by subcutaneous osmotic pumps. Histological sections of the myocardium, kidneys and liver were stained and observed for the presence of necrosis. There were ANG II-induced perivascular inflammation and necrosis of the arteriolar wall in the myocardium, kidney, and liver by, which were partially prevented by losartan. There was no significant correlation between heart and kidney damage. Tissue lesion severity was lower than that of vascular lesions, without statistical difference between groups. ANG II causes vascular injury in the heart, kidneys and liver, indicating a systemic vasculotoxic effect; the mechanisms of damage/protection vary depending on the target organ; perivascular lesions may occur even when anti-hypertensive doses of losartan are used.O aspecto sistêmico da lesão vascular induzida pela angiotensina II (ANG II) tem sido pouco explorada na literatura. Considerando a presença de ANG II e de seu receptor AT1 em diversos órgãos, todos os tecidos poderiam ser potencialmente afetados por esses efeitos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar as alterações histológicas iniciais no coração, fígado e rins, produzidas pela infusão de ANG II, e avaliar o efeito protetor do losartan. Ratos Wistar foram divididos em três grupos: controle (sem tratamento), tratados com ANG II, e tratados com ANG II + losartan. A ANG II foi infundida continuamente por 72 horas por meio de mini-bombas osmóticas. Foram realizados cortes histológicos de miocárdio, rim e fígado para coloração e observação para a presença de necrose. Observou-se a presença de inflamação perivascular e necrose de parede arteriolar em miocárdio, rins e fígado, que foram parcialmente prevenidas pelo losartan. Não houve correlação significante entre as lesões observadas no coração e nos rins. A severidade da lesão tissular foi menor quando comparada às lesões vasculares, sem diferença estatística entre os grupos. A ANG II causa injúria vascular no coração, rins e fígado, sugerindo um efeito vasculotóxico sistêmico; os mecanismos de lesão/proteção variam dependendo do órgão afetado; as lesões perivasculares podem ocorrer mesmo quando doses antihipertensivas de losartan forem utilizadas

Spontaneous canine transmissible venereal tumor: association between different phenotypes and theinsertion LINE-1/c-myc

Objective: this study aimed to evaluate the LINE-1 transposon inserted in c-myc gene as a specific genetic alteration in cells of spontaneous canine Transmissible Venereal Tumor (TVT) with either lymphocytoid or plasmacytoid phenotypes. Methods: tumoral biopsies from 35 dogs were collected by puncture or exfoliation. Polymerase Chain Reaction (PCR) was carried out with primers myc.s and LINE. A, specific to the LINE-1 segment to detect the presence of LINE-1/c-myc molecular marker. Results: sequence alignment of DNA samples from lymphocytoid and plasmacytoid TVT cells did not show polymorphisms, and the comparison with sequences from the GenBank identified them as a LINE-1/c-myc rearrangement. Conclusions: considering the aggressive nature of the plasmacytoid phenotype, there is no apparent relation between LINE-1/c-myc and the malignancy of TVT. Further studies are needed to establish molecular differences associated with the aggressiveness of the various phenotypes of canine TVT.Objetivo: evaluar la expresión del trasposón LINE-1 insertado en el oncogén c-myc como una alteración genética específica en células de Tumor Venéreo Transmisible canino espontáneo con fenotipos linfocitoideos o plasmocitoideos. Métodos: se tomaron muestras citológicas de 35 caninos naturalmente afectados por Tumor Venéreo Transmisible (TVT), separándolas en dos grupos de acuerdo al fenotipo predominante. La identificación del marcador molecular LINE-1/c-myc fue posible mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) usando los primers myc.s y LINE. A, específicos para el segmento LINE-1. Resultados: el resultado del alineamiento de las secuencias obtenidas a partir del DNA de cada uno de los fenotipos de TVT no presentó variación entre ellos y al compararlas con el alineamiento de otras secuencias depositadas en el GenBank, pudo observarse que se trata de un reordenamiento LINE- 1/c-myc. Conclusiones: teniendo en cuenta la naturaleza agresiva del fenotipo plasmocitoide, se estableció que no hay polimorfismo genético entre los grupos analizados, siendo necesario realizar nuevos estudios tendientes a establecer diferencias moleculares asociadas con la agresividad de los diferentes fenotipos del TVT canino.Objetivo: foi avaliado o elemento de transposição LINE-1 inserido no gene c-myc como alteração genética específica nas células do TVT espontâneo canino nos grupos fenotípicos previamente classificados como linfocitóide e plasmocitóide. Métodos: amostras da lesão de 35 cães foram colhidas por punção ou esfoliação. Para identificar o marcador molecular LINE-1/c-myc nas amostras foi utilizada a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase empregando-se os primers myc.s e LINE. A, específicos para o segmento LINE-1. Resultados: o resultado do alinhamento das sequências obtidas das amostras de DNA das células de TVT linfocitóide e plasmocitóide não apresentou polimorfismos e, por meio do alinhamento com outras sequências depositadas no GeneBank, identificou-se que trata-se do rearranjo LINE-1/c-myc. Conclusões: parece não haver relação entre este aspecto molecular analisado com a agressividade do tumor.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Immunoexpression of Cathepsin D and S100A4 protein and their molecular subtyptes in canine mammary carcinomas

Cathepsin D (CD), a lysosomal protease, and S100A4 protein, a calcium binding motif, are considered to be involved in metastasis in various human cancers. No data regarding such proteins are available for canine mammary carcinomas (CMCs). Accordingly, their expression in association with known factors of prognosis was investigated in this study. For that, 66 surgically resected CMCs were submitted to an immunohistochemical evaluation using anti CD, S100A4 protein, HER2, estrogen receptor α, cytokeratin 5, and p63 antibodies, further characterizing the tumors’ molecular subtype. An increase in S100A4 immunoexpression by neoplastic luminal mammary cells was associated with an infiltrative tumor mode of growth, consequently leading us to conclude that S100A4 protein could be related to progression in CMCs. Additionally, the occurrence of the luminal A molecular subtype was associated with the complex histotype in CMCs. Although we have demonstrated that changes in S100A4 protein immunoexpression occurs in CMCs, further studies are needed to determine whether this represents important independent biomarkers for CMCs.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP