Oral hairy leukoplakia: histopathologic features of the subclinical stage

A leucoplasia pilosa oral (LPO) é uma das manifestações orais mais comuns na AIDS, com valor diagnóstico e prognóstico. A LPO está relacionada ao Epstein-Barr vírus (EBV), com características clínicas e histopatológicas definidas. Já existem relatos de uma fase subclínica da LPO, porém sem caracterização histopatológica. O presente trabalho teve por objetivo descrever os aspectos histopatológicos desta fase, bem como realizar uma análise comparativa entre a LPO subclínica e clínica, com a finalidade de verificar a suficiência diagnóstica dos critérios histopatológicos. Trata-se de um estudo retrospectivo de 11 casos, obtidos a partir de cinco biópsias realizadas em pacientes com lesão e da borda de seis línguas sem lesão macroscopicamente detectável, provenientes de necropsias. Foram utilizados os seguintes métodos: histopatologia, imuno-histoquímica e hibridização in situ. Os aspectos histopatológicos que caracterizaram a fase subclínica da LPO foram: ausência de paraceratose e papilomatose, acantose leve, presença de células claras e alterações nucleares (inclusão tipo Cowdry A, núcleo em "vidro fosco" e núcleo "em colar"). Houve identificação do EBV através da hibridização in situ e da imuno-histoquímica nas alterações nucleares observadas na histopatologia. Concluiu-se, com fundamentos na identificação do EBV nas alterações nucleares, que a LPO em sua fase subclínica, da mesma forma que na lesão clínica, apresenta características histopatológicas específicas e suficientes para um diagnóstico definitivo, independentemente da identificação do EBV.Oral hairy leukoplakia (OHL) is one of the most common oral manifestations of AIDS, with diagnostic and prognostic value. OHL is associated to the Epstein-Barr virus and presents clinical and histological defined characteristics. There have already been reports about a subclinical stage of OHL, although they lacked histopathologic characterization. The present study had the aim to describe the histopathological characteristics of subclinical hairy leukoplakia, as well as to carry out a comparative analysis between clinical and subclinical OHL. For that, 11 cases were analyzed - 5 biopsies from patients who presented with the lesion and 6 samples from the borders of tongues obtained in necropsies. The histopathological findings in subclinical OHL were: absence of parakeratosis and papillomatosis, mild acanthosis, ballooning cells and nuclear alterations. In situ hybridization and immunostaining were positive for EBV in the nuclear alterations identified in the histophatological analysis. Based on the identification of EBV in the nuclear alterations, it was possible to conclude that subclinical OHL, similarly to the clinical lesion, presents histopathological features that are specific and sufficient to establish the definitive diagnosis, regardless of the identification of the virus

Estudos genéticos sobre a Fibrose Cística no Brasil: uma revisão sistemática

Introdução: a Fibrose Cística (FC) é a doença genética mais comum e letal em caucasianos. O Brasil apresenta grande diversidade étnica entre as cinco regiões geográficas, o que leva a uma incidência variável da FC entre os diferentes Estados. Objetivo: verificar a distribuição dos estudos acerca do perfil de mutações FC em diferentes regiões do Brasil. Metodologia: foi realizada uma revisão sistemática da literatura nas bases de dados (PubMed, LILACS, SciELO e Capes), nos idiomas português e inglês de 1990 a 2014. Resultados: após a aplicação dos critérios de seleção, restaram 60 artigos elegíveis para análise. Foi observado um desequilíbrio de distribuição dos estudos acerca da FC nas cinco regiões do Brasil. As regiões Sudeste e Sul foram as que mais apresentaram trabalhos relacionados ao estudo de mutações genéticas e da doença. Conclusão: alto grau de miscigenação da população brasileira e a grande variabilidade de mutações já descritas impõe o conhecimento do perfil mutacional de cada região do país, tendo em vista a heterogeneidade clínica apresentada pelos pacientes.  

Identificação das fases latente e replicativa do vírus Epstein-Barr: análise em tecidos parafinados de lesões de cabeça e pescoço através das técnicas de imuno-histoquímica, hibridização in situ e Nested PCR

O vírus Epstein-Barr pertence à família do grupo herpes e dados sorológicos indicam que mais de 90% da população mundial está infectada com o EBV latente nos linfócitos B. O mecanismo pelo qual ocorre a replicação viral em indivíduos saudáveis ainda não está bem esclarecido, mas é certo o envolvimento de tecidos da orofaringe e a eliminação viral periódica pela saliva. O EBV tem sido associado a doenças benignas e malignas, entre as quais os linfomas (Hodgkin, não-Hodgkin, de células B e T), carcinomas nasofaríngeos, gástricos e mamários, mononucleose infecciosa e a leucoplasia pilosa oral. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV). Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto à relação da etiopatogenia. Lesões papilomatosas bucais têm sido relacionadas etiopatogenicamente com o Papilomavírus humano (HPV) e até com o vírus Epstein-Barr (EBV), além do papel destes vírus na carcinogênese bucal. Até o momento, os resultados encontrados na literatura relativos às lesões exofíticas malignas e benignas da mucosa bucal são controversos e imprecisos quanto a relação da etiopatogenia com diferentes tipos de HPV e EBV. Este trabalho tem como objetivo principal estudar as alterações morfológicas e moleculares em linfócitos e células epiteliais infectados pelo vírus Epstein-Barr através de cortes de tecidos parafinados, utilizando as técnicas de detecção de proteínas, DNA e RNA. Foram selecionadas 125 amostras de tecidos parafinados de lesões suspeitas de infecção pelo vírus Epstein-barr que foram submetidas ao Nested-PCR para identificação do genoma do vírus. O EBV foi identificado em 52(42%). Sendo detectado em 5/5 (100%) das leucoplasias pilosas orais, 10/52 papilomas,14/15(93%) carcinomas nasofaríngeos, 13/24 (54%) tonsilites e 10/29 (34%) linfomas. Na hibridização in situ para o transcrito EBER observou-se uma maior marcação positiva no grupo das leucoplasias pilosas (100%) seguidos pelos carcinomas nasofaríngeos e linfomas (80% cada). A identificação do EBER pela ISH, em leucoplasias pilosas não foi relatada na literatura. Conclui-se que a PCR foi a técnica com maior sensibilidade na detecção do EBV quando comparada a ISH e IHQ. A boa sensibilidade observada com a imuno-histoquímica para a BZLF-1 em leucoplasias pilosas torna a técnica uma boa escolha na investigação das infecções replicativas. A infecção latente e replicativa nas leucoplasias pilosas são demonstradas através da imuno-histoquimica e hibridização in situ nas áreas dos efeitos citopáticos do EBVEpstein-Barr virus (EBV) belongs to the herpes virus family and sorological data indicate that about 90% of the world population is infected by latent EBV infection in B lymphocytes. The mechanism of viral replication in healthy subjects is still not completely understood, but involvement of the oropharynx soft-tissues and periodic salivary elimination of the virus are well accepted. EBV has been associated to several benign and malignant diseases, including lymphomas (Hodgkin, no-Hodgkin, B-cell and T-cell), nasopharyngeal, gastric and mammary carcinomas, infectious mononucleosis and oral hairy leukoplakia. Oral papillomatous lesions have been also pathogenically associated with human papillomavirus (HPV) and EBV. Data from the literature regarding benign and malignant oral exophytic diseases are controversial in confirming this ethiopatogenic relationship. Oral papillomatous lesions have been pathogenetically associated to HPV and EBV, and both these virus have been also proved to play a role in oral carcinogenesis. The aim of this study was to evaluate the morphological and molecular alterations in lymphocytes and epithelial cells infected by EBV, through the use of protein, DNA and RNA detection techniques in histological sections obtained from paraffin-embedded specimens. A total of 125 paraffin-embedded specimens from EBV-infected suspected lesions were selected and submitted to nested-PCR for EBV identification. The virus was identified in 52 (42%), including 5/5 (100%) oral hairy leukoplakias, 10/52 papillomas, 14/15 (93%) nasopharyngeal carcinomas, 13/24 (54%) tonsillitis and 10/29 (34%) lymphomas. In situ hybridization for EBER showed higher positiveness in oral hairy leukoplakia (100%), followed by nasopharyngeal carcinoma and lymphomas (80% each). Identification of EBER by in situ hybridization in oral hairy leukoplakia was not previously reported in the literature. We concluded that PCR was the most sensitive technique for EBV detection, compared to in situ hybridization and immunohistochemistry. Sensitivity observed with the use of immunohistochemistry to BZLF-1 protein in oral hairy leukoplakia indicates that this technique can be a trustful option in the investigation of infections due to replication of EBV. Latent and replicative EBV infection in oral hairy leukoplakia can be demonstrated through the use of immunhohistochemistry and in situ hybridization in areas with cytopathic effects of EBV227 f

Iron oxide polyaniline-coated nanoparticles modulate tumor microenvironment in breast cancer: an in vitro study on the reprogramming of tumor-associated macrophages

Abstract Background Breast cancer is the neoplastic disease with the highest incidence and mortality in the female population worldwide. Treatment remains challenging due to various factors. Therefore, it is of great importance to develop new therapeutic strategies that promote the safe destruction of neoplastic cells without compromising patients' quality of life. Among advances in the treatment of breast cancer, immunotherapy stands out as a promising trend. Recent studies have demonstrated the potential of iron oxide nanoparticles in promoting the reprogramming of M2 macrophages (pro-tumor phenotype) into M1 macrophages (anti-tumor phenotype) within the tumor microenvironment, resulting in potent antitumor effects. In this study, the effect of polyaniline-coated iron oxide nanoparticles (Pani/y-Fe2O3) on macrophage polarization and breast cancer cell death was investigated. Methods The non-cytotoxic concentration of nanoparticles was determined using the MTT assay. For in vitro co-culture experiments, breast cancer cell lines MCF -7 and MDA-MB -231 and macrophages THP-1 were co-cultured in a Transwell system and then the effects of Pani/y-Fe2O3 on cell viability, gene expression, cytokine profile, and oxidative stress markers were investigated. Results The results showed that Pani/y-Fe2O3 nanoparticles induced M2-to-M1 macrophage polarization in both cell lines through different pathways. In MCF -7 and THP-1 macrophage co-culture, the study showed a decrease in cytokine levels IL -1β, upregulation of M1-associated genes (IL-12, TNF-α) in macrophages, resulting in increased MCF -7 cell death by apoptosis (caspase 3/7+). In MDA-MB -231 co-cultures, increases in cytokines IL -6, IL -1β, and oxidative stress markers were observed, as well as upregulation of the inducible nitric oxide synthase (iNOS) gene in macrophages, leading to tumor cell death via apoptosis-independent pathways (Sytox+). Conclusions These findings highlight the potential of Pani/y-Fe2O3 as a promising therapeutic approach in the context of breast cancer treatment by effectively reprogramming M2 macrophages into an anti-tumor M1 phenotype, Pani/y-Fe2O3 nanoparticles demonstrated the ability to elicit antitumor effects in both MCF-7 and MDA-MB-231 breast cancer cell lines