91 research outputs found

    Determinants of Desired Career Paths among Canadian Engineers

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    The goal of this research is to study five career paths available to engineers and to understand what leads them to prefer the management path to other career path possibilities (i.e. the technical path, the project-based path, the entrepreneurial path, and the hybrid path). A questionnaire survey was conducted using a sample of 900 male and female engineers from a large Canadian province. The0501n results show that several determinants under study (mainly individual-related factors, such as career anchors and education) effectively distinguish engineers who want to pursue a management path from those who choose other career paths, especially technical ones Cette recherche vise Ă  Ă©tudier six orientations que les ingĂ©nieurs peuvent vouloir donner Ă  leur carriĂšre et Ă  comprendre ce qui les amĂšne Ă  privilĂ©gier certains choix de carriĂšre. Les possibilitĂ©s de carriĂšre retenues sont la voie de gestion, la voie technique, la voie de projet, la voie entreprenieuriale, la voie hybride et une nouvelle carriĂšre. Une enquĂȘte par questionnaire a Ă©tĂ© rĂ©alisĂ©e auprĂšs de 900 ingĂ©nieurs Ă  travers le QuĂ©bec, dont 403 femmes. Les rĂ©sultats dĂ©montrent principalement que plusieurs des facteurs Ă©tudiĂ©s (principalement les facteurs individuels comme les ancres de carriĂšre et la scolaritĂ©) permettent de distinguer efficacement les ingĂ©nieurs qui dĂ©sirent poursuivre une carriĂšre en gestion de ceux qui aspirent Ă  d'autres voies de carriĂšre.Engineers, career, career path, entrepreneurial career, career anchor, IngĂ©nieurs, carriĂšre, voies de carriĂšre, changement de carriĂšre

    MĂ©thodologie pour la synthĂšse combinatoire d’azapeptides: application Ă  la synthĂšse d’analogues aza-GHRP-6 en tant que ligands du rĂ©cepteur CD36

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    Les azapeptides sont des mimes peptidiques oĂč le carbone alpha d’un ou de plusieurs acides aminĂ©s est remplacĂ© par un atome d’azote. Cette modification tend Ă  stabiliser une conformation en repliement beta en raison de la rĂ©pulsion Ă©lectronique entre les paires d’électrons libres des atomes d’azote adjacents et de la gĂ©omĂ©trie plane de l’urĂ©e. De plus, le rĂ©sidu semicarbazide a une meilleure rĂ©sistance face aux protĂ©ases en plus d’ĂȘtre chimiquement plus stable qu’une liaison amide. Bien que les propriĂ©tĂ©s des azapeptides en fassent des mimes peptidiques intĂ©ressants, leurs mĂ©thodes de synthĂšses font appel Ă  la synthĂšse laborieuse d’hydrazines substituĂ©es en solution. Le peptide sĂ©crĂ©teur d’hormone de croissance 6 (GHRP-6, His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2) est un hexapeptide synthĂ©tique qui possĂšde une affinitĂ© pour deux rĂ©cepteurs distincts: les rĂ©cepteurs GHS-R1a et CD36. Les travaux effectuĂ©s au cours de mon doctorat qui seront dĂ©taillĂ©s dans cet ouvrage visent Ă  atteindre deux objectifs: (1) le dĂ©veloppement d’analogues du peptide GHRP-6 sĂ©lectif Ă  un seul rĂ©cepteur et (2) la mise au point d’une nouvelle mĂ©thodologie pour la synthĂšse combinatoire d’azapeptides. En rĂ©ponse au premier objectif, la synthĂšse parallĂšle de 49 analogues aza-GHRP-6 a Ă©tĂ© effectuĂ©e et certains candidats sĂ©lectifs au rĂ©cepteur CD36 ont Ă©tĂ© identifiĂ©s. L’étude de leurs propriĂ©tĂ©s anti-angiogĂ©niques, effectuĂ©e par nos collaborateurs, a Ă©galement permis d’identifier des candidats intĂ©ressants pour le traitement potentiel de la dĂ©gĂ©nĂ©rescence maculaire liĂ©e Ă  l’ñge. Une nouvelle approche pour la synthĂšse combinatoire d’azapeptides, faisant appel Ă  l’alkylation et la dĂ©protection chimiosĂ©lective d’une sous-unitĂ© semicarbazone ancrĂ©e sur support solide, a ensuite Ă©tĂ© dĂ©veloppĂ©e. La portĂ©e de cette mĂ©thodologie a Ă©tĂ© augmentĂ©e par la dĂ©couverte de conditions permettant l’arylation rĂ©giosĂ©lective de cette sous-unitĂ© semicarbazone, donnant accĂšs Ă  treize nouveaux dĂ©rivĂ©s aza-GHRP-6 possĂ©dant des rĂ©sidus aza-arylglycines aux positions D-Trp2 et Trp4. L’élaboration de conditions propices Ă  l’alkylation et la dĂ©protection chimiosĂ©lective de la semicarbazone a donnĂ© accĂšs Ă  une variĂ©tĂ© de chaĂźnes latĂ©rales sur l’acide aminĂ© « aza » prĂ©alablement inaccessibles. Nous avons, entre autres, dĂ©montrĂ© qu’une chaĂźne latĂ©rale propargyl pouvait ĂȘtre incorporĂ©e sur l’acide aminĂ© « aza ». Tenant compte de la rĂ©activitĂ© des alcynes, nous avons ensuite Ă©laborĂ© des conditions rĂ©actionnelles permettant la formation in situ d’azotures aromatiques, suivie d’une rĂ©action de cycloaddition 1,3-dipolaire sur support solide, dans le but d’obtenir des mimes de tryptophane. Sept analogues du GHRP-6 ont Ă©tĂ© synthĂ©tisĂ©s et testĂ©s pour affinitĂ© au rĂ©cepteur CD36 par nos collaborateurs. De plus, nous avons effectuĂ© une rĂ©action de couplage en solution entre un dipeptide possĂ©dant un rĂ©sidu aza-propargylglycine, du paraformaldehyde et une variĂ©tĂ© d’amines secondaires (couplage A3) afin d’accĂ©der Ă  des mimes rigides d’aza-lysine. Ces sous-unitĂ©s ont ensuite Ă©tĂ© incorporĂ©es sur support solide afin de gĂ©nĂ©rer sept nouveaux azapeptides avec des dĂ©rivĂ©s aza-lysine Ă  la position Trp4 du GHRP-6. Enfin, une rĂ©action de cyclisation 5-exo-dig a Ă©tĂ© dĂ©veloppĂ©e pour la synthĂšse de N-amino imidazolin-2-ones en tant que nouveaux mimes peptidiques. Leur fonctionnalisation par une sĂ©rie de groupements benzyliques Ă  la position 4 de l’hĂ©tĂ©rocycle a Ă©tĂ© rendue possible grĂące Ă  un couplage Sonogashira prĂ©cĂ©dant la rĂ©action de cyclisation. Les propriĂ©tĂ©s conformationnelles de cette nouvelle famille de composĂ©s ont Ă©tĂ© Ă©tudiĂ©es par cristallographie aux rayons X et spectroscopie RMN d’un tĂ©trapeptide modĂšle. L’activitĂ© biologique de deux mimes peptidiques, possĂ©dant un rĂ©sidu N-amino-4-mĂ©thyl- et 4-benzyl-imidazolin-2-one Ă  la position Trp4 du GHRP-6, a aussi Ă©tĂ© examinĂ©e. L’ensemble de ces travaux devrait contribuer Ă  l’avancement des connaissances au niveau des facteurs structurels et conformationnels requis pour le dĂ©veloppement d’azapeptides en tant que ligands du rĂ©cepteur CD36. De plus, les rĂ©sultats obtenus devraient encourager davantage l’utilisation d’azapeptides comme peptidomimĂ©tiques grĂące Ă  leur nouvelle facilitĂ© de synthĂšse et la diversitĂ© grandissante au niveau de la chaĂźne latĂ©rale des acides aminĂ©s « aza ».Azapeptides are peptide mimics in which the CH alpha in one or more amino acids has been replaced with a nitirogen atom. Such a modification tends to induce beta turn conformations in peptides, because of the consequences of lone–pair lone–pair repulsion between the two adjacent nitrogens and the planar geometry of the urea in the semicarbazide moiety. Furthermore, the semicarbazide increases protease resistance and is chemically more stable than its amide counterpart. Despite the potential advantages of using azapeptides mimics, their synthesis has been hampered by the solution-phase construction of substituted hydrazines prior to their incorporation into peptide sequences. Growth Hormone Releasing Peptide 6 sequence (GHRP-6, His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2) is a synthetic hexapeptide that binds to two distinct receptor: the Growth Hormone Secretatgogue Receptor 1a (GHS-R1a) and the Cluster of Differentiation 36 (CD36) receptor. The body of my Ph.D thesis has been generally targeted towards two objectives: (a) the development of azapeptide analogs of GHRP-6 with enhanced receptor selectivity and (b) the elaboration of a new synthetic approach for combinatorial submonomer azapeptide synthesis. In response to the first objective, 49 aza-GHRP-6 derivatives were synthesized and evaluated for receptor binding and biological activity. From this library, certain candidates were identified which exhibited decreased affinity for the GHS-R1a receptor with maintained affinity for the CD36 receptor. Furthermore, in studying their anti-angiogenic properties, our collaborators have identified aza-GHRP-6 analogs, which caused a marked decrease in microvascular sprouting in choroid explants, as well as another displaying potential to increase angiogenesis. A new approach for the combinatorial synthesis of azapeptides was developed to better conduct SAR studies using azapeptides. This method features the chemoselective alkylation and deprotection of a resin-bound semicarbazone building block. The scope of the methodology was further expanded by the development of reaction conditions for the chemoselective N-arylation of this semicarbazone residue, yielding 13 aza-GHRP-6 derivatives with aza-arylglycines residues at the D-Trp2 and Trp4 positions. The elaboration of a methodology based on the chemoselective alkylation and deprotection of a semicarbazone has allowed for greater aza-amino acid side chain diversity, enabling for example, the efficient incorporation of aza-propargylglycine residues into peptide sequences. Considering the reactivity of alkynes, we developed reaction conditions for in situ formation of aromatic azides, followed by a 1,3-dipolar cycloaddition reaction on solid support to yield aza-1-aryl,2,3-triazole-3-alanine residues as tryptophan mimics. Seven aza-GHRP-6 analogs were synthesized and subsequently tested for binding to the CD36 receptor by our collaborators. Moreover, the coupling reaction between an aza-propargylglycine-containing dipeptide building block, paraformaldehyde and a variety of secondary amines (A3 coupling) was accomplished in solution to provide access to rigid aza-lysine mimics. These aza-dipeptides were subsequently incorporated at the Trp4 position of seven new aza-GHRP-6 analogues using a solid-phase protocol, and the resulting azaLys mimics were tested for binding towards the CD36 receptor. Finally, conditions for a 5-exo-dig cyclization of an aza-propargylglycine residue were developed to give N-amino imidazolin-2-ones as turn-inducing peptide mimics. Their modification at the 4 position was achieved using a Sonogashira coupling protocol prior to the cyclization step. The conformational properties of these new heterocyclic motifs were assessed by X-ray crystallography and NMR spectroscopy on a tetrapeptide model system. The incorporation of N-amino-4-methyl- and 4-benzyl-imidazolin-2-ones at the Trp4 position of GHRP-6 was further accomplished and the biological evaluation of the peptidomimetics was examined. Taken together, these results should lead to a better understanding of the structural and conformational factors responsible for binding and biological activity of azapeptide ligands of the CD36 receptor. Furthermore, the submonomer approach for azapeptide synthesis developed should promote the use of azapeptides as peptide mimics, given its accessibility and the increased aza-amino acid side-chain diversity available

    Élaboration d’un rĂ©pertoire de ressources pour soutenir la planification de l’enseignement lexical au primaire : une recherche-dĂ©veloppement

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    L’objectif gĂ©nĂ©ral de cette recherche est d’élaborer un rĂ©pertoire de ressources composĂ© de capsules informatives sur la didactique du lexique et de nombreuses propositions d’activitĂ©s lexicales afin de soutenir les enseignantes du primaire Ă  planifier leur enseignement lexical. Cette idĂ©e est nĂ©e de nos propres besoins de praticienne. Ces besoins faisaient Ă©cho aux travaux s’intĂ©ressant aux pratiques d’enseignement lexical qui ont relevĂ© que malgrĂ© le rĂŽle important jouĂ© par le vocabulaire dans la rĂ©ussite scolaire, un temps limitĂ© Ă©tait accordĂ© Ă  son enseignement, les interventions Ă©taient plus spontanĂ©es que planifiĂ©es et les dispositifs choisis Ă©taient peu variĂ©s. Bien que le champ de recherche de la didactique du lexique soit en plein essor, les enseignantes du primaire semblent peu outillĂ©es pour planifier des interventions lexicales de qualitĂ©. Nous nous sommes donc intĂ©ressĂ©e Ă  l’étape prĂ©alable aux interventions en classe : la planification. Pour concevoir le rĂ©pertoire, 19 professionnelles de l’éducation (enseignantes titulaires, enseignantes ressources, conseillĂšres pĂ©dagogiques) ont Ă©tĂ© rencontrĂ©es en entretiens de groupe semi-dirigĂ©s afin de rĂ©pondre au premier objectif de recherche : mieux connaitre leurs pratiques et leurs besoins en matiĂšre de planification. Ces entretiens ont Ă©galement permis de relever les caractĂ©ristiques essentielles d’un outil de planification et de rĂ©colter les premiers commentaires au regard d’un prototype de rĂ©pertoire de ressources pour soutenir la planification de l’enseignement lexical au primaire. Le deuxiĂšme objectif de recherche Ă©tait de dĂ©crire les diffĂ©rentes mises Ă  l’essai de notre rĂ©pertoire. Une version amĂ©liorĂ©e du rĂ©pertoire a Ă©tĂ© soumise Ă  une mise Ă  l’essai fonctionnelle auprĂšs de huit expertes en didactique du lexique ou ayant une forte expĂ©rience en recherche-dĂ©veloppement. Au moyen d’un questionnaire, elles ont donnĂ© des rĂ©troactions au regard de l’utilitĂ©, l’utilisabilitĂ© et la valeur d’estime du prototype dans une visĂ©e d’amĂ©lioration. Enfin, des mises Ă  l’essai empiriques auprĂšs de 16 professionnelles de l’éducation ont permis d’apporter de nouvelles modifications au prototype. Plus de 13 versions ont Ă©tĂ© dĂ©veloppĂ©es entre le prototype initial et le produit final que l’on retrouve au lien suivant : https ://view.genial.ly/64f11263810d1b001cc8da20. Les rĂ©troactions des participantes ont portĂ© sur l’utilitĂ©, l’utilisabilitĂ© et la valeur d’estime du rĂ©pertoire.The general objective of this research is to develop a resource directory consisting of informative capsules on lexical didactics and numerous proposals for lexical activities in order to support primary school teachers in planning their lexical interventions. This idea originated from our own practitioner needs. These needs resonated with studies focusing on lexical teaching practices, which highlighted that despite the significant role played by vocabulary in academic success, limited time was devoted to its teaching. Interventions were more spontaneous than planned, and the chosen methods were not very diverse. Although the field of lexical didactics research is growing rapidly, primary school teachers seem to lack the tools to effectively plan quality lexical interventions. Thus, we focused on the preliminary stage of classroom interventions: planning. To design the directory, we conducted semi-structured interviews with 19 education professionals (regular teachers, resource teachers, educational advisors) to better understand their planning needs (specific objective 1). These interviews also helped identify essential characteristics of a planning tool and gather initial feedback on a first prototype of the directory. The participants' responses enabled us to improve the prototype and submit an enhanced version for functional testing to eight experts in lexical didactics or those with strong experience in research and development. Through a questionnaire, they provided feedback on the usefulness, usability, and perceived value of the prototype for the purpose of improvement. Finally, empirical tests with 16 education professionals led to further modifications of the prototype. Over 13 versions were developed

    Nouvelle méthodologie de synthÚse de dérivés carbamates : réarrangement de Curtius catalysé par le cuivre

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    Mémoire numérisé par la Direction des bibliothÚques de l'Université de Montréal

    Violence du réel et fragmentation chez Hubert Aquin et Marguerite Duras

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    La prĂ©sente thĂšse porte sur la fragmentation comme Ă©criture du sujet aux prises avec la violence du rĂ©el dans les Ɠuvres d'Hubert Aquin et de Marguerite Duras. La rencontre des corpus de ces Ă©crivains marquants du XXe siĂšcle - malgrĂ© le fait qu'Aquin soit moins connu en dehors du QuĂ©bec - peut paraĂźtre Ă  la fois Ă©tonnante et insolite. Les poĂ©tiques de ces deux Ɠuvres semblent s'opposer lĂ  oĂč la prose aquinienne s'Ă©crit dans un dĂ©bordement de la parole alors que celle de Duras procĂšde plutĂŽt d'un dĂ©pouillement de la langue. Lire conjointement ces deux Ɠuvres permet de prendre en considĂ©ration diffĂ©rents effets d'une fragmentation dont la source, la cause, est prĂ©cisĂ©ment ce que la thĂšse vise Ă  dĂ©terminer. Afin de rendre compte de cette fragmentation dans un corps d'Ă©criture, c'est le rapport du sujet au rĂ©el et Ă  sa violence d'effraction qu'il convient d'analyser. On verra, de lĂ , Ă  quel point les poĂ©tiques de ces deux Ă©crivains empruntent des voies Ă©tonnamment communes. La premiĂšre partie de la thĂšse s'interroge sur le statut du sujet en question, et cherche Ă  construire les rapports entre ce que la psychanalyse (Freud et Lacan) a rĂ©vĂ©lĂ© de sa division par l'Autre, dans ce qu'il infĂšre sur le plan pulsionnel, et le sujet tel qu'il est mis en acte dans l'Ă©criture. Cette rĂ©flexion se divise en deux chapitres. Le premier porte d'abord sur la reprĂ©sentation du « je » tentĂ©e par les textes pararomanesques qui rĂ©flĂ©chissent sur l'acte mĂȘme d'Ă©crire. Il s'agit ensuite de mettre en lumiĂšre la mosaĂŻque kalĂ©idoscopique de certains moi imaginaires - personnages-narrateurs -, qui construisent le sujet fictif. Le deuxiĂšme chapitre travaille Ă  montrer, Ă  partir de Neige noire (Aquin) et Les yeux bleus cheveux noirs (Duras), deux textes qui convoquent le scĂ©nique dans le romanesque, l'obsession du voir et la prĂ©sence d'une pulsion scopique dĂ©terminante. On parvient dĂšs lors Ă  rendre compte d'un sujet divisĂ© par un dĂ©sir et une jouissance dont le corps poĂ©tique est la manifestation singuliĂšre. La deuxiĂšme partie se consacre au rapport Ă  l'Autre entendu selon ses multiples acceptions, c'est-Ă -dire l'autre imaginaire, l'Autre symbolique, mais aussi et surtout l'Autre rĂ©el. La notion d'Autre telle qu'elle nous vient de Lacan permet d'Ă©clairer avec concrĂ©tude comment se joue la fragmentation d'un sujet aux prises avec l'impossible. Car le rĂ©el tel que l'entend cette thĂšse n'est pas conçu comme un synonyme de rĂ©alitĂ©, mais bien comme ce qui existe au-delĂ  du symbolisable, « lieu » structurant et dĂ©structurant qui fait retour dans le corps textuel des deux auteurs, Aquin et Duras. L'impossible frappe l'Ă©criture, produit des effets d'Ă©clatement, surmultipliant les fractures, et rouvre des trous dans la reprĂ©sentation comme dans la langue; trous que chacune de ces Ɠuvres Ă©prouve et rejoue de maniĂšre diffĂ©rente. Ce rapport Ă  l'Autre rĂ©el est lisible Ă  partir de certaines figures importantes et centrales pour Aquin et pour Duras : le maternel/fĂ©minin, l'Histoire et Dieu. Le troisiĂšme chapitre travaille donc Ă  dĂ©gager la figure du fĂ©minin/maternel, alors que le quatriĂšme et dernier chapitre de la thĂšse analyse conjointement Dieu et l'Histoire, montrant ainsi que si le rĂ©el est, pour ces deux Ɠuvres, le registre central qui permet d'inscrire la force d'une mĂȘme dĂ©liaison, Aquin et Duras entretiennent avec ce rĂ©el des rapports bien diffĂ©rents. La thĂšse rĂ©vĂšle que la fragmentation est l'effraction du rĂ©el dans l'Ă©criture. Certains sujets en font l'expĂ©rience violente au cƓur mĂȘme de ce qui fait Ă©crire. Le sujet dont il est question, celui de l'Ă©nonciation et de la poĂ©tique, est d'abord et avant tout une construction de l'Ă©criture, que ce soit celle des rĂ©cits ou de certains textes pararomanesques qui appartiennent Ă  des genres diffĂ©rents. Cette dimension du sujet convoque donc le registre de la jouissance. C'est sur le plan de la jouissance que les Ɠuvres d'Aquin et de Duras nous engagent Ă  les lire, une jouissance problĂ©matique qui questionne les fondements mĂȘmes d'une culture traversĂ©e par la violence de la haine. Ainsi, par leur Ă©criture, Aquin et Duras mettent Ă  l'avant-scĂšne une vĂ©ritĂ© universelle et la nĂ©cessitĂ© de dire la puissance mortifĂšre qui opĂšre. C'est parce que les textes s'en font la transmission qu'ils relĂšvent d'une Ă©thique singuliĂšre. Par un parcours qui emprunte des voies multiples, mais essentielles, la thĂšse veut Ă©clairer l'Ă©thique d'une Ă©criture qui est finalement transgressive. Sans pouvoir rĂ©soudre de maniĂšre morale et conceptuelle le problĂšme de la violence et de la jouissance que les Ɠuvres dĂ©gagent, c'est au contraire l'ambivalence sur laquelle elles se fondent qui se doit d'ĂȘtre Ă  la fin reconvoquĂ©e. La fragmentation qui devient corps dans et par l'Ă©criture est le lieu d'une luciditĂ© qui fait la malĂ©diction des grands Ă©crivains. En cela, Hubert Aquin et Marguerite Duras dialoguent avec plusieurs auteurs et penseurs incontournables de la modernitĂ© littĂ©raire.\ud ______________________________________________________________________________ \ud MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : fragmentation, psychanalyse, rĂ©el, violence, sujet de l'Ă©nonciation, modernitĂ©, Ă©criture, pulsion scopique, Autre, maternel, fĂ©minin, Histoire, Dieu, Ă©thique, malĂ©dictio

    Ensemble

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    Short-term post-implantation dynamics of in vitro engineered human microvascularized adipose tissues

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    Engineered adipose tissues are developed for their use as substitutes for tissue replacement in reconstructive surgery. To ensure a timely perfusion of the grafted substitutes, different strategies can be used such as the incorporation of an endothelial component. In this study, we engineered human adipose tissue substitutes comprising of functional adipocytes as well as a natural extracellular matrix using the self-assembly approach, without the use of exogenous scaffolding elements. Human microvascular endothelial cells (hMVECs) were incorporated during tissue production in vitro and we hypothesized that their presence would favor the early connection with the host vascular network translating into functional enhancement after implantation into nude mice in comparison to the substitutes that were not enriched in hMVECs. In vitro, no significant differences were observed between the substitutes in terms of histological aspects. After implantation, both groups presented numerous adipocytes and an abundant matrix in addition to the presence of host capillaries within the grafts. The substitutes thickness and volume were not significantly different between groups over the short-term time course of 14 days. For the microvascularized adipose tissues, human CD31 staining revealed a human 3 capillary network connecting with the host microvasculature as early as 3 days after grafting. The detection of murine red blood cells within human CD31+ structures confirmed the functionality of the human capillary network. By analyzing the extent of the global vascularization achieved, a tendency towards increased total capillary network surface and volume was revealed for prevascularized tissues over 14 days. Therefore, applying this strategy on thicker reconstructed adipose tissues with rate-limiting oxygen diffusion might procure added benefits and prove useful to provide voluminous substitutes for patients suffering from adipose tissue loss or defects

    Reconstruction of a human cornea by the self-assembly approach of tissue engineering using the three native cell types

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    Purpose: The purpose of this study was to produce and characterize human tissue-engineered corneas reconstructed using all three corneal cell types (epithelial, stromal, and endothelial cells) by the self-assembly approach. Methods: Fibroblasts cultured in medium containing serum and ascorbic acid secreted their own extracellular matrix and formed sheets that were superposed to reconstruct a stromal tissue. Endothelial and epithelial cells were seeded on each side of the reconstructed stroma. After culturing at the air-liquid interface, the engineered corneas were fixed for histology and transmission electron microscopy (TEM). Immunofluorescence labeling of epithelial keratins, basement membrane components, Na+/K+-ATPase α1, and collagen type I was also performed. Results: Epithelial and endothelial cells adhered to the reconstructed stroma. After 10 days at the air-liquid interface, the corneal epithelial cells stratified (4 to 5 cell layers) and differentiated into well defined basal and wing cells that also expressed Na+/K+-ATPase α1 protein, keratin 3/12, and basic keratins. Basal epithelial cells from the reconstructed epithelium formed many hemidesmosomes and secreted a well defined basement membrane rich in laminin V and collagen VII. Endothelial cells formed a monolayer of tightly-packed cells and also expressed the function related protein Na+/K +-ATPase α1. Conclusions: This study demonstrates the feasibility of producing a complete tissue-engineered human cornea, similar to native corneas, using untransformed fibroblasts, epithelial and endothelial cells, without the need for exogenous biomaterial
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