1 research outputs found
Efectes dels inhibidors de la ciclooxigenasa en c猫l路lules hep脿tiques i el seu paper en la inflamaci贸 i fibrosi hep脿tica experimental
[cat] INTRODUCCI脫:La inflamaci贸 茅s una reacci贸 defensiva de l'organisme contra tot tipus de lesi贸. Si la inflamaci贸 aguda persisteix s'arriba a un estat d'inflamaci贸 cr貌nica generant-se una neoformaci贸 de teixit connectiu que pot arribar a derivar a teixit fibr贸s. Els eicosanoids constitueixen els mediadors d'inflamaci贸 m茅s importants ja que modulen la iniciaci贸, progressi贸 i resoluci贸 de la resposta inflamat貌ria. L'acid araquidonic (AA) 茅s el precursor m茅s important dels eicosanoids. L'oxidaci贸 de l'AA es pot donar de manera enzim脿tica a trav茅s de l'acci贸 la ciclooxigenasa (COX) que catalitza la s铆ntesi de prostaglandines (PG). L'aspirina (ASA) inhibeix la producci贸 de PG al bloquejar l'activitat de la COX. Interessantment, l'ASA desencadena la bios铆ntesi de compostos antiinflamatoris end貌gens (anomenats 15-epi-lipoxines, 15-epi-LXs), que actuen com a senyals de reclutament de leuc貌cits i juguen un paper important en la resoluci贸 de la inflamaci贸. Aix铆 doncs, en el primer estudi vam examinar els efectes de l'ASA en les vies de la COX i la 5-lipooxigenasa i el seu impacte en els nivells del receptor activat per proliferadors peroxisomals (PPAR) i CINC-1 (citoquina pro-inflamatoria hom貌loga de la IL-8 humana) en c猫l路lules hep脿tiques de rata. La inflamaci贸 茅s un dels factors determinants de la patog猫nesi de la fibrosi hep脿tica ja que precedeix o coexisteix amb el desenvolupament d'alteracions de la matriu extracel路lular. La COX-2 茅s l'enzim clau en el proc茅s inflamatori i la seva inhibici贸 selectiva constitueix una diana farmacol貌gica interessant en el tractament de la inflamaci贸 i la fibrosi hep脿tica. En el moment actual no es coneix en precisi贸 la via de la COX en el fetge i les conseq眉猫ncies de la seva inhibici贸 a nivell de reducci贸 de la inflamaci贸 i fibrosi hep脿tica. Ja que les c猫l路lules de Kupffer (KC) s贸n el tipus cel路lular majorit脿riament responsable de l'increment de la COX-2 i de la s铆ntesi de PGs en el fetge i perqu猫 la poblaci贸 d'aquestes c猫l路lules incrementa durant la progressi贸 de la inflamaci贸 hep脿tica, el segon estudi es va basar en l'efecte d'un inhibidor selectiu de COX-2 sobre aquest tipus cel路lular.OBJECTIUS: 1. Avaluar els efectes de l'ASA sobre la s铆ntesi d'eicosanoids i de productes proinflamatoris en c猫l路lules hep脿tiques en cultiu. 2. Estudiar els efectes d'un inhibidor selectiu de la COX-2, l'SC-236, i el seu possible paper en la resoluci贸 de la fibrosi hep脿tica.RESULTATS I CONCLUSIONS:En el primer estudi observ脿rem que l'ASA produ茂a en KC un redireccionament del metabolisme dels eicosanoids, de la producci贸 de PGE2 cap a la formaci贸 de leucotri猫 B4 i 15-epi-LXA4. Al mateix temps l'ASA i LXA4 i 15-epi-LXA4, a mes d'inhibir l'activitat de la 5-LO, reduiren els nivells de PPAR i CINC-1 en hepat貌cilts. En conjunt, i degut a que els productes derivats de l'AA, els nivells de PPAR, i la secreci贸 de CINC-1 estan involucrats en la duraci贸 de la resposta inflamat貌ria, aquests resultats proporcionen mecanismes moleculars addicionals a les propietats farmacol貌giques de l'ASA.Els resultats del segon estudi ens indicaren que l'expressi贸 de COX-2 es trobava augmentada en fetges de rates tractades amb CCl4. L'administraci贸 d'SC-236 disminu茂a els nivells incrementats de 15d-PGJ2, el grau de fibrosi hep脿tica, el contingut d'hidroxiprolina, l'activitat de les metaloproteinases 2 i 9, i l'expressi贸 de l'alfa-SMA en els fetges de les rates tractades amb CCl4. Addicionalment, l'SC-236 inhibia el creixement i induia apoptosi en c猫l路lules hep脿tiques estrellades (HSCs) i KC, augmentava l'expressi贸 del PPAR-gamma en HSCs i actuava com a agonista d'aquest receptor nuclear. Aix铆 doncs, tots aquests resultats ens indiquen que l'inhibidor selectiu de COX-2, SC-236, mitjan莽ant mecanismes que involucren l'apoptosi de c猫l路lules no parenquimals i l'activaci贸 del PPAR-gamma, pot tenir un potencial terap猫utic en la prevenci贸 de la fibrosi hep脿tica.[eng] The mechanism of action of aspirin (ASA) is related to cyclooxygenase (COX) inhibition, but additional actions cannot be excluded for their antiinflammatory and antithrombotic properties. We examined the effects of ASA on COX and 5-lipoxygenase (5-LO) pathways and its impact on peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPAR) and cytokine-induced neutrophil chemoattractant-1 (CINC-1) levels in rat liver cells. In Kupffer cells (KC), the liver resident macrophages, ASA switched eicosanoid biosynthesis from prostaglandin (PG) E2 to leukotriene B4 and 15-epi-lipoxin A4 (15-epi-LXA4) formation. In hepatocytes, ASA significantly inhibited PPAR-alpha protein expression and CINC-1 secretion. Interestingly, the endogenous antiinflammatory eicosanoids LXA4 and 15-epi-LXA4, in addition to inhibiting macrophage 5-LO activity, reduced PPAR levels and CINC-1 secretion in hepatocytes. Taken together and because arachidonic acid-derived products, PPAR expression and CINC-1 levels are involved in the extent and duration of an inflammatory response, these findings provide additional molecular mechanisms for the pharmacological properties of ASA.The importance of inflammation in initiating the sequence of events that lead to liver fibrosis is increasingly recognized. For this reason, we tested the effects of SC-236, a selective COX-2 inhibitor, in rats with carbon tetrachloride (CCl4)-induced liver fibrosis. Livers from CCl4-treated rats showed increased COX-2 expression and 15d-PGJ2 formation. In these animals, SC-236 reduced liver fibrosis as revealed by histological analysis and by a reduction in hepatic hydroxyproline levels, metalloproteinase-2 activity, and alpha-smooth muscle actin expression. Interestingly, SC-236 normalized 15d-PGJ2 levels and restored PPAR-alpha expression in the liver of CCl4-treated rats. In isolated hepatic stellate cells (HSC)--the major player in liver fibrogenesis--and KC--the cell type primarily responsible for increased hepatic COX-2-- SC-236 exhibited remarkable pro-apoptotic and growth inhibitory properties. Of interest, SC-236 decreased HSC viability to a similar extent than the PPAR-gamma ligand rosiglitazone. Moreover, SC-236 significantly induced PPAR-gamma expression in HSCs and acted as a potent PPAR-gamma agonist in a luciferase-reporter trans-activation assay. These data indicate that, by mechanisms involving non-parenchymal cell apoptosis and PPAR-gamma activation, the selective COX-2 inhibitor SC-236 might have therapeutic potential for prevention of liver fibrosis