The missing links of neutron star evolution in the eROSITA all-sky X-ray survey

The observational manifestation of a neutron star is strongly connected with the properties of its magnetic field. During the star's lifetime, the field strength and its changes dominate the thermo-rotational evolution and the source phenomenology across the electromagnetic spectrum. Signatures of magnetic field evolution are best traced among elusive groups of X-ray emitting isolated neutron stars (INSs), which are mostly quiet in the radio and $\gamma$-ray wavelengths. It is thus important to investigate and survey INSs in X-rays in the hope of discovering peculiar sources and the long-sought missing links that will help us to advance our understanding of neutron star evolution. The Extended R\"ontgen Survey with an Imaging Telescope Array (\eROS), the primary instrument on the forthcoming Spectrum-RG mission, will scan the X-ray sky with unprecedented sensitivity and resolution. The survey has thus the unique potential to unveil the X-ray faint end of the neutron star population and probe sources that cannot be assessed by standard pulsar surveys.Comment: 5 pages, 3 figures; to appear in the proceedings of "Physics of Neutron Stars 2017" eds. G.G. Pavlov, J.A. Pons, P.S. Shternin & D.G. Yakovle

O desenvolvimento de normas sociais na criança em idade pré-escolar: a perspetiva do educador

Dissertação de mestrado, Educação Pré-Escolar, Escola Superior de Educação e Comunicação, Universidade do Algarve, 2013No presente relatório procurámos evidenciar o papel do educador no desenvolvimento de normas sociais na criança em idade pré-escolar. Neste sentido, realizámos uma investigação que surgiu no âmbito da unidade curricular de Prática de Ensino Supervisionada (PES) e que se realizou num jardim de infância localizado na cidade de Faro. Para conseguirmos obter respostas às questões orientadoras a que nos propusemos, recorremos a uma investigação de natureza qualitativa. Assim, numa primeira fase, procedemos à análise documental do Projeto Educativo (PE) e do Projeto Curricular de Grupo (PCG), documentos orientadores da ação pedagógica. Posteriormente, realizámos uma entrevista semiestruturada à educadora cooperante participante no estudo com o intuito de conhecermos as suas conceções acerca do desenvolvimento de normas sociais, bem como as práticas e estratégias que promove nesse sentido. De seguida, procedemos à análise de momentos significativos videogravados em contexto de prática pedagógica e, por fim, a uma segunda entrevista semiestruturada que pretendeu clarificar e complementar dados necessários à investigação. Com este estudo, verificámos que a instituição e a educadora cooperante atribuem importância ao desenvolvimento de normas sociais na criança, sendo a educação pré-escolar considerada a primeira etapa da educação básica que potencia o desenvolvimento de competências sociais fundamentais para a coexistência em grupo e, consequentemente, em sociedade. Reforçamos, ainda, a ideia de que a discussão, a reflexão e a negociação de regras em grupo propiciam o desenvolvimento moral da criança, devendo o diálogo e o reforço positivo ser considerados estratégias fundamentais neste processo e em toda a prática pedagógica do educador

Identification of the proteomes of C-Kit and SCA-1 expressing populations of mice cardiac stem cells

Tese de mestrado, Bioquímica (Bioquímica Médica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2010Heart failure and other heart diseases are the most important death causes in developed countries. When the heart fails, it heals by scar formation, which compromises its normal ability to pump sufficient blood to meet the metabolic demands of the body. As the heart was usually viewed as a post mitotic organ, the renewal of its tissue by endogenous cells was considered non-existent. However, recent studies in which small dividing cells with stem cell surface marker were found in the heart and identified as Cardiac Stem Cells (CSCs), changed this view and gave a new perspective in therapeutic approaches to heart related diseases. As CSCs are a recent discovery, it is essential to study and characterize these cells to better understand the way in which they regenerate the heart damaged tissue, the molecular factors involved in their mobilization and differentiation and the molecular factors produced by these cells. In the present work, the membrane and nucleus of CSCs expressing the stem cell markers Sca-1 and c-Kit were isolated using differential centrifugation, and the proteome of this nuclear and membrane fractions, along with a whole cell sample for the c-kit+ CSCs was analyzed by Peptide Mass Fingerprint, using MALDI ionization coupled with FT-ICR detection, which allowed an increase in sensitivity and resolution. 122 proteins were identified, 48 for the c-kit+ CSCs and 74 for the Sca-1+ population. Uncharacterized proteins were found in both kinds of cells, along with proteins involved in the proliferation pathways common to both populations, as is the case of the Protein Chibby Homolog 1, or specific of c-kit+ population (Alpha Enolase) or to the Sca-1+ population (47 kDa heat shock protein). Other differences were found and discussed. This work is the first attempt at the unraveling of the proteome of Cardiac Stem Cells.Até ao seculo XX, o coração era considerado um órgão pós-mitótico, sem capacidade de auto-regeneração. Estudos recentes levaram a uma mudança de paradigma, provando a existência de células estaminais no coração, Células Estaminais Cardíacas (CEC), responsáveis por uma taxa diminuta de renovação do tecido cardíaco, e revelando novas possibilidades de terapia para doenças cardíacas. Infelizmente, pouco se sabe ainda acerca dos mecanismos subjacentes à diferenciação e migração destas células, pelo que há necessidade de estudos neste sentido, exigindo uma investigação mais detalhada. No presente projecto caracterizou-se o proteoma de duas populações de Células Estaminais Cardíacas, caracterizadas por apresentarem os marcados de superfície celular c-kit e Sca-1. Através da identificação do proteoma de membrana e núcleo destas células, pretende-se obter conhecimento acerca dos mecanismos subjacentes à diferenciação e proliferação de CSCs, utilizando o modelo animal de ratinhos Balb C, com o objectivo de melhor compreender o potencial destas células na regeneração cardíaca No Capítulo 1 descreve-se com detalhe as propriedades das Células Estaminais Cardíacas. Estas células são multipotentes, pelo que podem diferenciar-se nas três linhagens cardíacas: Cardiomiócitos, Músculo Liso vascular e Células Endoteliais, e têm um papel importante na regeneração cardíaca.Estas célulasdemonstram capacidade de auto-renovação, apresentam elevada plasticidade, e possuem ainda a capacidade de se dividirem assimetricamente, gerando uma nova Célula Estaminal Cardíaca é uma célula progenitora, que se irá diferenciar numa das três linhagens cardíacas já referidas. Cada vez mais existem resultados que indicam que as proteínas secretadas pelas Células Estaminais Cardíacas na vizinhança de uma lesão cardíaca têm um papel importante na regeneração. É fundamental conhecer as vias de sinalização autócrinas e parácrinas destas células e perceber de que modo influenciam a diferenciação e migração das Células Estaminais Cardíacas. Devido a serem uma descoberta recente, pouco se sabe acerca do metabolismo e da sua biologia destas células. O conhecimento do proteoma das Células Estaminais Cardíacas é fundamental para a aplicação destas células em terapia, uma vez que a maioria das funções celulares é exercida por proteínas. O estudo do seu proteoma recorrendo à espectrometria de massa é a estratégia proposta neste trabalho. A abordagem proteómica Bottom-Up à caracterização do proteoma das CSCs permite a identificação de várias proteínas numa mistura. A amostra proteica é digerida enzimaticamente, através da incubação com trispsina, os péptidos resultantes são analisados por espectrometria de massa, e as proteínas identificadas por PeptideMassFingerprint usando o motor de busca MASCOT (www.matrixscience.com). A partir do homogenato proteico, as proteínas a identificar são separadas de acordo com a massa por electroforese unidimensional (SDS-PAGE), separando as proteínas de acordo com a sua massa molecular. Após a digestão das amostras, a mistura de péptidos é analisada por MALDI-FTICR (Matrix-Assisted Laser DesorptionIonization, com deteccao por Fourier Transform- IonCyclotronRessonanceMassSpectrometry). A análise por FTICR-MS permite a mais elevada exactidão de massa e resolução, dois factores cruciais para o sucesso da identificaçãao de proteínas em misturas complexas. O conhecimento do proteoma das Células Estaminais Cardíacas permite o acesso a informação acerca dos mecanismos que levam à migração e diferenciação das Células Estaminais Cardíacas. No Capítulo 2, é descrito o método de isolamento de Células Estaminais Cardíacas e os resultados obtidos. Ratinhos Balb C foram executados e os seus miocárdios submetidos a destruição manual e várias sequências de centrifugações e filtrações, obtendo-se uma suspensão de células cardíacas. Desta suspensão, através do uso da técnica de FluorescentActivatedCellSorting, as duas populações de Células Estaminais Cardíacas forma isoladas, utilizando sondas fluorescentes, isto é, fluorocromos conjugados com anticorpos monoclonaisanti c-kit e anti Sca-1.Citometria de fluxo é uma técnica amplamente usada para medir características de partículas biológicas. As células a serem analisadas são preparadas em suspensão celular singlecell, e o fluxo-uni-celular é bombardeado com um laser. Quando o laser atinge as células previamente marcadas com uma sonda fluorescente, a fluorescência emitida permite seleccionar e isolar estas células marcadas. A emissão de fluorescência pelas sondas utilizadas permite o isolamento das células que se ligam as mesmas. 1134807 Células Estaminais Cardíacas foram isoladas para a população c-kit+, a partir de 82 ratinhos. 77656 células foram isoladas para a população Sca-1+, a partir de 30 ratinhos, tenho esta população sido mais fácil de isolar, como previsto pela literatura. A partir das amostras obtidas no Capitulo 2, foram isoladas fracções membranares e nucleares de cada população, através do método de centrifugação diferencial, no Capítulo 3. As populações foram isoladas com sucesso, facto verificado através de Western Blott, uma vez que para a fracção membranar o marcador de membrana (Sca-1 e c-kit) é observado em maior quantidade que o marcador nuclear (phospho-Histona H3), e na fracção nuclear apenas o marcador nuclear é observado. Devido a escassez de amostras de Células Estaminais Cardíacas c-kit+, uma amostra de wholecell, isto é, extracto proteico não fraccionado contendo proteínas provenientes de todos os componentes celulares, foi também efectuada, através de 3 diferentes métodos de extracção de proteínas, uma optimização que permitiu perceber a necessidade de elevadas quantidades de células c-kit+com vista à obtenção de quantidades de proteína suficientes para a visualização por SDS-PAGE, fundamental para a última parte do trabalho desenvolvido. O estudo do proteoma das Células Estaminais Cardíacas foi desenvolvido no Capítulo 4. A partir das fracções membranares e nucleares de Células Estaminais Cardíacas c-kit+ e Sca-1+procedeu-se a separação das proteínas por SDS-PAGE, e seguidamente a digestão com tripsina das bandas do gel, obtendo um conjunto de péptidos a analisar por MALDI-FTICR. Após a análise dos espectros através de ferramentas bioinformáticas, identificaram-se 134 proteínas, 58 para as Células Estaminais Cardíacas c-kit+, e 74 para as Células Estaminais Cardíacas Sca-1+. Das 35 proteínas identificadas para a fracção wholecell de Células Estaminais Cardíacas c-kit+, 8,3% estão envolvidas nos mecanismos de proliferação celular (Stress- Induced Phosphoprotein-1, Alpha-Enolase, ProteinChibbyHomolog 1), e 11,1 % são proteínas não caracterizadas e de função desconhecida. Na fracção membranar desta população de Células Estaminais Cardíacas identificaram-se as mesmas proteínas não caracterizadas e de função desconhecida, e ainda 10% de proteínas envolvidas nos mecanismos de proliferação. Na identificação de proteínas nucleares desta população de Células Estaminais Cardíacas foram identifcadas proteínas de função ubiquitária Para a população de Células Estaminais Cardíacas Sca-1+, das 45 proteínas identificadas, 2% estão relacionadas com a proliferação celular e 4% com os processos de diferenciação celular. Todas as proteínas identificadas para a fracção membranar de Células Estaminais Cardíacas c-kit+ foram encontradas nesta fracção, demonstrando a similaridade de ambas as populações de células estaminais. No entanto, mais estudos serão necessários para determinar quais as diferenças mais relevantes entre os proteoma das duas populações de Células Estaminais Cardíacas. As proteínas identificadas na fracção nuclear de Células Estaminais Cardíacas Sca-1+ estão maioritariamente relacionadas com a regulação da transcrição e são comuns a maioria das células mamíferas, destacando-se 10% de proteínas relacionadas com a regulação da proliferação celular. Proteínas não caracterizadas foram encontradas em todas as amostras. Estas proteínas, devido a serem aparentemente muito abundantes nestas populações devem ser alvo de estudos futuros, que possibilitarão determinar o seu envolvimento em processos relevantes para a biologia de células estaminais. Ainda, algumas diferenças entre as proteínas identificadas envolvidas nos processos de proliferação e diferenciação de células estaminais deverão ser futuramente exploradas através de estudos funcionais que permitirão estabelecer um fenótipo característico de cada população destas células

Beliefs and attitudes of educators about inclusion Why we should take it into account?

Oral Communication at the Multiplier event of the Project ASUMIE: ERASMUS+ - KA2 (2020-1-BE02-KA201-074751)in Varna, Bulgaria, about Beliefs and attitudes of educators about inclusion.Project ASUMIE: ERASMUS+ - KA2 (2020-1-BE02-KA201-074751

Nanosystems in nose-to-brain drug delivery: a review of non-clinical brain targeting studies

The treatment of neurodegenerative and psychiatric disorders remains a challenge in medical research. Several strategies have been developed over the years, either to overcome the blood-brain barrier or to achieve a safer or faster brain delivery, one of them being intranasal (IN) administration. The possibility of direct nose-to-brain transport offers enhanced targeting and reduced systemic side effects. Nevertheless, labile, low soluble, low permeant and/or less potent drugs might need a formulation other than the common solutions or suspensions. For that, the formulation of nanosystems is considered to be a promising approach, since it can protect drugs from chemical and/or metabolic degradation, enhance their solubility, or offer transport through biological membranes. However, the understanding of the factors promoting efficient brain targeting when using nanosystems through the nasal route is currently patchy and incomplete. The main purpose of the present review was to evaluate the association between brain delivery efficacy (in terms of brain targeting, brain bioavailability and time to reach the brain) and nanosystem type. For that, we performed a systematic bibliographic search and analysis. Furthermore, study designs, nanosystem properties, and reporting quality were also analyzed and discussed. It was found a high heterogeneity in how pre-clinical brain targeting studies have been conducted, analyzed and reported in scientific literature, which surely originates a significant degree of bias and data dispersion. This review attempts to provide some systematization recommendations, which may be useful for researchers entering the field, and assist in increasing the uniformity of future reports. The analysis of literature data confirmed that there is evidence of the advantage of the IN route (when compared to the intravenous route) and in using carrier nanosystems (when compared to IN solutions) for brain delivery of a large set of drugs. Among the most represented nanosystem classes, microemulsions had some of the lowest pharmacokinetic ratios values, while polymeric micelles had some of the best. Nevertheless, brain targeting efficacy comparisons between nanosystem groups had little statistical significance, and the superiority of the polymeric micelles group disappeared when nanosystems were compared to the respective IN drug solutions. In fact, some drugs reached the brain so efficiently, even as drug solutions, that further benefit from formulating them into nanosystems became less evident.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Well-being, Inclusion and Sustainability - Why we need it at school?

Apresentação de Comunicação no "Inclusion & Disability Congress - Antwerp" sobre "Well-being, Inclusion and Sustainability"Project ASUMIE: ERASMUS+ - KA2 (2020-1-BE02-KA201-074751

Searching for new thermally emitting isolated neutron stars in the 2XMMp catalogue - Discovery of a promising candidate

The group of 7 thermally emitting and radio-quiet isolated neutron stars (INSs) discovered by ROSAT constitutes a nearby population which locally appears to be as numerous as that of the classical radio pulsars. So far, attempts to enlarge this particular group of INSs finding more remote objects failed to confirm any candidate. We found in the 2XMMp catalogue a handful of sources with no catalogued counterparts and with X-ray spectra similar to those of the ROSAT discovered INSs, but seen at larger distances and thus undergoing higher interstellar absorptions. In order to rule out alternative identifications such as an AGN or a CV, we obtained deep ESO-VLT and SOAR optical imaging for the X-ray brightest candidates. We report here on the current status of our search and discuss the possible nature of our candidates. We focus particularly on the X-ray brightest source of our sample, 2XMM J104608.7-594306, observed serendipitously over more than four years by the XMM-Newton Observatory. A lower limit on the X-ray to optical flux ratio of ~ 300 together with a stable flux and soft X-ray spectrum make it the most promising thermally emitting INS candidate. Beyond the finding of new members, our study aims at constraining the space density of this population at large distances and at determining whether their apparently high local density is an anomaly or not.Comment: 3 pages, 2 figures, proceedings of the conference "40 Years of Pulsars", 12-17 August 2007, Montreal, Canad

XMM-Newton reveals a candidate period for the spin of the "Magnificent Seven" neutron star RX J1605.3+3249

The group of thermally emitting isolated neutron stars (INSs) known as the "Magnificent Seven" (M7) is unique among the various neutron star populations. Crustal heating by means of magnetic field decay and an evolutionary link with magnetars may explain why these objects rotate more slowly and have higher thermal luminosities and magnetic field intensities than standard pulsars of similar age. The third brightest INS, RX J1605.3+3249, is the only object amidst the seven still lacking a detected periodicity. We observed the source with the XMM-Newton Observatory for 60 ks aiming at unveiling the neutron star rotation rate and investigating its spectrum in detail. A periodic signal at P=3.387864(16) s, most likely the neutron star spin period, is detected at the 4-sigma confidence level. The coherent combination of the new data with a past XMM-Newton EPIC-pn observation of the source constrains the pulsar spin-down rate at the 2-sigma confidence level, implying a dipolar magnetic field of B~7.4e13 G. If confirmed, RX J1605.3+3249 would be the neutron star with the highest dipolar field amongst the M7. The spectrum of the source shows evidence of a cool blackbody component, as well as for the presence of two broad absorption features. Furthermore, high-resolution spectroscopy with the RGS cameras confirms the presence of a narrow absorption feature at energy 0.57 keV in the co-added spectrum of the source, also seen in other thermally emitting isolated neutron stars. Phase-resolved spectroscopy, as well as a dedicated observing campaign aimed at determining a timing solution, will give invaluable constraints on the neutron star geometry and will allow one to confirm the high value of spin down, which would place the source closer to a magnetar than any other M7 INS.Comment: 12 pages, 6 figures; accepted for publication in A&A (revised version after language editing; results unchanged