Determination of Retinol, -Tocopherol, Lycopene, and -Carotene in Human Plasma Using HPLC with UV-Vis Detection: Application to a Clinical Study

A method is described here for the simultaneous determination of retinol, -tocopherol, lycopene, and -carotene in human plasma. e effectiveness of various protein precipitants and extraction solvents was tested. Aer adequate sample preparation, the samples were injected directly into the HPLC system. e separation was realized on an analytical reversed-phase column with a UV-Vis detection. e analytical performance of this method was satisfactory. e intraassay and interassay coefficients of variation were below 10%. e recoveries were as follows: 97.0% (CV 2.4%) for retinol, 94.6% (CV 1.7%) for -tocopherol, 91.9% (CV 3.6%) for lycopene, and 93.9% (CV 4.2%) for -carotene. e levels of selected fat-soluble vitamins in plasma of patients with cardiovascular disease were measured and discussed

Denominational system in oncological patients

All people who are diagnosed as having a malignant tumour live in fear. They know about their disease, they fear the examinations and the side effects of medicine. Moreover, they often worry about their work and future, and, last but not least, they have a fear of dying. During my practise in hospital, I have realized that oncological disease influence the system of values of the oncologically ill very much

Reasons for choice of 9th elementary school classes between learning specialization and high school

Bakalářská práce s názvem důvody volby žáků devátých tříd základních škol mezi učebním oborem a střední školou má za cíl ukázat jak tuto problematiku vnímají rodiče, děti a učitelé základních škol. Práce má teoretickou a praktickou část. Teoretická část popisuje vzdělávací soustavu ČR a vývojové změny u adolescentů.Katedra psychologieObhájenoThe bachleor´s thesis named Reasons for choice of 9th elementary school classes between learning specilization and high school aims to show us how this problems perceive parents, childerns and teachers from elementary school

Determination of selected antioxidants (ascorbic acid, uric acid) in seminal plasma

Kyselina askorbová, ve vodě rozpustný antioxidant, reaguje se superoxidovým, peroxylovým i hydroxylovým radikálem za vzniku oxidované formy - kyseliny dehydroaskorbové. Chrání zárodečné buňky před poškozením vyvolaným oxidačním stresem. Její koncentrace v seminální plazmě je až desetkrát vyšší než v krvi. Kyselina močová je konečným produktem odbourávání purinových bazí. Hraje významnou roli při antioxidační ochraně organismu před škodlivým účinkem volných radikálů. Pro stanovení kyseliny askorbové a kyseliny močové byla použita metoda HPLC s UV detekcí. Byla použita kolona MAG 1, 250 x 4,6 mm, Labiospher PSI 100 C18, 5 ?m (Labio a.s.), opatřená PEEK filtrem (Supelco) a mobilní fáze 25 mmol/l NaH2PO4 - ethanol (97,5:2,5 v/v), pH 4,69. Kalibrační křivka byla lineární v celém rozsahu koncentrací použitých standardů kyseliny askorbové i kyseliny močové. Hladina kyseliny askorbové se pohybovala u jednotlivých souborů pacientů v těchto rozmezích: všichni pacienti (23,6 - 1120,2) ?mol/l (medián 362,0 ?mol/l), kuřáci (23,6 - 908,6) ?mol/l (medián 327,4 ?mol/l), nekuřáci (59,0 - 1120,2) ?mol/l (medián 400,0 ?mol/l). Hladina kyseliny močové se pohybovala u jednotlivých souborů pacientů v těchto rozmezích: všichni pacienti (109,7 - 651,6) ?mol/l (medián 303,9 ?mol/l), kuřáci (163,0 - 557,6) ?mol/l (medián 298,7 ?mol/l), nekuřáci (109,7 - 651,6) ?mol/l (medián 304,2 ?mol/l).Ascorbic acid, a water-soluble antioxidant, reacts with superoxide, peroxide and hydroxyl radicals to form dehydroascorbic acid. It protects male germ cells against oxidative damage. It is present at approximately ten-fold higher concentrations in seminal plasma compared with blood plasma. Uric acid is the final product of purine bases degradation in humans. It acts important role in an antioxidant protection against the negative effect of free radicals. For the determination of ascorbic acid and uric acid in a seminal plasma a reversed-phase HPLC with UV detection was used. A column MAG 1, 250 x 4.6 mm, Labiospher PSI 100 C18, 5 ?m (Labio a.s.), fitted with PEEK filter (Supelco) and a mobile phase 25 mmol/l NaH2PO4 - ethanol (97.5:2.5 v/v), pH 4.69 were used. Calibration curve was linear in the whole range of tested concentrations of ascorbic and uric acid standards. The levels of ascorbic acid in a seminal plasma of the individual patients were in the following ranges: all patients (23.6 - 1120.2) ?mol/l (median 362.0 ?mol/l), smokers (23.6 - 908.6) ?mol/l (median 327.4 ?mol/l), nonsmokers (59.0 - 1120.2) ?mol/l (median 400.0 ?mol/l). The levels of uric acid in a seminal plasma of the individual patients were in the following ranges: all patients (109.7 - 651.6) ?mol/l (median 303.9 ?mol/l), smokers (163.0 - 557.6) ?mol/l (median 298.7 ?mol/l), nonsmokers (109.7 - 651.6) ?mol/l (median 304.2 ?mol/l).Katedra biologických a biochemických věd1) Prezentace výsledků diplomové práce 2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3) Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práceDokončená práce s úspěšnou obhajobo

Analysis of the Kaizen approach in selected company focusing on human resources management

Tato bakalářská práce je věnována problematice Kaizen se zaměřením na řízení lidských zdrojů. V první části jsou teoreticky vymezeny základní pojmy z oblasti řízení lidských zdrojů a definovány termíny týkající se metody Kaizen. Analytická část je věnována průzkumu, jehož cílem bylo zjistit rozsah vlivu přístupu Kaizen na řízení lidských zdrojů ve vybraném podniku a následná formulace návrhů a doporučení.This bachelor thesis is devoted to the Kaizen focusing on human ressources management. The first part contains theoretical basic concepts of human resources management and defined terms relating to methods of Kaizen. The analytical part is devoted to research whose aim was to determine the extent of the impact Kaizen approach to human resources management in the selected company and the subsequent formulation of proposals and recommendations.Fakulta ekonomicko-správníPrůběh: Studentka představila v prezentaci svou bakalářskou práci s názvem Analýza přístupu Kaizen ve vybraném podniku se zaměřením na řízení lidských zdrojů. Cílem práce bylo provést analýza přístupu Kaizen konkrétního podnikatelského subjektu se zaměřením na řízení lidských zdrojů a doporučit opatření pro zlepšení současného stavu. Studentka dále odpověděla na otázky vedoucí práce:1. Ve své práci popisujete také důležitost interní komunikace a podnikové kultury. Stručně prosím zhodnoťte interní komunikaci a podnikovou kulturu ve Vámi vybraném podniku.2. Která doporučení navrhovaná v bakalářské práci budou v praxi aplikována

Application of hight-performance liquid chromatography in assisted reproduction

Cílem této práce bylo (a) zavést metody pro stanovení vitaminů a antioxidantů v seminální plazmě mužů a porovnat jejich hladiny mezi různými skupinami pacientů a (b) zavést metody pro stanovení aminokyselin a oxokyselin v kultivačním médiu pro porovnání metabolismu mezi jednotlivými lidskými embryi a nalézt vztah mezi metabolismem aminokyselin a morfokinetickými parametry embrya určenými time-lapse analýzou. Byly zavedeny dvě metody pro simultánní stanovení antioxidantů (vitaminů) v seminální plazmě mužů, jedna pro stanovení kyseliny askorbové a močové, druhá pro stanovení retinolu a ?-tokoferolu. V obou případech se jedná o metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie s UV detekcí. Vzorky spermatu byly získány od mužů léčících se pro neplodnost. Při stanovení kyseliny askorbové a močové, byly ejakuláty odstředěny a seminální plazma naředěna roztokem dithiothreitolu, po filtraci byly vzorky dávkovány na analytickou kolonu s vázanou reverzní fází. Při stanovení retinolu a ?-tokoferolu byla seminální plazma deproteinována ethanolem, vitaminy byly extrahovány n-hexanem a extrakty odpařeny do sucha v atmosféře dusíku. Odparek byl rozpuštěn v ethanolu a po filtraci byl vzorek dávkován na analytickou kolonu s vázanou reverzní fází. Analytické parametry těchto metod byly vyhovující. Nebyly nalezeny žádné statisticky významné rozdíly v koncentracích kyseliny askorbové i močové mezi kuřáky a nekuřáky [327,4 (263,0) ?mol/l a 298,7 (146,8) ?mol/l vs. 400,0 (367,8) ?mol/l a 304,2 (138,2) ?mol/l, p > 0,05]. Podobně hladiny retinolu a ? tokoferolu se statisticky významně nelišily mezi kuřáky a nekuřáky [12 (6) nmol/l a 1,9 (0,3) ?mol/l vs. 13 (8) nmol/l a 1,8 (0,5) ?mol/l, p > 0,05]. Byly zavedeny dvě metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí, jedna pro stanovení vybraných aminokyselin, druhá pro stanovení vybraných oxokyselin v kultivačním médiu. Dvacet čtyři hodin po intraplazmatické injekci spermií, byla jedna, náhodně vybraná zygota, přemístěna do kultivačního média. Po kultivaci byla kultivační média, ve kterých se inkubovala embrya, a média, ve kterých se embrya neinkubovala (slepý vzorek), uchována při 80 °C. Vzorky médií byly derivatizovány (a) ortho-ftalaldehydem (stanovení aminokyselin) a (b) ortho fenylendiaminem (stanovení oxokyselin) za vzniku vysoce fluoreskujících derivátů. Nebyly pozorovány žádné statisticky významné rozdíly v produkci/spotřebě a obratu aminokyselin mezi dělícími se a nedělícími se embryi. Hladiny aminokyselin, které jsou součástí média, nekorelovaly s morfokinetickými znaky embrya, s výjimkou stupně fragmentace embrya ve 3. dni po oplození, kde byla pozorována negativní korelace s hladinou kyseliny glutamové a pozitivní s hladinami glutaminu, glycinu a taurinu. V médiu některých dělících se i nedělících se embryí se objevily esenciální aminokyseliny, jejichž hladiny spolu navzájem korelovaly, ale nekorelovaly s hladinami aminokyselin, které jsou součástí kultivačního média. V médiích před inkubací i po inkubaci lidských embryí byly pozorovány pouze hladiny pyruvátu a 2-oxoglutarátu.The aim of this work was (a) to develop methods for the determination of vitamins and antioxidants in human seminal plasma and to compare their levels between different groups of patients and (b) to develop methods for the determination of amino acids and ?-keto acids in human culture medium and to compare amino acids metabolism between human embryos and to find some relationship between amino acids metabolism and the embryo morphokinetic parameters studied via time-lapse analysis. Two methods for the simultaneous determination of antioxidants (vitamins) in human seminal plasma were developed; one for the measurement of ascorbic acid and uric acid and the second for the determination of retinol and ?-tocopherol, both using an high-performance liquid chromatography with UV detection. Semen samples were obtained from consecutive male partners of couples presenting for a fertility evaluation. For the determination of ascorbic acid and uric acid, ejaculates were centrifuged and the seminal plasma diluted with dithiothreitol solution and after a filtration injected onto an analytical reverse-phase column. For the determination of retinol and ?-tocopherol, seminal plasma was deproteinized with ethanol, vitamins were extracted with n-hexane and extracts were evaporated to dryness, under nitrogen. The dried residue was resuspended in ethanol and after a filtration, injected onto an analytical reverse-phase column. Analytical performance of these methods was satisfactory. No statistically significant differences in both ascorbic acid and uric acid concentration between the smokers and non-smokers [327.4 (263.0) ?mol/l a 298.7 (146.8) ?mol/l vs. 400.0 (367.8) ?mol/l a 304.2 (138.2) ?mol/l, p > 0,05] were observed and similarly no statistically significant differences in both retinol and ?-tocopherol concentration between the smokers and nonsmokers [12 (6) nmol/l a 1.9 (0.3) ?mol/l vs. 13 (8) nmol/l a 1.8 (0.5) ?mol/l, p > 0,05] were found. Two methods, one for the determination of selected amino acids and the second for the determination of keto acids in culture medium using high-performance liquid chromatography with fluorescence detection, were developed. Twenty hours after the intra-cytoplasmic sperm injection, one randomly selected zygote was transferred to the culture medium. After incubation, culture medium, in which the embryo was incubated, and blank medium were immediately stored at 80 °C. Medium samples were derivatized (a) with ortho-phthalaldehyde (determination of amino acids) and (b) with ortho-phenylenediamine (determination of keto acids) to forms highly fluorescent amino (?-keto) acid derivatives. For the separation, a reverse-phase column was used and gradient elution was carried out. Analytical performance of these methods was satisfactory. No statistically significant differences between dividing and arresting embryos were observed in terms of amino acids production/consumption and turnover. Amino acids which were part of the culture medium did not exhibit any statistically significant correlation with morphokinetic parameters, with the exception of the grade fragmentation on day 3; there were negative correlation with glutamate, and positive with glutamine, glycine and taurine. In some dividing and in some arresting embryos appeared new (essential) amino acids which strongly correlated with each other, with methionine, but not with any other amino acid that is a regular part of the culture medium. Only pyruvate and ?-ketoglutarate were observed in culture medium before and after incubation of human embryos.Fakulta chemicko-technologick

Využití mechanizačních prostředků při údržbě městské zeleně

The first part of this Bachelor thesis deals with a definition of city vegetation, with a description of methods of operation (working procedures) and a use of a mechanical equipment in the sphere of maintenance for this type of vegetation. The paper analyzes current knowledge about this group of machinery and describes individual working procedures for which are the machinery designed. The second part attempts to find and gather current supply on the market of selected machinery for the city vegetation maintenance with the emphasis on modern technologies which are employed in this area. The final part concentrates on a specific area of Park Lužánky in Brno; prepares a plan of maintenance, suggests technologies and mechanization for year-round maintenance of this park

HPLC metoda pro stanovení vybraných aminokyselin v kultivačním médiu pro kultivaci lidských embryí

A method for the determination of selected amino acids in culture medium using HPLC with fluorescence detection is described. Twenty hours after intra-cytoplasmic sperm injection, one randomly selected zygote was transferred to the culture medium. After incubation (72 h after fertilization), the culture medium in which the embryo was incubated and blank medium was immediately stored at -80°C. Filtered medium samples were derivatized with ortho-phthalaldehyde (naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde), forming highly fluorescent amino acids derivatives. Reverse-phase columns (LichroCART, Purospher STAR RP-18e or Ascentis Express C18) were used for the separation. The derivatives were analyzed by gradient elution with a mobile phase containing ethanol and sodium dihydrogen phosphate. The analytical performance of this method is satisfactory for all amino acids; the intra-assay coefficients of variation were <10% and quantitative recoveries were between 95.5 and 104.4%. Changes in the levels of selected amino acids before and after human embryo cultivation were observed. After embryo incubation, the levels of all amino acids in the medium were increased, apart from aspartate and asparagine. After the cultivation of some embryos, amino acids which were not part of the medium were detected. Low amino acids turnover was observed in some embryos.Je zde popsána metoda pro stanovení vybraných aminokyselin v kultivačním médiu metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Dvacet čtyři hodin po intracytoplazmatické injekci spermií byla náhodně vybraná zygota přenesena do kultivačního média. Po inkubaci (72 h po oplození) bylo kultivační médium, ve kterém bylo inkubováno embryo, a médium, ve kterém embryo nebylo inkubováno (slepý vzorek) bezprostředně zamraženo při -80 °C. Aminokyseliny v přefiltrovaném vzorku média byly derivatizovány ortho-ftalaldehydem (naftalen-2,3-dikarboxaldehydem) za vzniku vysoce fluoreskujících derivátů aminokyselin. Pro separaci derivátů aminokyselin byly použity kolony s vázanou reverzní fází (LichroCART, Purospher STAR RP-18e nebo Ascentis Express C18). Deriváty byly z kolony eluovány mobilní fází obsahující ethanol a dihydrogenfosforečnan sodný v gradientovém módu. Analytické parametry metody byly vyhovující pro všechny stanovované aminokyseliny: variační koeficienty přesnosti v sérii byly <10 % a výtěžnosti se pohybovaly v rozmezí 95,5–104,4 %. Hladiny vybraných aminokyselin se před a po inkubaci lidského embrya lišily. Po inkubaci některých lidských embryí byly hladiny všech sledovaných aminokyselin zvýšeny, vyjma aspartátu a asparaginu. Po kultivaci některých embryích byly v médiu detekovány aminokyseliny, které nejsou součástí kultivačního média. U některých embryí byl pozorován nízký obrat aminokyselin

An assay of creatine in human serum using an HPLC with UV detection

An ion-exchange high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection for the determination of creatine in human serum has been developed. The human serum was deproteinized with perchloric acid. For the separation, a cation-exchange column LC-SCX, 250 mm × 4.6 mm, 5 μm, was used. The mixture of ethanol and 10 mmol l–1 ammonium acetate (15:85, v/v), pH 4.00 ± 0.05 was used as a mobile phase. The analytical performance of this method is satisfactory: the intra-assay and inter-assay coefficients of variation were below 10 %. Quantitative recoveries of spiked serum samples were between 97.1 % and 103.5 %. The calibration curve was linear in the whole range tested. The limit of quantification was 2 μmol l–1. The preliminary reference ranges of serum creatine in a group of blood donors are 17-89 μmol l–1 for women and 21-97 μmol l–1 for men