Characterization of genetic C9ORF72 mouse model of amyotrophic lateral sclerosis and effects of CDNF in SOD1 and C9ORF72 mouse models

Amyotrofinen lateraaliskleroosi (ALS) on harvinainen kuolemaan johtava hermorappeumatauti, jossa sekä ylemmät että alemmat liikehermot rappeutuvat. Taudin patologisiin tunnusmerkkeihin kuuluvat väärin laskostuneet proteiinit ja proteiinikasaumat keskushermostossa. Taudin molekulaarisiin mekanismeihin liitetään muun muassa neuroinflammaatio, glutamaatin aiheuttama eksitotoksisuus ja solulimakalvoston stressi (ER- stressi). ALS-taudin taustalta on löydetty lukuisia geenivirheitä, joista yleisimpiä ovat mutaatiot C9ORF72-, SOD1-, TDP43- ja FUS-geeneissä. Kullekin geenimutaatiolle on tärkeää kehittää luotettava ALS-eläinmalli sairauden patofysiologisten tutkimusten ja uusien hoitomuotojen kehittämisen mahdollistamiseksi. Kaikista yleisimmällä ja uusimmalla löydetyllä geenimutaatiolla, C9ORF72-toistojaksomutaatiolla, ei toistaiseksi ole vielä vakiintunutta eläinmallia. ALS-tautia parantavaa tai hidastavaa lääkehoitoa ei ole, joten tarve uusille taudinkulkuun vaikuttaville lääkehoidoille on merkittävä. Aivoperäinen dopamiinihermokasvutekijä (CDNF) suojaa ja korjaa dopamiinihermosoluja ja säätelee ER-stressiä Parkinsonin taudin kokeellisissa eläinmalleissa. CDNF:n on myös osoitettu parantavan motorista koordinaatiota sekä suojaavan selkäytimen liikehermosoluja solutuholta ALS:n geneettisissä SOD1-G93A ja TDP-43M3377 eläinmalleissa. Tämän erikoistyön tarkoituksena oli karakterisoida uudehkon C9ORF72-500-tautimallin hermorappeumaan ja neuroinflammaatioon liittyviä muutoksia sekä tutkia CDNF:n vaikutuksia ER-stressiin SOD1-hiirimallissa ja inflammaatioon C9ORF72-hiirimallissa. Ensimmäisessä osatutkimuksessa suoritettiin C9-siirtogeenisten ja villityypin hiirten aivoleikkeille kuusi erilaista immunohistologista värjäystä eri aikapisteissä (30, 70 ja 170). Tuloksia verrattiin kussakin aikapisteessä siirtogeenisen ja villityypin ryhmän välillä. Toisessa osatutkimuksessa hiirten selkäydin- ja aivoleikkeille tehtiin immunohistokemiallisia värjäyksiä, jonka jälkeen ER-stressimarkkerin (GRP78:n) ja GFAP:n intensiivisyyttä analysoitiin mikroskopian avulla. Osalle transgeenisistä ja villityypin hiiristä oli injektoitu CDNF:ää ja osalle vehikkeliliuosta. Ryhmiä verrattiin keskenään ER-stressin tai neuroinflammaation ilmentymisen sekä CDNF:n vaikutuksen osalta käyttäen mikroskopia- ja kuvantamisanalyysimenetelmiä. Ensimmäisessä osatutkimuksessa tuloksissa todettiin neuroinflammaatiota siirtogeenisissä C9ORF72 hiirissä 24 viikon aikapisteen kohdalla. C9-ALS:n patologisina tunnusmerkkeinä pidettyjä erilaisia proteiinikertymiä havaittiin ainoastaan siirtogeenisessä ryhmässä 24 viikon aikapisteessä. Hermosolukatoa ei tutkimuksessa havaittu. Saadut tulokset tukevat aiemmin julkaistuja tutkimustuloksia ja tutkitun eläinmallin luotettavuutta. Toisessa osatutkimuksessa todettiin ER-stressin olevan suurempaa SOD1-hiirissä verrattuna villityypin hiiriin. Aivokammioon annettu CDNF-hoito vähensi ER-stressin ja inflammaation lähes samalle tasolle villityypin hiirten ER-stressin ja inflammaation kanssa. CDNF ei vaikuttanut merkittävästi villityypin ER-stressitasoihin tai neuroinflammaation ilmentymiseen. Tutkimustulokset vahvistavat varsinkin ER-stressin patologista roolia ALS- taudissa ja osoittavat CDNF:n vähentävän ER-stressiä, kun se annostellaan taudin vaiheessa, jossa hermosoluvaurioita alkaa ilmetä, mutta ne eivät vielä johda hermosolutuhoon. CDNF vaikuttaa lupaavalta lääkekandidaatilta ALS-taudin hoitoon, minkä vuoksi sitä tulisi tutkia lisää.Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a rare fatal neurodegenerative disease in which both the upper and lower motor neurons degenerate. Pathological features of the disease include misfolded proteins and accumulations in the central nervous system. The molecular mechanisms of the disease include neuroinflammation, glutamate induced excitotoxicity, and endoplasmic reticulum stress (ER-stress). Numerous genetic defects have been identified in the background of ALS, the most common mutations are in the C9ORF72, SOD1, TDP43 and FUS genes. For each gene mutation, it is important to develop a reliable animal model of ALS for studying pathology and testing new therapies. The most common and most recently found gene mutation, the C9ORF72 repeat expansion mutation, does not yet have an established animal disesase model. The molecular mechanisms of the disease include neuroinflammation, glutamate induced excitotoxicity, and endoplasmic reticulum stress (ER- stress). There is no drug treatment to cure or slow ALS, so the need for new drug therapies that affect the course of the disease is significant. Cerebral dopamine neurotrophic factor (CDNF) protects and restores dopamine neurons and controls ER-stress in preclinical models of Parkinson’s disease. CDNF has also been shown to improve motor coordination as well as protect spinal cord neurons from cell destruction in ALS genetic SOD1- G93A mouse and TDP-43M337 animal models. The purpose of this master's thesis study was to characterize the changes related to neurodegeneration and neuroinflammation in the new C9ORF72-500 disease model and study ER stress of the SOD1-93A disease model and the effect of CDNF on ER stress in SOD1-model and on inflammation in C9-model. In the first sub-study, brain sections from C9ORF72 transgenic and wild-type mice at different time points were subjected to six different immunohistological stainings. The results were compared at each time point (30, 70 and 170) between the wild type and the transgenic group. In another sub-study, spinal cord sections from CDNF snd vehicle treated SOD1- G93A mice were subjected to immunofluorescence staining, after which the intensity of their ER stress marker, GRP78, was analyzed using a confocal microscope. GFAP stained brain sections from CDNF and vehicle treated C9ORF72 mice were analyzed using microscope and imaging analyses. The results of the first sub-study showed neuroinflammation at 24 weeks timepoint in the transgenic group compared to wild-type mice. Pathological features of C9-ALS, various protein accumulations, were observed only in the transgenic group, mainly at 24 weeks. No neuronal loss was observed in this study. The obtained results support the previously published research results and support the reliability of the studied disease model. In the second sub-study ER stress levels were higher in SOD1-mice compared to wild-type mice. Single intracerebroventrical CDNF injection reduced ER stress in SOD1-G93A transgenic mice almost to the same level as ER stress in wild-type mice. CDNF treatment also showed a tendency for reducing inflammation in hippocampus and motor cortex of C9ORF72 mice. The results confirm the pathological role of ER stress in ALS and show that CDNF reduces ER stress when administered as early in the disease as possible, when neuronal damage begins to occur but does not yet lead to neuronal destruction. CDNF appears to be a promising drug candidate for the treatment of ALS and should therefore be further investigated

Tunnetarhan satoa – tunnetarha-kerho 4–5-vuotiaille lapsille päiväkoti poutapilvessä

Opinnäytetyössä käytettiin toiminnallisia menetelmiä, mutta siinä oli myös kehittämistyön piirteitä. Opinnäytetyön tarkoituksena oli suunnitella, toteuttaa ja arvioida tutustumiskerta sekä neljä ohjattua pedagogista tunnekasvatus-tuokiota 4–5-vuotiaille lapsille. Opinnäytetyön tavoitteena oli tehdä lapsille tunteet ja tunnetaidot tutuiksi. Tavoittee-na oli myös, että lapset nauttisivat ja viihtyisivät toiminnan parissa. Toimeksiantajana toimi yksityinen päiväkoti Poutapilvi, joka kuuluu Pikku Leijona Oy:n alaisuuteen Opinnäytetyöprosessin aikana suunniteltiin, toteutettiin ja arvioitiin neljä pedagogista tunnekasvatustuokiota, joiden tavoitteena oli tukea lasten tunteiden tunnistamista ja nimeämistä, ilmaisua ja säätelyä. Tunnekasvatustuokioiden kokonaisuus nimettiin Tunnetarha-kerhoksi. Pedagogisia tunnekasvatustuokioita varten laadittiin neljä pedagogista suunnitelmaa, joiden tarkoituksena oli havainnollistaa toimeksiantajalle Tunnetarha-kerhon sisältöä. Pedagogiset suunnitelmat mukailivat varhaiskasvatussuunnitelman (2016) perusteita. Toiminnassa hyödynnettiin asiakirjan mu-kaisia monipuolisia työtapoja, joita olivat leikki, draama sekä taiteellinen ilmaisu ja kokeminen. Jokaisella tunnekas-vatustuokiolla oli oma teema, joita olivat tunteiden tunnistaminen ja nimeäminen, tunteiden säätely ja ilmaisu sekä myötätunto itseä ja muita kohtaan. Opinnäytetyön teoreettisena viitekehyksenä toimi tunneälyteoria. Opinnäytetyöprosessin aikana kerättiin palautetta lapsilta ja toimeksiantajalta. Palautteen perusteella opinnäytetyön tavoitteet täyttyivät, sillä toimeksiantaja oli tyytyväinen Tunnetarha-kerhon toteutukseen. Toimeksiantaja koki Tun-netarha-kerhon toiminnan tarpeelliseksi lasten tunnetaitojen tukemiselle. Lasten palautteen perusteella lapset naut-tivat Tunnetarha-kerhon toiminnasta ja saivat kokemuksen tunnetaitoihin tutustumisesta. Pedagogisten suunnitel-mien pohjalta rakennettua Tunnetarha-kerhon -mallia toimeksiantaja voi hyödyntää jatkossa toiminnassaan. Opin-näytetyön jatkokehitysideana voisi toimia tutkimus tunnekasvatustuokioiden tuloksellisuudesta.The aim of the thesis was to plan, execute and evaluate four pedagogic emotional learning lessons for children aged 4–5 years. The aim of the thesis was to make emotions and emotional skills familiar to children. The aim of the thesis was that children would enjoy their time in arranged activities. The thesis was a practice-based study which contained development work. The thesis was commissioned by the kindergarten Poutapilvi. The thesis process contained planning, executing and evaluating, and the main aim was to support children’s ability to recognize and name emotions and express and regulate emotions. The ensemble of the four emotional learning lessons was named Tunnetarha-kerho. The emotional education lessons were given on the basis of the pedagogic plans in accordance with the national early childhood education plan (2016). Play, drama and artistic expression and experience were methods used in the activities. Each emotional learning lesson had a theme of its own. The themes included recognizing and naming emotions, expressing and regulating emotions and compas-sion for yourself and others. The theoretical framework of the thesis was based on the theory of emotional intelli-gence. The kindergarten Poutapilvi can utilize the created content of the Tunnetarha-kerho in their upcoming activities. Feedback from the children and the kindergarten Poutapilvi was collected throughout the thesis process. Based on the feedback, the objectives of the thesis were achieved, because the kindergarten Poutapilvi was content with the implementation of the activity. The staff of the kindergarten Poutapilvi felt that the activities formed a useful method for supporting emotional skills. Based on the children’s feedback, the children were enjoying their time in Tunnetar-ha-kerho and got an opportunity to get to know emotional skills. A topic for further study could be emotional educa-tion lessons and their effect on kindergarten children

Opettajien ja oppilaiden välisten konfliktitilanteiden rakentuminen ja ratkaiseminen oppitunneilla

Tässä tutkimuksessa selvitettiin opettajien ja oppilaiden välisten konfliktitilanteiden rakentumista oppitunneilla sekä opettajien tapoja ratkaista niitä. Tutkimuksen aineisto kerättiin oppituntien videotallenteina ala -ja yläkoulun yleisopetus- ja erityisopetusryhmistä (N = 83 oppituntia). Aineisto analysoitiin keskustelunanalyyttisesti. Tulokset osoittivat ristiriitatilanteiden syntyvän arkisista yhteentörmäyksistä, kuten annettujen tehtävien välttelystä tai työrauhapulmien kasaantumisesta. Lisäksi oppilaiden turhautumisen ilmaisut ja eriävän mielipiteen tai näkökulman esittäminen edelsivät usein konfliktitilanteita. Opettajien tavat selvittää konflikteja vaihtelivat sivuuttavista ja välttelevistä keinoista neuvotteleviin ja perusteleviin toimintatapoihin. Sivuuttavia toimintatapoja olivat oppilaan eriävän mielipiteen huomiotta jättäminen, oppilaan huomion palauttaminen takaisin oppitunnin aiheeseen, sovittuihin toimintatapoihin vetoaminen sekä oppilaan hiljentäminen tai käskeminen. Perustelevia menetelmiä olivat puolestaan perusteleminen, neuvotteleminen ja suostutteleminen sekä konfliktitilanteen siirtäminen keskustelemalla oppilaan kanssa jälkikäteen. Tulosten perusteella opettajat pysähtyivät vain harvoin selvittämään ristiriitojen syitä tai tarjoamaan oppilaille mahdollisuuksia avoimeen keskusteluun erilaisista näkökulmista

Between agency and uncertainty – Young women and men constructing citizenship through stories of sexual harassment

In this article, we examine young people's narratives on sexual harassment on how it is endured, objected, observed, and negotiated in diverse everyday life environments. The article is based on an analysis of thematic interviews with 36 young people aged 15–19 living in the metropolitan area of Helsinki, Finland. Altogether 23 young women and 13 young men participated in the interviews which were conducted at educational institutions as individual, paired or group interviews. We analyze young people's narratives on sexual harassment as stories of everyday citizenship and, and more precisely, as acts of citizenship. We have also applied the concept of respectability to study how young women and men construct respectable sexual citizenship. We found out that whereas female respectability suggests that young women should be able to protect their sexual integrity effectively, male respectability expects young men to effectively balance between different positions of masculinity. While young people widely condemn sexual harassment and recognize it as discrimination, the gendered ways of constructing respectability, however, maintain the moral double standard by which young women remain the gatekeepers of sexual consent and young men test its boundaries.publishedVersionPeer reviewe

Survival and Motor Phenotypes in FVB C9-500 ALS/FTD BAC Transgenic Mice Reproduced by Multiple Labs.

Mordes et al. (2020) did not detect the survival or motor phenotypes in C9orf72 BAC transgenic mice originally described by Liu et al. (2016). We discuss methodological differences between the Mordes and Liu studies, several additional studies in which survival and motor phenotypes were found, and possible environmental and genetic effects. First, Nguyen et al. (2020) showed robust ALS/FTD phenotypes in C9-BAC versus non-transgenic (NT) mice and that α-GA1 treatment improved survival, behavior, and neurodegeneration. The groups of Gelbard and Saxena also show decreased survival of C9-BAC versus NT mice and neuropathological and behavioral deficits similar to those shown by Liu et al. (2016). Although FVB/N mice can have seizures, increases in seizure severity and death of C9 and NT animals, which may mask C9 disease phenotypes, have been observed in recent C9-500 FVB/NJ-bred cohorts. In summary, we provide an update on phenotypes seen in FVB C9-BAC mice and additional details to successfully use this model. This Matters Arising Response paper addresses the Mordes et al. (2020) Matters Arising paper, published concurrently in Neuron

Evidence of a causal effect of genetic tendency to gain muscle mass on uterine leiomyomata

Uterine leiomyomata (UL) are the most common tumours of the female genital tract and the primary cause of surgical removal of the uterus. Genetic factors contribute to UL susceptibility. To add understanding to the heritable genetic risk factors, we conduct a genome-wide association study (GWAS) of UL in up to 426,558 European women from FinnGen and a previous UL meta-GWAS. In addition to the 50 known UL loci, we identify 22 loci that have not been associated with UL in prior studies. UL-associated loci harbour genes enriched for development, growth, and cellular senescence. Of particular interest are the smooth muscle cell differentiation and proliferation-regulating genes functioning on the myocardin-cyclin dependent kinase inhibitor 1A pathway. Our results further suggest that genetic predisposition to increased fat-free mass may be causally related to higher UL risk, underscoring the involvement of altered muscle tissue biology in UL pathophysiology. Overall, our findings add to the understanding of the genetic pathways underlying UL, which may aid in developing novel therapeutics.Peer reviewe