Az Interferon-gamma által indukált jelátvitel mechanizmusa humán újszülöttek mononukleáris fagocitasejtjeiben = Interferon-gamma induced signaling in mononuclear phagocytes from human neonates

Humán újszülöttek és felnőttek mononukleáris (MN) fagocitasejtjeiben a foszforilált STAT-1 kimutatásához olyan monoclonalis antitesteket használtunk, amelyek specifikusan kötődnek a foszforilált STAT-1 molekulákhoz, de nem kötődnek a natív STAT-1 fehérjéhez. Az eredmények megerősítik, hogy humán újszülöttekben a Th1 immunválasz csökkent működése korhoz kötött, immunbiológiai sajátosság. Ennek oka valószínűleg az interauterin mikrokörnyezet Th2 dominanciája. Új vizsgáló módszereket állítottunk be a SOCS (Suppressors of Cytokine Signaling) fehérjék γ-interferonnal aktivált sejtekben való kimutatására. Folyamatban lévő, real-time PCR technikával végzett vizsgálatainkkal választ keresünk arra, hogy újszülöttek, különböző korú gyermekek és felnőttek izolált MN fagocitasejtjeiben milyen a SOCS fehérjékre specifikus mRNA kifejeződése. Az alapvizsgálatok befejezését követően az mRNA expressiót különböző citokinekkel (elsősorban IFN-γ-val és GM-CSF-el) stimulált sejtekben vizsgáljuk. A veleszületett immundefektusok új típusát írtuk le. A hyper-IgM syndroma 4-es típusában a szomatikus hypermutáció normális, az izotypus váltás kóros. Új SH2D1A gén mutációt (p.G16D) írtunk le X-kromoszómához kötött lymphoproliferatív betegségben. Kimutattuk, hogy a mutáns G16D protein elveszíti kötődési képessét. | We have found a marked deficiency in phosphorylation of the IFN-R-associated STAT-1 in human newborn macrophages compared to adult cells. These findings suggest that there are important differences in the way newborns and adults use STAT-1 to modify immune response to pathogens. Based on our research we propose that a decreased STAT-1 phosphorylation and activation may represent developmental immaturity and may contribute to the unique susceptibility of neonates to infections by intracellular pathogens. Research on the role of SOCS (suppressors of cytokine signaling) proteins in the neonatal signaling deficiency is in progress. We have described a new molecular form of hyper IgM syndrome (HIGM) which we designate as HIGM-4 and characterized normal somatic hypermutation (SHM) and deficient class switch recombination. We have described a new disease-causing, SH2D1A mutation in X-linked lymphoproliferative syndrome. We have reported that the p.G16D mutation resulted in a defect in protein folding as manifested by moderately reduced half-life compared to that of wild type SH2D1A. Furthermore, the G16D protein was defective in binding to its physiological ligands (SLAM and 2B4). We unveiled that assembly of the respiratory burst oxidase of mononuclear phagocytes may be a possible target of the pathologic actions of glucocerebrosid accumulating in macrophages of patients with Gaucher disease. macrophages of patients with Gaucher disease

Investigation of the Penicillium chrysogenum derived antifungal protein (PAF) in animal models

A Penicillium chrysogenum által termelt antifungális fehérje (PAF) gátolja a szaporodását fontos pathogén fonalas gombáknak, köztük az Aspergillus család tagjainak és néhány dermatophytonnak. Továbbá a PAF-ról bebizonyították, hogy nincs toxikus hatása emlős sejtekre in vitro. Annak bizonyítására, hogy a PAF biztonságosan használható lehet a humán terápiában, in vivo kísérleteket végeztünk. Felnőtt egereknek adagoltunk PAF-ot intranasalisan különböző koncentrációkban, maximálisan 2700 μg/kg-ig két hétig naponta. Ez a koncentráció már erősen toxikus in vitro az összes használt érzékeny gombafajra. Tömegspektrometriával bizonyítottuk, hogy mérhető mennyiségű PAF halmozódott fel a tüdőkben a kezelés után. A PAF-fal kezelt egerekből származó tüdőszövet kivonatok szignifikáns antifungális aktivitást mutattak. Még a legmagasabb koncentrációnál sem pusztult el egyetlen egy állat sem a kezelés következtében, illetve nem figyeltünk meg mellékhatásokat. Szövettani vizsgálattal nem találtunk patológiás eltéréseket sem a májban, a vesékben, vagy a tüdőkben. Kisállat pozitron emissziós tomográfiával kimutattuk, hogy sem a fiziológiás sóoldat, sem a PAF nem váltott ki gyulladást, míg a lipopoliszacharid igen. A szer bőrre kifejtett hatását megvizsgáltuk, ahol az egerek füleinek vastagsága nem változott PAF kezelés után, míg a pozitív kontroll PMA adása után igen. Mivel nem találtunk toxikus hatást a PAF adagolása során, invazív pulmonalis aspergillosis (IPA) elleni hatékonyságát teszteltük IPA-ban szenvedő egereken. Felnőtt egereket immunszupprimáltunk, majd megfertőztünk Aspergillus fumigatus-szal. A stabil fertőzés létrehozása után, az állatokat PAF-fal kezeltük intranasalisan naponta kétszer 2,7 mg/kg koncentrációban, ami erősen toxikus in vitro A. fumigatusra. Az állatok mortalitása enyhén lassult, de végül minden állat elpusztult. A szövettani vizsgálatok masszív gombás fertőzést mutattak ki a PAF-fal kezelt és a kezeletlen állatok tüdejében is. Mivel az intranasalisan adagolt PAF képtelen volt legyőzni az IPA-t, módosított és kombinált kezeléseket alkalmaztunk. Az IPA-ban szenvedő állatok intraperitonealis kezelése PAF-fal az állatok túlélését csak 1 nappal hosszabbította meg. Hasonló eredményeket kaptunk amfotericin B-vel (AMB), amely szinergisztikusan hat in vitro a PAF-al. A kombinált kezelés AMB-vel és PAF-fal hatékonyabbnak bizonyult, mint akár az AMB vagy PAF kezelés önmagában. Mivel emlősökben eddig nem derült ki a PAF-nak semmilyen toxikus hatása, továbbá nem jelentettek eddig természetes vagy szerzett PAF rezisztenciával rendelkező A. fumigatus törzseket, érdemes lenne további vizsgálatokat végezni a PAF bevezetéséhez potenciális antifungális szerként a humán terápiába.The antifungal protein of Penicillium chrysogenum (PAF) inhibits the growth of important pathogenic filamentous fungi, including members of the Aspergillus family and some dermatophytes. PAF was proven to have no toxic effects on mammalian cells in vitro. To prove that PAF could be safely used in therapy, experiments were carried out to investigate its in vivo effects. Adult mice were inoculated with PAF intranasally in different concentrations, up to 2700 μg/kg daily, for 2 weeks. Mass spectrometry confirmed that a measurable amount of PAF was accumulated in the lungs after the treatment. Lung tissue extracts from PAF treated mice exerted significant antifungal activity. Even at the highest concentration - a concentration highly toxic in vitro for all affected molds used - animals neither died due to the treatment nor were any side effects observed. Histological examinations did not find pathological reactions in the liver, in the kidney, and in the lungs. Small-animal positron emission tomography revealed that neither the application of physiological saline nor that of PAF induced any inflammation while the positive control lipopolysaccharide did. The effect of the drug on the skin was examined in an irritative dermatitis model where the change in the thickness of the ears following PAF application was found to be the same as in control. Since no toxic effects of PAF were found in intranasal application, the next step was to test its efficacy against invasive pulmonary aspergillosis (IPA), experiments were carried out in mice suffering from IPA. Adult mice were immunosuppressed and then infected with Aspergillus fumigatus. After stable infection, the animals were inoculated with PAF intranasally at a concentration of 2,7 mg/kg twice per day. At this concentration -which is highly toxic in vitro to A. fumigatus- the mortality of the animals was slightly delayed but finally all animals died. Histological examinations revealed massive fungal infections in the lungs of both PAF-treated and untreated animal groups. Because intranasally administered PAF was unable to overcome IPA, modified and combined therapies were introduced. The intraperitoneal application of PAF in animals with IPA prolonged the survival of the animals only 1 day. Similar results were obtained with amfotericin B (AMB), with PAF and AMB being equally effective. Combined therapy with AMB and PAF -which are synergistic in vitro- was found to be more effective than either AMB or PAF treatment alone. As no toxic effects of PAF in mammals have been described thus far, and, moreover, there are so far no A. fumigatus strains with reported inherent or acquired PAF resistance, it is worth carrying out further studies to introduce PAF as a potential antifungal drug in human therapy

Identification of caspase 3 motifs and critical aspartate residues in human Phospholipase D1b and Phopsholipase D2a

Stimulation of mammalian cells frequently initiates phospholipase D-catalysed hydrolysis of phosphatidylcholine in the plasma membrane to yield phosphatidic acid (PA) a novel lipid messenger. PA plays a regulatory role in important cellular processes such as secretion, cellular shape change and movement. A number of studies have highlighted that PLD-based signalling also plays a pro-mitogenic and pro-survival role in cells and therefore anti-apoptotic. We show that human PLD1b and PLD2a contain functional caspase-3 cleavage sites and identify the critical aspartate residues within PLD1b that affect its activation by phorbol esters and attenuate phosphatidylcholine hydrolysis during apoptosis

Measuring the measurement error: A method to qualitatively validate survey data

This is the author accepted manuscript. The final version is available from Elsevier via the DOI in this record.Empirical social science relies heavily on self-reported data, but subjects may misreport behaviors, especially sensitive ones such as crime or drug abuse. If a treatment influences survey misreporting, it biases causal estimates. We develop a validation technique that uses intensive qualitative work to assess survey misreporting and pilot it in a field experiment where subjects were assigned to receive cash, therapy, both, or neither. According to survey responses, both treatments reduced crime and other sensitive behaviors. Local researchers spent several days with a random subsample of subjects after surveys, building trust and obtaining verbal confirmation of four sensitive behaviors and two expenditures. In this instance, validation showed survey underreporting of most sensitive behaviors was low and uncorrelated with treatment, while expenditures were under reported in the survey across all arms, but especially in the control group. We use these data to develop measurement error bounds on treatment effects estimated from surveys.This study was funded by the National Science Foundation (SES-1317506), the World Bank's Learning on Gender and Conflict in Africa (LOGiCA) trust fund, the World Bank's Italian Children and Youth (CHYAO) trust fund, the Department of International Development, UK (DFID, GA-C1-RA2-114) via the Institute for the Study of Labor (IZA), a Vanguard Charitable Trust, the American People through the United States Agency for International Development (USAID, AID-OAA-A-12-00066) DCHA/CMM office, and the Robert Wood Johnson Health and Society Scholars Program at Harvard University (Cohort 5). The contents of this study are the sole responsibility of authors and do not necessarily reflect the views of their employers or any of these funding agencies or governments

Impact of Energy Rating on House Prices and Lending Rates

The real estate market is a key component of the green transition, and thus it is worth examining the pricing and financing costs of modern residential buildings in Hungary. In our study, we investigate a) whether a significant price premium can be identified for green properties based on new housing projects in Budapest, and b) whether banks finance residential buildings with more advanced energy technologies at lower interest rates. Based on our regression estimation, the green price premium is clearly evident in the Budapest new housing market: on average, homes with an energy rating of BB or better are 5.1 per cent more expensive than homes with an energy rating of CC. Based on our estimate of housing loan interest rates, no significant difference can be identified in the interest rates on loans granted to finance properties with a certificate higher than CC compared to loans granted for properties with CC certificate, i.e. banks do not yet factor energy aspects into the pricing of loans

Az energetikai minősítés hatása a kínálati lakásárakra és hitelkamatokra

Az ingatlanpiac kardinális eleme a zöld átállásnak, ezért érdemes megvizsgálni, hogy milyen árazással és finanszírozási költséggel érhetők el a korszerű lakóingatlanok Magyarországon. Tanulmányunkban egyrészt azt vizsgáljuk, hogy kimutatható-e szignifikáns árprémium a zöld ingatlanokra a budapesti új építésű lakásprojektek alapján, másrészt hogy a bankok alacsonyabb kamatszint mellett finanszírozzák-e a korszerűbb energetikával felszerelt lakóingatlanokat. Regressziós becslésünk alapján a zöld árprémium egyértelműen kimutatható a fővárosi új lakások piacán: a BB vagy jobb energetikai besorolással rendelkező lakások átlagosan 5,1 százalékkal drágábbak, mint a CC energetikai besorolású lakások. A lakáshitelek kamatlábára vonatkozó becslésünk alapján a CC-nél magasabb tanúsítvány kategóriájú ingatlanok finanszírozására nyújtott hitelek kamatlábára vonatkozóan nem azonosítható szignifikáns eltérés a CC tanúsítvánnyal rendelkező ingatlanokra nyújtott hitelek kamatlábához képest, azaz a bankok jelenleg még nem érvényesítik az energetikai szempontokat a hitelek árazásában