Features of the interrelationships of some molecular parameters of cervical epithelium cells with biological characteristics of tumor cells in the process of cervical carcinogenesis

Background. Despite the known trigger and identified risk factors, the screening program developed, many aspects of the pathogenesis of cervical cancer are still being studied. In particular, recently in the literature there are data on the participation of short-chain fatty acids in the tumor process. The aim of the study was to perform a correlation analysis of the level of TNF-A., its soluble sTNF-RI receptor, the spectrum of SCFA and some biological parameters (apoptosis, necrosis, proliferation, cell cycle) in the exocervical cells during dys- and neoplastic transformation. Materials and methods: the laboratory data obtained by us earlier were used to perform the Spearman correlation analysis. The groups of research: IA - the focus of the pre-tumor lesion of exocervix; IB - paradysplastic cells; IIA - locus of cervical cancer; IIB - paraneoplastic cells. Results. The correlation relationships between the parameters studied were multidirectional, determined by the state of the cell (healthy, dysplastic, malignant) and varied within one study, depending on the location in relation to the pathological focus. Conclusions. The revealed interrelations are important for expanding the already available information on cervical carcinogenesis, for discovery of new diagnostic methods and treatment of cervical neoplasia. Summarizing, it is possible to judge the presence of pathogenetic relationships between the processes of cervical carcinogenesis (proliferation, apoptosis, necrosis, modulation of the phases of the cell cycle), the level of short-chain fatty acids and cytokine production at the local level

Acute kidney injury in patients with pneumonia with A/H1N1 influenza

Background. A critical condition of any genesis may be accompanied by the development of multiple organ failure, one of the manifestations of which is acute renal injury. Often, the process is subclinical in nature and the «classical» approaches to diagnose renal damage by creatinine concentration, urea level and assessment of glomerular filtration rate may not fully reflect the degree of impaired renal function, while acute kidney injury is a well-known predictor of high hospital mortality among critically ill patients.Aims. The purpose of this study was to assess functional state of the kidneysby determining the serum concentration of the markers of kidney injury  NGAL and Cystatin C in patients with pneumonia associated with influenza A/H1N1.Materials and methods. 85 patients with pneumonia associated with influenza A/H1N1 were examined, 30 patients with severe pneumonia, 55 with non-severe pneumonia. The control group was formed by 15 healthy donors. The serum concentration of NGAL and Cystatin C molecules was determined by flow cytometry on a Beckman Coulter analyzer (USA), using a Human Immune Checkpoint Panel 1 multiplex assay kit (Biolegend, USA). The glomerular filtration rate was calculated using the CKD-EPI formula.Results. It was found that in patients with severe pneumonia with the influenza A/H1N1, the concentration of NGAL increased 3.8 times compared with the control group, the concentration of Cystatin C increased 1.4 times, the glomerular filtration rate did not change.Conclusion. Timely diagnosis of subclinical kidney injury makes it possible to  objectify the severity of the condition, make adjustments to therapy, which can help to an increase in the survival rate of critically ill patients

ЗНАЧЕНИЕ ФАКТОРОВ РОСТА В ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ РАКА ТОЛСТОЙ КИШКИ

 Objective: to determine the level of growth factors in the blood serum of patients with left-sided colon cancer and to assess the feasibility of using these findings in the tumor detection.Material and Methods. The study group included 63 patients aged 20 to 75 years who underwent surgery for left-sided colon adenocarcinoma (descending, sigmoid, rectosigmoid) with stage i (t1–2n0m0), ii (t3–4an0m0), and iii (t1–2n1m0). Only 5 patients developed metastases in one regional lymph node. The remaining patients had no regional metastases. In all patients, before hospitalization, the tumor was confirmed by colonoscopy followed by histological examination. The group of comparison consisted of 25 patients with chronic hemorrhoids without exacerbation, who underwent colonoscopy. In patients of the study group, blood tests were drawn on the day of surgery before its starting. In patients of the comparison group, blood was taken after excluding colon cancer (after colonoscopy). Blood tests were carried out using a test system (Biolegend): multiplex set for determining growth factors (angiopoietin-2, (ang-2), egf, epo, FGF-basic, G-csf, GM-csf, HGF, M-csf, pdgf-aa, pdgf-BB, scf, tgf-α, vegf).Results. In cancer patients, the levels of egf, HGF, M-csf, pdgf-aa, and pdgf-BB were several times higher than in the control group (p <0.05). The level of pdgf-aa was 10 times higher in cancer patients than in controls. In addition to quantitative changes, statistically significant differences were observed between the vegf level and sex of the patients; angio protein-2, G-csf, epo, M-csf, pdgf-aa, pdgf-BB, vegf levels and the age of the patients; tgf-α, HGF levels and the histological grade of the tumor.Conclusion. It was found that changes in the level of biologically active substances that occur in colon cancer can serve as additional diagnostic markers for cancer detection.Цель исследования – определить уровень факторов роста в сыворотке крови больных раком левой половины толстой кишки и оценить возможность использования этих данных в диагностике опухолевого процесса.Материал и методы. В основную группу вошло 63 пациента в возрасте от 20 до 75 лет, оперированных по поводу рака (аденокарциномы) левой половины ободочной кишки (нисходящий, сигмовидный, ректосигмоидный отделы) i (t1–-2n0M0), ii (t3–4аn0M00 и iii (t1–2n1M0) стадии. У 5 пациентов был выявлен метастаз в одном регионарном лимфоузле. Остальные пациенты были без регионарного метастазирования. У всех пациентов до госпитализации опухоль была подтверждена посредством колоноскопии с последующим гистологическим исследованием. Группу клинического сравнения в количестве 25 человек составили пациенты с хроническим геморроем вне обострения, которым проводилась колоноскопия. Забор крови у пациентов основной группы осуществлялся в день операции до ее начала. У пациентов группы клинического сравнения кровь брали после исключения рака толстой кишки (после колоноскопии). исследование крови осуществлялось с помощью тест-системы (Biolegend): мультиплексный набор для определения факторов роста (angiopoietin-2, (ang-2), eGF, ePO, FGF-basic, G-CsF, GM-CsF, HGF, M-CsF, PdGF-aa, PdGF-BB, sCF, tGF-α, VeGF).Результаты. В среднем у онкологических пациентов уровень таких сравниваемых веществ, как eGF, HGF, M-CsF, PdGF-aa, PdGF-ВВ, был выше, чем в контрольной группе, в несколько раз, что является статистически  значимым (р<0,05). Особенно ярко выраженная разница (более чем в 10 раз) установлена по уровню PdGF-aa. кроме общих количественных изменений, установлена статистически значимая зависимость уровня исследуемых веществ: VeGF – с полом; angioprotein-2, G-CsF, ePO, M-CsF, PdGFaa, PdGF-ВВ, VeGF – с  возрастом пациента; tGF-α, HGF – со степенью дифференцировки опухоли.Заключение. Установлено, что изменения уровня биологически активных веществ, возникающие при раке толстой кишки, могут служить дополнительным диагностическим маркером при выявлении злокачественной опухоли

Активность системы негативной регуляции Т-клеточного ответа PD-1/PD-L1/PD-L2 у больных пневмониями на фоне гриппа A/H1N1

Systemic inflammation is an integral pathophysiological component of many critical illnesses. The systemic inflammatory response is based on a cascade of interactions leading to hypercytokinemia and, as a consequence, multiple organ failure, which is one of the main causes of mortality in intensive care units.Aim of the study. To evaluate the activity of the negative regulation system of T-cell response by determining the plasma levels of PD-1, PD-L1 and PD-L2 molecules in pneumonia patients with influenza A (H1N1).Materials and methods. 85 patients with pneumonia and underlying influenza A (H1N1) were examined. Among them there were 30 patients with severe pneumonia, and 55 patients with non-severe pneumonia. Plasma levels of PD-1, PD-L1, PD-L2 molecules was determined by flow cytofluorometry method.Results. In patients with severe pneumonia and underlying influenza A (H1N1), the plasma level of PD-1 receptor increased 4.6-fold, while the concentration of its ligands PD-L1 and PD-L2 increased 10.6 and 2.2-fold, respectively.Conclusion. Significant increase in levels of PD-1 and its ligands PD-L1 and PD-L2 in patients with pneumonia and underlying influenza A (H1N1) indicates the involvement of negative regulation system of T-cell response in the cascade of immunological reactions and is associated with the severe disease. Possible correction of immune reactions realized through PD-1/PD-L1/PD-L2 complex in critically ill patients is a promising research avenue.Системное воспаление является неотъемлемой патофизиологической составляющей многих критических состояний. В основе системного воспалительного ответа лежит каскад взаимодействий, приводящий к гиперцитокинемии, и, как следствие, к полиорганной недостаточности, которая является одной из основных причин летальности в отделениях интенсивной терапии.Цель работы. Оценить активность системы негативной регуляции Т-клеточного ответа, определив плазменную концентрацию молекул PD-1, PD-L1 и PD-L2 у больных пневмониями на фоне гриппа A/H1N1.Материалы и методы. Обследовали 85 больных пневмонией на фоне гриппа A/H1N1. Из них 30 пациентов с тяжелой пневмонией, 55 — с нетяжелой пневмонией. Методом проточной цитофлуометрии определяли плазменную концентрацию молекул PD-1, PD-L1, PD-L2.Результаты. Установили, что у больных тяжелой пневмонией на фоне гриппа A/H1N1 плазменная концентрация рецептора PD-1 повышалась в 4,6 раза, при этом концентрация его лигандов PD-L1 и PD-L2 увеличивалась в 10,6 и в 2,2 раза, соответственно.Заключение. Статистически значимое увеличение концентрации PD-1 и его лигандов PD-L1 и PD-L2 у больных пневмонией на фоне гриппа A/H1N1 свидетельствует о вовлечении в каскад иммунологических реакций системы негативной регуляции Т-клеточного ответа и ассоциировано с тяжестью состояния. Возможная коррекция иммунных реакций, реализуемых через комплекс PD-1/PD-L1/PD-L2 у пациентов в критическом состоянии — это перспективное научное направление

ВЛИЯНИЕ ПРОПИОНАТА НА СПЕКТР ВЫСШИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В КЛЕТКАХ ШЕЙКИ МАТКИ ПРИ ДИС- И НЕОПЛАСТИЧЕСКОЙ ТРАНСФОРМАЦИИ

Background. Metabolic reprogramming of tumor cells is one of the leading links in carcinogenesis. The objective to confirm the hypothesis of a propionate pathway for the synthesis of long-chain acids with an odd number of carbon atoms in cervical cancer.Materials and methods. As samples for the study were biopsies of the colli uteri, from which a suspension of tumor cells was obtained (20 – cervical cancer, 20 – cervical intraepithelial neoplasia III grade, 18 – endocervical scraping from healthy women). The spectrum of fatty acids (FA) was analyzed before, after 24 hours incubation without and with 50 μmol/l propionic acid by the gas chromatography method.Results. Metabolism of FA is multidirectional in different locus in cervical cancer. In the locus of cervical cancer, most likely, there is a propionic pathway for the synthesis of FA using palmitate. In cervical intraepithelial neoplasia III grade, the metabolism of FA is another. Palmitic acid was used for synthesis stearate, which was metabolized to oleic acid.Сonclusion. The specificity of biochemical changes within one organ and one pathology has been revealed, which reflects the stage-by-stage development of the oncological process.Введение. Метаболическое перепрограммирование опухолевых клеток является одним из ведущих звеньев канцерогенеза. Цель исследования – подтвердить гипотезу пропионатного пути синтеза высших жирных кислот (ВЖК) с нечетным числом атомов углерода при цервикальном раке.Материалы и методы. В качестве образцов для исследования послужили биоптаты шейки матки, из которых выделяли суспензию опухолевых клеток (20 – рак шейки матки, 20 – цервикальная интраэпителиальная неоплазия, 18 – эндоцервикальный соскоб от здоровых женщин). Спектр ВЖК анализировали до и после 24-часовой инкубации с 50 мкмоль/л пропионовой кислоты и без нее с помощью метода газовой хроматографии.Результаты. При злокачественной трансформации эпителия шейки матки в пределах одного органа метаболизм ВЖК разнонаправлен. В локусе цервикального рака, вероятнее всего, имеет место пропионатный путь синтеза ВЖК с использованием пальмитата. При тяжелой цервикальной дисплазии метаболизм ВЖК иной. Дефицит пальмитиновой кислоты можно объяснить синтезом стеариноата, который метаболизировался в олеиноат.Заключение. Выявлена особенность биохимических изменений в пределах одного органа и одной патологии, что отражает этапность развития онкологического процесса

Уровень некоторых гематологических воспалительных маркеров у больных раком шейки матки в зависимости от морфологических особенностей первичной опухоли

Background. Tumors influence on various vital processes in organism leading to cachexia, immunosuppression, anemia, changes in humoral regulation etc. Inflammation is one of the well-known etiological factors of carcinogenesis, including for cervical cancer, so we suggest that some blood serum inflammatory factors in patients with cervical cancer influence are associated with the level of tumor progression.The objective of our study was to analyze the level of some hematological markers of inflammation in the blood serum of patients with cervical cancer in dependence on the histological characteristics of the primary tumors.Materials and methods. In the study we analyzed the blood serum of patients with invasive cervical cancer I–IV stage (4 patients with verrucous cancer and 26 – with cervical cancer among them 10 – of G1 stage, 6 – of G2 stage, 10 – G3 stage) using flow cytometry. We studied the value of myoglobin, calprotectin, lipocalin, matrix metalloperoxidase 2, matrix metalloperoxidase 9, osteopontin, myeloperoxidase, serum amyloid A, protein 4, insulin-like growth factor-binding protein 4, cell-cell adhesion molecule 1, vascular cell adhesion molecule, cystatin С.Results. We revealed the changes of some serum markers of inflammation in patients with G3 and verrocous cervical cancer.Conclusion. The obtained dates demonstrate that further study of blood inflammatory markers as an additional differential and prognostic criteria in patients with cervical cancer should be considered as reasonable.Введение. Системное действие опухоли на организм подразумевает влияние на различные процессы жизнедеятельности органов и тканей, приводящие к кахексии, иммунодепрессии, анемии, изменению гуморальной регуляции и др. Поскольку воспаление является одним из хорошо известных этиологических факторов канцерогенеза, в том числе и для рака шейки матки (РШМ), мы предполагаем влияние опухолевой прогрессии на содержание маркеров воспаления в плазме крови пациенток с данным онкологическим заболеванием.Цель исследования – оценить уровень ряда гематологических маркеров воспалительного процесса у больных РШМ в сопоставлении с гистологическими особенностями первичной опухоли.Материалы и методы. Материал исследования – сыворотка крови пациенток с инвазивным РШМ I–IV стадии (4 пациентки с веррукозным раком, 26 – с РШМ, среди которых у 10 степень злокачественности G1, у 6 – G2, у 10 – G3). Метод исследования – проточная цитометрия. Определяемые показатели: миоглобин, кальпротектин, липокалин, матриксная металлопероксидаза-2, -9, остеопонтин, миелопероксидаза, сывороточный амилоид А, белок 4, связывающий инсулиноподобный фактор роста, молекула межклеточной адгезии 1, молекула адгезии сосудистого эндотелия 1, цистатин С.Результаты. Выявлены изменения профиля некоторых воспалительных маркеров в крови пациенток с РШМ низкой степени дифференцировки и веррукозным РШМ.Заключение. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности дальнейшего изучения ассоциации уровня содержания ряда гематологических маркеров воспалительного процесса и наличия РШМ низкой степени дифференцировки в целях их возможного использования в качестве вспомогательных дифференциальных и прогностических критериев

Взаимосвязь некоторых параметров мукозального иммунитета полости рта с уровнем витамина D у пациентов с множественным кариесом

Aim. To determine the saliva level of immunoregulatory proteins in patients with rampant caries and 25-hydroxyvitamin D (25(OH)D) deficiency and evaluate the association of their concentration with 25(OH)D plasma level.Materials and methods. The study was performed in two groups. The experimental group included 15 patients aged 20–22 years with rampant caries and the 25(OH)D plasma level of < 20 ng / ml. The control group encompassed 15 healthy age-matched volunteers with the 25(OH)D plasma level of 20–100 ng / ml. The concentrations of B7.2 (CD86), free active TGF-β1, CTLA-4, PD-1, Tim-3, LAG-3, IGFBP-4, and ICAM-1 were assessed using flow cytometry. The levels of LL-37 and secretory immunoglobulin A (sIgA) were measured using ELISA. The Spearman’s rank correlation coefficient was used to reveal a correlation between the indicated proteins and the 25(OH)D plasma level.Results. A decrease in B7.2 (CD86), PD-1, Tim-3, sIgA, and LL-37 and elevation of IGFBP-4 and ICAM-1 saliva levels were detected in patients with rampant caries and 25-hydroxyvitamin D deficiency. A positive Spearman’s rank correlation coefficient was revealed between plasma 25(OH)D and saliva levels of free active TGF-β1, CTLA4, B7.2 (CD86), LL-37, and sIgA. A negative correlation was revealed between 25(OH)Dand ICAM-1.Conclusion. 25(OH)D deficiency in patients with rampant caries is associated with decreased levels of B7.2 (CD86), PD-1, Tim-3, sIgA, and LL-37 and elevated levels of IGFBP-4 and ICAM-1 in the saliva. Цель – оценить содержание иммунорегуляторных молекул в слюне у лиц с множественным кариесом и дефицитом 25(OH)D3 и определить взаимосвязи их величин с концентрацией 25(OH)D3 в крови.Материалы и методы. Обследованы две группы лиц в возрасте 20–22 лет. В одну включены 15 человек с кариесом и уровнем 25(OH)D3 менее 20 нг/мл, в другую (контрольную) – 15 здоровых человек с содержанием 25(OH)D3 30–100 нг/мл. В ротовой жидкости определены концентрации растворимых форм молекул B7.2 (CD86), Free Active TGF-b1, CTLA-4, PD-1, Tim-3, LAG-3, IGFBP-4, ICAM-1 методом проточной цитофлуометрии, количество кателицидина LL-37, секреторного иммуноглобулина A (IgA) методом иммуноферментного анализа. Между определяемыми показателями рассчитан критерий корреляции Спирмена.Результаты. У лиц с кариесом и дефицитом витамина D выявлено снижение значений Free Active TGF-b1, B7.2 (CD86), PD-1, Tim-3, sIgA, кателицидина LL-37 и повышение уровня IGFBP-4 и ICAM-1 в слюне. Обнаружено наличие прямых корреляционных связей между количеством 25(OH)D3 в крови, с одной стороны, и значениями Free Active TGF-b1, CTLA-4, В7.2 (CD86), секреторного IgA, пептида LL-37 – с другой. Зафиксирована отрицательная взаимосвязь между величинами 25(OH)D3 и ICAM-1.Заключение. На фоне дефицита витамина D при множественном кариесе в ротовой жидкости регистрируются низкие концентрации Free Active TGF-b1, B7.2 (CD86), PD-1, Tim-3, секреторного IgA, кателицидина LL-37 по сравнению с контролем, но увеличены значения IGFBP-4 и ICAM-1.