Aislamiento, producción y evaluación de la patogenicidad de cepas de Hirsutella citriformis Speare para el control de Diaphorina citri Kuwayama, vector de la enfermedad Huanglongbing de los cítricos

La industria citrícola es una de las más importantes industrias con las que cuenta el país y en los últimos años se encuentra amenazada por una plaga que está ocasionando estragos en todas las áreas citrícolas en México, el Huanglongbing o greening la cual es transmitida por el psílido asiático de los cítricos, Diaphorina citri Kuwayama, insecto que ocasiona daño en las plantas al alimentarse de los brotes tiernos y que además es el vector de la bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus para la cual no hay cura y por lo que es necesario controlar al insecto que la transmite. Por lo que el presente trabajo consistió en aislar hongos de D. citri micosados, identificarlos en base a sus características morfométricas y usando técnicas moleculares, cultivarlos en diferentes medios de cultivo comerciales de agar para seleccionar aquel en el cual crecen y conidian mejor, se determinó también el tipo de exudados producidos por Hirsutella citriformis en los medios de agar, se cultivaron en dos diferentes medios de cultivo líquido y un sustrato vegetal para obtener mayor cantidad de conidios; también se realizaron bioensayos de laboratorio para determinar la virulencia de las cepas y seleccionar aquellas que pudieran controlar mejor al insecto; se evaluó la patogenicidad que pudieran presentar sobre insectos depredadores de D. citri, y con los resultados obtenidos se seleccionó las cepas que presentaron mayor patogenicidad sobre el insecto vector del HLB para evaluar su actividad sobre el mismo en bioensayo de campo. Se aislaron cinco cepas de insectos micosados provenientes de diferentes regiones citrícolas, se trabajó con ellos además de tres cepas con las cuales ya contaba el INIFAP de General Terán de Nuevo León. Se identificaron morfométrica y molecularmente como Hirsutella citriformis Speare. Los medio comerciales de cultivo en los cuales crecen y presentan mejor conidiación son los medios agar papa dextrosa enriquecidos con extracto de levadura al 0.5 y 1 % en los cuales se obtuvo un crecimiento radial de 3.2 a 3.8 cm para las cepas IB-Hir-2 e INIFAP-Hir-1 respectivamente, a los 34 días de cultivo a 25 ± 1 °C. La conidiación obtenida para las ocho cepas no correspondió al crecimiento radial, pero si concordó en presentarse en los medios enriquecidos con extracto de levadura, los valores variaron desde 1.22 x 10⁶ a 2.79 x 10⁷ para las cepas 2 INIFAP-Hir-2 en agar papa dextrosa e IB-Hir-2 en agar papa dextrosa con extracto de levadura al 1% respectivamente. En medios líquidos la mayor producción de blastosporas obtenida fue 4.3 x 108 blastosporas /ml a los 9 días en el medio de casaminoácidos para la cepa INIFAP-Hir-1, y en caldo papa dextrosa la mayor producción la presentó a los 11 días la cepa IB-Hir-2 (7.7 x 107 blastosporas/ml). La mayor producción de conidios en el sustrato vegetal (arroz) se obtuvo a los 14 días por la cepa INIFAP-Hir-4 (1.97 x 107 conidios/gr). Se analizaron los dos tipos de exudados observados en las cepas usando los métodos de Bradford para proteínas y el del Fenol Sulfúrico para carbohidratos y con estos métodos se determinó que todas las cepas producen ambos tipos de compuestos, además de que las proteínas son los exudados amarillo claro y oscuro, mientras que los carbohidratos corresponden a las gotas cristalinas producidas por las cepas en los diferentes medios de agar. En los diferentes bioensayos de laboratorio las cepas presentaron mayor mortalidad cuando se inoculó por contacto, donde las cepas INIFAP-Hir-1, INIFAP-Hir-2, IB-Hir-1 e IB-Hir-2 mostraron los mayores porcientos de mortalidad media. Al evaluar la patogenicidad de cuatro cepas sobre dos depredadores de D. citri, los resultados fueron similares para tratamientos y testigo y no se presentó micosamiento en los insectos muertos. Bajo condiciones de laboratorio la CL50 y CL90 obtenidas para el aislado INIFAP-Hir-1 fueron, 34 x 105 y 26.7 x 107 respectivamente. En el bioensayo de campo se usaron las cepas INIFAP.Hir-2, INIFAP.Hir-4, IB-Hir-1 e IB-Hir-2 y el mayor porciento de mortalidad obtenida fue 51.049 y el menor 35.7 para las cepas INIFAP-Hir-4 e IB-Hir-1 respectivamente, mientras que el testigo con adherente mostro 6.059 y en el testigo absoluto 4.84 % de mortalidad promedio. Además logramos aislar la cepa que los micosaba de 20 insectos colectados en diferentes puntos de muestreo, identificando en base a sus características morfológicas de crecimiento colonial a tres de las cepas evaluadas y a la cepa nativa de Martínez de la Torre

Insight into Biological Control Potential of Hirsutella citriformis against Asian Citrus Psyllid as a Vector of Citrus Huanglongbing Disease in America

Studies on Hirsutella citriformis Speare are scarce. Among these, some reports have focused on phenotypic identification, based on its morphological structure and morphometric characteristics. This fungus is known to control economically important citrus crop pests. In recent years, H. citriformis has received increased attention as a control agent for the Asian citrus psyllid Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae), which causes the Huanglongbing (HLB) disease. Unfortunately, formal H. citriformis strains characterization is marginal, which mainly involves the role of biologically active exudates (metabolites) produced during their growth. Information regarding their mode of action and biocontrol potential is limited. However, epizootics reports of this fungus, under suitable environmental conditions for its development (25 °C to 28 °C and ~80% relative humidity), have demonstrated its parasitization efficacy. Therefore, it becomes challenging to determine whether H. citriformis strains may be developed as commercial products. In this review, we showed relevant information on isolation and bioassay strategies of H. citriformis to evaluate potential biocontrol strains under laboratory and field conditions in America

Mortalidad por intoxicaciones agudas producidas con medicamentos: Cuba, 1995-1996

Se realizó un estudio descriptivo para determinar la incidencia de intoxicaciones agudas fatales medicamentosas en 1995 y 1996, y los principales factores de riesgo en la población cubana. Ocurrieron 314 defunciones para una tasa de 1,4 por 100 000 habitantes. En edades pediátricas el riesgo superior se encuentra en los menores de 1 a y en los adultos el riesgo aumenta al avanzar la edad, con una mayor afectación del sexo femenino. Las edades de mayor riesgo son a partir de 55 a en las mujeres y en los hombres después de 75 a. Los años de vida potencialmente perdidos fueron 7 430, con predominio de las mujeres (74 %). En los adultos predominaron las circunstancias voluntarias, en especial los suicidios con ingestión de psicofármacos; el diazepam y el fenobarbital se encuentran entre los más elegidos. En segundo término aparecen las reacciones adversas, producidas fundamentalmente por antibióticos, con predominio de las penicilinas. Por último, las circunstancias accidentales originadas por cardiotónicos. En los niños no existió diferencia estadística significativa en las diferentes circunstancias.<br>We undertook a descriptive stuy to determine the incidence of fatal outcomes of acute drug poisoning in 1995 and 1996 and the main risk factors for the Cuban population. There were 314 deaths accounting for 1,4 death per 1000 pop. In pediatric ages, under 1 year-old infants are at the highest risk whereas risk for adults increases with age, being females the most affected ones. The most risky ages for women are from 55 years and over, and for men after 75 years of life. Potential years of life lost amounted to 7 430 with females predominating (74 %). Voluntary poisonings in adults prevailed spcially suicides from psychodrug-taking; diazepam and phenobarbital were the most used drugs for this end. Adverse drug effects was the second cause, which are mainly caused by antibiotics particularly penicilims. Lastly, accidental situations created by cardiotonic substances. There was no significant statistical differences for children in any situations

Control biológico de Lasiodiplodia theobromae y Fomitopsis meliae causantes de la muerte regresiva de los cítricos

The research was carried out in the state of Nuevo Le ó n, Mexico, during 2018, with the aim of isolating and identifying strains of soil microorganisms and evaluating their antagonistic capacity in vitro against citrus pathogens Lasiodiplodia theobromae and Fomitopsis meliae . For the isolation of the microorga nisms, 17 rhizosphere samplings were carried out in different locations and types of vegetation; the samples were heat treated and spread by extension in the potato dextrose agar culture medium added with 0.3% yeast extract and 0.3% malt extract (PDLMA). The isolates obtained were preliminarily evaluated by observation and growth comparison. Of 70 isolates, 15 presented antagonistic activity, which showed inhibition percentages of 39 - 91%. The actinomycete strains M4 R and M1 - 101, and the fungus M1 04 ( Penicillium citrinum ) caused 84, 91 and 85% inhibition respectively against L . theobromae and 83, 91 and 91% respectively against F . meliae . Isolation of bacteria was achieved , actinomycetes and fungi from the soil capable of inhibiting the growth of L . theobromae and F . meliae fungi causing regressive citrus deathLa investigación fue realizada en el estado de Nuevo León, México, durante el año 2018, con el objetivo de aislar e identificar cepas de microorganismos de suelo y evaluar su capacidad antagónica in vitro frente a los patógenos de cítricos Lasiodiplodia theobromae y Fomitopsis meliae. Para el aislamiento de los microorganismos se realizaron 17 muestreos de rizósfera en diferentes localidades y tipos de vegetación; las muestras se trataron con calor y se sembraron por extensión en el medio de cultivo papa dextrosa agar adicionado con 0.3% de extracto levadura y 0.3% de extracto de malta (PDLMA). Los aislamientos obtenidos se evaluaron preliminarmente por observación y confrontación del crecimiento. De 70 cepas aisladas, 15 presentaron actividad antagónica, las cuales mostraron porcentajes de inhibición de 39-91%. Las cepas de los actinomicetos M4 R y M1-101, y el hongo M104 (Penicillium citrinum) causaron inhibición de 84, 91 y 85% respectivamente contra L. theobromae y de 83, 91 y 91% respectivamente contra F. meliae. Se logró el aislamiento de bacterias, actinomicetos y hongos del suelo capaces de inhibir el crecimiento de los hongos L. theobromae y F. meliae causantes de muerte regresiva de los cítricos

Calidad de vida en el adolescente asmático Quality of life in the asthmatic adolescent

INTRODUCCIÓN: la mejoría de la calidad de vida es clave en el tratamiento del niño-adolescente con asma. OBJETIVO: identificar la afectación que provoca el asma bronquial en la calidad de vida del adolescente asmático. MÉTODOS: se realizó un estudio descriptivo, longitudinal y prospectivo de 103 adolescentes asmáticos con diagnóstico de asma leve intermitente, asma leve persistente y asma moderada persistente en la Escuela Secundaria Básica "Antonio José de Sucre", en la localidad de Cojímar, en el período entre el 1ro. de enero de 2006 y el 31 de diciembre del propio año. RESULTADOS: los síntomas principales fueron la tos, la disnea y la sibilancia, y las molestias más frecuentes, el cansancio, la dificultad para respirar hondo y la sensación de quedar sin aire. Predominó el sexo masculino y las edades de 12 y 13 años. El mayor número de respuestas de las alteraciones de la función emocional se concentraba en las categorías más bajas del nivel de afectación, y las respuestas sobre la limitación de la actividad motora se inclinaron hacia las categorías de muchísimo, mucho, bastante y regular. Predominó la afectación moderada de la calidad de vida. El asma persistente moderada fue la mayormente referida en la afectación de calidad de vida severa.<br>INTRODUCTION: the improvement in quality of life is a key element in treatment of asthmatic child-adolescent. OBJECTIVE: to identify the affection provoking the bronchial asthma in the quality of life of the asthmatic adolescent. METHODS: a prospective longitudinal and descriptive study was conducted in 103 asthmatic adolescents diagnosed with intermittent slight asthma from the "Antonio José de Sucre" Secondary Basic School in the Cojimar place, from January 1, to December 31, 2006. RESULTS: the major symptoms included cough, dyspnea and sibilation and the more frequent nuisances were the tiredness, profound breathlessness and the feeling of lack of air. There was predominance of male sex and ages of 12 and 13 years. The great number of responses of emotional function alterations it was concentrated in the lowest categories of affection level and the responses on motor activity limitation were qualified as very much, much, enough and regular. In quality of life there was predominance of moderate affection. The moderate persistent asthma was mainly perceived in the severe quality of life state

Increased Hirsutella citriformis conidia shelf life in Acacia and Hirsutella gum formulations

: Biological control by beneficial microorganisms is known to significantly reduce the effect of pests on crops yield. Among the biocontrol strategies is the use of entomopathogenic fungi such as Hirsutella citriformis, which has been applied to infect and kill hemipteran insect pests, including Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) and Bactericera cockerelli Sulc. (Hemiptera: Triozidae). These biological agents are applied in the form of conidia that are often combined with other inert materials to facilitate application, protect conidia, and improve their shelf life. The aim of this study was to implement strategies for developing formulations to increase conidia shelf life. We evaluated gum produced from one strain and conidia from two different H. citriformis strains. Conidia were formulated by evaluating different concentrations of Acacia and Hirsutella gums to enhance conidia viability during storage at 4 ◦C or 25 ◦C. Results indicated that formulations maintained conidia viability for at least 90 d after storage at 25 ◦C (≥70% viability) and at least 120 d after storage at 4 ◦C, which was significantly (p ≤ 0.05) higher than that of the control, without observing changes in pH values. We also demonstrated 100% formulation purity from days 0 to 120, among all treatments. In conclusion, evaluated formulations maintained H. citriformis conidia viability for at least three months, when stored at 4 ◦C