Acidente botrópico em cão na região Noroeste do Espírito Santo: Botropic accident in a dog in the Northwest region of Espírito Santo

O envenenamento por picada de cobra é uma condição que afeta seres humanos e animais em todo mundo. No Brasil, as serpentes venenosas existentes pertencem aos gêneros Bothrops, Crotalus, Lachesis e Micrurus. Contudo, os acidentes botrópicos são os mais frequentemente descritos na medicina humana e veterinária. Assim, o objetivo desse estudo foi descrever um caso de acidente botrópico em um cão na região noroeste do Espírito Santo, destacando suas características clínico-laboratoriais. Foi atendido um canino, macho, castrado, sem raça definida (SRD), de 1 ano de idade, proveniente da zona rural do município de Pancas, região noroeste do Espírito Santo, com suspeita de picada de cobra do gênero Bothrops. O animal apresentava sangramento e algia intensa em membro torácico direito. Foi realizada a administração do soro antiofídico e fármacos analgésicos, antibióticos, anti-inflamatórios e hemostáticos. Nos exames laboratoriais, o paciente apresentou anemia intensa, hipoproteinemia, leucocitose por neutrofilia e trombocitopenia, além de hipoalbuminemia e aumento nas concentrações fosfatase alcalina e ureia. O diagnóstico de acidente ofídico por cobra do gênero Bothrops baseou-se nas alterações clínico-laboratoriais típicas e pela visualização da serpente pelo tutor. A alta incidência de acidentes botrópicos no Brasil ocorre devido à vasta distribuição geográfica das serpentes no país. Os sinais clínicos e as alterações hematológicas e bioquímicas observadas nos animais ocorrem devido a diversas enzimas, peptídeos e proteínas presentes no veneno que causam os efeitos deletérios locais e sistêmicos descritos. A terapia consiste, principalmente, na administração do soro antiofídico e fármacos adjuvantes para controle dos efeitos locais. Chama-se a atenção que as estatísticas de acidentes ofídicos na medicina veterinária baseiam-se principalmente em relatos de casos ou estudos feitos nos centros de diagnósticos das universidades do país, devido a não obrigatoriedade da notificação desses acidentes

Measurement of vector boson production cross sections and their ratios using pp collisions at √s = 13.6 TeV with the ATLAS detector

Abstract available from publisher's website

Beam-induced backgrounds measured in the ATLAS detector during local gas injection into the LHC beam vacuum

Inelastic beam-gas collisions at the Large Hadron Collider (LHC), within a few hundred metres of the ATLAS experiment, are known to give the dominant contribution to beam backgrounds. These are monitored by ATLAS with a dedicated Beam Conditions Monitor (BCM) and with the rate of fake jets in the calorimeters. These two methods are complementary since the BCM probes backgrounds just around the beam pipe while fake jets are observed at radii of up to several metres. In order to quantify the correlation between the residual gas density in the LHC beam vacuum and the experimental backgrounds recorded by ATLAS, several dedicated tests were performed during LHC Run 2. Local pressure bumps, with a gas density several orders of magnitude higher than during normal operation, were introduced at different locations. The changes of beam-related backgrounds, seen in ATLAS, are correlated with the local pressure variation. In addition the rates of beam-gas events are estimated from the pressure measurements and pressure bump profiles obtained from calculations. Using these rates, the efficiency of the ATLAS beam background monitors to detect beam-gas events is derived as a function of distance from the interaction point. These efficiencies and characteristic distributions of fake jets from the beam backgrounds are found to be in good agreement with results of beam-gas simulations performed with theFluka Monte Carlo programme

Measurements of electroweak W±Z boson pair production in association with two jets in pp collisions at √s = 13 TeV with the ATLAS detector

Measurements of integrated and differential cross-sections for electroweak W±Z production in association with two jets (W±Zjj) in proton-proton collisions are presented. The data collected by the ATLAS detector at the Large Hadron Collider from 2015 to 2018 at a centre-of-mass energy of √ s = 13 TeV are used, corresponding to an integrated luminosity of 140 fb−1 . The W±Zjj candidate events are reconstructed using leptonic decay modes of the gauge bosons. Events containing three identified leptons, either electrons or muons, and two jets are selected. Processes involving pure electroweak W±Zjj production at Born level are separated from W±Zjj production involving a strong coupling. The measured integrated fiducial cross-section of electroweak W±Zjj production per lepton flavour is σW Zjj−EW→ℓ ′ νℓℓjj = 0.368 ± 0.037 (stat.) ± 0.059 (syst.) ± 0.003 (lumi.) fb, where ℓ and ℓ ′ are either an electron or a muon. Respective cross-sections of electroweak and strong W±Zjj production are measured separately for events with exactly two jets or with more than two jets, and in three bins of the invariant mass of the two jets. The inclusive W±Zjj production cross-section, without separating electroweak and strong production, is also measured to be σW Zjj→ℓ ′ νℓℓjj = 1.462 ± 0.063 (stat.) ± 0.118 (syst.) ± 0.012 (lumi.) fb, per lepton flavour. The inclusive W±Zjj production cross-section is measured differentially for several kinematic observables. Finally, the measurements are used to constrain anomalous quartic gauge couplings by extracting 95% confidence level intervals on dimension-8 operators

Effects UV-A and visible light on skin cells and hair

A luz solar apresenta ondas eletromagnéticas em ampla faixa espectral, incluindo as regiões do ultravioleta (UV-C, UV-B, UV-A), visível e infravermelho. Cada região interage com a pele de forma dependente da fotofísica e da fotoquímica dos seus respectivos compostos absorvedores. A luz UV-A causa a geração de espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio (EROs e ERNs) através da fotossensibilização de moléculas endógenas (co-enzimas de flavina, porfirinas, melaninas). Quando fotossensibilizadores produzem quantidades de EROs e ERNs maiores do que a capacidade celular de supressão destas espécies, caracteriza-se um quadro de desbalanço redox, que causa lesão em biomoléculas como os ácidos nucleicos, lipídeos e as proteínas. Essas lesões podem levar à morte celular ou a outras transformações fenotípicas e genotípicas e também estimulam a liberação de citocinas pró-inflamatórias. Com a finalidade de melhor compreender a dinâmica dos mecanismos de resposta celular após exposição ao UV-A e ao visível, nós caracterizamos inicialmente as propriedades fotofísicas da melanina e detectamos a produção de oxigênio singlete (1O2) pela fotossensibilização no visível e a supressão desta espécie excitada pela reação do oxigênio singlete com a dupla ligação reativa dos grupos indóis presentes na melanina. Estes processos também foram observados no cabelo e levaram-nos a propor um modelo que explica o efeito da luz visível na estrutura e cor dos cabelos. Demonstramos também que a feomelanina produz mais (30%) 1O2 do que a eumelanina, que sofre maior modificação na sua estrutura por fotodegradação. O efeito destes processos na pele foi estudado a nível celular. Demonstramos que células epiteliais com maior teor de melanina apresentaram maior geração de 1O2 que causa lesão no DNA e morte necro-apoptótica após irradiação com luz visível. A foto-oxidação da melanina pela luz visível nos motivou a estudar um pigmento que fosse foto-protetor não somente contra luz UV-B mas também contra luz visível. A pigmentação com Acetil-Tirosina se mostrou atóxica e protetora contra luz UV-B e visível ao contrário do pigmento com tirosina, que se mostrou protetor do UV-B mas tóxico no visível. Este efeito foi relacionado com a localização celular do polímero e não com a estrutura do mesmo. A luz UV-A, por sua vez, promove o acúmulo de lipofuscina dentro dos vacúolos autofágicos de queratinócitos da pele e que também ativa a fototoxicidade pela luz visível. A lipofuscina dentro dos vacúolos autofágicos é foto-oxidada pela luz visível, causando lesão no DNA e morte celular programada tipo II. Doses UV-A que desencadeiam a liberação de citocinas também foram caracterizados.Sunlight presents electromagnetic radiation over a wide spectral range, including the regions of ultraviolet (UV-C, UV-B, UV-A), visible and infrared. Each region interacts with skin dependending on the photophysics and photochemistry of the respective absorbing compounds. UV-A light causes the generation of reactive oxygen and nitrogen species (ROS and RNS) by photosensitization of endogenous molecules (flavin coenzymes, porphyrins, melanins). When photosensitizers produce amounts of ROS and RNS larger than the cell capacity to suppress these species, a set of redox imbalance, which damages biomolecules such as nucleic acids, lipids and proteins. This damage cause cell death and to other phenotypic and genotypic changes and also stimulates the release of proinflammatory cytokines. In order to better understand the dynamics of the mechanisms of cellular responses after exposure to UV-A and visible light, we initially characterized the photophysical properties of melanin and detected the production of singlet oxygen (1O2) by photosensitization in the visible, as well as the suppression of these excited species by reaction of singlet oxygen with the double bonds of the reactive groups presented in the melanin indols. These processes were also observed in hair and led us to propose a model that explains the effects of visible light on the structure and color of hair. We also demonstrated that pheomelanin produces more (30%) 1O2 than eumelanin, which undergoes a quick change on its structure by photodegradation. The effect of these processes in the skin was studied at the cellular level. We demonstrated that epithelial cells with larger melanin content have stronger generation of 1O2, which causes DNA damage and necro-apoptotic death after irradiation with visible light. The photo-oxidation of melanin by visible light has motivated us to study a pigment that was not only able to protect against UV-B but also against visible. Pigmentation with Acetyl-Tyrosine proved nontoxic and protective against UV-B and visible light instead of pigmentation with Tyrosine, which shielded against UV-B but showed toxicity in the visible. This effect was associated with the polymer, cell location and not with its structure. UV-A light, in turn, promotes the accumulation of lipofuscin, within autophagic vacuoles of keratinocytes also enabling phototoxicity in the visible light. The lipofuscin within the autophagic vacuoles is fotooxidized by visible light, causing DNA damage and programmed cell death type II. Linear dose of UV-A that trigger the release of cytokines were also characterized

Filogeny and filogeografy of porcine circovirus 2 (PCV2), construction and characterization of a recombinant adenovirus that express capsid protein of PCV2

O circovirus suíno 2 (PCV2) é o principal agente causador da síndrome da postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) e está associado a diferentes síndromes em suínos. O genoma do PCV2 possui três ORFs principais, sendo a ORF2 a codificadora da proteína do capsídeo. No primeiro estudo, sequências de nucleotídeos da ORF2 de 30 isolados brasileiros foram analizadas e comparadas com outras sequências depositadas no GenBank usando uma abordagem filogenética e filogeográfica. No segundo estudo, a fim de controlar a circovirose suína, nós construímos um sistema de expressão gênica da ORF2 do PCV2 em vetor adenovírus. Primeiramente, um total de onze amostras de seis estados brasileiros foram coletadas e as ORF2 foram clonadas em vetor pGEM T-easy e sequenciadas. Nossos resultados, portanto, mostraram uma alta variabilidade de sequências no Brasil além de os isolados brasileiros serem classificados nos subgrupos 1AB, 2D e 2, e que o vírus foi introduzido no Brasil mais que uma vez. Em seguida, a ORF2 de um desses isolados foi amplificada pela reação da polimerase em cadeia (PCR) e clonada em vetor pGEM T-easy. Células de Escherichia coli DH5α foram transformadas com o plasmídeo recombinante (pGEM-ORF2) e o material genético amplificado. A clonagem foi confirmada por sequenciamento e ensaio de restrição com a enzima EcoRI. Confirmada a clonagem, o plasmídeo foi clivado pelas enzimas AclI e NheI, liberando a ORF2. Este segmento foi clonado no vetor pAD5-Blue previamente clivado pelas enzimas ClaI e XbaI. Células de E. coli TOP10 foram transformadas com a construção (pAd5-Blue ORF2); as colônias recombinantes foram selecionadas e o material genético multiplicado. Este plasmídeo foi linearizado pela enzima PacI e trasnfectado em células da linhagem HEK 293. A expressão viral in vitro foi confirmada por imunoperoxidase em monocamada, Western blotting e imunofluorescência. Os vírus purificados foram titulados em 2 x108 TCID50/50μL. Duas doses de vírus purificado foram inoculadas em camundongos BALB/c para verificação da resposta imune. Soro e baço dos animais foram coletados para ensaios de resposta humoral e celular, respectivamente. A resposta imune celular se caracterizou por uma eficiente expressão de mRNA de INF-γ bem como a proliferação de linfócitos T CD8+. Em relação à resposta humoral, o candidato vacinal apresentou produção de anticorpos principalmente após a segunda dose evidenciado na coleta de soro do dia 45. De acordo com os resultados encontrados neste trabalho, acredita-se que este modelo de vacina possa ser utilizado em suíno SPF e convercional uma vez que em modelo murino, o adenovírus recombinante foi capaz de estimular resposta imune celular, em especial linfócitos T CD8+, o que destaca eficiênica na eliminação do PCV2.The porcine circovirus 2 (PCV2) is the main agent causing the postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) and is associated with different syndromes in pigs. The genome of PCV2 has three major ORFs, the ORF2 encodes a protein of capsid. First in this study, the ORF2 nucleotide sequences of 30 Brazilian isolates were analyzed and compared to other GenBank sequences using phylogenic and phylogeographic approaches. Secound, in order for the control of swine circovirose, our constructed a system of gene expression of the RF2 of PCV2 in an adenovirus vector. The first work, a total of eleven samples of six Brazilian states were collected and the ORF2 were cloned into vector pGEM T-easy and sequencing. Our results show high sequence variability in Brazil, since, in this work, the Brazilian isolates were classified into subgroup 1AB, 2D and 2, which reveals that the virus was introduced in Brazil more than once. The second work, one this isolate of ORF2 was amplified by the polymerase chain reaction (PCR). Cells of Escherichia coli DH5α were transformed with the recombinant plasmid (pGEM-ORF2) and amplified genetic product. The cloning was confirmed by and a test of the restriction enzyme EcoRI. Confirmed the cloning, the plasmid was cleaved by restriction enzyme NheI and AclI, releasing the ORF2. This segment was cloned in the vector-Blue pAD5 previously cleaved with the enzymes XbaI and ClaI. Cells of E. coli TOP10 were transformed with the construction (pAd5 Blue-ORF2), the recombinant colonies were selected and the genetic product multiplied. This plasmid was cleaved by the enzyme PacI, linearized and trasnfected in HEK 293 cells. The confirmation of viral expression in vitro was detected by Immunoperoxidase Monolayer Assay (IPMA), Western Blotting and Immunofluorescence Assay (IFA) tecnics. The purified viruses were titled in 2 x108 TCID50/50μL. Two doses of purified virus were inoculated into BALB/c animals to check the immune response. Serum and spleen of animals were collected for testing the humoral and cellular response respectively. The cellular immune response marked a high expression of mRNA for INF-γ and high proliferation of CD8+ T cells. Regarding the humoral response, the candidate vaccine showed antibody production after the second dose mainly evidenced in the collected of serum of day 45. According to the results found in this work, this type of vaccine can be used in SPF and convercional pigs since in mouse model, the recombinant adenovirus was able to stimulate cellular immune response, particularly cells T CD8+, that emphasizes the elimination of PCV2.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

Melanin, lipofuscin and the effects of visible light in the skin

Photoexcitation of endogenous photosensitizers (ePS) in the human skin by sunlight culminates with the formation of electronic excited states, such as triplet excited states, singlet oxygen, and a variety of reactive oxygen and nitrogen species, either free radicals or two-electron oxidants. Considering the endogenous skin photosensitizers, melanin is the most abundant and is involved in photoprotection mechanisms, while lipofuscin is an unintentionally pigment accumulated during cell aging or oxidative stress. Both pigments severely increase the phototoxicity of visible light (VL) to skin cells. In the presence of these pigments, VL induces significant oxidative damage in nucleic acids, lipids and proteins, triggering regulated and unregulated cell death mechanisms. Besides, there is accumulation of premutagenic DNA lesions, indicated by the formamidopyrimidine glycosylase (Fpg)- and endonuclease III (Endo III)-sensitive sites in the nuclear DNA. As consequence of the photoinduced oxidative damage, skin cells, under the stimulus of VL release pro-inflammatory cytokines and metalloproteinases, prompting further cell death and skin aging. In this review we describe the photochemical properties of both melanin and lipofuscin pigments and discuss the consequences of their accumulation in terms of the phototoxicity of VL to the human skin

DNA lesions triggered by visible light in skin cells: In the search for comprehensive sun protection

Skin cells present many endogenous photosensitizers (ePS) that interact with light, generating oxidizing species, causing molecular damage in proteins, lipids, and nucleic acids, and consequently triggering cellular and organelle malfunction. Several cell lines with terminal differentiation are susceptible to accumulating non-digestible pigments, such as lipofuscin or melanin-lipofuscin. Besides being hallmarks of aging, both pigments can work as photosensitizers, increasing and expanding the toxicity of sunlight to the range of visible light (VL, 400–700 nm). In here we review the literature to describe the mechanisms by which the photosensitized oxidation reactions induced by VL cause DNA damage. We aim to provide the mechanistic background needed to improve the current strategies of photoprotection

Infecção do trato urinário: estudo de sensibilidade e resistência bacteriana em pacientes internados

Infecção do Trato Urinário (ITU) é uma doença bacteriana que acomete principalmente o sexo feminino com maior prevalência em crianças e idosos. Os antibióticos possuem uma capacidade de inibir o crescimento bem como destruir as bactérias que causam a ITU. O uso de antibióticos sem condução do antibiograma tem aumentado o número de isolados resistentes. O foco deste estudo foi investigar a incidência e a resistência aos antibióticos das bactérias causadoras da ITU em hospitais de Colatina. Laudos da urocultura dos pacientes hospitalizados no período de 2015 a 2019 foram investigados. Faixa etária, sexo, agentes etiológicos mais freqüentes e resistência aos antibióticos foram analisados. A avaliação estatística foi realizada pelo programa Origin 8,0 a p<0,05. Os resultados mostraram maior incidência de ITU em crianças e idosos com acometimento maior em pacientes do sexo feminino (56%). Klebsiella pneumoniae (31%), Escherichia coli (29%), Enterococcus sp (20%), Pseudomonas aeruginosa (7%), Proteus (7%) e Stapylococcus coagulase negativa (6%) foram as bactérias mais prevalentes. Klebsiella pneumoniae mostrou-se resistente em 41% dos antibióticos administrados, Stapylococcus coagulase negativa 38%, Pseudomonas aeruginosa 30%, Proteus 29%, Escherichia coli 21% e Enterococcus sp 19%. Amicacina, gentamicina, imipenem e vancomicina foram os antibióticos mais eficazes para o tratamento da ITU. Pacientes internados em hospitais de Colatina com ITU apresentaram resistência bacteriana em torno de 40% para a maioria dos antibióticos administrados. Portanto faz-se necessário o uso do antibiograma para evitar o aumento da resistência bacteriana nos ambientes hospitalares de Colatina – ES.Urinary tract infection (UTI) is a bacterial disease that mainly affects females, with a higher prevalence in children and the elderly. Antibiotics have the ability to inhibit growth and destroy bacteria that cause UTI. The use of antibiotics without conducting antibiograms increased the number of resistant isolates. The focus of this study was to investigate the incidence and antibiotic resistance of bacteria that cause UTIs in Colatina hospitals. Uroculture reports of patients hospitalized between 2015 and 2019 were investigated. Statistical evaluation was performed using Origin 8.0 at p <0.05. The results showed a higher incidence of UTI in children and the elderly, with a greater number of female patients (56%). Klebsiella pneumoniae (31%), Escherichia coli (29%), Enterococcus sp. (20%), Pseudomonas aeruginosa (7%), Proteus (7%), and Staphylococcus sp. (6%) were the most prevalent. Klebsiella pneumoniae was resistant to 41% of the antibiotics administered. The other bacteria showed 38% resistance to Staphylococcus sp., 30% to Pseudomonas aeruginosa, 29% to Proteus, 21% to Escherichia coli, and 19% to Enterococcus sp. Amikacin, gentamicin, imipenem, and vancomycin were the most effective antibiotics for the treatment of UTIs. Patients admitted to Colatina hospitals with UTI showed a bacterial resistance of approximately 40% for most antibiotics administered. Therefore, it is necessary to use antibiograms to avoid increasing bacterial resistance in hospital environments in Colatina, ES