Novel Endogenous Antimicrobial Peptides

Antimicrobial peptides serve as a first line of defence against invading microorganisms and are an essential part of our fast innate immune system. They are ancient molecules found in all classes of life. Antimicrobial peptides rapidly kill a broad spectrum of microbes and are immunomodulatory, i.e. having additional actions influencing inflammation and other innate immune responses. Results presented in this thesis demonstrate that proteases of common human pathogens degrade and inactivate the antimicrobial peptide LL-37, probably a strategy for bacteria to circumvent the action of antimicrobial peptides. Likewise, heavily sulphated glycosaminoglycans like dermatan sulphate and heparin were shown to bind to and inactivate LL-37. Furthermore, we demonstrate that structural characteristics associated with heparin affinity (cationicity and amphipathicity) may confer antimicrobial properties to any given peptide. Heparin-binding consensus sequences were proven to be active against Gram-positive bacteria, Gram-negative bacteria and the fungus Candida albicans. Similar results were obtained with synthetic peptides derived from heparin-binding sequences within endogenous proteins. In addition, novel antimicrobial activity and heparin-binding capacity were discovered for the anaphylatoxin C3a, generated during activation of the complement system, and the inactive derivative of C3a (C3adesArg), as well as shorter synthetic peptides from the molecule. Novel antimicrobial activity was also shown for the heparin binding and cell-binding domain 5 of high molecular weight kininogen, a substrate in the intrinsic pathway of coagulation. Interestingly, the peptide HKH20 (His479 His498) from this domain was active in high salt, and highly resistant to degradation by various bacterial proteases. The understanding that heparin binding is a property of many antimicrobial peptides may represent a powerful tool in the discovery of novel endogenous antimicrobial peptides from complex biological mixtures

Antifungal Activities of Peptides Derived from Domain 5 of High-Molecular-Weight Kininogen

In both immunocompromised and immunocompetent patients, Candida and Malassezia are causing or triggering clinical manifestations such as cutaneous infections and atopic eczema. The innate immune system provides rapid responses to microbial invaders, without requiring prior stimulation, through a sophisticated system of antimicrobial peptides (AMPs). High molecular weight kininogen (HMWK) and components of the contact system have previously been reported to bind to Candida and other pathogens, leading to activation of the contact system. A cutaneous Candida infection is characterized by an accumulation of neutrophils, leading to an inflammatory response and release of enzymatically active substances. In the present study we demonstrate that antifungal peptide fragments are generated through proteolytic degradation of HMWK. The recombinant domain 5 (rD5) of HMWK, D5-derived peptides, as well as hydrophobically modified D5-derived peptides efficiently killed Candida and Malassezia. Furthermore, the antifungal activity of modified peptides was studied at physiological conditions. Binding of a D5-derived peptide, HKH20 (His479-His498), to the fungal cell membrane was visualized by fluorescence microscopy. Our data disclose a novel antifungal activity of D5-derived peptides and also show that proteolytic cleavage of HMWK results in fragments exerting antifungal activity. Of therapeutic interest is that structurally modified peptides show an enhanced antifungal activity

Skolans roll vid kränkande behandling på nätet : En studie om arbetet mot nätmobbning på en skola

Syftet med denna empiriska studie är att synliggöra en grundskolas tolkning och förebyggande arbete mot kränkande behandling på internet. Genom att svara på vilken syn de olika professionerna i skolan har, från rektor till klasslärare, om skolans förebyggande arbete mot kränkande behandling på internet kommer syftet besvaras. Tillvägagångssättet för att besvara frågeställningarna i studien har varit kvalitativa intervjuer där informanternas svar står för studiens resultat. Till studien har fyra professioner som är verksamma på samma skola bidragit med sina uppfattningar och svar på intervjufrågorna. Studiens resultat synliggör att skolan saknar ett tydligt förebyggande arbete och att det främst är upp till undervisande lärare att jobba med frågorna som rör kränkande behandling på internet. Studien visar vilken brist som finns i det förebyggande arbetet och vad verksamma lärare tycker krävs för att det förebyggande arbetet ska bli bättre. Således kan denna studie vara intressant för skolor att ta del av för att själva veta vad som krävs och vad verksamma lärare önskar rent kunskapsmässigt för att på lång sikt minska den kränkande behandlingen på internet hos eleverna

Skolans roll vid kränkande behandling på nätet : En studie om arbetet mot nätmobbning på en skola

Syftet med denna empiriska studie är att synliggöra en grundskolas tolkning och förebyggande arbete mot kränkande behandling på internet. Genom att svara på vilken syn de olika professionerna i skolan har, från rektor till klasslärare, om skolans förebyggande arbete mot kränkande behandling på internet kommer syftet besvaras. Tillvägagångssättet för att besvara frågeställningarna i studien har varit kvalitativa intervjuer där informanternas svar står för studiens resultat. Till studien har fyra professioner som är verksamma på samma skola bidragit med sina uppfattningar och svar på intervjufrågorna. Studiens resultat synliggör att skolan saknar ett tydligt förebyggande arbete och att det främst är upp till undervisande lärare att jobba med frågorna som rör kränkande behandling på internet. Studien visar vilken brist som finns i det förebyggande arbetet och vad verksamma lärare tycker krävs för att det förebyggande arbetet ska bli bättre. Således kan denna studie vara intressant för skolor att ta del av för att själva veta vad som krävs och vad verksamma lärare önskar rent kunskapsmässigt för att på lång sikt minska den kränkande behandlingen på internet hos eleverna

Anmälningsplikten i förskolan : En kvalitativ studie om sex förskolepedagogers erfarenheter och uppfattningar av anmälningsplikten i den pedagogiska verksamheten

Syftet med denna studie var att skapa en förståelse för sex förskolepedagogers erfarenheter och uppfattningar av anmälningsplikten i den pedagogiska verksamheten. För att samla in data till vår kvalitativa studie använde vi oss av semistrukturerade intervjuer och vinjetter som metod. Intervjuerna utfördes med sex pedagoger i sex olika kommuner i samma län, där vi fick ta del av deras erfarenheter och upplevelser av anmälningsplikten i förskolan. Vår studies resultat är bearbetat och analyserat utifrån fem olika teman. Resultatet visar att dessa pedagoger känner en stor osäkerhet runt anmälningsplikten och om sin skyldighet att agera när de misstänker att ett barn far illa.  Det visar även att det finns svårigheter kring att veta när ett barn är i behov av att få hjälp från en vuxen. I resultatet framgår dessutom att relationen mellan hem och förskola är sårbar, vilket komplicerar en anmälningsprocess. Vidare visar resultatet vikten av att ha ett stöd från arbetslag och ledning när de vill anmäla en oro. Den teoretiska utgångspunkten i vår studie är det fenomenologiska perspektivet, vilket handlar om människans erfarenheter, uppfattningar och upplevelser av ett fenomen. Erfarenhet, upplevelse och uppfattning är därför nyckelbegrepp i den här uppsatsen.   2019-12-20</p

Preservation of antimicrobial properties of complement peptide C3a - from invertebrates to humans.

The human anaphylatoxin peptide C3a, generated during complement activation, exerts antimicrobial effects. Phylogenetic analysis, sequence analyses, and structural modeling studies paired with antimicrobial assays of peptides from known C3a sequences showed that, in particular in vertebrate C3a, crucial structural determinants governing antimicrobial activity have been conserved during the evolution of C3a. Thus, regions of the ancient C3a from Carcinoscorpius rotundicauda as well as corresponding parts of human C3a exhibited helical structures upon binding to bacterial lipopolysaccharide permeabilized liposomes and were antimicrobial against Gram-negative and Gram-positive bacteria. Human C3a and C4a (but not C5a) were antimicrobial, in concert with the separate evolutionary development of the chemotactic C5a. Thus, the results demonstrate that, notwithstanding a significant sequence variation, functional and structural constraints imposed on C3a during evolution have preserved critical properties governing antimicrobial activity