Women trafficking for sexual exploitation in Portugal: Life narratives.

This paper describes a qualitative research about women trafficking for sexual exploitation in Portugal. The life experiences of a group of Brazilian women were characterised through the use of a comprehensive methodology – life narratives. The evidences found in this study, analysed and interpreted discursively from a feminist critical perspective, show us an unmistakable and intricate articulation between gender issues and poverty and social exclusion. Those conditions seem to establish themselves risk factors for victimisation and sexual oppression

O papel da lipocalin-2 na patofisiologia da esclerose múltipla: um olhar para além do cérebro

Dissertação de mestrado em Ciências da SaúdeMultiple sclerosis (MS) is an immune-mediated demyelinating disease of the central nervous system (CNS), characterized by the presence of demyelination plaques, inflammation and gliosis that consequently lead to axonal damage. The sequence of events that leads to demyelination remains unclear and the pathophysiological mechanisms are diverse. Also, although this is a disease of the CNS, there is no doubt that, in terms of peripheral organs, the thymus, as the organ of T cell differentiation and maturation, plays an important role in the pathophysiology of the disease. Recently, the levels of lipocalin 2 (LCN2), an acute phase protein that is part of the defense system against bacteria, by binding to iron-loaded siderophores, were found to be increased in cerebrospinal fluid (CSF) and serum of MS patients, when compared to control subjects. Similarly, using the MS animal model of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), LCN2 was detected in brain parenchyma astrocytes, in regions typically affected in MS patients. This expression by astrocytes, together with an increased LCN2 level in the CSF, occurs during the active phases of the disease, which could point towards a role for LCN2 secreted by astrocytes in the mediation of inflammatory responses in the EAE model. Altogether, these findings support LCN2 as a valuable molecule for the diagnostic/monitoring of MS and suggest its potential involvement as a disease modulator. Of relevance, the exact role of LCN2 in the pathophysiology of the disease remains largely unknown and contradictory data exists on its potential protective or deleterious effect. Therefore, we sought to investigate the role of LCN2 in the onset and progression of the disease. Herein, we tackled the disease, by evaluating the role of LCN2, not only in the perspective of the CNS, but also on the perspective of peripheral organs such as the thymus. First we intended to perform a characterization of the thymus regarding thymocyte populations and histological morphology, in wild-type (WT) animals induced with EAE, in the onset and chronic phases of disease. Next, to further understand the role of LCN2 in MS pathology, we induced EAE both in LCN2- null mice and in WT littermates. Non-induced EAE animals were used as controls. The thymus of EAE animals was atrophied, as assessed by its weight, normalized for total body weight, and by the number of total cells. Also, we found a decrease in total cell number of all thymocyte populations, during the onset and chronic phases of EAE. In relative terms, the percentage of double positive cells was decreased, and the percentages of the cluster of differentiation (CD)4 and CD8 single positive cells were increased, during the onset phase. At the chronic phase, the proportions between the different populations were restored. LCN2-null mice induced with EAE did not present major alterations in terms of the clinical score, when compared with WT littermates also induced with EAE. Likewise, their thymic alterations were similar to the ones observed in WT EAE animals. Of relevance, as for the inflammatory profile in the cerebellum, LCN2-null mice presented less inflammation, as assessed by decreased expression levels of proinflammatory cytokines interferon (Ifn)-gamma, interleukin (Il)12a and Il17a. Also of interest, the cerebellum of LCN2-null mice presented a decrease in the percentage of lesioned areas. Finally, EAE animals, from both genotypes, presented an increase in the area positive for glial fibrillary acidic protein (GFAP), in the white matter of the cerebellum, in both the onset and chronic phases of disease. On the contrary, the expression levels of Gfap in the cerebellum were only increased at the onset phase of disease.A Esclerose Múltipla (EM) é uma doença autoimune desmielinizante do sistema nervosa central (SNC), caracterizada pela presença de placas de desmielinização, inflamação e gliose, que tem como consequência dano axonal. A sequência de eventos que induzem desmielinização permanecem desconhecidos, e os mecanismos patofisiológicos são diversos. Embora esta seja uma doença do SNC, não há dúvidas que, em termos de órgãos periféricos, o timo, sendo o órgão de maturação e diferenciação das células T, desempenha um papel importante na patofisiologia da doença. Recentemente, os níveis de lipocalin-2 (LCN2), uma proteína de fase aguda que participa no sistema de defesa contra infeções bacterianas, através da ligação a sideróforos, foram encontrados como estando elevados no líquido cefalorraquidiano (LCR) e no soro de doentes com EM, comparativamente aos controlos. Da mesma maneira, usando o modelo animal de EM de encefalomielite autoimune experimental (EAE), a LCN2 foi detetada em astrócitos do parênquima, em regiões tipicamente afetadas em doentes com EM. Esta expressão pelos astrócitos, associada a um aumento de LCN2 no LCR, ocorreu durante as fases ativas da doença, o que aponta para um papel da LCN2 secretada pelos astrócitos na mediação da response inflamatória no modelo de EAE. No seu conjunto, estas evidências suportam o papel da LCN2 como uma molécula importante no diagnóstico e/ou monitorização da EM, e sugere o seu possível envolvimento como moduladora da doença. É relevante dizer que o papel exato da LCN2 na patofisiologia da doença permanece desconhecido, e existem dados contraditórios no que diz respeito ao seu potencial efeito protetor ou deletério. Por isso, nós procurámos perceber o papel da LCN2 no onset e na progressão da doença. Assim, nós investigámos o papel da LCN2 na doença, não só na perspetiva do SNC, mas também dos órgãos periféricos, nomeadamente do timo. Primeiro pretendemos caracterizar o timo em relação às populações de timócitos e morfologia histológica, em animais wild-type (WT) induzidos com EAE, no onset e na fase crónica da doença. De seguida, para melhor entender o papel da LCN2 na patologia da EM, induzimos EAE em animais LCN2- null e em WT da mesma ninhada. Para além disso, usámos animais não induzidos como controlos. Nós observámos que o timo dos animais induzidos com EAE estava atrofiado, com base no seu peso, após normalização para o peso total do animal, e no número total de células. Para além disso, encontrámos uma diminuição no número total de células de todas as principais populações de timócitos, durante o onset e fase crónica da doença. No que diz respeito à percentagem de cada uma das populações de timócitos, durante o onset da doença, a percentagem de células duplas positivas encontrava-se diminuída, enquanto as percentagens das populações CD4+CD8- e CD4-CD8+ se encontrava aumentada. Na fase crónica da doença, as proporções entre as diferentes populações foram reestabelecidas. Os animais LCN2-null induzidos com EAE não apresentaram grandes alterações em termos de score clínico, quando comparados com os animais WT da mesma ninhada também induzidos com EAE. Para além disso, as alterações observadas no timo foram semelhantes às encontradas nos animais WT EAE. De relevância, no que diz respeito ao perfil inflamatório no cerebelo, os animais LCN2-null apresentaram menos inflamação, o que é suportado por níveis diminuídos dos níveis de expressão das citoquinas pró-inflamatórias interferão-gama, e interleucinas 12 e 17. É importante também referir que os cerebelos de animais LCN2-null apresentaram uma diminuição na percentagem de áreas com lesões. Os animais EAE, de ambos os genótipos, apresentaram um aumento na área positiva para GFAP, na substância branca do cerebelo, no onset e na fase crónica da doença. Pelo contrário, os níveis de expressão de Gfap no cerebelo só foram encontrados elevados no onset da doença

Fatores de eficácia na intervenção clínica no mutismo seletivo: estudo de caso

Dissertação de mestrado integrado em PsicologiaO mutismo seletivo é uma perturbação complexa, bastante resistente à terapia, em que se deve ter em atenção todos os fatores situacionais, contextuais, e características individuais da criança, para um tratamento bem-sucedido. Este estudo de caso demonstra o processo de avaliação e terapêutico de uma menina de 10 anos que apresenta mutismo seletivo. O objetivo principal é compreender mais detalhadamente esta perturbação e as suas implicações na vida da criança. Recorrendo a uma terapia cognitiva-comportamental adaptada, com recurso ao jogo como forma de intervenção, pretendeu-se perceber quais revelaram ser as melhores estratégias com sucesso ao longo de todo o processo terapêutico. O tratamento consistiu em 47 sessões, incluindo psicoeducação, relaxamento, jogos lúdicos, exposição e sistema de recompensas. Os progressos obtidos são listados ao longo do estudo e surgem de um trabalho em equipa de terapeutas, direcionado especificamente para a criança. Ainda são necessários estudos nesta problemática, para encontrar mais respostas que possam ajudar estas crianças.Selective mutism is a complex disorder, quite resistant to therapy, in which all the situational and contextual factors, and individual characteristics of the child must be taken into account in order for a successful treatment. This case study demonstrates assessment and therapeutic processes of a 10-year-old girl with selective mutism. The main objective is to detailed understand this disorder and its implications in child's life. Using adapted cognitivebehavioral therapy, and play-therapy as a form of intervention, we tried to understand what proved to be the best strategies successfully throughout the therapeutic process. The treatment consisted of 47 sessions, including psychoeducation, relaxation, playful games, exposure and rewards system. The progress achieved is listed throughout the study and comes from a teamwork of therapists, specifically aimed at the child. Studies are still needed on this problem, to find more answers that can help these children

Vitimação e funcionamento psicológico na adolescência: o papel mediador do suporte social

Orientação: Carla Margarida Vieira Antunes ; co-orientação: Célia Isabel Lima FerreiraA violência na adolescência tem impacto no funcionamento psicológico e bem-estar das vítimas. Este trabalho considera a violência numa perspetiva holística e multidimensional e pretende estudar a violência e funcionamento psicológico na adolescência e o papel mediador do suporte social. Nesta sequência, o protocolo envolveu um questionário sociodemográfico, um questionário para avaliar experiências de vitimação na idade adulta (QUEVIA), escala de suporte social (MSPSS), escalas de avaliação de sintomatologia de internalização (EADS), de externalização (ASRDS) e de bem-estar psicológico (EBEP). A amostra foi constituída por 114 adolescentes, do sexo masculino e feminino, com idades entre os 15 e 18 anos. Os resultados encontrados evidenciam a existência de mediação entre a violência Psicológica e depressão, bem como entre a violência psicológica e uma dimensão do bem-estar. Nos dois casos o mediador revelou-se ser o suporte social familiar percebido. Estes resultados evidenciam a relevância do suporte social (e mais especificamente o familiar) no contexto da vitimação na infância e adolescência, quer para a intervenção psicológica individual, quer para o desenvolvimento de programas de prevenção.Adolescence violence has an impact on the psychological functioning and well-being of victims. This study considers violence in a holistic and multidimensional perspective and aims to explore violence and psychological functioning in adolescence and the mediating role of social support. In this sequence, the protocol was constituted by a Sociodemographic Questionnaire, questionnaire to evaluate the experiences of victimization in adulthood (QUEVIA), social support scale (MSPSS), evaluation scales for internalization symptomatology (EADS), externalization (ASRDS) and psychological wellbeing (EBEP). The sample consisted of 114 adolescents, male and female, aged between 15 and 18 years. The results found evidence the existence of mediation between Psychological violence and depression, as well as between psychological violence and a dimension of well-being. In both cases the mediator proved to be the perceived social support. These results highlight the relevance of social (and more specifically the family) support in the context of victimization in childhood and adolescence, both for individual psychological intervention and for the development of prevention programs

The current trends in industrial symbiosis and its potential implementation in Portuguese industrial parks

The negative effects of rising greenhouse gas emissions and resource consumption have driven countries to seek sustainable solutions that promote economic growth decoupled from rising emissions and rising resource consumption. In this context, industrial symbiosis, which consists of a collaborative approach between different entities involving the use of waste and by-products from one company as raw material in another company, can play an important role for sustainable development. With recognized environmental, economic and social benefits, this practice has been applied around the world, both in developed countries and in countries with developing economies. The main objective of this work is to contribute to the increase of the industrial symbiosis in Portugal, providing an analysis of the existing industrial symbiosis and establishing a series of recommendations and best practices to increase the number of synergies and improve those existing in Portugal. To achieve this main objective, other existing and potential cases of industrial symbiosis around the world have been compiled and analyzed in order to characterize the various synergy networks and to study factors that may inhibit or drive the creation and development of industrial symbiosis relationships. The results demonstrate the enormous potential of application of industrial symbiosis in Portugal. However, for the growth of this practice, various political, cultural and economic barriers have to be overcome and various measures have to be implemented.Os efeitos negativos do aumento das emissões de gases com efeito de estufa e do consumo de recursos têm impulsionado os países para a procura de soluções sustentáveis que promovam o crescimento económico dissociado do aumento das emissões e do aumento do consumo de recursos. Neste contexto, a simbiose industrial que consiste numa abordagem colaborativa entre diferentes entidades que envolve o uso de resíduos e subprodutos de uma empresa como matéria-prima em outra empresa, pode desempenhar um papel importante para o desenvolvimento sustentável. Com reconhecidos benefícios a nível ambiental, económico e social, esta prática tem sido aplicada um pouco por todo o mundo, quer em países desenvolvidos quer em países com economias em vias de desenvolvimento. O principal objectivo deste trabalho é contribuir para o aumento da simbiose industrial em Portugal, proporcionando uma análise da simbiose industrial existente e estabelecendo uma série de recomendações e melhores práticas para aumentar o número de sinergias e melhorar as existentes em Portugal. Para a concretização deste objectivo principal, outros casos de simbiose industrial existentes e potenciais em todo o mundo foram compilados e analisados a fim de caracterizar as várias redes de sinergia e estudar os factores que podem inibir ou impulsionar a criação e desenvolvimento das relações de simbiose industrial. Os resultados evidenciam o enorme potencial de aplicação da simbiose industrial em Portugal. Contudo, para o crescimento desta prática, várias barreiras políticas, culturais e económicas têm ainda que ser transpostas e várias medidas têm que ser implementadas

Guide for ferrets lymphoma

Ferrets popularity as pets is increasing in North America and Europe and appear more frequently in veterinary practice. Therefore, it is important to study this specie in order to provide advanced medical care. After insulinoma and adrenocortical neoplasia, lymphoma is the third more common neoplasia in domestic ferrets, and this condition appears to be increasing in frequency. Lymphoma can be described as a proliferation of neoplastic lymphoid cells, and can occur in ferrets of all ages and in practically all organ systems. Despite various theories, the exact etiology of lymphoma remains unknown. Although the increased incidence of lymphoma, there are still difficulties in obtaining an accurate diagnose of this neoplasia, lack of uniformity in its classification, and protocols to ensure an appropriate treatment. This article aims to present guide that gathers the information published about lymphoma in ferrets, and to provide an orientation on the diagnosis and treatment of ferrets with this neoplasia.Os furões são cada vez mais populares como animais de companhia na América do Norte e Europa, surgindo mais frequentemente na prática veterinária. Portanto, é cada vez mais importante conhecer esta espécie e estar apto a prestar cuidados médicos avançados. Depois do insulinoma e da neoplasia adrenocortical, o linfoma é a terceira neoplasia mais comum nos furões domésticos, estando a sua frequência a aumentar. O linfoma pode ser descrito como uma proliferação de células linfóides neoplásicas, e pode ocorrer em todas as faixas etárias e em praticamente todos os sistemas de órgãos. Apesar das várias teorias, a verdadeira etiologia do linfoma permanece desconhecida. Apesar da elevada incidência do linfoma, há ainda dificuldades em obter um diagnóstico preciso desta neoplasia, falta de uniformidade na sua classificação, e de protocolos que assegurem um tratamento apropriado. Este artigo tem como objectivo apresentar um guia que reúna a informação publicada acerca de linfoma em furões, e fornecer uma orientação no diagnóstico e tratamento de furões com esta neoplasia

R2WEB: repairing and evaluating rich web applications accessibility

Tese de mestrado em Engenharia Informática (Sistemas de Informação), apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2013QualWeb is an existing tool that evaluates Web pages’ compliance with WCAG 2.0 HTML techniques. We wanted to enhance this tool’s functions by adding a CSS module. For this we intend to create a CSS module, to extend the evaluation process, so that it evaluates HTML and stylesheets, but also to present the user solutions for every evaluation problem. In this report we present the different development stages that our CSS evaluation and repair module went through. We describe how we interpreted the WCAG 2.0 techniques and how we turned them into code; how we processed every CSS rule in a .html document and how we established the connection between the different HTML elements and their CSS rule; how we build the repair process itself and how we managed to present it in an online user interface. One of this stages includes an experimental study where we presented to a set of twenty Web developers, with different levels of HTML knowledge, our developments in order to obtain some feedback on how we were doing. In the corresponding chapter we describe our study and show how presenting repair suggestions for accessibility problems, helps users feel less lost and more self-assured when using our tool. These findings will build ground for a future complete repair module for QualWeb and open way for further enhancements of this Web Accessibility evaluation tool.A Web é hoje em dia a plataforma mais utilizadas para partilha de conhecimento e divulgação de serviços. A sua crescente importância nota-se aos mais diferentes níveis da nossa sociedade. Universidades, governos, empresas e outras entidades todas aproveitam da facilidade de chegar ao destinatário através da Web. No entanto, o problema surge dado o facto de que nem todos aqueles, a quem este conhecimento e estes serviços se destinam, têm as mesmas capacidades, cognitivas ou físicas. Grupos sociais de indivíduos com dificuldades cognitivas e físicas acabam por ficar à margem destas potencialidades da Web. Apesar de existirem já inúmeras tecnologias de ajuda para estas pessoas, como leitores de ecrã, etc., para que estas funcionem corretamente, é necessário que a informação seja disponibilizada adequadamente formatada. De forma a colmatar estas e outras situações existe a necessidade de normas cujo objectivo seja estandardizar conteúdos desenvolvidos para a Web. A acessibilidade Web é uma preocupação da qual surgem os princípios de inclusão social. E graças à qual, inúmera documentação e tecnologias, têm surgido de forma a colmatar este problema. Entre elas, tecnologias automáticas de avaliação e até de reparação de Acessibilidade Web. Contudo, muitas dessas tecnologias ainda não conseguem colmatar dificuldades que surgem do desenvolvimentos tecnológico da Web. Novas tecnologias, como Javascript, tornam os conteúdos Web em mais do que simples apresentações de texto. Conteúdos Web passam a ser dinâmicos, graças à execução ao de chamadas aos servidores, paralelas à apresentação das páginas Web. Estas interações com o servidor permitem a alteração dos conteúdo nas páginas Web. A avaliação da acessibilidade destes novos conteúdos dinâmicos, não pode ser verificada utilizando os mesmos padrões usados até agora. Caso isto aconteça estes avaliadores de conteúdos estáticos, podem levar a conclusões incompletas que podem mesmo ser incorretas. A ferramenta QualWeb é uma ferramenta de avaliação de Acessibilidade Web. No entanto, ao contrário das mencionadas anteriormente, recorrendo a tecnologias recentes, esta ferramenta permite avaliar aplicações Web dinâmicas. Avaliações de acessibilidade realizadas por esta ferramenta seguem normas internacionais WCAG 2.0 graças à implementação de um modulo de técnicas HTML. No entanto existe ainda espaço para expandir o âmbito desta ferramenta. As normas WCAG 2.0 englobam não apenas o HTML mas também um conjunto de outras tecnologias de entre as quais o CSS. Sendo que, com o crescimento da Web e da quantidade de conteúdos disponíveis online, maior atenção tem sido atribuída à utilização de estilos que possibilitam aos developers desenvolver conteúdos mais apelativos. Por este motivo a sua utilização tem aumentado e os CSS são hoje em dia, considerados como uma das tecnologias mais importantes para a Web. Data esta importância, este trabalho pretende expandir o funcionamento de ferramenta QualWeb, introduzindo lhe novas capacidades anívels dos CSS. Para isso incluímos um módulo de avaliação e reparação de CSS. Esta avaliação, tal como a já existente avaliação de HTML, segue as t´técnicas CSS WCAG 2.0. Não só nos preocupámos em manter a modularidade da ferramenta, mas também nos preocupámos em torna-la ainda mais flexível. As avaliações de HTML seguiam uma determinada forma de execução¸ ao de comprometia a flexibilidade da apresentação de resultados ao developer. Foi por este motivo que decidimos também alterar a perspectiva de apresentação dos resultados,. Esperamos assim melhorar o workflow do developer bem como, a sua experiencia com a nossa ferramenta. Considerando que a complexidade das páginaWeb tem vindo a aumentar, o tempo que um developer poderá eventualmente despender, analisando os seus conteúdos, segundo padrões de acessibilidade, pode ser considerável. De forma a mantermos os developers interessados nestes temas, sem que considerem estas verificações cansativas, é importante tornar a sua experiencia tao simples quando possível. é com este objectivo que surgem ferramentas de reparação de acessibilidade. No entanto, se já as avaliações de acessibilidade podem ser algo ambíguas, esta situação agrava-se na reparação. Reparar uma página Web requer um conhecimento relativamente da página bem como uma visão geral que muitas vezes as ferramentas automáticas não possuem. Por este motivo o que propomos neste trabalho são sugestões de reparação, apresentadas ao developer, de forma a que a ferramenta de forneça toda a informação necessária para reparar a acessibilidade dos seus conteúdos. Neste trabalho procedemos ao desenvolvimento de um módulo de reparação para as técnicas CSS desenvolvidas. O objectivo é acima de tudo, mostrar ao developer que pode tornar as suas páginas mais acessíveis, educando-o sobre como o fazer e despoletando o seu interesse explicando também porque o deve fazer. De forma a que toda esta informação possa ser divulgada, é necessário melhorar a interface da ferramenta QualWeb, desenvolvida paralelamente a este projecto. Desenvolveuse paralelamente a este trabalho uma interface para esta ferramenta, no entanto esta interface tem como objectivo apresentar uma versão anterior do QualWeb. De forma a conseguir disponibilizar todos os conteúdos desenvolvidos foi necessário melhorar essa interface introduzindo lhe novas funcionalidades. Todas estas componentes desenvolvidos, foram verificadas através de um corpus de teste. Para a avaliação desenvolvemos testes individuais, por técnica, e globais que simulavam a complexidade de uma páginaWeb real. Para a reparação, procedemos a reparação de algumas das mais utilizadas páginas Web, o que nos permitiu fazer uma analise critica às nossas implementações. Por fim, de forma a validar a interface e as reparações, procedemos a testes com utilizadores. Estes testes foram cruciais para o refinamento da nossa ferramenta, bem como para obtermos algumas conclusões interessantes no nosso trabalho. No final, conseguimos, como pretendíamos, melhorar a ferramenta QualWeb, tornando a ainda mais competitiva nesta área. Conseguimos também validar toda a implementação realizada dos diferentes componentes e tirámos conclusões bastante interessantes. Nomeadamente que o conhecimento de ferramentas deste género, a nível de estudantes de universidade não é muito elevado e que estas ferramentas podem desempenhar um papel interessante para alterar esta situação. Este trabalho ajudou também a pavimentar caminho para novas melhorias desta ferramenta de avaliação de Acessibilidade Web

Romantic Love and Intimacy Experiences: Discourses of Immigrant Women In Portugal

Based on a critical feminist framework, this paper describes qualitative research that aims to understand how immigration influences women’s experiences of love and intimacy. Eight immigrant women with an average age of 32.25 years old were interviewed, and the subsequent data were analysed using a critical discourse analysis methodology. The results reveal how women’s experiences of love and intimacy are marked by cultural standards informed by gender norms, and these lead to power imbalances in several aspects of their lives. Intimate relationships are particularly affected by social representations from the country of origin, with more conservative political systems predicting more conservative experiences of love and intimacy.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Gender Performativities: Discourses and Representations of a Group of Catholic Nuns

O presente documento analisa as performatividades de género de irmãs religiosas católicas portuguesas. A partir de um estudo qualitativo procurou perceber-se se as performativida-des de género de um grupo de irmãs religiosas são constrangidas pelos discursos e represen-tações oficiais da Igreja Católica. Procurou-se também analisar de que modo estas mulheres caracterizam as relações sociais de género e se posicionam face às noções de feminilidade e masculinidade tradicionalmente propagadas pela ordem de género (Connell, 2009) e, mais concretamente, pelo regime de género da Igreja Católica. Para tal realizaram-se 7 entrevis-tas individuais semiestruturadas a irmãs religiosas católicas residentes em instituições da região do Grande Porto. Os dados recolhidos foram tratados através de uma análise de con-teúdo. Concluiu-se que as irmãs religiosas são efetivamente constrangidas pelos discursos e representações da Igreja Católica, performatizando o género por via da reprodução e reite-ração de conceções tradicionais de feminilidade e masculinidade. O género é por elas mate-rializado nas ações quotidianas, tendo por base prescrições institucionais e sociais altamen-te conservadoras.This paper explores the gender performativities of Portuguese Catholic religious nuns. Based on a qualitative study, we intended to understand if gender performativities of a group of religious nuns are constrained by the official discourses and representations of the Catholic Church. We also intended to analyze these women’s perspectives about gender social relations and their positions towards femininity and masculinity conceptions tradi-tionally propagated by the gender order (Connell, 2009) and, concretely, by the Catholic Church gender regime. For that purpose 7 individual semi-structured interviews were con-ducted with nuns living in institutions located in Oporto Metropolitan area. Data was ana-lyzed through a content analysis. It was concluded that nuns are, in fact, constrained by the discourses and representations of Catholic Church, performing gender through repro-ductions and reiteration of traditional conceptions of femininity and masculinity. Gender is materialized by them through daily actions, based on institutional and social prescriptions highly conservative

Contribution to the functional analysis of genes involved in cyclic GMP signaling in bacteria of the Burkholderia cepacia complex

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2013O complexo Burkholderia cepacia (Bcc) é constituído actualmente por 18 espécies de bactérias patogénicas oportunistas, capazes de causar infecções respiratórias graves e por vezes letais doentes com fibrose quística (FQ). A FQ é uma doença genética autossómica recessiva mais comum em caucasianos e é causada por mutações no gene CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator), que está localizado no cromossoma 7 e codifica uma proteína de 1480 aminoácidos que funciona como canal transportador de iões cloreto (Cl-) nas membranas epiteliais. Vários estudos têm sido realizados com o objectivo de entender quais os mecanismos moleculares associados aos processos de colonização e persistência destas bactérias nos doentes com FQ. Normalmente, os organismos pertencentes ao Bcc começam por colonizar o tracto respiratório dos doentes com FQ, podendo em alguns casos invadir o epitélio e sobreviver dentro de células epiteliais e de macrófagos. As infecções causadas pelo Bcc em doentes com FQ têm um desenvolvimento clinico imprevisível, variando desde assintomático até ao “síndroma cepacia”, uma pneumonia necrotizante rápida e fatal, que pode levar à morte do paciente num período de tempo de cerca de uma semana. Estas bactérias possuem ainda uma elevada resistência a múltiplos antibióticos, o que dificulta a sua erradicação. Vários factores de virulência têm sido descritos para as bactérias do complexo Burkholderia cepacia, tais como sistemas de “quorum-sensing” (QS), produção de biofilmes, produção de exopolissacáridos (EPS), ilhas genómicas e a multirresistência a antibióticos, entre outros Sabe-se actualmente que o mensageiro secundário di-guanilato cíclico (c-di-GMP) desempenha um papel importante na biologia das bactérias. Devido à sua interacção com várias moléculas efetoras, o c-di-GMP tem uma função regulatória a nível dos processos de transcrição e tradução e na actividade e estabilidade de proteínas. Este permite controlar uma grande variedade de funções relacionadas com o comportamento da comunidade, a secreção, adesão e mobilidade, contribuindo para a virulência de organismos patogénicos. No entanto, ainda pouco se sabe sobre os mecanismos reguladores envolvidos. A caracterização dos mecanismos associados à regulação pelo c-di-GMP representa um dos principais desafios na compreensão das suas funções. No género Burkholderia, o c-di-GMP está envolvido na síntese de flagelos, mobilidade, formação de biofilmes e na invasão e citotoxicidade para as células humanas. Os níveis intracelulares de c-di-GMP são controlados pelas enzimas diguanilato ciclase (DGC) e fosfodiesterase (PDE). As DGC canalizam a sintetize c-di-GMP a partir da condensação de duas moléculas de GTP, enquanto que a actividade de PDE cataliza a hidrolise do c-di-GMP em pGpG. As proteínas com actividades DGC e PDE apresentam, respectivamente, os motivos GG(D/E)EF e EAL. Vários estudos com o objectivo de encontrar genes que codifiquem para proteínas DGC com domínio PAS revelaram a presença de 3 genes no genoma de B. cenocepacia J2315. Estes genes são conservados nos genomas de outras estirpes do Bcc. Diversos estudos têm vindo a demonstrar que concentrações elevadas de c-di-GMP podem suprimir a mobilidade e estimular a formação de biofilmes e a produção de componentes superficiais, tais como a celulose. Estas consequências no comportamento bacteriano devido a elevados níveis de concentração de c-di-GMP podem levar a um bloqueamento das células num estado séssil. Em contraste, baixos níveis de concentração de c-di-GMP vão ter consequências opostas, inibindo portanto a formação de biofilmes e a produção de componentes superficiais, estimulando a mobilidade. Assim, é possível estabelecer a ligação entre os níveis de c-di-GMP e o comportamento e adaptação bacteriana a ambientes específicos. A concentração intracelular de c-di-GMP pode ser rapidamente modulada através do aumento da expressão de proteínas com domínios GGDEF e EAL, alcançando assim respectivamente a saturação ou o esgotamento, do conteúdo intracelular de c-di-GMP na célula. O trabalho desenvolvido teve como principal objectivo o estudo do papel da sinalização pelo mensageiro secundário c-di-GMP na adaptação de bactérias do Bcc a condições ambientais típicas dos pulmões de doentes com Fibrose Quística. Com este objectivo, foram seleccionados 2 genes (BCAM0580 E BCAM2836) de B. cenocepacia J2315 que codificam para DGCs. Com este trabalho foi possível estabelecer uma associação entre a presença de níveis elevados de proteínas com os domínios conservados EAL e GGDEF e a produção de EPS e virulência. No entanto, não foram detectadas diferenças significativas com a superexpressção dos genes BCAM0580 e BCAM2836, indicando que é necessário mais trabalho para adquirir mais conhecimentos sobre os papéis desempenhados pelo mensageiro secundário c-di-GMP na virulência do Bcc. Este trabalho contribuiu para esclarecer o papel do mensageiro secundário c-di-GMP como um factor de virulência, o que permitiu um conhecimento mais profundo da biologia destes patogénicos. Este estudo contribuiu para a identificação de novos alvos para a identificação de novos agentes antimicrobianos ou para a implementação de novas e melhores estratégias terapias para a irradicação destes patogénicos.The Burkholderia cepacia complex (BCC) currently comprises 18 species of opportunistic pathogenic bacteria capable of causing and often lethal respiratory infections in patients with cystic fibrosis (CF). Several studies have been performed envisaging the understanding of the molecular mechanisms underlying the processes associated with the colonization and persistence of these bacteria in the respiratory tract of patients with CF. It is now well known that the action of the second messenger cyclic di-guanylate (c-di-GMP) is involved in the adaptive process to new environmental conditions. Due to their interaction with various effector molecules, c-di-GMP has a regulatory function at the levels of transcription and translation processes, and on the activity and stability of proteins. The intracellular levels of c-di-GMP are controlled by the enzyme activities diguanylate cyclase (DGC) and phosphodiesterase (PDE). The DGC enzyme activity synthesizes c-di-GMP by condensing two GTP molecules, while the PDE enzyme activity catalises the hydrolysis of c-di-GMP into pGpG. Proteins with DGC and PDE activities have, respectively, the GG(D/E) EF and EAL domains. A bioinformatic study was initiated to find genes which encode for DGC proteins. This analysis revealed the presence of three genes enconding putative DGC proteins in the genome of B. cenocepacia J2315 The studied of the role of the second messenger signaling c-di-GMP in the biology of Bcc bacteria involved the functional characterization of two B.cenocepacia J2315 genes encoding DGCs domain. In this work we were able to establish an association between the presence of increased levels of proteins with the conserved domains EAL and GGDEF and the production of EPS and virulence. However, no significant differences were detected when overexpressing the BCAM0580 or BCAM2836, indicating thet further work is necessary to gain knew knowledge on the roles played by the secong messenger c-di-GMP on Bcc virulence