Avaliação do efeito antitrombótico e anticoagulante de extratos brutos de algas marinhas e seus compostos isolados

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2019.A hemostasia é um processo fisiológico que consiste em um equilíbrio entre proteínas pró-coagulantes e anticoagulantes. Distúrbios nos mecanismos hemostáticos podem ocasionar eventos tromboembólicos. A trombose é uma complicação de alta incidência, morbidade e mortalidade no Brasil e no mundo. Atualmente, diversos medicamentos são utilizados para a prevenção e o tratamento da trombose, porém ainda existem muitos efeitos adversos associados a sua utilização, o que limita o seu uso universal. Portanto, há a necessidade de novas terapias, com melhor custo-benefício e menos reações adversas. Nesse contexto, compostos de origem natural, com boa atividade sobre a hemostasia, podem representar um avanço tecnológico nas terapias anticoagulantes e antitrombóticas. Diante disso, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de extratos brutos de algas marinhas pardas e de seus compostos isolados sobre a agregação plaquetária e a coagulação sanguínea humana. A ação sobre a coagulação foi analisada pelo tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa). A atividade antiagregante foi avaliada por turbidimetria usando difosfato de adenosina (ADP), epinefrina, ácido araquidônico (AA) e colágeno como agonistas. Previamente a realização dos ensaios, o plasma rico ou pobre em plaquetas foi incubado a 37 °C com os extratos brutos ou os compostos isolados. Dos 27 extratos brutos avaliados, apenas um extrato de Dictyopteris jolyana prolongou significativamente o TTPa. No entanto, 15 extratos brutos inibiram significativamente da agregação plaquetária induzida por ADP e/ou epinefrina. A partir da triagem com os extratos, selecionaram-se cinco compostos isolados deles (DJ12, DJ13, DJ14, DJ17 e AP1) para verificar seu efeito sobre a hemostasia. Nenhum composto apresentou efeito anticoagulante, e quatro inibiram significativamente a agregação induzida por ADP e/ou epinefrina. O composto AP1, isolado da alga marinha parda Desmarestia menziesii J. Agardh, apresentou os melhores resultados e por isso foi selecionado para dar continuidade às investigações. Quando o ADP foi utilizado como agonista, a CI50 de AP1 foi de 201,8 ± 6,4 µM, frente à epinefrina foi de 239,7 ± 9,0 µM, ao AA foi de 207,5 ± 6,6 µM e ao colágeno foi de 156,9 ± 5,4 µM. A avaliação do perfil da curva de agregação sugeriu que AP1 interfere nos mecanismos relacionados com a resposta exógena da plaqueta, visto que inibiu parcialmente a primeira onda de agregação. Segundo o método de exclusão por azul de trypan, AP1 diminuiu em menos de 5% a viabilidade das plaquetas. A avaliação da expressão membranar de P-selectina e de GpIIb/IIIa ativa por citometria de fluxo demonstrou que AP1 inibiu a ativação plaquetária, uma vez que diminuiu em quase 100% a expressão de ambos marcadores. Ainda constatou-se que na concentração de 500 µM, AP1 era citotóxico para células mononucleadas sanguíneas. Contudo, AP1 apresentou-se fracamente hemolítico até a concentração de 720 µM. Segundo as regras de Lipinski e Veber, AP1 pode apresentar boa biodisponibilidade oral. Conclui-se que AP1 pode ser utilizado como protótipo para o desenvolvimento de um novo medicamento antitrombótico, uma vez que apresentou significativo efeito antiagregante, não afetou a viabilidade plaquetária, apresentou fraca atividade hemolítica e boa biodisponibilidade oral.Abstract: Hemostasis is a physiological process consisting of a balance between procoagulant and anticoagulant proteins. Disturbances in hemostatic mechanisms can lead to thromboembolic events. Thrombosis is a complication of high incidence, morbidity and mortality in Brazil and in the world. Currently, several drugs are used for the prevention and treatment of thrombosis, but there are still many adverse effects associated with its utilization, which limits its universal use. Therefore, there is a need of new therapies, with better cost-benefit and less adverse reactions. In this context, compounds of natural origin, with good activity on hemostasis, may represent a technological advance in anticoagulant and antithrombotic therapies. The aim of this study was to evaluate the effect of crude extracts of brown marine algae and their isolated compounds on platelet aggregation and blood coagulation. The effect on coagulation was evaluated by prothrombin time (PT) and activated partial thromboplastin time (aPTT). The antiplatelet activity was evaluated by turbidimetry using adenosine diphosphate (ADP), epinephrine, arachidonic acid (AA) and collagen as agonists. Prior to the assays, rich or platelet-poor plasma was incubated at 37 °C with the crude extracts or the isolated compounds. Of the 27 crude extracts evaluated, only one extract of Dictyopteris jolyana significantly prolonged the TTPa. However, 15 crude extracts significantly inhibited platelet aggregation induced by ADP and/or epinephrine. From the screening with the crude extracts, five compounds isolated from them (DJ12, DJ13, DJ14, DJ17 and AP1) were selected to verify their effect on hemostasis. No compound had anticoagulant effect, and four significantly inhibited ADP and/or epinephrine-induced aggregation. The compound AP1, isolated from the brown algae Desmarestia menziesii J. Agardh, presented the best results and was therefore selected to continue the investigations. When ADP was used as an agonist, the IC50 of AP1 was 201.8 ± 6.4 µM, for epinephrine it was 239.7 ± 9.0 µM, for AA it was 207.5 ± 6.6 µM and for collagen it was 156.9 ± 5.4 µM. The evaluation of the profile of the aggregation curve suggested that AP1 interferes in the mechanisms related to the exogenous platelet response, since it partially inhibited aggregation?s first wave. According to the blue trypan exclusion method, AP1 decreased the platelet viability by less than 5%. Evaluation of P-selectin and active GpIIb/IIIa membrane expression by flow cytometry demonstrated that AP1 inhibited platelet activation, as it decreased the expression of both markers by almost 100%. It was further found that at the concentration of 500 µM, AP1 was cytotoxic to blood mononuclear cells. However, AP1 was poorly hemolytic up to the concentration of 720 µM. According to the rules of Lipinski and Veber, AP1 may have a good oral bioavailability. It is concluded that AP1 can be used as a prototype for the development of a new antithrombotic drug, since it presented a significant antiplatelet effect, did not affect platelet viability, and presented poor hemolytic activity and good oral bioavailability

Análise de composição nutricional e produção de enzimas em resíduo de Macaúba após fermentação no estado sólido

A busca por matérias-primas naturais no âmbito do desenvolvimento tecnológico, em qualquer setor, vem sendo prioridade nas grandes indústrias. Um exemplo é a procura por fontes alternativas para produção de biodiesel. Atualmente, a maior parte do biodiesel produzido no Brasil utiliza o óleo de soja como matéria-prima, entretanto, a possibilidade de diversificação e apoio à agricultura familiar abrem perspectivas promissoras para utilização de outras espécies, como a macaúba (Acromia Aculeata). Com a extração do óleo da macaúba são gerados resíduos sólidos como a torta da polpa, pobre em proteína e bastante fibrosa, podendo ser utilizada como insumo calorífico para caldeiras ou como fertilizante para os campos cultivados de macaúba, tanto “in natura” como na forma de cinzas (CETEC,1983). Estes produtos poderiam ser utilizados para fins mais nobres (maior valor agregado) como, por exemplo, rações. Entretanto, para este fim necessitariam ser melhorados quanto à sua digestibilidade (diminuição de fatores anti- nutricionais) e teor protéico/ nutricional. Deste modo, o presente trabalho avaliou a utilização da Fermentação no Estado Sólido (FES) na torta de macaúba por fungos filamentosos oriundos da coleção de cultura do LaBiM (Laboratório de Biotecnologia Microbiana- IQ/UFRJ). Além da produção de enzimas, este processo avaliou o enriquecimento nutricional do rejeito utilizado pela redução de componenetes anti-nutricionais e produção de proteínas microbianas. Dentre os fungos utilizados, o P.brevicompactum apresentou maior atividade lipásica (27 U/g) em 72 horas, atividade fitásica (0,1U/g) por 96 horas e tanásica de 8 U/g em 96 horas de fermentação. Entretanto, as maiores reduções dos teores de fatores anti-nutricionais foram observados nas fermentações com o Aspergillus tamarii (87% de redução de ácido fítico) e Aspergillus niger (50% de redução de substâncias tânicas). Em relação ao teor protéico, as proteínas geradas pelo crescimento fúngico não foram suficientes para resultar no enriquecimento, possivelmente apenas substituíram as que foram consumidas pelos mesmos

Analysis Of Soccer Players' Positional Variability During The 2012 Uefa European Championship: A Case Study

The purpose of this study was to analyse players' positional variability during the 2012 UEFA European Championship by applying principal component analysis (PCA) to data gathered from heat maps posted on the UEFA website. We analysed the teams that reached the finals and semi-finals of the competition. The players' 2D coordinates from each match were obtained by applying an image-processing algorithm to the heat maps. With all the players' 2D coordinates for each match, we applied PCA to identify the directions of greatest variability. Then, two orthogonal segments were centred on each player's mean position for all matches. The segments' directions were driven by the eigenvectors of the PCA, and the length of each segment was defined as one standard deviation around the mean. Finally, an ellipse was circumscribed around both segments. To represent player variability, segment lengths and elliptical areas were analysed. The results demonstrate that Portugal exhibited the lowest variability, followed by Germany, Spain and Italy. Additionally, a graphical representation of every player's ellipse provided insight into the teams' organisational features throughout the competition. The presented study provides important information regarding soccer teams' tactical strategy in high-level championships that allows coaches to better control team organisation on the pitch.47122523

LIDERANÇA COMO CARACTERÍSTICA EMPREENDEDORA

Introdução: O exercício da liderança nas organizações é fundamental pois é através do líder que se vê a interação e o planejamento em traçar as metas para que se possam atingir os objetivos pretendidos. O líder busca a opinião da equipe, a fim de saber o ponto de vista de cada um, e com base nas informações, encontrar a melhor maneira para a tomada de decisão. Organizações orientadas ao empreendedorismo favorece a iniciativa de funcionários para trazer soluções, propostas de mudanças e novas ideias para melhorar o trabalho, a qualidade, o desempenho e a eficácia de processo. Objetivos: Tem como objetivo geral esclarecer o papel de liderança do empreendedor perante o futuro das organizações. Os objetivos específicos foram: esclarecer o papel da liderança e do empreendedorismo; proporcionar uma análise sobre liderança empreendedora; identificar as características predominantes aplicadas nas organizações; relatar alguns aspectos de uma liderança eficaz. Metodologia: O desenvolvimento desta pesquisa foi realizado uma revisão literária, com levantamento de documentos como artigos, monografias e livros. Utilizou-se os seguintes descritores: empreendedores, liderança e a importância dos respectivos. A pesquisa foi realizada no banco de dados Google Acadêmico e Scielo (Scien tific Eletronic Library Online). Para seleção dos artigos foi usado os critérios de exclusão como documentos referentes ao tema e publicados. Considerações Finais: Conclui-se que todos os estudos que tratam de liderança e empreendedorismo considerados para o presente trabalho se preocupam com o esclarecimento e a delimitação dos conceitos nas organizações e a que liderança deve estar presente em todas as organizações, independente do seu tamanho, para que os padrões estabelecidos venham a gerar resultados satisfatórios, para que o processo ocorra conforme planejado e com segurança

Coumestrol has neuroprotective effects before and after global cerebral ischemia in female rats

AbstractGlobal ischemia arising during cardiac arrest or cardiac surgery causes highly selective, delayed death of hippocampal CA1 neurons. Phytoestrogens are naturally occurring plant-derived compounds that are present in the human diet and are considered selective estrogen receptor (ER) modulators. The phytoestrogen coumestrol is a potent isoflavonoid, with binding affinities for both ER-α and ER-β that are comparable to those of 17b-estradiol. The present study examined the hypothesis that coumestrol protects hippocampal neurons in ovariectomized rats in a model of cerebral global ischemia. Ovariectomized rats were subjected to global ischemia (10min) or sham surgery and received a single intracerebroventricular or peripheral infusion of 20μg of coumestrol, 20μg of estradiol or vehicle 1h before ischemia or 0h, 3h, 6h or 24h after reperfusion. Estradiol and coumestrol afforded significant neuroprotection in all times of administration, with the exception of estradiol given 24h after the ischemic insult. Animals received icv infusion of the broad-spectrum ER antagonist ICI 182,780 (50μg) or vehicle into the lateral ventricle just before the E2 or coumestrol administration. The ER antagonist abolished estradiol protection, consistent with a role of classical ERs. In contrast, ICI 182,780 effected only partial reversal of the neuroprotective actions of coumestrol, suggesting that other cellular mediators in addition to classical ERs may be important. Additional research is needed to determine the molecular targets mediating the neuroprotective action of coumestrol and the therapeutic potential of this phytoestrogen in the mature nervous system

Chromosomal mapping of rDNAs and H3 histone sequences in the grasshopper rhammatocerus brasiliensis (acrididae, gomphocerinae): extensive chromosomal dispersion and co-localization of 5S rDNA/H3 histone clusters in the A complement and B chromosome

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Supernumerary B chromosomes occur in addition to standard karyotype and have been described in about 15% of eukaryotes, being the repetitive DNAs the major component of these chromosomes, including in some cases the presence of multigene families. To advance in the understanding of chromosomal organization of multigene families and B chromosome structure and evolution, the distribution of rRNA and H3 histone genes were analyzed in the standard karyotype and B chromosome of three populations of the grasshopper <it>Rhammatocerus brasiliensis</it>.</p> <p>Results</p> <p>The location of major rDNA was coincident with the previous analysis for this species. On the other hand, the 5S rDNA mapped in almost all chromosomes of the standard complement (except in the pair 11) and in the B chromosome, showing a distinct result from other populations previously analyzed. Besides the spreading of 5S rDNA in the genome of <it>R. brasiliensis </it>it was also observed multiple sites for H3 histone genes, being located in the same chromosomal regions of 5S rDNAs, including the presence of the H3 gene in the B chromosome.</p> <p>Conclusions</p> <p>Due to the intense spreading of 5S rRNA and H3 histone genes in the genome of <it>R. brasiliensis</it>, their chromosomal distribution was not informative in the clarification of the origin of B elements. Our results indicate a linked organization for the 5S rRNA and H3 histone multigene families investigated in <it>R. brasiliensis</it>, reinforcing previous data concerning the association of both genes in some insect groups. The present findings contribute to understanding the organization/evolution of multigene families in the insect genomes.</p

A DEMANDA POR ALIMENTOS E O BEM-ESTAR DO CONSUMIDOR CAMPO-GRANDENSE

O padrão do consumo de alimentos de um indivíduo é resultado, basicamente, de seu poder aquisitivo. Pessoas com baixo poder aquisitivo tende a mostrar maior sensibilidade à variação de preços, onde uma elevação dos preços dos alimentos pode ocasionar alterações em seus hábitos alimentares. Sendo assim, este trabalho tem por objetivo verificar se alterações na renda dos consumidores e preços dos alimentos afetam os hábitos alimentares dos indivíduos de baixa renda. Nestes termos, para poder retratar bem os gastos das famílias tornam-se imprescindíveis revisões no índice de custo de vida e do bem-estar da população. Para tanto, este trabalho utilizará como ferramenta para o cálculo do índice do custo de vida os índices de Laspeyres, calculado por meio de fatores de ponderação determinados a partir de preços e de quantidades da época básica; índice de Paasche, o qual pondera os preços de insumos em duas épocas, inicial e atual , tomando como pesos às quantidades arbitradas para estes insumos na época atual e; índice de Fischer, que medido pela média geométrica dos índices de Laspeyres e Paasche.----------------------------------------------The pattern of the consumption of an individual's foods is resulted, basically, of his/her purchasing power. People with low purchasing power tend to show larger sensibility to the variation of prices, where an elevation of the prices of the foods can cause alterations in their eating habits. Being like this, this work has for objective to verify alterations in the consumers' income and prices of the foods affect the individuals' of low income eating habits. In these terms, to portray the expenses of the families well they become indispensable revisions in the cost of living index and of the well-being of the population. For so much, work will use as tool for the calculation of the index of the cost of living the indexes of Laspeyres, made calculations through certain consideration factors starting from prices and of amounts of the basic time; index of Paasche, which considers the prices of inputs in two times, initial and current, taking about weights to the amounts arbitrated for these inputs at that time current and; index of Fischer, that measured for the geometric mean of the indexes of Laspeyres and Paasche.: Consumo de alimentos, Bem-estar do consumidor, Índice de custo de vida, Consumption of foods, the consumer's Well-being, cost of living Index, Food Consumption/Nutrition/Food Safety,

ELABORAÇÃO DO FASCÍCULO: “ESSE MUNDO DA LINGUAGEM!”

Neste artigo pretendemos apresentar o trabalho realizado na disciplina Estágio Supervisionado I e II, que consistiu na elaboração de um fascículo destinado a alunos da 9ª série do Ensino Fundamental, intitulado: “Esse mundo da Linguagem!”. Gostaríamos de apresentar as principais características do nosso fascículo que tem como objetivo principal levar o aluno de Língua Portuguesa a refletir sobre a sua própria língua