Un modelo en Drosophila del mecanismo de patogénesis de las expansiones ctg en la distrofia miotónica.

RESUMEN La distrofia miotónica tipo 1 (DM1) es una enfermedad neuromuscular que se debe a una expansión de repeticiones CTG inestables en la región 3 no traducida del gen proteína kinasa de la DM (DMPK). La DM1 se caracteriza por la miotonía y distrofia muscular que muestran los pacientes, los cuales también presentan cataratas, arritmias cardiacas y alteraciones neuropatológicas. A nivel bioquímico muestran defectos en el procesado alternativo de pre-mRNAs específicos lo cual explica algunos síntomas definitorios de la DM1. El mecanismo de patogénesis se debe a la toxicidad de los RNAs con expansiones CUG para la célula. Varias proteínas de unión a RNA, como las proteínas humanas Muscleblind-like MBNL1-3 son secuestradas por los transcritos mutantes DMPK. Las proteínas MBNL colocalizan con los foci ribonucleares CUG dentro de los núcleos de músculo y neuronas de pacientes DM1. Existen defectos asociados a DM1 en ratones knockout para Mbnl1 y en moscas mutantes muscleblind. Nos propusimos generar un modelo en Drosophila de la DM1 para entender su mecanismo molecular y celular. En primer lugar comprobamos que las proteínas Muscleblind de Drosophila y la humana MBNL1 eran homólogos funcionales. Un modelo basado en secuestrar la proteína Muscleblind endógena con RNAs portadores de repeticiones CUG sólo sería relevante desde el punto de vista biomédico si la proteína de Drosophila y la humana realizan funciones equivalentes. Una vez demostrada la conservación funcional entre ambas proteínas mediante el rescate del fenotipo mutante muscleblind expresando la proteína humana, generamos moscas transgénicas capaces de expresar 60 y 480 repeticiones CUG en un transcrito no codificante bajo el control del sistema GAL4/UAS. Detectamos que los RNAs de 480 repeticiones CUG formaban inclusiones nucleares y que Muscleblind era secuestrada por estos transcritos tal y como ocurre en pacientes DM1. La expresión de RNAs (CUG)480 en músculo mostró una reducción dependiente de la edad en el tamaño de la fibra de los músculos indirectos del vuelo y un aumento en el número de vacuolas. Analizamos el patrón de procesado de la α-actinina, un gen muscular, en moscas que expresan RNAs (CUG)480 y se observó una alteración en los niveles de isoformas. En pacientes también se ha descrito una degeneración en las células de la retina y una pérdida en las neuronas fotorreceptoras. Analizamos la retina de las moscas modelo que expresaban RNAs (CUG)480 en el disco de ojo-antena y mostraron alteraciones en la adhesión de las células subretinales y la falta de los rabdómeros de los fotorreceptores. Externamente mostraban un fenotipo de ojo rugoso y ligeramente más pequeño que utilizamos para comprobar mediante una combinación alélica de pérdida de función de muscleblind que las repeticiones CUG estaban interfiriendo genéticamente con la función de este gen. Realizamos una búsqueda de modificadores dominantes con este fenotipo ojo rugoso para identificar genes potencialmente relacionados con el mecanismo de patogénesis de la enfermedad. Identificamos los genes viking y thread entre otros como modificadores y los agrupamos en cinco categorías en función del proceso celular en el que estuvieran actuando; factores de transcripción reguladores, reguladores de la estructura de la cromatina, adhesión celular, apoptosis y metabolismo del RNA. Finalmente comprobamos in vivo si los RNAs CUG podían ser una fuente de siRNA o miRNAs. La expresión de estos RNAs de doble cadena incrementaron los niveles de transcritos de muscleblind por un mecanismo desconocido. En resumen, hemos demostrado que estas moscas reproducen aspectos de la enfermedad humana DM1 y pueden utilizarse para el estudio de la misma. __________________________________________________________________________________________________Myotonic dystrophy type 1 (DM1) is a neuromuscular disease involving the expansion of unstable CTG repeats in the 3´ untranslated region of the DM protein kinase (DMPK) gene. DM1 is multisystemic and characteristic features include myotonia, muscular dystrophy, cardiac arrhythmias, and neuropathology. A biochemical hallmark of DM1 is misregulated alternative splicing of specific skeletal muscle, heart and brain premRNAs. In mice, expression of 250 CUG repeats within a heterologous RNA gives rise to DM1-like phenotypes demonstrating that expanded CUG repeat transcripts are toxic to cells. RNA binding proteins, most notably human Muscleblind-like proteins MBNL1-3 are sequestered by mutant DMPK transcripts. MBNL proteins co-localize with CUG ribonuclear foci within muscle and neuron nuclei in DM1 patients. DM1-associated defects are remarkably similar to those observed in Mbnl1 knockout mice and muscleblind mutations in Drosophila provide additional examples of DM1-like alterations. To understand this toxic RNA gain-of-function mechanism we developed a Drosophila model expressing 60 and 480 CUG repeats in the context of a nontranslatable RNA. Previously, we showed that MBNL1 rescues a muscleblind loss-offunction phenotype, thus demonstrating functional conservation. CUG-expressing flies reproduced aspects of the DM1 pathology, including nuclear accumulation of CUG transcripts, dystrophic muscles that degenerate with age, splicing misregulation, and reduced Muscleblind activity (evident from the enhancement of CUG-induced phenotypes by a decrease in muscleblind dose). Targeted expression of CUG repeats to the developing eye was toxic originating eyes externally rough and smaller than normal. This phenotype was utilized to identify 15 genetic modifiers. These included viking and thread, which suggest cellular processes previously unknown to be altered by CUG repeat RNA such as cell adhesion, programmed cell death, nuclear-cytoplasm export complex ECJ, and chromatin remodelling. We also explored the possibility that CUG repeat RNA could be a source of small interfering RNAs, thus silencing transcripts containing complementary sequences such as muscleblind transcript themselves. Surprisingly, we detected an increase of muscleblind mRNA in CUGexpressing flies. To sum up, here we describe Drosophila flies that reproduce aspects of the human disease DM1 and that can find application in the study of DM1

La Didáctica de las Ciencias Experimentales en el Grado en Maestro/a de Educación Primaria

XIX Jornades de Foment de la Investigació de la Facultat de Ciències Humanes i Socials (Any 2014)Los estudios universitarios se consideran una etapa educativa avanzada que requiere una implicación relevante del estudiante y del profesorado. Concretamente en el Grado en Maestro/a de Educación Primaria se proporcionan conocimientos, actitudes y habilidades para que los futuros maestros/as sean autónomos y eficaces en la escuela. En general, aquellos cursos y/o asignaturas con base teórica o no directamente aplicada generan apatía en el estudiante y en este sentido, la Didáctica de las Ciencias Experimentales es comúnmente percibida como demasiado formal, abstracta y su puesta en práctica no despierta interés en el alumnado. A finales del curso 2013/14 se realizó un estudio sobre el alumnado de 2º curso para cuantificar el interés por la Didáctica de las Ciencias y su capacidad para enseñar y promocionar las Ciencias en la escuela. Los resultados mostraron que los alumnos carecen de cierto perfil científico pues llevan muchos años sin cursar Ciencias. De esta forma resulta poco probable su futura implicación en Ciencia y su promoción en la escuela. El interés por la Ciencia desde el inicio hasta el final del curso mejoraba sensiblemente pero aun así, la valoración final es inferior a la esperada. Por último, conviene destacar que aproximadamente el 30% del alumnado encuestado no se siente capacitado para enseñar Ciencias en la escuela. Para mejorar la percepción de la Ciencia se proponen una serie de propuestas entre las que destacan una mayor interacción profesor/alumno para desarrollar actividades docentes en el aula escolar. Paralelamente se plantea que el docente universitario se implique en cursos de formación del profesorado para mejorar la transferencia de conocimiento. También se tratará de mejorar la interacción Ciencia-Tecnología-Sociedad con el fin de promocionar la Ciencia en la vida real y que esta situación sea interpretable por los estudiantes. Por último, promocionar la investigación en Didáctica de las Ciencias y aportar una visión crítica serían también pilares básicos sobre los que mejorar la docencia y despertar el interés de la Ciencia en los alumnos

Métodos inmunológicos para la detección de cambios en el sistema dopaminérgico: western blot y neurohistología para la detección de DARPP-32

La detección de cambios en los niveles de un neurotransmisor, como la dopamina o de su cascada metabotrópica que se inicia con la activación de sus receptores tras la realización de una conducta o un tratamiento farmacológico en estructuras cerebrales concretas, puede ser realizada con técnicas inmunológicas. Los métodos inmunoquímicos en general se fundamentan en la utilización de anticuerpos específicos para el marcaje de una proteína concreta. En el caso de que se quiera localizar la proteína en áreas o neuronas concretas por inmunohistología, los anticuerpos unidos a enzimas (peroxidasa o fosfatasa) o a fluorocromos aplicados a cortes histológicos de cerebro, se unen a la proteína antigénica de interés permitiendo su marcaje mediante una reacción colorimétrica o emisión de fluorescencia, respectivamente. Esta técnica nos ofrece la oportunidad de realizar un mapeado cerebral y observar en qué regiones la proteína de interés está presente y en qué medida. Por ejemplo, se han utilizado estas técnicas para el marcaje y/o cuantificación de algunos marcadores dopaminérgicos, como el DARPP -32, en el núcleo accumbens. Además, esa proteína puede ser cuantificada mediante la técnica western blot (WB). El WB requiere de la homogeneización del tejido, desnaturalización de proteínas y su separación por peso molecular mediante electroforesis y da como resultado una reacción quimioluminiscente detectable por una película fotográfica. Ambas técnicas son complementarias, pues ofrecen información de localización y permiten cuantificar la proteína.Detecting changes in the levels of a neurotransmitter such as dopamine or changes in the metabotropic cascade initiated by the activation of its receptors in specific brain structures after performing a behavior or receiving a specific drug therapy, can be accomplished with immunological techniques. Immunochemical methods are based onthe affinity of antibodies for a particular protein. The antibodies are bound to a marker that provides color or fluorescence. In the immunohistological methods, after the antibody is applied to a specific brain section where the antigenic protein is localized, neurons containing the targeted protein show the color or fluorescence, and they can be identified and quantified by microscopy and imaging processing techniques. For example, these techniques have been used for the localization and quantification of some dopaminergic markers such as DARPP -32, in the nucleus accumbens. This protein can be quantified also by western blotting (WB). The WB requires tissue homogenization, protein denaturalization and separation of proteins by molecular weight with electrophoresis, and results in a detectable chemiluminescent reaction by an X-ray film. Both techniques complement each other providing information about localization, as well as quantity of protein present in the tissue

Interacción entre receptores d2 y a2a. Toma de decisiones basada en el esfuerzo mediante un Programa de Razón Progresiva en ratas

Uno de los síntomas motivacionales característicos de la depresión y que supone un mayor problema para la realización de tareas cotidianas, es la anergia. Este síntoma supone una disminución del vigor y el esfuerzo que el sujeto está dispuesto a realizar para conseguir un objetivo. Las bases neurales de la anergia pueden estudiarse en el laboratorio mediante modelos animales, induciéndose a través de antagonistas dopaminérgicos. En el presente estudio, analizamos los efectos de la manipulación farmacológica del sistema dopaminérgico mediante el antagonismo de los receptores D2 (eticlopride). Como tratamiento que revierta estos síntomas administraremos MSX3, un antagonista de los receptores de adenosina A2a, los cuales están colocalizados con los receptores D2 y tienen efectos opuestos a éstos. Para evaluar los efectos conductuales de estas manipulaciones utilizamos un paradigma operante en el que el animal debe realizar cada vez más esfuerzo (apretando un mayor número de veces una palanca, Programa de Razón Progresiva, PROG) para conseguir una comida más apetecible, o tiene la opción de comer libremente otro tipo de comida menos sabrosa pero de libre acceso (chow). Los resultados demuestran que fármacos que interfieren con la transmisión de DA reducen el nivel de esfuerzo que el animal está dispuesto a realizar cuando tiene opciones menos costosas. Los antagonistas A2a revierten estos efectos y tienen potencial como fármacos para el tratamiento de la anergia en la depresión y en otras patologías como el Parkinson o el síndrome de fatiga crónica.People with depression not only display alterations in mood or affect, but also can show profound motivational impairments such as anergia. Mesolimbic dopamine (DA) is involved in behavioral activation and effort-related processes. Rats with impaired DA transmission reallocate their instrumental behavior away from food-reinforced tasks with high response requirements, and instead select less effortful food-seeking behaviors. DA receptors are colocalized with adenosine receptors but have opposite effects in the intracellular cascade. Thus, adenosine receptors can be a target for therapeutical approaches. In the present study, we used a progressive ratio (PROG)/chow feeding concurrent choice task. With this task, rats can lever press on a pr og schedule reinforced by a preferred high-carbohydrate food pellet, or alternatively approach and consume the less preferred but concurrently available laboratory chow. The DA D2 antagonist eticlopride reduced highest ratio achieved but did not reduce chow intake. In contrast, the A2a antagonist MSX3 coadministrated with eticlopride reversed the effects of the interference with DA transmission

El ejercicio forzado previene la anergia inducida por la depleción de dopamina. Estudios comparando la selección entre actividad física o la ingesta de alimentos dulces

Disfunciones relacionadas con el esfuerzo como la anergia y la fatiga son síntomas centrales de la depresión y otros trastornos. El sistema dopaminérgico (DA) mesolímbico desempeña un papel crítico en la activación de la conducta. Sin embargo, se ha demostrado que la depleción da no cambia la preferencia cuando no se requiere realizar esfuerzo en la adquisición del reforzador. Aun así, cuando una concentración alta de sucrosa requiere trabajo, los roedores con depleción da reducen el esfuerzo necesario para obtener la concentración preferida pero aún así compensan consumiendo sucrosa menos dulce de libre acceso. En el presente estudio, hemos desarrollado una tarea en un laberinto en T para ratones que nos permita evaluar la preferencia entre tres diferentes tipos de reforzadores situados cada uno en uno de los brazos: actividad física como la condición de refuerzo que requiere un alto esfuerzo, un plato con bolitas de sucrosa de libre acceso, y un agujero en el que se localiza un olor neutro. Los ratones muestran preferencia, de manera innata, por el ejercicio físico y esto es dependiente de las condiciones homeostáticas del animal (si está hambriento o saciado). Por otro lado, observamos un incremento de la preferencia por rodar en la rueda de actividad cuando la comida dulce se devalúa (se le añade un sabor amargo). Los animales que reciben tetrabenazina, un depletor DA que inhibe de manera reversible el transportador vesicular de monoaminas de tipo 2 (VMAT2), demostraron reducir su preferencia por el ejercicio físico, pero aumentaron el consumo de sucrosa de libre acceso. Así pues la reducción de DA produce síntomas de anergia (falta de energía) aunque no de anhedonia (falta de apreciación de las propiedades gustativas apetecibles de la sucrosa).Effort-related dysfunctions such as anergia and fatigue are core symptoms of depression and other disorders. Dopamine (DA) systems play a critical role in behavioral activation. However, previous studies have shown that DA depletion does not change sucrose consumption or preference when no effort is involved in procuring this reinforcer. Nevertheless, when the preferred sucrose concentration requires work, rodents with DA depletions reduce the work output for the preferred highly concentrated sucrose drink but compensate by consuming more of the less sweet but freely available sucrose fluid. In the present studies, we have developed mice T-maze tasks for the assessment of preference between three different type of reinforcers: engagement in physical activity as the high effort reinforcing condition, a dish with freely available sucrose pellets, and a non-social (neutral) odor in the third arm. Mice show an important preference by the physical exercise, and this preference depends on the animal’s homeostatic conditions (satiety or hunger). Moreover, preference for the running wheel increases when the sweet food is devalued. In the present studies, tetrabenozine, a selective and reversible vesicular monoamine transporter-2 (VMAT2) inhibitor reduced preference for physical exercise, but increased sucrose consumption. Thus the reduction of DA produces symptoms of anergy (lack of energy) but not anhedonia (lack of enjoyement of the sucrose taste)

Situaciones para el aprendizaje de las ciencias en infantes de 3 y 4 años en el huerto escolar

In educational centers there should be natural means to promote a healthy lifestyle among the educational community. An example of this natural environment could be the school garden, since its use has different benefits both for the students' academic performance and for the lifestyle of their environment. In this work we propose the elaboration of two didactic sequences working in an interdisciplinary way in the areas of mathematics and experimental sciences, as well as their application in two educational centers: in the school garden of a school in Benicarló, with pupils of four years old and in a school in Torreblanca without a school garden, with pupils of three years old.En los centros educativos deben existir medios naturales para fomentar una vida saludable entre la comunidad educativa. Un ejemplo de este medio natural podría ser el huerto escolar, ya que su uso conlleva diferentes beneficios tanto para el rendimiento académico del alumnado como en el estilo de vida de su entorno. En este trabajo se propone la elaboración de dos secuencias didácticas trabajando de manera interdisciplinar las áreas de Matemáticas y Ciencias Experimentales, así como su aplicación en dos centros educativos: en el huerto escolar de un colegio de Benicarló, con el alumnado de Educación Infantil de cuatro años y en un colegio de Torreblanca sin huerto escolar, con el alumnado de tres años

Pautes per a elaborar el Treball Final de Grau al Grau de Mestre i Mestra d’Educació Primària

Grau de Mestre i Mestra d’Educació Primaria. Codi assignatura: MP1040 - Treball Fi de Gra

Intracellular calcium chelation with BAPTA-AM modulates ethanol-induced behavioral effects in mice

Calcium (Ca2+) has been characterized as one of the most ubiquitous, universal and versatile intracellular signaling molecules responsible for controlling numerous cellular processes. Ethanol-induced effects on Ca2+ distribution and flux have been widely studied in vitro, showing that acute ethanol administration can modulate intracellular Ca2+ concentrations in a dose dependent manner. In vivo, the relationship between Ca2+ manipulation and the corresponding ethanol-induced behavioral effects have focused on Ca2+ flux through voltage-gated Ca2+ channels. The present study investigated the role of inward Ca2+ currents in ethanol-induced psychomotor effects (stimulation and sedation) and ethanol intake. We studied the effects of the fast Ca2+ chelator, BAPTA-AM, on ethanol-induced locomotor activity and the sedative effects of ethanol. Swiss (RjOrl) mice were pretreated with BAPTA-AM (0–10 mg/kg) 30 min before an ethanol (0–4 g/kg) challenge. Our results revealed that pretreatment with BAPTA-AM prevented locomotor stimulation produced by ethanol without altering basal locomotion. In contrast, BAPTA-AM reversed ethanol-induced hypnotic effects. In a second set of experiments, we investigated the effects of intracellular Ca2+ chelation on ethanol intake. Following a drinking-in-the-dark methodology, male C57BL/6J mice were offered 20% v/v ethanol, tap water, or 0.1% sweetened water. The results of these experiments revealed that BAPTA-AM pretreatment (0–5 mg/kg) reduced ethanol consumption in a dose-dependent manner while leaving water and sweetened water intake unaffected. Our findings support the role of inward Ca2+ currents in mediating different behavioral responses induced by ethanol. Our results are discussed together with data indicating that ethanol appears to be more sensitive to intracellular Ca2+ manipulations than other psychoactive drugs

The heartbeat from an interdisciplinary education perspective

This proposal is based on the design of an educational project dealing with the horizontal coordination of subjects taught in the second year of the Bachelor's Degree in Primary School Education at the Universitat Jaume I in Castellón, Spain. The project incorporates three subject areas: Music, Mathematics Education and Natural Sciences Education.We take the heartbeat as the core thematic focus. The physiology of the circulatory system and the evolution of the heart throughout the animal kingdom, the whole and rational numbers, and the rhythmic movements in the creation of soundscapes are some of the concepts included in the design of the activities.A preliminary analysis shows important information about the students’ motivation, interests and predispositions to reinforce their education using project-based learning and the value they give to interdisciplinary education

Estudiando los polinizadores en el contexto del huerto ecodidáctico universitario: presentación de una SEA

Se presenta una Secuencia de Enseñanza-Aprendizaje (SEA) para maestros en formación inicial, así como los resultados obtenidos tras dos implementaciones consecutivas en dos universidades diferentes, con una fase de rediseño entre ambas. Su objetivo es promover el conocimiento sobre la reproducción vegetal, la importancia de la polinización entomófila y los grupos taxonómicos de polinizadores de la Península Ibérica. Su diseño se planteó desde una estrategia de enseñanza de las ciencias en contexto, utilizando los huertos ecodidácticos como contextos reales, e incluyendo entre sus actividades el uso del dibujo científico para la enseñanza-aprendizaje de la anatomía (flor y polinizadores), y la realización de experiencias prácticas, incluyendo un muestreo de polinizadores del huerto, que se hizo siguiendo un programa de ciencia ciudadana británico, traducido y adaptado. Se evalúan su implementación piloto (n=21, Universitat Jaume I) y la implementación de la secuencia mejorada (n=41, Universidad de Valladolid), en base al análisis de las respuestas que dieron los estudiantes a un cuestionario combinando preguntas abiertas y cerradas que se les planteó inicial y finalmente, en el que se solicitaban también representaciones gráficas. Respecto a las plantas, se observaron ideas iniciales erróneas sobre la reproducción sexual, como no considerar la existencia de flores hermafroditas, o de plantas monoicas; la creencia de que existen angiospermas sin flores; la asociación de flor con polen, pero no con óvulos; o la conceptualización del polen en base a su aspecto y no a su función, que mejoraron tras la instrucción, particularmente en la Universidad de Valladolid. Respecto a polinizadores, la segunda implementación conllevó mejoras notables en el aprendizaje sobre su anatomía, diversidad, y clasificación taxonómica. Se discuten potenciales mejoras para esta SEA, conectándose así su diseño con la investigación educativa. Palabras clave: Ciencia ciudadana; Dibujo científico; Enseñanza de las ciencias en contexto; Formación inicial de maestros; Investigación Basada en Diseño; Polinizadores; Secuencia de Enseñanza-Aprendizaje (SEA). Studying pollinators in the context of the university organic learning garden: a teaching-learning sequence Abstract: A Teaching-Learning Sequence (TLS) for pre-service teachers is introduced, together with the results obtained after two consecutive implementations at two different universities, with a redesign phase between them. Its objective is promoting knowledge about plant reproduction, the importance of entomophile pollination, and the taxonomic groups of pollinators in the Iberian Peninsula. Its design was approached from a strategy of science education in context, by using learning gardens as real contexts, and including among its activities the use of scientific drawing for teaching-learning on anatomy (flowers and pollinators), and the realization of practical experiences, including a sampling of garden’s pollinators, that was conducted by following a British citizen science program, translated and adapted. Its pilot implementation (n=21, Universitat Jaume I) and the implementation of the improved sequence (n=41, Universidad de Valladolid) are assessed based on the analysis of the responses given by students to a questionnaire that was conducted both initially and finally, including open and closed questions, and also graphic representations. Regarding plants, initial erroneous ideas on sexual reproduction were observed, such as obviating hermaphroditic flowers, or monoecious plants; the belief that there are angiosperms without flowers; associating flowers with pollen, but not with ovules; or a concept of pollen based on its external appearance instead of its function. All such ideas improved after instruction, particularly at Universidad de Valladolid. Regarding pollinators, the second implementation led to notable improvements in learning about their anatomy, diversity, and taxonomic classification. Potential improvements for the TLS are discussed, thus connecting its design with educational research. Keywords: Citizen science; Initial teacher training; Pollinators; Research-Based Design; Science education in context; Scientific drawing; Teaching-Learning Sequence (TLS).Se presenta una Secuencia de Enseñanza-Aprendizaje (SEA) para maestros en formación inicial, así como los resultados obtenidos tras dos implementaciones consecutivas en dos universidades diferentes, con una fase de rediseño entre ambas. Su objetivo es promover el conocimiento sobre la reproducción vegetal, la importancia de la polinización entomófila y los grupos taxonómicos de polinizadores de la Península Ibérica. Su diseño se planteó desde una estrategia de enseñanza de las ciencias en contexto, utilizando los huertos ecodidácticos como contextos reales, e incluyendo entre sus actividades el uso del dibujo científico para la enseñanza-aprendizaje de la anatomía (flor y polinizadores), y la realización de experiencias prácticas, incluyendo un muestreo de polinizadores del huerto, que se hizo siguiendo un programa de ciencia ciudadana británico, traducido y adaptado. Se evalúan su implementación piloto (n=21, Universitat Jaume I) y la implementación de la secuencia mejorada (n=41, Universidad de Valladolid), en base al análisis de las respuestas que dieron los estudiantes a un cuestionario combinando preguntas abiertas y cerradas que se les planteó inicial y finalmente, en el que se solicitaban también representaciones gráficas. Respecto a las plantas, se observaron ideas iniciales erróneas sobre la reproducción sexual, como no considerar la existencia de flores hermafroditas, o de plantas monoicas; la creencia de que existen angiospermas sin flores; la asociación de flor con polen, pero no con óvulos; o la conceptualización del polen en base a su aspecto y no a su función, que mejoraron tras la instrucción, particularmente en la Universidad de Valladolid. Respecto a polinizadores, la segunda implementación conllevó mejoras notables en el aprendizaje sobre su anatomía, diversidad, y clasificación taxonómica. Se discuten potenciales mejoras para esta SEA, conectándose así su diseño con la investigación educativa. Palabras clave: Ciencia ciudadana; Dibujo científico; Enseñanza de las ciencias en contexto; Formación inicial de maestros; Investigación Basada en Diseño; Polinizadores; Secuencia de Enseñanza-Aprendizaje (SEA). Studying pollinators in the context of the university organic learning garden: a teaching-learning sequence Abstract: A Teaching-Learning Sequence (TLS) for pre-service teachers is introduced, together with the results obtained after two consecutive implementations at two different universities, with a redesign phase between them. Its objective is promoting knowledge about plant reproduction, the importance of entomophile pollination, and the taxonomic groups of pollinators in the Iberian Peninsula. Its design was approached from a strategy of science education in context, by using learning gardens as real contexts, and including among its activities the use of scientific drawing for teaching-learning on anatomy (flowers and pollinators), and the realization of practical experiences, including a sampling of garden’s pollinators, that was conducted by following a British citizen science program, translated and adapted. Its pilot implementation (n=21, Universitat Jaume I) and the implementation of the improved sequence (n=41, Universidad de Valladolid) are assessed based on the analysis of the responses given by students to a questionnaire that was conducted both initially and finally, including open and closed questions, and also graphic representations. Regarding plants, initial erroneous ideas on sexual reproduction were observed, such as obviating hermaphroditic flowers, or monoecious plants; the belief that there are angiosperms without flowers; associating flowers with pollen, but not with ovules; or a concept of pollen based on its external appearance instead of its function. All such ideas improved after instruction, particularly at Universidad de Valladolid. Regarding pollinators, the second implementation led to notable improvements in learning about their anatomy, diversity, and taxonomic classification. Potential improvements for the TLS are discussed, thus connecting its design with educational research. Keywords: Citizen science; Initial teacher training; Pollinators; Research-Based Design; Science education in context; Scientific drawing; Teaching-Learning Sequence (TLS)