Relación entre enfermedad periodontal, niveles de cortisol en saliva y Porphyromonas gingivalis en pacientes que asisten al Centro de Clínicas Odontológicas de la Universidad de Talca entre julio y agosto del 2014

92 p.INTRODUCCION: La enfermedad periodontal es una patología de carácter inflamatorio y etiología multifactorial, cuyo principal factor etiológico es el biofilm dental que se encuentra compuesto por múltiples especies bacterianas, dentro de las que destacan Porphyromonas gingivalis. Si bien la etiología microbiana está ampliamente aceptada, es insuficiente para explicar la progresión de ésta, es por esto mismo, que en la actualidad estudios apuntan a que factores inherentes a la placa dental tales como estrés psicosocial influyen en el inicio y velocidad de progresión de ésta patología. La correlación significativa que se ha observado entre estrés y enfermedad periodontal tiene sus cimientos en que frente a la exposición del huésped a condiciones estresantes se estimula la liberación de biomarcadores tales como el cortisol, el cual, en altos niveles puede revelar un aumento del riesgo a padecer periodontitis crónica conllevando a cambios a nivel inmunológico, clínico y microbiológico en el huésped. Nuevas líneas investigativas apuntan a una posible correlación entre niveles elevados de cortisol y la composición de la microbiota subgingival pudiendo afectar el crecimiento de periodontopatógenos, ya sea de forma positiva o negativa; Es por esto mismo, que es necesario dilucidar si existe una relación entre niveles de cortisol en saliva con la cuantificación de Porphyromonas gingivalis y enfermedad periodontal. OBJETIVO: Comparar el diagnóstico periodontal con los niveles de cortisol en saliva y la cuantificación de Porphyromonas Gingivalis en pacientes que asisten al Centro de Clínicas Odontológicas de la Universidad de Talca entre julio y agosto del 2014.MATERIALES Y MÉTODOS: Se estudiaron 61 individuos adultos (≥ 18 años) quienes fueron sometidos a un examen clínico periodontal, examen inmunológico de saliva (Test de Elisa) y examen microbiológico molecular (PCR en tiempo real), estos tres exámenes se realizaron para determinar diagnóstico periodontal, cuantificar concentración de cortisol en saliva y cuantificación de P. gingivalis.RESULTADOS: No se encontraron interacciones entre diagnóstico periodontal, niveles de cortisol y cuantificación de P. gingivalis (ANOVA paramétrica, Valor p = 0,49 > 0,05). CONCLUSION: No existe interacción (Valor p > 0,05) entre diagnóstico periodontal, niveles de cortisol y cuantificación de P. gingivalis en pacientes que asistieron al Centro de Clínicas Odontológicas de la Universidad de Talca entre julio y agosto del 2014.PALABRAS CLAVES: enfermedad periodontal, estrés crónico, cortisol, P. gingivali

Determinación de los niveles de calcio y pH en saliva estimulada y su relación con la formación de tártaro supragingival en alumnos de Odontología de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad de Talca, entre los meses de agosto y octubre del año 2014

86 p.INTRODUCCIÓN: En la actualidad existe poca información sobre la concentración de calcio aumentada en la saliva y su relación con la formación de tártaro, a pesar que el calcio es uno de los principales iones necesarios para la mineralización del biofilm y la posterior formación del tártaro dental. Los iones inorgánicos (fosfatos de calcio principalmente) necesarios para la mineralización provienen de la saliva, por lo tanto la fuente de minerales de la que se nutre el tártaro supragingival es la saliva, lo que explica su distribución en las superficies dentales en relación a los conductos de salida de las glándulas salivales mayores principalmente. El medio ideal para que se produzca la precipitación de fosfatos de calcio es el de pH alcalino (>7,5) de la saliva. Esto favorecería la aparición y la progresión de la enfermedad periodontal. La saliva, como un espejo de la salud oral y sistémica, es una valiosa fuente de información de relevancia clínica. Es por esto, que se ha propuesto estudiar el calcio en saliva, ya que es método rápido, fácil y no invasivo para los pacientes. OBJETIVO: Establecer si existe relación entre la concentración de calcio y el pH en saliva estimulada con la formación de tártaro supragingival. MATERIALES Y MÉTODO: 33 individuos, estudiantes de la carrera de Odontología de la Universidad de Talca durante el año 2014, no fumadores, sin hiposialia, que no usaban colutorios a base de clorhexidina ni estuviesen consumiendo suplementos de calcio. Se les tomó muestras de saliva estimulada y se midieron los niveles de tártaro supragingival a través de dos índices: Índice de Greene y Vermillión Simplificado e índice de Superficie de Cálculo. Las muestras de saliva fueron procesadas a través de espectrofotometría de luz uv-visible. RESULTADOS: De manera observacional se pudo ver que a mayor concentración de calcio en saliva estimulada existe una tendencia a una menor formación de tártaro en todos los tiempos, según Índice de Greene y Vermillión Simplificado, a excepción del tiempo 1 donde no hubo formación de tártaro por ser la sesión post destartraje. En cuanto al pH la tendencia indica que no hubo diferencia entre los niveles de éste y la formación de tártaro según ambos índices utilizado (GVS y CSI), sólo en el tiempo 2 se observa una mayor tendencia a la formación de tártaro a un pH más elevado (según GVS). Estadísticamente, sólo se encontró una correlación lineal directa muy débil del 39,9% entre pH y formación de tártaro según Índice de Superficie de Cálculo (CSI) en el tiempo 2 y una correlación lineal muy débil de un 39,3% entre la concentración de calcio y la formación de tártaro según el Índice de Superficie de Cálculo (CSI) en el tiempo 3. CONCLUSIÓN: No se puede establecer una relación entre la formación de tártaro, el pH y los niveles de calcio en saliva estimulada. Es posible que la cantidad de tiempo o las variables individuales como la dieta o la higiene oral pudiesen estar influyendo en la determinación de relaciones estadísticamente significativas. PALABRAS CLAVE: enfermedad periodontal, biofilm, tártaro dental, calcio, saliva, pH salival

Correlación entre la formación de tártaro supragingival, niveles de fosfato y pH alcalino en saliva estimulada, medida mediante espectrofotometria de luz visible, en alumnos de Odontología en el Centro de Clínicas Odontológicas de Universidad de Talca durante los meses de agosto – octubre del año 2014

71 p.INTRODUCCIÓN: La enfermedad periodontal es una de las patologías más frecuentes y afecta a cerca del 90% de la población en el mundo. El factor etiológico de la enfermedad periodontal, es la placa bacteriana o biopelícula y su principal factor retentivo es el tártaro dental, el que está constituido principalmente por los minerales de calcio y fosfato, los que pueden ser precipitados desde la secreción de saliva estimulada Por otra parte el pH alcalino en la cavidad bucal, conforma el medio ideal para que se produzca la precipitación de fosfatos. Esto favorecería la aparición, progresión y mantención de la enfermedad periodontal. Es por esto que se ha propuesto estudiar a la concentración de fosfato y el nivel de pH, para establecer a estas variables como factores predictores de precipitación y formación de tártaro OBJETIVO: Determinar la relación entre la formación de tártaro supragingival, niveles de fosfato y pH, en saliva estimulada, en alumnos de Odontología en el centro de clínicas odontológicas de la Universidad de Talca entre los meses de Agosto- Octubre en el año 2014 SUJETOS Y METODO: Se escogieron 33 sujetos, alumnos de tercero a sexto año de la carrera de Odontología de la Universidad de Talca, a todos ellos se les registro a través de los índices de Greene y Vermillion e Índice de cálculo de superficie y medición del nivel de PH Salival, en un tiempo inicial, posteriormente se les realizó terapia mecánica periodontal y luego se les realizaron controles a los 7, 30 y 60 días. En el cual se controlaron los índices periodontales, toma de muestra salival, cuantificación de las concentraciones de fosfato en saliva estimulada mediante Espectrofotometria UV-visible y medición de pH. Los datos fueron recolectados por dos examinadores calibrados y luego fueron analizados mediante el programa estadístico SPSS (Statistical Package for Social Sciences) versión 15.0 e InfoStat versión 2008 para sistema operativo Windows, utilizando un nivel de significancia de 5%. RESULTADOS: No existe correlación estadísticamente significativa entre la concentración de fosfato en saliva estimulada, la presencia de tártaro y el nivel de pH salival, en los diferentes tiempos de la investigación. (Pearson, valor p>0,05). CONCLUSIÓN: No se puede establecer que la concentración de fosfato soluble en la saliva estimulada y el nivel pH, sean factores predictores de precipitación y formación de tártaro supragingival

Descubrimiento y caracterización de ARN no codificantes involucrados en la regulación de la fermentación alcohólica en saccharomyces cerevisiae

Tesis (Doctor en Biotecnología)La levadura induce reprogramaciones transcripcionales para tolerar el desafiante y a la vez, cambiante ambiente que se desarrolla durante la fermentación alcohólica. Los mecanismos sistémicos que controlan este proceso no han sido completamente dilucidados. En este trabajo, datos del transcriptoma de la levadura obtenidos por análisis seriado de expresión génica (SAGE) revelaron actividad transcripcional en regiones intergénicas, mediante mapeo de etiquetas NORF (regiones de lectura no abiertas). El ARN no codificante largo de tipo intergénico con la mayor sobre-expresión en la fase estacionaria tardía de la fermentación alcohólica, fue caracterizado por estudios fisiológicos y por análisis transcriptómico de microarreglos en una cepa mutante nula para este ARN. Las evidencias sugieren que este ARN no codificante participa en la modulación de la actividad regulatoria de los factores de transcripción ADR1 y AFT2, los cuales cumplen un papel relevante durante la fase estacionaria de la fermentación alcohólica, la que se asocia con condiciones estresantes, tales como agotamiento de nutrientes y concentraciones tóxicas de etanol. Además, desde este conjunto de datos fueron descubiertos ARNs de antisentido (asARN) y luego caracterizados funcionalmente. En su conjunto, las evidencias sugieren fuertemente que estos ARNs no codificantes corresponden a asARNs que juegan un rol regulatorio en la fase estacionaria de la fermentación alcohólica mediante el silenciamiento de genes diferencialmente expresados en S. cerevisiae. Estos genes están involucrados en metabolismo respiratorio y la composición de la membrana, los cuales podría estar implicados en procesos de adaptación a las condiciones estresantes de la fase estacionaria de la fermentación.Yeast induces transcriptional reprogramming to tolerate the increasingly challenging environment that develops during alcoholic fermentation . Systemic mechanisms that control this process are not fully understood yet. In this work, serial analysis of gene expression (SAGE) transcriptomic data revealed , by NORF (Non Open Reading Frame) tags mapping , transcriptional activity across long intergenic regions. The long intergenic non-coding (nc) RNA up-regulated highest at late-stationary phase was characterized by microarray experiments, performed in a yeast strain knock out for this RNA. The evidences suggest that this ncRNA participates in the modulation of the activity of regulatory transcription factors ADR1 and AFT2 during stationary phase of alcoholic fermentation, which is associated with stressing conditions, such as nutrient depletion and toxic ethanol levels. Furthermore, antisense (as) RNAs were discovered from this data set and then functionally characterized. Altogether, the evidences strongly suggest that these ncRNAs are asRNAs that play a regulatory role at late-stationary phase of alcoholic fermentation by silencing of specific differentially expressed genes S. cerevisiae. These genes are involved in respiratory metabolism and membrane composition, which might have implications in adaptation process to stressing conditions from stationary phase

Diagnósticos estructurales en los sistemas de producción de ganadería doble propósito en el municipio Alberto Arvelo Torrealba del estado Barinas (Structural diagnostics in the cattle dual purpose production systems in the municipality Alberto Arvelo Torrealba in the Barinas state of Venezuela)

The objective of this work was to carry out a structural diagnostic in 30 raising cattle farms under a double purpose system in the Alberto Arvelo Torrealba municipality, Barinas state in Venezuela. It was applied the methodology of technical, structural, functional diagnoses and continuous improvement in the systems of production of milk and meat with bovine. The data were analyzed by multivariate statistical methods using the factorial analysis of multiple correspondences and the upward hierarchical classification, in the statistical package CSTAT. There were considered the following variables: Income for milk, staying time of the producer in the property, females in the herd, cows with medium grade of European inheritance, calves with more than a half of European inheritance, size of the property, working capital, and the quality of the milk (acidity). The analysis generated three modalities with different intensities of milk production: 1) eight properties with directionality toward the meat production, defined as double purpose meat-milk, 2) eighteen properties with directionality for the production of milk classified as double purpose milk-meat, and 3) four properties with a tendency to look for a balance in the production of milk and meat, identified as indefinite double purpose. The variables with higher contribution for the conformation of the productive were: 24.50, 17.42, 14.03 and 12.69% for the calves with European inheritance, females in the herd, milk and working capital, respectively. The study showed that the systems of double purpose cattle raising in the area under study were structurally variable. The structural studies are indispensable for the knowledge in detail and the establishment of bases to foment the transformations and their continuous improvement. RESUMEN El presente trabajo tiene como objetivo realizar un diagnóstico estructural en 30 fincas de doble propósito en el municipio Alberto Arvelo Torrealba, estado Barinas, Venezuela. Se aplicó la metodología de diagnósticos técnicos, estructurales, funcionales y mejoramiento continuo en los sistemas de producción de leche y carne con vacunos. Los datos se analizaron por métodos estadísticos multivariados, mediante el análisis factorial de correspondencias múltiples y clasificación ascendente jerárquica, contenidos en el paquete estadístico CSTAT. Se consideraron las siguientes variables: ingreso por leche, tiempo de permanencia del productor en la finca, hembras en el rebaño, vacas con mediano grado de herencia europea, becerros con más de ½ de herencia europea, tamaño de la finca, capital de trabajo y la calidad de la leche (acidez). El análisis generó tres modalidades con distintas intensidades de producción de leche: 1) ocho fincas con direccionalidad hacia la producción de carne, definida como doble propósito carne-leche, 2) 18 fincas con direccionalidad para la producción de leche clasificada como doble propósito leche-carne y 3) cuatro fincas tendientes a buscar un equilibrio en la producción de leche y carne ubicadas como doble propósito indefinida. Las variables de mayor contribución para la conformación de las modalidades productivas fueron: 24,50, 17,42, 14,03 y 12,69% para los becerros con herencia europea, hembras en el rebaño, ingreso por leche y capital de trabajo, respectivamente. El estudio mostró que los sistemas de ganadería doble propósito en la zona bajo estudio fueron estructuralmente variantes. Los estudios estructurales son indispensables para el conocimiento en detalle y el establecimiento de bases para fomentar las transformaciones y su mejoramiento continuo

Postharvest Treatment of Hydrogen Sulfide Delays the Softening of Chilean Strawberry Fruit by Downregulating the Expression of Key Genes Involved in Pectin Catabolism

Hydrogen sulfide (H2S) plays several physiological roles in plants. Despite the evidence, the role of H2S on cell wall disassembly and its implications on fleshy fruit firmness remains unknown. In this work, the effect of H2S treatment on the shelf-life, cell wall polymers and cell wall modifying-related gene expression of Chilean strawberry (Fragaria chiloensis) fruit was tested during postharvest storage. The treatment with H2S prolonged the shelf-life of fruit by an effect of optimal dose. Fruit treated with 0.2 mM H2S maintained significantly higher fruit firmness than non-treated fruit, reducing its decay and tripling its shelf-life. Additionally, H2S treatment delays pectin degradation throughout the storage period and significantly downregulated the expression of genes encoding for pectinases, such as polygalacturonase, pectate lyase, and expansin. This evidence suggests that H2S as a gasotransmitter prolongs the post-harvest shelf-life of the fruit and prevents its fast softening rate by a downregulation of the expression of key pectinase genes, which leads to a decreased pectin degradation

Image_2_RNAseq, transcriptome analysis and identification of DEGs involved in development and ripening of Fragaria chiloensis fruit.pdf

Fragaria chiloensis (Chilean strawberry) is a native species that produces fruit with an exotic pinkish color and a fruity aroma. It has a non-climacteric pattern of fruit ripening, and it is the mother of the commercial Fragaria x ananassa. The ripening of F. chiloensis fruit seems stimulated by ABA, and a complete set of genes participate in its softening, color, and aroma development. In addition, a set of transcription factors regulate the entire process, but few of them have been described. Over the last two decades, RNA-seq was used to identify genes at three fruit development/ripening stages, named C2 (unripe, large green) to C4 (full ripe), in whole fruit and fruit without achenes. A total of 204,754 contigs were assembled considering all samples, obtaining an N50 of 1.125 bp. Differentially expressed genes (DEGs) between two samples were identified, obtaining a total of 77,181 DEGs. Transcripts for genes involved in ABA biosynthesis present high and differential expression during the C2, C3, and C4 stages. Besides, contigs corresponding to ABA receptors, which interact with a regulatory network, are also differentially expressed. Genes associated with cell wall remodeling and those involved in flavonoid synthesis were also differentially expressed. An interaction network was built considering differentially expressed genes for the phenylpropanoid and flavonoid molecular pathways and having FcMYB1 as a transcription factor regulator. Identifying key genes could give an option to control the ripening of this non-climacteric fruit.</p

Data_Sheet_2_RNAseq, transcriptome analysis and identification of DEGs involved in development and ripening of Fragaria chiloensis fruit.xlsx

Fragaria chiloensis (Chilean strawberry) is a native species that produces fruit with an exotic pinkish color and a fruity aroma. It has a non-climacteric pattern of fruit ripening, and it is the mother of the commercial Fragaria x ananassa. The ripening of F. chiloensis fruit seems stimulated by ABA, and a complete set of genes participate in its softening, color, and aroma development. In addition, a set of transcription factors regulate the entire process, but few of them have been described. Over the last two decades, RNA-seq was used to identify genes at three fruit development/ripening stages, named C2 (unripe, large green) to C4 (full ripe), in whole fruit and fruit without achenes. A total of 204,754 contigs were assembled considering all samples, obtaining an N50 of 1.125 bp. Differentially expressed genes (DEGs) between two samples were identified, obtaining a total of 77,181 DEGs. Transcripts for genes involved in ABA biosynthesis present high and differential expression during the C2, C3, and C4 stages. Besides, contigs corresponding to ABA receptors, which interact with a regulatory network, are also differentially expressed. Genes associated with cell wall remodeling and those involved in flavonoid synthesis were also differentially expressed. An interaction network was built considering differentially expressed genes for the phenylpropanoid and flavonoid molecular pathways and having FcMYB1 as a transcription factor regulator. Identifying key genes could give an option to control the ripening of this non-climacteric fruit.</p

Data_Sheet_1_RNAseq, transcriptome analysis and identification of DEGs involved in development and ripening of Fragaria chiloensis fruit.xlsx

Fragaria chiloensis (Chilean strawberry) is a native species that produces fruit with an exotic pinkish color and a fruity aroma. It has a non-climacteric pattern of fruit ripening, and it is the mother of the commercial Fragaria x ananassa. The ripening of F. chiloensis fruit seems stimulated by ABA, and a complete set of genes participate in its softening, color, and aroma development. In addition, a set of transcription factors regulate the entire process, but few of them have been described. Over the last two decades, RNA-seq was used to identify genes at three fruit development/ripening stages, named C2 (unripe, large green) to C4 (full ripe), in whole fruit and fruit without achenes. A total of 204,754 contigs were assembled considering all samples, obtaining an N50 of 1.125 bp. Differentially expressed genes (DEGs) between two samples were identified, obtaining a total of 77,181 DEGs. Transcripts for genes involved in ABA biosynthesis present high and differential expression during the C2, C3, and C4 stages. Besides, contigs corresponding to ABA receptors, which interact with a regulatory network, are also differentially expressed. Genes associated with cell wall remodeling and those involved in flavonoid synthesis were also differentially expressed. An interaction network was built considering differentially expressed genes for the phenylpropanoid and flavonoid molecular pathways and having FcMYB1 as a transcription factor regulator. Identifying key genes could give an option to control the ripening of this non-climacteric fruit.</p